Проблемы медицинской микологии. 2020, Т.22. №3
ЭТИОЛОГИЯ КЕРАТИТОВ В САНКТ-ПЕТЕРБУРГЕ
Свистунова Е.М., Борзова Ю.В., Богомолова Т.С., Скрябина Е.В., Васильева Н.В.
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, НИИ медицинской микологии им. Н.П. Кашкина, Санкт-Петербург, Россия
ETIOLOGY OF KERATITIS IN SAINT PETERSBURG
Svistunova E.M., Borzova Y.V., Bogomolova T.S., Skryabina Y.V., Vasilyeva N.V.
North-Western State Medical University named after I.I. Mechnikov, Kashkin Research Institute of Medical Mycology, St. Petersburg, Russia
Цель исследования - определение спектра возбудителей воспалительного поражения роговицы.
Материалы и методы. Ретроспективное исследование пациентов с воспалительным поражением роговицы офтальмологического центра СПб ГБУЗ «ГМПБ №2» проведено в период с 2013 по 2019 гг. Офтальмологическое обследование выполняли с использованием биомикроскопии, периметрии, офтальмоскопии. Лабораторная диагностика материала соскоба роговицы, получаемого во время проведения биомикроскопии глаза, включала флуоресцентную микроскопию и культуральное исследование. Статистическую обработку данных осуществляли с помощью программы Microsoft Office Excel 2016. Статистический анализ включал как описательные, так и математические методы.
Результаты. В период с 2013 по 2019 гг. выявлено 111 пациентов с воспалительным поражением роговицы: 62 мужчины (55,86%) и 49 женщин (44,14%), средний возраст - 47,77±16,35 лет.
Кератиты, обусловленные бактериями, составили 23%, грибами - 33%, простейшими - 5,5%.
При микроскопии материала в 50 случаях (45%) микроорганизмы обнаружить не удавалось, в 29 (26%) - выявляли дрожжи или плесневые микромицеты, в 26 (23,5%) - бактерии, в 6 (5,5%) - акантамебы. При культуральном исследовании материала соскоба роговицы у 14,4% больных получен рост бактериальных агентов, микромицеты выделили у 20,7%. Наиболее частым возбудителем микотиче-ского кератита был Fusarium ssp. (47,8%), реже выделяли Aspergillus fumigatus (17,4%), Candida ssp. (8,7%), Penicillium ssp. (8,7%), Sporothrix schenckii (4,3%), Acremonium spp. (4,3%), Paecilomyces lilacinus (4,3%), Scedosporium apiospermum (4,3%).
Выводы. Микотические кератиты составили 33% всех воспалительных поражений роговицы, основной возбудитель - Fusarium ssp.
ИССЛЕДОВАНИЕ АНТАГОНИСТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ФЕРМЕНТА L-ЛИЗИН-а-ОКСИДАЗЫ НА УРОПАТОГЕННЫЕ ПОЛИРЕЗИСТЕНТНЫЕ ESCHERICHIA COLI
Сенягин А.Н., Смирнова И.П., Подопригора И.В., Смолякова Л.А.
Российский университет дружбы народов, Москва, Россия
RESEARCHING OF THE ANTAGONISTIC EFFECT OF THE ENZYME L-LYSINE-A-OXIDASE ON UROPATHOGENIC MULTIRESISTANT ESCHERICHIA COLI
Senyagin A.N., Smirnova I.P., Podoprigora I.V., Smolyakova L.A.
Peoples' Friendship University of Russia, Moscow, Russia
Цель исследования - установление наличия антагонистической активности культуральной жидкости штамма Trichoderma harzianum, содержащей фермент L-лизин-а-оксидазу, по отношению к клиническим изолятам уропатогенных полирезистентных Escherichia coli (UPEC).
Материалы и методы. Исследовали антагонистическое действие фермента L-лизин-а-оксидазы - активного начала культуральной жидкости (КЖ) гриба T. harzianum Rifai R-180. Активность фермента в КЖ - 0,54-0,58 усл. Ед./мл
В качестве объектов выбраны клинические изоляты уропатогенных полирезистентных E. coli (UPEC, N=76). Инокулят UPEC объемом 100 мкл вносили в 5 мл сердечно-мозгового бульона. Культивировали 24 часа при 37±0,5 °C. После культивирования КЖ центрифугировали в течение 25 минут при 2500 rpm с использованием центрифуги ELMI SkyLine (CM-6M). Рабочую суспензию UPEC готовили из полученного центрифугата по стандарту мутности 0,5 McFarland в 0,9% растворе хлорида натрия. 50 мкл готовой суспензии UPEC наносили на поверхность сердечно-мозгового агара и засевали методом «газона». С помощью стерильного металлического пробойника в агаре делали лунки: d=5 мм, V=15мкл. В лунку вносили концентрат КЖ T. harzianum Rifai R-180. В качестве отрицательного контроля использован 0,9% раствор хлорида натрия, а положительного -коммерческие диски с Фосфомицином (200 мкг/диск).
Результаты. Исследования представлены на рисунке.
(с
© jf \
- \
А i © » © г » @
5 7 9 11 13 15
Дыам^тр зоны задержки роста, мм
Рис. Графическое соотношение количества изолятов UPEC и зоны задержки роста вокруг лунок с концентратом КЖ T. harzianum Rifai R-180.
Заключение. Установлено, что фермент L-лизин-а-оксидаза, содержащийся в концентрате КЖ гриба T. harzianum Rifai R-180, обладает антагонистическим действием по отношению к клиническим изолятам уропатогенных полирезистентных E. coli.
КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ ВЛИЯНИЯ ПОЛИМЕРНЫХ БИОЦИДОВ НА CHAETOMIUM GLOBOSUM KUNZE: FR. И TRICHODERMA VIRIDE PERS.: FR.
Сергеева Л.Е.
Национальный государственный университет физической культуры, спорта и здоровья имени П.Ф. Лесгафта, Санкт-Петербург, Россия
CRITERIA FOR EVALUATING THE EFFECT OF THE POLYMER BIOCIDES ON THE CHAETOMIUM GLOBOSUM KUNZE: FR. AND TRICHODERMA VIRIDE PERS.: FR.
Sergeeva L. E.
Lesgaft National State University of Physical Education, Sport and Health, St Petersburg, Russia
Различные проявления воздействия биоцидов на микромицеты изучают на протяжении всей истории науки. В последние несколько десятилетий исследования в данной области стали особенно интенсивными и плодотворными. Причина этого кроется в развитии новых инструментальных методов исследования живой материи, позволивших получать новые данные.
Цель - исследование воздействия трибутилоловоакрилат-содержащего биоцида на слабовирулентные штаммы видов Chaetomium globosum Kunze: Fr. и Trichoderma viride Pers.: Fr. in vitro. Указанные виды являются типичными кон-таминантами сложных динамических, в том числе замкнутых, экологических систем.
Материалы и методы. Использовали чистые культуры C. globosum Kunze: Fr. (3 штамма), T. viride Pers.: Fr. (2 штамма). Образцы помещали на агаризован-ную среду Чапека без источника углерода. Опыты выполнены в герметично закрытых флаконах емкостью 16 мл. В течение 9 суток периодически наблюдали за развитием культур, а также определяли дыхательную активность газохромато-графическим способом по содержанию диоксида углерода и кислорода внутри флаконов. Для измерений применяли газовый хроматограф ЛХМ-72 с колонками длиной 2 м, внутренним диаметром 4 мм. Адсорбентом являлся Полисорб-1. В качестве газа-носителя служил гелий. При разделении компонентов соблюдали следующие условия: температура термостата - 50 °С, ток детектора - 150 мА, скорость газа-носителя - 60 см3/ч, скорость диаграммной ленты - 60 мм/ч. Компоненты элюировали в следующем порядке: О2 - через 1,5 мин, СО2 - через 2 мин после введения пробы. Идентификацию компонентов проводили по результатам хроматографирования стандартных проб с заданным газовым составом. Количественное содержание каждого компонента определяли по площади соответствующего пика на диаграммной ленте. Дыхательный коэффициент рассчитывали, как отношение количества выделенного диоксида углерода и убыли кислорода в молярном исчислении. Для каждой концентрации биоцида и конкретного времени измерения дыхательный коэффициент определяли в десяти повторностях, а затем результаты усредняли.
Результаты. Всего в 2012 г. изучено 98 проб, в 2004 г. - 58 проб. Оказалось, что для всех испытанных штаммов рост полностью подавлялся при концентрации 1%, что в 15-20 раз превышает фунгистатическую концентрацию латекса в образцах бумаги. Ингибирование уменьшалось для штаммов T. viride следующим образом: 1,0>0,2>0,1 >0,005, а для C. globosum - 1,0>0,2>0>0,01. Отметим, что обработанные культуры, как ранее было выявлено и для изолятов других видов микромицетов, не утрачивали своей жизнеспособности, так как на среде без биоцида из обработанных конидий развивались в основном колонии с типичными для нативных штаммов фенотипическими признаками, имеющие, однако, в 50% случаев удлиненный лаг-период. Продолжительность лаг-фазы зависела от концентрации биоцида. Как правило, она тем длиннее, чем выше концентрация препарата. При возрастании концентрации биоцида в среде продолжительность лаг-периода возрастает, а при достижении определенной концентрации (1%) - становится бесконечной. При росте практически на всех