CC BY
171
УДК 618.19-006.6-08:615.256.51:577.1.088
М.В. Родионова1, И.К. Воротников1, В.В. Родионов2, Н.В. Чхиквадзе1, Е.А. Дудко1, Д.А. Рябчиков1, Е.В. Ошкина1, Т.А. Богуш1 ЭСТРОГЕНОВЫЕ РЕЦЕПТОРЫ БЕТА
КАК МАРКЕРЫ ЭФФЕКТИВНОСТИ ГОРМОНАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
1ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина», Москва 2Ульяновский государственный университет, Ульяновск
Контактная информация
Родионова Мария Валерьевна, аспирант хирургического отделения опухолей молочных желез НИИ клинической онкологии
адрес: 115478, Каширское шоссе, 24; тел. +7(499)324-90-10; e-mail: miss.rodionova@gmail.com
Статья поступила 03.02.2015, принята к печати 27.04.2015
Резюме
Рецепторы эстрогенов являются важнейшей клеточной мишенью, воздействуя на которую, можно не только контролировать процессы канцерогенеза, но и подавлять рост опухолевых клеток. Блестящим подтверждением этого стали результаты многолетнего применения первого таргетного препарата антиэстрогена тамок-сифена у больных раком молочной железы с положительным рецепторным статусом опухоли. Открытие в 1990-х годах эстрогенового рецептора бета расширило понимание механизмов эстроген-опосредованного сигнального пути и межрецепторных взаимодействий. В обзоре литературы представлены данные о строении и функциональной активности эстрогеновых рецепторов бета, а также результаты клинических исследований, показавших предиктивную роль маркера при лечении рака молочной железы.
Ключевые слова: рак молочной железы, эстрогеновые рецепторы, тамоксифен, предиктивный маркер.
M.V. Rodionova1, I.K. Vorotnikov1, T.A. Bogush, V.V. Rodionov, N.V. Chkhivadze1,
E.A. Dudko1, D.A. Ryabchikov, E.V. Oshkina1
ROLE OF ESTROGEN RECEPTOR BETA
IN THE DEVELOPMENT AND TREATMENT
1O. F BREAST CANCER
1.FSBSI «N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center», Moscow
2Ulyanovsk State University, Ulyanovsk
Abstract
Estrogen receptors are one of the major targets in cancer cells, acting on which it is possible not only to control the processes of carcinogenesis, but also to inhibit tumor cells growth. Brilliant confirmation of this is the results of long-term application of the first targeted therapy - antiestrogen tamoxifen - in breast cancer patients with positive hormonal status of the tumor. Being discovered in the 90s, estrogen receptor beta enhanced the understanding of estrogen-mediated signaling pathway and receptor-related interactions. This review of the literature presents data on the history of the discovery, structure and functional activity of selective estrogen receptor beta, and the results of existing clinical trials which have shown the predictive role of this marker.
Key words: breast cancer, estrogen receptors, tamoxifen, predictive biomarker.
Введение
РМЖ занимает 1 место в структуре онкологической заболеваемости женского населения. В 2012 г. в России зарегистрированы 59538 новых больных РМЖ. По сравнению с 2007 г. прирост составил 13,8 %. [5].
Этиология РМЖ до сих пор изучается, но многочисленные исследования показали, что именно эстрогены играют ведущую роль в возникновении этого заболевания, реализуя свое действие че-
рез лиганд-зависимые транскрипционные факторы, называемые ЭР.
В 1962 году Jensen E. и Jacobsen H., обнаружив специфическое взаимодействие 17-ß эстрадио-ла с белками в ткани матки, пришли к заключению, что биологическое действие эстрогенов реализуется при участии рецепторного белка [27]. В дальнейшем этот белок изучался в различных лабораториях, и в 1986 Г. две исследовательские группы сделали заявление о том, что ЭР клонирован [19; 20]. До 1995 г. считалось, что существует только
один тип ЭР, и что именно он ответственен за реализацию всех физиологических и фармакологических эффектов естественных и синтетических эстрогенов и антиэстрогенов. Однако в 1995 г. был клонирован второй эстрогеновый рецептор из библиотеки к-ДНК простаты крысы [31]. Уже известный эстрогеновый рецептор был назван ЭРа, а новый рецептор - ЭРр. Этот тип рецепторов экспрес-сируется в опухолях разных локализаций [1], а в ткани первичного и метастатического рака легкого, в отличие от ЭРа, является главной клеточной мишенью эстрогенов [2; 3; 6].
Сравнительная характеристика
эстрогеновых рецепторов:
строение, функциональная активность
ЭРа и ЭРр принадлежат к суперсемейству стероидных ядерных рецепторов и имеют сходную структурную архитектуру [17; 18; 21; 28; 36; 62]. Ген ЭРа находится в длинном плече хромосомы 6 (локус q24-27), тогда как ген ЭРр расположен в локусе q21—22 хромосомы 14. Оба рецептора состоят из трех основных доменов, выполняющих специфические функции: N-концевой (А/B), ДНК-связывающий (C) и лиганд-связывающий домены (E) [43].
На N-концевом участке рецептора находится домен транскрипционной активаторной функции AF1 - участок рецептора, ответственный за белок-белковые взаимодействия и транскрипционную активацию гена-мишени независимо от связывания с лигандом [10; 29; 39]. Сравнительный анализ AF1 доменов эстрогеновых рецепторов в различных клеточных линиях показал, что в ЭРа этот домен высоко эффективен в стимуляции репортерных генов различных эстроген-чувствительных элементов (ERE), в то время как подобная активность AF1 ЭРр низкая [15]. ДНК связывающий домен (DBD), как следует из названия, отвечает за присоединение к специфическим последовательностям ДНК [56]. Гомологичность DBD ЭРа и ЭРр высока и составляет около 96 % [22].
Лиганд-связывающий домен (LBD) ответственен за связывание лиганда с рецептором, димери-зацию рецептора, ядерную транслокацию и трансактивацию экспрессии генов-мишеней. Этот домен содержит участок с активационной функцией (AF-2), ответственный за конформационные изменения ЭР в присутствии лигандов и последующее связывание димеров ЭР с коактиваторами и коре-прессорами [17; 18; 62].
Лиганд-связывающие LBD домены ЭРа и ЭРр обладают высокой гомологичностью и имеют сходную третичную структуру аминокислотной последовательности [18; 33]. Поэтому не удивительно, что ЭРа и ЭРр имеют сходную афинность к эстрогенам и антиэстрогенам [32].
Присоединение лиганда к ЭР через цепь последующих событий приводит к изменению уровня транскрипции эстроген-регуляторных генов. Эти события и порядок, в котором они происходят, до конца не понятны, но известно, что они включают в
себя димеризацию рецептора, взаимодействие рецептора с ДНК, коактиваторами, корепрессорами или другими транскрипционными факторами, и формирование преинициаторного комплекса [8; 9; 28-30; 58].
Накапливаются данные о негеномных эффектах эстрогенов, которые происходят слишком быстро, чтобы быть обусловленными активацией синтеза РНК и белка. Негеномные эффекты являются общим свойством стероидных гормонов и часто связаны с активацией различных протеинки-назных каскадов [35]. Описанные негеномные эффекты 17р-эстрадиола включают мобилизацию внутриклеточного кальция, стимулирование активности аденилатциклазы, и синтез цАМФ [7; 26; 54]. В культуре клеток РМЖ была отмечена способность 17р-эстрадиола активировать МАРК и Р13К сигнальные пути [13; 40].
На сегодняшний день изучено 5 изоформ ЭРр [42]. Ген ЕЖ2, с которого происходит трансляция ЭРр, имеет 8 экзонов. В процессе альтернативного сплайсинга мРНК последнего экзона образуются белковые продукты с различной функциональной активностью - изоформы ЭРр 1 - ЭРр 5. Все изоформы отличаются по длине С-концевых последовательностей, и имеют различную молекулярную массу. При этом ЭРР1 является единственным полноразмерным белком, способным связываться с лигандом. Функциональные—исследования показали, что гиперэкспрессия ЭРр1имеет проапоптоти-ческий и антипролиферативные эффекты [34; 50]. Активность изоформ ЭРр2 - ЭРр 5 изучена недостаточно. ЭРр3 специфично экспрессируется преимущественно в ткани яичка [42], а ЭРР4 в ткани молочной железы найден не был [53]. Несмотря на то, что ЭРр2 и ЭРр5 не связываются с лигандом, исследования транзиторной трансфекции показали, что ЭРр2 и ЭРр5 могут выступать как антагонисты ЭРа, путем образования гетеродимеров [52; 67].
Имеются сообщения, что высокий уровень экспрессии ЭРр 2 ассоциирован с резистентностью к тамоксифену и более агрессивным течением РМЖ [23; 65]. Рассмотренные в следующем разделе обзора данные касаются предиктивной роли в терапии больных РМЖ только полноразмерной изо-формы эстрогеновых рецепторов.
Для определения уровня экспрессии ЭР наиболее часто применяется полуколичественный метод иммуногистохимии. Использование селективных моноклональных антител позволяет с высокой точностью установить наличие ЭР в исследуемой ткани. Однако, осуществляемая визуально оценка доли клеток, содержащих рецепторы, а тем более интенсивности их экспрессии в клетке, является субъективной и полуколичественной. В отдельных работах в качестве альтернативы иммуногистохи-мии для определения ЭР применяют метод ПЦР. Но уровень мРНК, обнаруживаемый таким способом, не всегда соответствует уровню рецептора в клетке, так как на формирование белка из мРНК оказывают влияние различные трансляционные факторы, постсинтетическая модификация и белко-
вая деградация. Недостаточно информативными являются радиолигандный метод и вестерн-блоттинг. Первый сводится к определению уровня ЭР в неочищенном цитозоле гомогената клеток на основании связывания рецепторов и продуктов их деградации с лигандом, а второй - к детекции ЭР по связыванию со специфическими антителами в тотальной белковой фракции, полученной из анализируемых клеток.
Безусловным шагом вперёд явился разработанный в РОНЦ им. Н.Н. Блохина и запатентованный метод иммунофлуоресцентного анализа с привлечением проточной цитофлуориметрии. Метод позволяет строго количественно оценивать не только уровень экспрессии разных типов ЭР, то есть количество клеток, экспрессирующих маркер в исследуемой опухоли, но и интенсивность экспрессии ЭР в каждой клетке [4].
Эстрогеновые рецепторы ß
и их корреляция
с клинико-морфологическими
параметрами
Экспрессия ЭРßl коррелирует с экспрессией ЭРа, небольшим размером опухолевого узла, низкой степенью злокачественности, отсутствием поражения регионарных лимфоузлов [24; 38; 46; 61] и отсутствием экспрессии Her2 [38; 45; 46] (табл. 1). Самым крупным явилось ретроспективное исследование, включавшее 2170 больных РМЖ, проведенное Marotti J. et al. (2010). ЭРß+ опухоли были представлены в 68 % случаев всех инвазивных карцином. Экспрессия ЭРß статистически достоверно коррелировала с экспрессией ЭРа (P<0,0001), рецепторов прогестерона (ПР) (P<0,0001), Her2- статусом опухоли (Р=0,004). ЭРß/- статус опухоли значимо отличается в различных молекулярно-генетических подтипах РМЖ (P<0,0001), встречаясь более чем в 72 % случаев люминального А подтипа, 68 % - люминального В подтипа. Интересным является тот факт, что 55 % опухолей Her2+ подтипа и 60 % случаев базалоидного рака, являющихся ЭРа-, экспрессируют ЭРß. Последняя была представлена в опухолях всех гистологических вариантов РМЖ: в 63 % случаях инвазивных прото-ковых карцином, 87%- инвазивных дольковых карцином, 83 % - муцинозных карцином, 100 % -тубулярных карцином. Отсутствие экспрессии ЭРß 1 ассоциировалось с большим размером опухоли (P=0,0008), высокой степенью злокачественности (P<0,0001), метастатическим поражением регионарных лимфоузлов (P=0,06) [38]. Однако имеются и результаты другого исследования, не показавшего взаимосвязи экспрессии ЭРß1 и клинико-патологических параметров [57]. Такие различия в полученных результатах могут быть обусловлены различной концентрацией используемых антител, а также - отсутствием единой шкалы определения уровня экспрессии. Однако, исходя из частой комбинации изучаемого рецептора с благоприятными кли-нико-морфологическими параметрами, ЭРß1+ опухоли представляются группой хорошего прогноза.
Рядом авторов изучали уровень экспрессии ЭРр2 (табл. 1). В двух крупных исследованиях, включавших 757 и 150 больных РМЖ соответственно, была отмечена прямая корреляция экспрессии ЭРР2 с экспрессией ЭРа [57; 61], ПР [57], низкой степенью злокачественности [61] и лимфова-скулярной инвазией [12]. Тем не менее, Vinayagam R. et al. в работе, включавшей данные о 141 больной, взаимосвязи между экспрессией опухолью ЭРр2 и клинико-морфологическими параметрами выявить не смогли [63].
Эстрогеновые рецепторы р и их предиктивная роль в терапии больных раком молочной железы После открытия ЭРр представления о сигнальных путях эстрогенов значительно изменились. Теперь известно, что 17р-эстрадиол, главный эндогенный активатор ЭР, неселективен по отношению к разным типам рецепторов - а и р. ЭРа присутствуют в 80 % случаев РМЖ и являются основным иммуногистохимическим параметром для назначения антиэстрогенотерапии. Поскольку большинство пациенток, получающих тамоксифен, имеют ЭРа+ опухоли, затруднительно определить прогностическую и предиктивную значимость экспрессии ЭРР, несмотря на тот факт, что 5-10 % ЭРа- опухолей чувствительны к терапии тамоксифеном [60; 64]. Анализ, проведенный EBCTCG (1998), показал незначительное снижение смертности (6 %) в группе пациентов с низкой экспрессией ЭРа (0-2 балла по системе Allred Scoring Guideline), получавших тамоксифен [14]. Однако эти данные не подтвердились в последующем метаанализе, включавшем большее количество исследований [16].
Имеются данные 9 ретроспективных исследований, в которых сравнивался уровень экспрессии ЭРр (изолированно и в сочетании с экспрессией ЭРа) в первичной опухоли c показателями выживаемости больных первично-операбельным РМЖ (табл. 2) [24; 25; 45-47; 57; 60;]. Данные исследования отличаются по количеству включенных больных, виду адъювантной терапии, пороговому значению в оценке ЭРр и медиане наблюдения. В шести исследованиях с общим количеством 1227 пациенток получена достоверная взаимосвязь высокого уровня экспрессии ЭРр и безрецидивной выживаемости, как в группе пациенток, получавших комбинированное лечение, так и антиэстроге-нотерапию в монорежиме. Также достоверно значимое увеличение общей выживаемости в случае высокой экспрессии ЭРр было показано в работах Sugiura et al. (2007), Nakopoulou et al. (2004), Honma et al. (2008), Mann et al/ (2001). В трех других исследованиях статистически достоверной корреляции уровня экспрессии ЭРр и показателей выживаемости получено не было [47; 48; 57].
Говоря об экспрессии ЭРр в ткани РМЖ, можно выделить две группы случаев - когда ЭРР ко-экспрессируются с ЭРа (ЭРР+/ЭРа+) и экспрес-сируются изолированно (ЭРр+/ЭРа-).
Таблица 1
Результаты ретроспективных исследований по оценке уровня экспрессии ЭРР1 и ЭРР2 и клинико-морфологических параметров___
Автор ЭР, изо-форма Гистологический вариант n пациентов Клинико-морфологические параметры
[61] ЭРР1 Инвазивная карцинома молочной железы 150 Корреляция экспрессии ЭРР1 с небольшим размером опухоли, N0, низкой степенью злокачественности
[46] Инвазивная карцинома молочной железы 181 Корреляция экспрессии ЭРР1 с экспрессией ЭРа, отсутствием экспрессии НБЯ2
[45] Инвазивная карцинома молочной железы 150 Корреляция экспрессии ЭРР1 с отсутствием экспрессии НБЯ2
[57] Инвазивная карцинома молочной железы 757 Отсутствие корреляции с клинико-морфологическими параметрами
[38] Инвазивная карцинома молочной железы с выделением моле-кулярно-биологических подтипов 2170 Корреляция экспрессии ЭРР1 с экспрессией ЭРа, отсутствием экспрессии НБИ2, небольшим размером опухолевого узла, N0, низкой степенью злокачественности
[24] Апокриновая карцинома 150 Корреляция экспрессии ЭРР1 с небольшим размером опухолевого узла, низкой степенью злокачественности
[57] ЭРР2 Инвазивная карцинома молочной железы 757 Корреляция экспрессии ЭРР2 с экспрессией ЭРа, отсутствием метастазов и сосудистой инвазии
[61] Инвазивная карцинома молочной железы 150 Корреляция экспрессии ЭРР2 с экспрессией ЭРа и низкой степенью злокачественности
[63] Инвазивная карцинома молочной железы 141 Отсутствие корреляции с клинико-морфологическими параметрами
[12] Инвазивная карцинома молочной железы 44 Корреляция экспрессии ЭРР2 с наличием лим-фоваскулярной инвазии
[12] Протоковый рак in situ 26 Отсутствие корреляции с клинико-морфологическими параметрами
Первая группа (ЭРр+/ЭРа+) составляет более половины случаев первичного РМЖ, в то время как изолированная экспрессия ЭРр (ЭР/ЭР) встречается менее чем в 20% случаев [44; 55]. Опухоли, которые традиционно на основании иммуногистохимического анализа классифицируют как ЭР- и характеризуется более агрессивным течением и низкой частотой ответа на гормонотерапию [49], включают вторую группу ЭРр-экспрессирующих новообразований. Эта группа опухолей составляет 50-80 % ЭР- опухолей (фенотип ЭРр+/ЭРа-) [24; 51]. До открытия в 1996 г. ЭРр предполагалось, что часть пациентов так называемой «классической» ЭР- группы отвечают на гормонотерапию в силу методических погрешностей и неправильного определения статуса ЭР в опухоли (ложноотрицатель-ные иммуногистохимические результаты), а также в случае реализации эффектов антиэстрогенов, не ассоциированных с эстрогеновыми рецепторами [11]. До настоящего времени ЭРр/ЭРа- группа опухолей, изучена недостаточно, однако в свете современных знаний о существовании разных типов эстрогеновых рецепторов, которые являются мишенью для эстрогенов и антиэстрогенов, противоопухолевый эффект последних в опухолях с фенотипом ЭРр/ЭРа- кажется очевидным.
Особый интерес представляет исследование Нопта N. й а1. (2008), в которое вошли 442 пациентки с первично-операбельным инвазивным РМЖ, получившие хирургическое лечение с последую-
щей адъювантной терапией тамоксифеном вне зависимости от рецепторного статуса опухоли [24]. Медиана наблюдения составила 11,1 лет. Оказалось, что высокая экспрессия опухолевыми клетками ЭРр (в данном исследовании пороговое значение принималось как наличие 10% и более интенсивно окрашенных клеток) является благоприятным прогностическим маркером вне зависимости от уровня экспрессии ЭРа (р<0,001).
Из 442 пациенток, включенных в исследование, 60 имели ЭРа-/ПР- статус опухоли, однако у 50 пациенток (83 %) данной группы определялась экспрессия ЭРр. Разница БРВ ЭРа/ЭРр- и ЭРа-/ЭРр+ пациенток оказалась разительной. Только у 11 (22 %) из 50 ЭРр+ пациенток развился рецидив заболевания за весь период наблюдения, в то время как у 8 (80 %) из 10 ЭРр- пациенток развился рецидив в течение 5 лет. Проведенный многофакторный анализ показал, что низкий уровень экспрессии ЭРр является независимым показателем повышенной смертности (р=0,021) и рецидивирования (р=0,004) у больных РМЖ, получающих адъювантную гор-монтерапию тамоксифеном. В группе пациенток с трижды-негативным фенотипом, ОВ и БРВ также отличалиь в зависимости от экспрессии ЭРр (р<0,001).
Таблица 2
Результаты ретроспективных исследований по оценке уровня экспрессии ЭРр и выживаемости больных раком молочной железы
Автор n больных Период исследования Пороговое значение в оценке ЭРР статуса Системная терапия (п больных,%) Медиана наблюдения Показатели выживаемости
[61] 150 1993-2000 Allred >3 ГТ без уточнения -37% ХТ - 15% ХТ+ГТ - 20% Системная терапия не проводилась - 28% 58 мес. т БРВ (р=0,001) |ОВ (р=0,002)
[46] 181 Нет данных 10% окрашенных клеток ХТ + ТАМ ТАМ (независимо от гормонального статуса опухоли) 76 мес. т БРВ (р=0,0002) ТОВ (р=0,0002)
[45] 150 1996-2002 Allred >3 ХТ+ТАМ 27 мес. Т БРВ (р=0,0008) ОВ не оценивалась
[24] 442 1983-1993 10% окрашенных клеток ТАМ 11,1 лет Т БРВ (р<0,01) ТОВ (р<0,01)
[25] 186 N+ Нет данных Allred >3 65 мес Т БРВ (р=0,0063) ТОВ (р=0,03)
[37] 118 Нет данных 20% окрашенных клеток Нет данных ТОВ (р=0,03)
[48] 138 1993-1999 20% окрашенных клеток Нет данных ~ ОВ и БРВ
[47] 728 2001-2005 20% окрашенных клеток ГТ (без уточнения) ХТ+ГТ (без уточнения) 50 мес. ~ ОВ и БРВ Т БРВ только в группе люминальных А, N0 опухолей (р=0,02)
[56] 757 1986-1998 20% окрашенных клеток Нет данных о проводимой ХТ ТАМ - 32% Нет данных ~ ОВ и БРВ
метастазы в регионарные лимфоузлы: | - увеличение показателя выживаемости; ^ - отсутствие увеличения показателей выживаемости.
Учеными была предпринята попытка оценить предиктивную роль экспрессии ЭРр на модели не-оадъювантной гормонотерапии. В исследование Miller W. et al. (2006) вошли 33 пациентки в постменопаузе с морфологически верифицированным диагнозом РМЖ, с размером опухолевого узла >3см и высокой экспрессией ЭРа (Allred > 5), ежедневно получавших тамоксифен 20 мг/сут в течение 3 месяцев до операции [41]. Опухоли всех пациенток были высоко положительными по экспрессии ЭРр (Allred 58). Клинический ответ был зарегистрирован у 70 % пациенток, патоморфологический - у 48 %.
Однако статистических достоверных различий уровней экспрессии эстрогеновых рецепторов в группах ответивших и не ответивших на гормонотерапию получено не было. На фоне трехмесячного приема тамоксифена отмечалось снижение экспрессии ЭРа (у 81 % больных) и повышение экспрессии ЭРр (в 51 % случаев) по сравнению с исходными показателями. В 2013 году в Annals of Clinical Oncology опубликованы результаты проспективного анализа экспрессии ЭРР-1 и его регулятора SRAP в рамках исследования NCIC-
СТО-МА121 [66]. В исследование вошли 672 пациентки; период наблюдения составил 9,7 года. ЭРР-1 и 8ИАР были оценены у 457 из 462 больных, соответственно, в связи с отсутствием материала или невозможностью интерпретации иммуногистохимических результатов. Медиана уровня экспрессии ЭРР составила 5,0 баллов (0-205); 54,9 % пациенток были отнесены в группу высокой ЭРР экспрессии, а 45,1 % -низкой. Поскольку в исследование были включены пациентки как с положительным, так и с отрицательным ЭРа статусом опухоли, был выполнен анализ внутри группы в соответствии с стратификацией ЭРа+-. В группе ЭРа+ опухолей высокие уровни экспрессии ЭРР-1 и 8ИАР, как изолированно, так и в сочетании, не показали преимущества терапии тамок-сифеном В то время как в группе ЭРа- опухолей с высокой экспрессией ЭРр-1 при назначении тамокси-фена отмечалось увеличение общей (р=0,007) и безрецидивной выживаемости (р=0,0009) по сравнению с группой плацебо.
рандомизированное плацебо-контролируемое исследование тамоксифена после адъювантной химиотерапии у пременопау-зальных больных ранним РМЖ
При низкой экспрессии ЭРР-1 и 8ЯЛР не было получено статистических различий в показателях выживаемости между группами тамоксифена и плацебо. Авторами сделан вывод о возможной предиктивной роли ЭРР-1 в группе пациенток с ЭРа- РМЖ. Иными словами, в работе получено реальное доказательство того, что, по крайней мере, в половине случаев, позитивный эффект тамок-сифена при лечении РМЖ с отрицательным статусом ЭРа связан с экспрессией в опухолевых клетках другой мишени - эстрогеновых рецепторов р.
Важным параметром, определяющим биологические особенности опухоли, является уровень каждого из маркеров при их коэкспрессии. В некоторых случаях высокий уровень экспрессии в опухоли ЭРр может влиять на эффекты, опосредуемые ЭРа. Например, пролиферативный ответ при воздействии на культуру клеток РМЖ человека эстрогенов в случае коэкспрессии рецепторов наблюдается только при низком уровне экспрессии ЭРр [59]. Полученные на культурах клеток данные о влиянии соотношения разных типов рецепторов на пролиферативное действие эстрогенов ещё не подтверждены в клинических условиях при изучении действия блокаторов рецепторов. Поэтому информация о количественном соотношении экспрессии ЭРа и ЭРр может быть очень важной при оценке предиктивной значимости каждого из типов рецепторов при их коэкспрессии.
Заключение
В последние годы стало очевидно, что, помимо классических ЭРа, в биологии РМЖ важную роль играют рецепторы другого типа - ЭРР, которые также являются мишенью для эстрогенов и
антиэстрогенов, прогностическими и предиктив-ными маркерами РМЖ.
Рассматривая экспрессию ЭРР, следует выделять два типа опухолей, поскольку механизмы канцерогенеза и биологические свойства РМЖ различны при изолированной экспрессии ЭРр и коэкспрессии ЭРр с ЭРа. Более того, эффект эстрогенов зависит от соотношения в клетке разных типов рецепторов, при этом ЭРр могут подавлять функцию ЭРа. Существование различных изоформ ЭРр может лежать в основе не только повышенной чувствительности, но и резистентности опухоли к анти-эстрогенотерапии, а коэкспрессия ЭРР с ЭРа и рецепторами прогестерона наиболее надежно прогнозирует лучший исход болезни.
Роль изолированной экспрессии ЭРР в реализации биологических особенностей опухоли не только представляет научный интерес, но и требует дальнейших исследований по изучению эффективности антиэстрогенотерапии в данной группе пациентов. По нашему мнению, столь же важно проведение подобных оценок в группе больных с высоким уровнем ЭРР на фоне низкой экспрессии ЭРа.
В дальнейшем необходимы проспективные исследования с целью определения клинически значимых показателей экспрессии ЭРР в ткани РМЖ, используя для этого строго количественные методы оценки уровня и интенсивности экспрессии белка, в частности, с использованием современной проточной цитофлуориметрии.
Исследования поддержаны грантами РФФИ (№№ 13-04-01004-а, 15-04-06991-а и 14-04-31734-мол-а), а также грантом по программе РАН (ФИМТ-2014-205) и стипендией Президента РФ (376.2012.4).
Литература
1. Богуш Т.А., Дудко Е.А., Бёме A.A. и др. Экспрессия эстрогеновых рецепторов в опухолях, отличных от рака молочной железы // Антибиотики и химиотер. - 2009. - Т. 54, № 7-8. - С. 41-9.
2. Богуш Т.А., Дудко Е.А., Бёме А.А. и др. Эстрогеновые рецепторы, антиэстрогены и немелкоклеточный рак лёгкого // Биохимия. - 2010. - Т. 75, № 12. - С. 1633-41.
3. Богуш Т.А., Шатурова А.С., Дудко Е.А. и др. Сравнительная оценка экспрессии эстрогеновых рецепторов бета в ткани немелкоклеточного рака легкого и метастазов в легком опухолей других первичных локализаций // ДАН. - 2014. - Т. 454, № 6. - С. 720-4.
4. Богуш Т.А., Шатурова А.С., Дудко Е.А. и др. Количественная иммунофлуоресцентная оценка с использованием проточной цитофлуориметрии экспрессии эстрогеновых рецепторов р в солидных опухолях человека // Вестн. Моск. ун-та Сер. 2, Химия. - 2011. - Т. 52, № 4. - С. 305-12.
5. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2012 году. М.: Издательская группа РОНЦ, 2014. - С. 46.
6. Шатурова А. С., Богуш Т.А., Дудко Е.А. и др. Экспрессия эстрогеновых рецепторов р и Р1 в ткани немелко-клеточного рака легкого человека // Антибиотики и химиотер. - 2012. - Т. 57, № 5-6. - С. 11-7.
7. Aronica S.M., Kraus W.L., Katzenellenbogen B.S. Estrogen action via the cAMP signaling pathway: stimulation of adenylate cyclase and cAMP-regulated gene transcription // Proc Natl Acad Sci USA. - 1994. - 91. - P. 8517-21.
8. Beato M. Gene regulation by steroid hormones // Cell. - 1989. - 56. - P. 335-44.
9. Beekman J.M., Allan G.F., Tsai S.Y. et al. Transcriptional activation by the estrogen receptor requires a conformational change in the ligand binding domain // Mol Endocrinol. - 1993. - 7. - P. 1266-74.
10. Berry M., Metzger D., Chambon P. Role of the two activating domains of the oestrogen receptor in the cell-type and promotercontext dependent agonistic activity of the anti-oestrogen 4-hydroxytamoxifen // EMBO J. - 1990. -9. - P. 2811-8.
11. Bogush T., Dudko E., Bogush E. et al. Tamoxifen non-estrogen receptor mediated molecular targets // Oncology
reviews. - 2012. - 6:e15. - P. 122-9.
12. Bozkurt K., Kapucuoglu N. Investigation of immunohistochemical ERalpha, ERbeta and ERbetacx expressions in normal and neoplastic breast tissues // Pathol. Res. Pract. - 2012. - 208. - P. 133-9.
13. Castoria G., Migliaccio A., Bilancio A. et al. PI3-kinase in concert with Src promotes the S-phase entry of oestra-diol-stimulated MCF-7 cells // EMBO J. - 2001. - 20. - P. 6050-9.
14. Collins R., Davies C.. Early Breast Cancer Trialists' Collaborative Group. Tamoxifen for early breast cancer: an overview of the randomised trials // Lancet. - 1998. - 351. - P. 1451-67.
15. Cowley S.M., Parker M.G. A comparison of transcriptional activation by ER alpha and ER beta // J Steroid Bio-chem Mol Biol. - 1999. - 69. - P. 165-75.
16. Davies C., Godwin J., Gray R. et al. Relevance of breast cancer hormone receptors and other factors to the efficacy of adjuvant tamoxifen: patient-level meta-analysis of randomised trials // Lancet. - 2011. - 378. - P. 771-84.
17. Evans R.M. The steroid and thyroid hormone superfamily // Science. - 1988. - 240. - P. 889-95.
18. Giguere V., Yang N., Segui P., Evans R.M. Identification of a new class of steroid hormone receptors // Nature. -1988. - 331. - P. 91-4.
19. Green G.L., Gilna P., Waterfield M. et al. Sequence and expression of human estrogen receptor complementary DNA // Science. - 1986. - 231. - P. 1150-4.
20. Green S., Walter P., Kumar V. et al. Human oestrogen receptor cDNA: sequence, expression and homology to v-erb-A // Nature. - 1986. - 320. - P. 134-9.
21. Gronemryer H., Laudet V. Transcription factors 3: nuclear receptors // Protein Profile. - 1995. - 2. - P. 1167-322.
22. Hanstein B., Liu H., Yancisin M., Brown M. Functional analysis of a novel estrogen receptor-b isoform // Mol Endocrinol. - 1999. - 13. - P. 129-37.
23. Hartman J., Lindberg K., Morani A. Estrogen receptor beta inhibits angiogenesis and growth of T47D breast cancer xenografts // Cancer Res. - 2006. - 66. - P. 11207-13.
24. Honma N., Saji S., Kurabayashi R. et al. Oestrogen receptor-beta1 but not oestrogen receptor-betacx is of prognostic value in apocrine carcinoma of the breast // Apmis. - 2008. - 116. - P. 923-30.
25. Hopp T., Weiss H., Parra I. et al. Low levels of estrogen receptor beta protein predict resistance to tamoxifen therapy in breast cancer // Clinical Cancer Research. - 2004. - 10. - P. 7490-9.
26. Improta-Brears T., Whorton A.R., Codazzi F. et al. Estrogen-induced activation of mitogen-activated protein kinase requires mobilization of intracellular calcium // Proc Natl Acad Sci USA. - 1999. - 96. -P. 4686-91.
27. Jensen E.V., Jacobsen H.I. Basic guides to the mechanism of estrogen action // Rec Prog Horm Res. - 1962. - 18. -P. 387-414.
28. Katzenellenbogen J.A., Katzenellenbogen B.S. Nuclear hormone receptors: ligand-activated regulators of transcription and diverse cell responses // Chem Biol. - 1996. - 3. - P. 529-36.
29. Kraus W.L. McInerney E.M., Katzellenbogen B.S. Ligand-dependent transcriptionally productive association of the amino- and carboxy-terminal regions of a steroid hormone nuclear receptor // Proc Natl Acad Sci USA. - 1995. -92. - P. 12314-8.
30. Kraus W.L., Kadonaga J.T. P300 and estrogen receptor cooperatively activate transcription via differential enhancement of initiation and reinitiation // Genes Dev. - 1998. - 12. - P. 331-42.
31. Kuiper G.G., Enmar E., Pelto-Huikko M. et al. Cloning of a novel receptor expressed in rat prostate and ovary // Proc Natl Acad Sci USA. - 1996. - 93. - P. 5925-30.
32. Kuiper G.G., Lemmen J.G., Lemmen J.G. et al. Interaction of estrogenic chemicals and phytoestrogens with estrogen receptor beta // Endocrinology. - 1998. - 139. - P. 4252-63.
33. Lagerkrantz J., Nordenskjo L.D., Gustafsson J.A. Human estrogen receptor b-gene structure, chromosomal localisation and expression pattern // J Clin Endocrinol Metab. - 1997. - 82. - P. 4258-65.
34. Lazennec G., Bresson D., Lucas A. et al. ERp inhibits proliferation and invasion of breast cancer cells // Endocrinology. - 2001. - 142. - P. 4120-410.
35. LoselR., WehlingM. Nongenomic actions of steroid hormones // Nat Rev Mol Cell Biol. - 2003. - 4. - P. 46-56.
36. Mangelsdorf D.J., Thummel C., Beato M. et al. The nuclear receptor superfamily: the second decade // Cell. -1998. - 83. - P. 835-9.
37. Mann S., Laucirica R., Carlson N. et al. Estrogen receptor beta expression in invasive breast cancer // Human Pathology. - 2001. - 32. - P. 113-8.
38. Marotti J., Collins L., Hu R., Tamimi R. Estrogen receptor-beta expression in invasive breast cancer in relation to molecular phenotype: results from the Nurses' Health Study // Mod. Pathol. - 2010. - 23. - P. 197-204.
39. McInerney E.M., Katzellenbogen B.S. Different regions in activation function-1 of the human estrogen receptor required for antiestrogen- and estradiol-dependent transcription activation // J Biol Chem. - 1996. - 271. - P. 24172-8.
40. Migliaccio A., Di Domenico M., Castoria G. et al. Tyrosine kinase/p21ras/MAP-kinase pathway activation by es-tradiol-receptor complex in MCF-7 cells // EMBO J. - 1996. - 15. - P. 1292-300.
41. Miller W., Anderson T., Dixon J., Saunders P. Oestrogen receptor beta and neoadjuvant therapy with tamoxifen: prediction of response and effects of treatment // Br. J. Cancer. - 2006. - 94. - P. 1333-8.
42. Moore J.T., McKee D.D., Slentz-Kesler K. et al. Cloning and characterisation of human estrogen receptor beta iso-forms // Biochem Biophys Res Comm. - 1998. - 247. - P. 75-8.
43. Murphy L., Watson P. Is oestrogen receptor-p a predictor of endocrine therapy responsiveness in human breast cancer? // Endocr Relat Cancer. - 2006. - 13. - P. 327-34.
44. Murphy L., Cherlet T., Lewis A. et al. New insights into estogen receptor function in human breast cancer // Annals of Medicine. - 2003. - 35. - P. 614-31.
45. Myers E., Fleming F., Crotty T. et al. Inverse relationship between ER-beta and SRC-1 predicts outcome in endocrine-resistant breast cancer // Br. J. Cancer. - 2004. - 91. - P. 1687-93.
46. Nakopoulou L., Lazaris A., Panayotopoulou E. et al. The favourable prognostic value of oestrogen receptor beta immunohistochemical expression in breast cancer // J. Clin. Pathol. - 2004. - 57. - P. 523-8.
47. Novelli F., Milella M., Melucci E. et al. A divergent role for estrogen receptor-beta in node-positive and node-negative breast cancer classified according to molecular subtypes: an observational prospective study // Breast Cancer Res. - 2008. - 10. - P. 74.
48. O'Neill P., Davies M., Shaaban A. et al. Wild-type oestrogen receptor beta (ERbeta1) mRNA and protein expression in Tamoxifen-treated post-menopausal breast cancers // British Journal of Cancer. - 2004. - 91 - P. 1694-702.
49. Osborne C. Steroid hormone receptors in breast cancer management // Breast Cancer Research Treatment. - 1998.
- 51. - P. 227-38.
50. Paruthiyil S., Parmar H., Kerekatte V. et al. Estrogen receptor p inhibits human breast cancer cell proliferation and tumor formation by causing a G2 cell cycle arrest // Cancer Res. - 2004. - 64. - P. 432-8.
51. Peng B., Lu B., Leygue E., Murphy L. Putative functional characteristics of human estrogen receptor-beta isoforms // Journal of Molecular Endocrinology. - 2003. - 30. - P. 13-29.
52. Pettersson K., Delaunay F., Gustafsson J.A. Estrogen receptor p acts as a dominant regulator of estrogen signaling // Oncogene. - 2000. - 19. - P. 4970-8.
53. Poola I., Abraham J., Baldwin K., et al. Estrogen receptors p4 and p5 are full-length functionally distinct ERp isoforms: cloning from human ovary and functional characterization // Endocrine. - 2005. - 27. - P. 227-38.
54. Razandi M., Pedram A., Greene G.L., Levin E.R. Cell membrane and nuclear estrogen receptors (ERs) originate from a single transcript: studies of ERa and ERp expressed in Chinese hamster ovary cells // Mol Endocrinol. -1999. - 13. - P. 307-19.
55. Saji S., Hirose M., Toi M. Clinical significance of estrogen receptor beta in breast cancer // Cancer Chemotherapy and Pharmacology. - 2005. - 56. - P. 21-6.
56. Seol W., Choi H.S., Moore D.D. An orphan nuclear hormone receptor that lacks a DNA binding domain and het-erodimerizes with other receptors // Science. - 1996. - 272. - P. 1336-9.
57. Shaaban A., Green A., Karthik S. et al. Nuclear and cytoplasmic expression of ERbeta1, ERbeta2, and ERbeta5 identifies distinct prognostic outcome for breast cancer patients // Clin. Cancer Res. - 2008. - 14. - P. 5228-35.
58. Shibata H., Spencer T.E., Onate S.A. et al. Role of co-activators and co-repressors in the mechanism of steroid/thyroid receptor action // Rec Prog Horm Res. - 1997. - 52. - P. 141-65.
59. Sotoca A.M., van den Berg H., Vervoort J. et al. Influence of cellular ERalpha/ERbeta ratio on the ERalpha-agonist induced proliferation of human T47D breast cancer cells // Toxicol Sci. - 2008. - 105(2). - P. 303-11.
60. Stewart J., King R., Hayward J. et al. Estrogen and progesterone receptors: correlation of response rates, site and timing of receptor analysis // Breast Cancer Res Treat. - 1982. - 2. - P. 243-50.
61. Sugiura H., Toyama T., Hara Y. et al. Expression of estrogen receptor beta wild-type and its variant ERbe-tacx/beta2 is correlated with better prognosis in breast cancer // Jpn. J. Clin. Oncol. - 2007 - 37. - P. 820-8.
62. Tsai M.G., O'Malley B.W. Molecular mechanisms of action of steroid/thyroid receptor superfamily members // Annu Rev Biochem. - 1994. - 63. - P. 451-86.
63. Vinayagam R., Sibson D., Holcombe C. et al. Association of oestrogen receptor beta 2 (ER beta 2/ER beta cx) with outcome of adjuvant endocrine treatment for primary breast cancer - a retrospective study // BMC Cancer. - 2007.
- 7. - P. 131.
64. Von Maillot K., Gentsch H.H., Gunselmann W. Steroid receptors and response to endocrine treatment and chemotherapy of advanced breast cancer // J Cancer Res Clin Oncol. - 1980. - 98. - P. 301-13.
65. Warner M., Gustafsson J. The role of estrogen receptor beta (ERbeta) in malignant diseases - a new potential target for antiproliferative drugs in prevention and treatment of cancer // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2010. -396. - P. 63-6.
66. Yan Y., Li X., Blanchard A. et al. Expression of both Estrogen Receptor-beta 1 (ER-p1) and its co-regulator Steroid Receptor RNA Activator Protein (SRAP) are predictive for benefit from tamoxifen therapy in patients with Estrogen Receptor-alpha (ER-a)-Negative Early Breast Cancer (EBC) // Annals of Oncology. - 2013. - P. 1-8.
67. Zhao C., Matthews J., Tujague M., et al. Estrogen receptor p2 negatively regulates the transactivation of estrogen receptor a in human breast cancer cells // Cancer Res. - 2007. - 67. - P. 3955-62.
