CC BY
75
ФАРМАКО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТИ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ
Забокрицкий Н.А.
Институт “Иммунологии и физиологии УрО РАН” Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования “Уральская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию”, кафедра фармакологии г.Екатеринбург (РФ)
Процессы наследственности и изменчивости взаимно обусловлены, обеспечивая относительное постоянство микроорганизмов в природе и в то же время их непрерывное совершенствование. Работами Л. Пастера, И.И. Мечникова, Л.С. Ценковского и др. было доказано существование в природе микроорганизмов с определенными биологическими свойствами, которые могут изменяться под влиянием физических, химических и биологических воздействий внешней среды. Эра применения антибактериальных препаратов привела к возникновению различий между микроорганизмами и к вариабельности проявлений признаков в процессе развития при взаимодействии с окружающей средой. Новые свойства микроорганизмов появляются только благодаря изменчивости, но они могут играть роль в эволюции лишь при наследовании данного признака [1-2].
В последнее время отмечено увеличение популяций антибиотикорезистентных культур лактобактерий и сенной палочки, так как популяризация антибактериальной терапии среди населения способствует отбору и циркуляции резистентных форм микроорганизмов [5]. Обычно процедура мониторинга основана на анализе антибиотикограмм исследуемых культур по единой методике. На сегодняшний день такой методикой является рекомендация NCCLS - Национального комитета по клиническим лабораторным стандартам США. Согласно данным рекомендациям, чувствительность сначала определяют диско-диффузионным методом на чашках с агаром, затем определяют минимальную подавляющую концентрацию (МПК) макро- и микрометодом с помощью серийных разведений [2-3].
Мониторинг антибиотикорезистентности штаммов бацилл и молочно-кислых бактерий позволяет получить сведения о локальном уровне устойчивости исследуемых производственных штаммов к наиболее распространенным антибиотикам с последующим обоснованием конструирования на их основе бактерийных препаратов с возможностью применения в процессе этиотропной антибактериальной терапии [3-4].
На сегодняшний день активность различных антибактериальных соединений в отношении бацилл и лактобацилл изучена мало, но тем не менее в последнее время отмечено увеличение популяций антибиотикорезистентных штаммов. Вопрос этот чрезвычайно актуален, так как эти микроорганизмы входят в состав препаратов, предназначенных для лечения кишечных инфекций и дисбактериозов различных полостей. Использование пробиотиков на основе антибиотикорезистентных штаммов в сочетании с антибиотиками при комплексной терапии целого ряда заболеваний позволило бы составить принципиально новые тактические схемы лечебной коррекции и профилактики дисбиотических состояний.
Цель работы - изучить антибиотикоустойчивость штаммов микроорганизмов - пробионтов, наиболее широко применяемых в конструировании пробиотических и эубиотических препаратов.
Материалы и методы исследования. Для определения антибиотикорезистентности на основании репрезентативной выборки, согласно уровню антагонистической активности, было отобраны следующие штаммы: Bacillus subtilis 59Т (В-9907), Lactobacillus plantarum 8P-A3 и Lactobacillus acidophilus 100-АШ. Все штаммы депонированы во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов.
Чувствительность пробиотических штаммов к антибиотикам изучали диско-диффузным методом (ДДМ) при использовании стандартных дисков, пропитанных антибиотиками (М.О. Биргср, 1982; Меньшикова В. В., Воропаева С. Д., 1987). Сравнительное изучение резистентности пробиотических штаммов осущетсвляли к ряду из 23 антибиотиков и синтетических противомикробных средств (группы фторхинолонов и нитрофуранов) позволило выявить значительные межштаммовые различия. Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием t-критерия Стьюдента в программном пакете Microsoft office - Excel 2003. Различия считали достоверными при p<0,05.
Результаты исследований и их обсуждение
При посеве штаммов Lactobacillus plantarum 8P-A3 и Lactobacillus acidophilus 100-АШ на стандартные диски с антибиотиками и синтетическими противомикробными средствами наблюдали антибиотикоустойчивость к ß-лактамным антибиотикам - пенициллину, оксациллину, карбенициллину. Цефалоспоринам II и III поколений, антибиотикам широкого спектра действия - аминогликозидам - II и III поколений, а также к нитрофуранам. Штамм L. acidophilus 100-АШ обладал доплнительной устойчивостью к некоторым парентеральным цефалоспоринам III поколения. Пробиотический штамм Bacillus subtilis 59Т (В-9907) обладает абсолютной антибиотикорезистентностью только к синтетическим противомикробным средствам - производным хинолона (нитроксолин) и нитрофурану (фуразолидон). Кроме того, все штаммы оказались высокочувствительными в фторхинолону - левофлоксацину. Резистентность же остальных пробиотических штаммов к тест-антибиотикам определяется, но в разной степени, результаты представлены в таблице.
Выводы
На основании результатов проведенных исследований по изучению антибиотикорезистентности пробиотических штаммов можно сделать следующие вывод, что наибольшей антибиотикоустойчивостью обладают штаммы L.
plantarum 8Р-АЗ и L. acidophilum 100-АШ к препаратам пенициллинового ряда (кроме ампициллина), аминог-ликозидам (кроме неомицина), цефотаксиму и фуразолидону. Наименьшей антибиотикоустойчивостью обладает штамм Bacillus subtilis 59Т (В-9907).
Таким образом, эволюционно закрепившаяся природная резистентность микроорганизмов - пробионтов к антибиотикам является важным фактором при отборе культур для создания и промышленного производства про-и эубиотиков. Анализируя литературные данные и результаты собственных исследований, можно сделать выводы, что устойчивость бактерий к антибиотикам является характеристическим признаком конкретного штамма микроорганизма. Данные антибиотикорезистентности необходимо обязательно учитывать при отборе штаммов для конструирования препаратов про-, эуб- и синбиотиков, а также биологически активных пищевых добавок.
ЛИТЕРАТУРА
1. Пробиотические микроорганизмы - современное состояние вопроса и перспективы использования: Мат. Международ, науч.-практ. кон-фер. - Москва, 2002. - 88 с.
2. Тюрин, М.В. Аитибиотикорезистентпость и антагонистическая активность лактобацилл: Дисс. ... канд. мед. наук: 03.00.07 / Всесоюзный НИИ антибиотиков. - Москва. - 1990. - 149 с.
3. Orrhage, K. Bifidobacteria and Lactobacilli in human health / K.Orrhage, C.E.Nord // Drugs Exp. Clin. Res. -2000. - Vol. 26. - № 3. -P. 95-111.
4. Salminen, S. Gut flora in normal and disordered states / S.Salminen, E.Isolauri, T.Onnela// Chemotherapy. - 1995. -Vol. 41 (1). - P. 5-15.
5. Scardovi, V. Bergeys Manual of Systemic bacteriology. V. 2 / Eds. P.H.A.Sneath et al. - Baltimore: Williams and Wilkins. - 1986. - P. 1418-1435.
6. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2009. Т. 11. № 4.
7. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2008. Т. 10. № 4.
8. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2007. Т. 9. № 4.
9. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2006. Т. 8. № 4.
10. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2005. Т. 7. № 4.
11. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2004. Т. 6. № 4.
12. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2003. Т. 5. № 4.
13. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2002. Т. 4. № 4.
14. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 2001. Т. 3. № 4.
15. Сборник научных тезисов и статей «Здоровье и образование в XXI веке». 1999. Т. 2. № 4.
16. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2009. Т. 11. № 12.
17. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2008. Т. 10. № 12.
18. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2007. Т. 9. № 12.
19. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2006. Т. 8. № 12.
20. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2005. Т. 7. № 12.
21. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2004. Т. 6. № 12.
22. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2003. Т. 5. № 12.
23. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2002. Т. 4. № 12.
24. Электронный сборник научных трудов «Здоровье и образование в XXI веке». 2001. Т. 3. № 1.
