УДК 597.587.9-12 (234.24)
ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ РОЛЬ БАКТЕРИЙ СЕМЕЙСТВА VIBRIONACEAE В РАЗВИТИИ ЯЗВЕННЫХ ПОРАЖЕНИЙ КОЖИ ТРЕСКИ (GADUSMORHUA) БАЛТИЙСКОГО МОРЯ
E.C. Крачковская, магистрантка krachkovskaya_katya@mail. ru О.В. Казимирченко, канд. биол. наук, доцент, [email protected] ФГБОУ ВО «Калининградский государственный технический университет»
Исследована эпизоотически значимая бактериофлора трески Gadus morhua Балтийского моря. У отдельных экземпляров рыбы зарегистрированы опухоли и язвенные поражения на кожных покровах. В составе бактериофлоры трески выявлены бактерии семейства Vibrionaceae, среди которых доминировали виды Vibrio damsela, V. fluvialis, V. furnisii и Aeromonas hydrophila. Виды бактерий циркулировали в органах и тканях рыбы, преобладали в язвенных поражениях.
треска, Балтийское море, бактерии, Vibrio, Aeromonas, факторы патогенности, язвенные поражения трески
Треска - одна из важнейших промысловых видов рыб Балтийского моря. В последнее время в популяции трески Балтийского моря, по наблюдениям некоторых исследователей [1, 2], встречаются экземпляры рыб с патологиями кожных покровов в виде опухолевых наростов, язвенных поражений, обширных кровоизлияний. Такие изменения могут быть связаны с заражением рыбы патогенными микроорганизмами.
В естественных популяциях у морских видов рыб регистрируются вирусные и бактериальные заболевания. Наиболее часто причинами развития бактериальных заболеваний служат бактерии из семейства Vibrionaceae. Согласно классификации бактерий по Берджи [3] семейство Vibrionaceae включает три рода бактерий, из которых бактерии родов Vibrio и Aeromonas играют ключевую роль в развитии инфекционных патологий у рыб.
Бактерии рода Vibrio представляют собой грамотрицательные изогнутые подвижные палочки. Вибрионы распространены повсеместно: обитают как в морской, так и пресной воде. Температурный оптимум для развития многих видов 37 °С, но некоторые виды, обитающие в морской воде, лучше размножаются при температуре 25 °С и ниже. Вибрионы - хе-моорганотрофы с окислительным и бродильным типом метаболизма, обладают дыхательным ферментом цитохромоксидазой. Бактерии способны ферментировать углеводы с образованием кислоты, иногда газа; требовательны к присутствию в питательных средах хлорида натрия [3].
Бактерии рода Aeromonas - грамотрицательные подвижные (но есть неподвижные виды) палочки, диаметр клеток от 0,3 до 1 мкм, длина от 1 до 3,5 мкм. Аэромонады - факультативные анаэробы, оксидазо- и каталазоположительные. Бактерии растут на простых питательных средах, на щелочной пептонной воде. Обладают природной устойчивостью к Р-лак-тамным антибиотикам и вибрионоцидам. Хемоорганотрофы, обладающие и дыхательными, и бродильными типами метаболизма. По ДНКазе и желатиназе положительные, восстанавливают нитрат, продуцируют индол [3].
Облигатно-патогенные виды бактерий родов Vibrio и Aeromonas у тресковых становятся причинами возникновения таких эпизоотически значимых заболеваний как вибриоз и фурункулёз.
Вибриоз трески вызывается бактериями V. anguillarum, V. parahaemolyticus, V. alginolyticus и V. ordalii. Возникновению болезни способствуют высокая температура воды (выше 15 °С), рН более 8,0, низкое содержание кислорода, загрязнение воды органическими веществами и азотными соединениями (содержание азота более 1 мг/л) [4].
Основной путь передачи инфекции - вода, прямой контакт больных рыб со здоровыми. Инкубационный период в зависимости от температуры воды может быть от 3-5 до 14 дней. Вибриоз трески протекает остро с высокой летальностью (иногда при отсутствии внешних признаков) или хронически. Попадая в организм рыбы, возбудитель с током крови разносится по всем органам и вызывает септицемию. При этом в органах развиваются сероз-но-геморрагическое воспаление и дегенеративно-некротические изменения. Под влиянием вырабатываемого вибрионами гемолизина у рыб регистрируется анемия.
При клиническом осмотре заражённой трески на поверхности тела за головой появляются светлые пятнышки, позже развивающиеся в язвенные поражения различной величины и глубины. Пораженное место окружено зоной геморрагии и покрыто серо-желтой некротизированной массой. Происходит скопление гранулированной ткани или ее некротический распад. Некоторые очаги расположены глубоко и похожи на пустулы. У некоторых особей отмечают изъязвления слизистой кишечника. Внутренние органы выглядят без отклонений от нормы [4].
Треска, имеющая признаки вибриоза, согласно правилам ветеринарно-санитарной экспертизы [5], не допускается к реализации в торговую сеть. Больную рыбу с поражениями, язвами на поверхности тела используют в корм животным после термической обработки.
Фурункулез трески, вызванный атипичными бактериями Aeromonas salmonicida, -одно из самых опасных бактериальных инфекций, которая приводит к массовым эпизоотиям. Бактерии этого вида подразделяются на подвиды: A. salmonicida subs. salmonicida, A. salmonicida subs. achromogenes, A. salmonicida subs. masoucida, A. salmonicida subs. smithia, A. salmonicida subs. pectinolytica. Типичный фурункулез рыб вызывается гомогенными штаммами A. salmonicida suds. salmonicida. Атипичный фурункулез вызывается гетерогенными штаммами A. salmonicida subs. achromogenes, A. masoucida, smithia, pectinolytica.
Заболевание трески, вызываемое атипичными A. salmonicida, относится к язвенной форме или «атипичному фурункулёзу». Факторы патогенности аэромонад - экзопротеазы. Клинические признаки фурункулёза трески - появление геморрагий вдоль боковой линии и вокруг ануса, язв и подкожных гематом. При вскрытии отмечают геморрагии в кишечнике, печени, иногда на околосердечной сумке. Язвы на коже рыбы глубокие, проникают в мышечный слой. При гистопатологическом изучении в язвах регистрируются некротические клетки, колонии бактерий и макрофаги. Вокруг язв образуется зона из воспаленной ткани, включающая некротизированные клетки [6].
Цель нашей работы - выявление в микрофлоре трески Балтийского моря потенциально опасных бактерий семейства Vibrionaceae и определение их этиологического значения.
Микробиологические исследования трески были начаты в лаборатории ихтиопа-тологии КГТУ в 2015 г. При этом анализе применяли стандартные методы, принятые в ихтиобактериологии и санитарной микробиологии [7, 8, 9].
При клиническом исследовании экземпляров трески, выловленной в районе мыса Таран Балтийского моря, у 50 % рыб были зафиксированы патологические изменения в виде обширных язв, опухолей, геморрагий и кровоизлияний на поверхности тела (рис.).
Рисунок - Язвенные поражения трески Балтийского моря
Язвы (диаметром от 5-60 мм) были обнаружены на челюсти, спинных плавниках и хвостовом стебле. Язвы были глубокими, с красным ободком. У некоторых экземпляров трески были зарегистрированы опухолевые наросты на поверхности кожи за жаберной крышкой и на голове. Опухоли были обширными с разрастаниями ткани серого цвета, с некротизированным ободком или зоной воспаления красного цвета. У некоторых пораженных экземпляров опухоли представляли собой локализованные воспаленные участки серо -белого цвета. Вокруг таких опухолей отмечали многочисленные геморрагии на коже рыб, которые были также зафиксированы вблизи грудных плавников в виде обширных участков или точечных кровоизлияний на плавниках рыбы.
При изучении микрофлоры трески мы обращали внимание на характер обсеменен-ности рыбы потенциально опасными видами бактерий семейства Vibrionaceae. Проведенный нами микробиологический анализ выявил, что основу микробиоценоза трески составляют грамотрицательные галофильные бактерии рода Vibrio. В наибольшей степени рыбу обсеменяли бактерии двух видов - V. damsela и V. fluvialis. Среди вибрионов в меньших количествах в микрофлоре рыбы присутствовали бактерии V. furnisii. Виды идентифицированных вибрионов проявляли различную активность по отношению к аминокислотам и углеводам.
В бактериофлоре трески также обнаруживали патогенных A. hydrophila, участвующих наряду с A. Salmonicida в возникновении бактериальных инфекций морских видов рыб. Этот вид бактерий активно расщеплял углеводы, обладал протеолитическими ферментами.
Выявленные опасные для трески бактерии изменяли свою численность по сезонам года. Весной доминировали A. hydrophila, что связано с температурным диапазоном развития этих бактерий, так как они относятся к мезофильной группе. Осенью при понижении температуры воды в море преобладающими в микрофлоре трески были галофильные виды вибрионов, развивающиеся при более низких температурах.
Микробиологическому исследованию подвергали также и клинически здоровую рыбу без кожных патологий. У таких экземпляров трески в составе микрофлоры кожи и внутренних органов циркулировали сапрофитные, непатогенные морские бактерии, но виды бактерий рода Aeromonas оставались доминирующими.
Таким образом, в составе бактериоценоза трески Балтийского моря выявлены потенциально опасные виды бактерий семейства Vibrionaceae, которые могут выступать в качестве этиологических агентов бактериального заболевания трески с язвенным синдромом.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Samuelsen, O.B. et al Viral and bacterial diseases of Atlantic cod Gadus morhua, their prophylaxis and treatment: a review // Diseases of aquatic organisms. - 2006. - Vol. 71. -P. 239-254.
2. Cornick, J.V. Atypical Aeromonas salmonicida infection in Atlantic cod, Gadus morhua L. / J.V. Cornick, CM. Morrison // Journal of Fish Diseases. - 1984. - Vol. 7. - Issue 6. - P. 499.
3. Определитель бактерий Берджи / под ред. Дж. Хоулта. - Москва: Мир, 1997. - Т. 1. -
432 с.
4. Ихтиопатология / Н.А. Головина [и др.]; под ред. Н.А. Головиной, О.Н. Бауера. -Москва: Мир, 2003. - 448 с.
5. Правила ветеринарно-санитарной экспертизы морских рыб и икры [Электронный ресурс]. - URL: http://www.mcx.ru/documents/document/show.ru (дата обращения 22.02.2017).
6. Magnadottir, B. et al. Atypical Aeromonas salmonicida infection in naturally and experimentally infected cod, Gadus morhua L. // Journal of Fish Diseases. - 2002. - №25. - P. 583-597.
7. Практикум по ихтиопатологии: учеб. пособие / Н.А. Головина, [и др.]; под ред. Н.А. Головиной. - Москва: МОРКНИГА, 2016. - 417 с.
8. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований / под ред. А.С. Лабинской, Л.П. Блинковой, А.С. Ещиной. - Москва: Медицина, 2004. - 576 с.
9. Методы общей бактериологии / под ред. Ф. Герхардта. - Москва: Мир, 1984. - Т. 3. -
264 с.
ETIOLOGICAL ROLE OF BACTERIA VIBRIONACEAE FAMILY IN THE DEVELOPMENT OF ULCERATIVE SKIN LESIONS IN COD (GADUSMORHUA) OF THE BALTIC SEA
E.S. Krachkovskaya, Graduate student, krachkovskaya_katya@mail .ru O.V. Kazimirchenko, Candidate of Biological Sciences, Associate Professor
[email protected] FGBOU VO "Kaliningrad State Technical University"
The epizootic microflora of cod Gadus morhua from the Baltic Sea has been studied. In some species tumors and skin ulcers were revealed. In fish microflora the bacteria of Vibrionaceae family have been detected, species of Vibrio damsela, V. fluvialis, V. furnisii and Aeromonas hydrophila were dominated. These bacteria circulated in skin ulcers and internal organs of cod.
cod of the Baltic Sea, Vibrio, Aeromonas, pathogenicity factors, skin ulcer of cod