CC BY
22References
1. Seliverstov, V.V. Kompleksnaya ekologicheski bezopasnaya sistema veterinarnoy zashchity zdorovya zhivotnyh: metodicheskie rekomendatsii [Complex ecologically safe system of veterinary protection of animal health: guidelines ] / V.V.Seliverstov. - M., 2000. - 238 p.
2. SanPiN 2.1.4.1074-01 Pitewaya voda. Gigienicheckie trebovaniya k kachectvu vody centralizovannych system pitevogo vodocnabzheniya. Kontrol kachectva [SanPiN 2.1.4.1074-01. Drinking water. Hygienic requirements for water quality of centralized drinking water supply systems. Quality control.]. - M.: Minzhdrav Rossii, 2002. - 103 p.
3. VetPiN 13.7.1-1-00. Veterinarnyepravilainormy[VetPiN 13.7.1-1-00. Veterinary rules and regulations]. - M., 2001.
4. SanPiN 2.3.2.1078-01. Sanitarnye pravila i normy [SanPiN 2.3.2.1078-01. Sanitary rules and regulations]. - M., 2002.
5. Zhulenko, V.N. Veterinarnaya toksigologiya [Veterinary toxicology] / V.N.Zhulenko, G.A.Talanov, M.I.Rabinovich. - M., 2002. - 236 p.
6. Ekologicheskie i medico-sotsialnye aspekty okhrany prirodnoy sredy I zdorovya naseleniya: monografiya [Ecological and medico-social aspects of protection of the natural environment and public health] / V.G.Makarova, A.R.Tsyganov [et al.] -Minsk: bit: Chata, 2002. - 50 p.
7. Metodicheskie ukasaniya po opredeleniyu tyazhelykh metallov v pochvakh selskokhozyaystvennykh ugodiy i produktsii rastenievodstva [Methodological guidelines on the determination of heavy metals in soils of agricultural crops and production of crop production]. - M., 1992.
8. MI 2740-2002. Gosudarstvennay sistema obespecheniya edinstva izmereniya. Massovaya dolya obschey rtuti v pischevykh produktakh I prodovolstvennom syrie. Metodika vypolneniya izmereniy atomno-absorbtsionnym metodom [MI 2740-2002. State system for ensuring the unity of measurement. Mass fraction of total mercury in food products and food raw materials. Method for performing measurements by atomic absorption method]. - Kazan, 2002. - 10 p.
УДК 636.32/38:591.111.8:57.04:546.815
ЕСТЕСТВЕННАЯ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ОВЕЦ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ПОСТУПЛЕНИИ С КОРМОМ НИТРАТА СВИНЦА
В.Я.Саруханов - кандидат биологических наук, ст.н.с.; В.О.Кобялко - кандидат биологических наук,
вед.н.с.; Э.Б.Мирзоев - доктор биологических наук, вед.н.с.
ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт радиологии и агроэкологии», г.Обнинск (249032, Калужская область, г. Обнинск, Киевское шоссе, 109 км; e-mail: [email protected]).
Целью настоящего исследования было изучение влияния свинца на гуморальные и клеточные факторы естественной резистентности организма овец при хроническом поступлении нитрата металла с кормом в концентрациях 1, 5 и 30 МДУ. Эксперименты были выполнены на 12 овцах романовской породы, разделенных на 4 группы по принципу аналогов. Кормление овец осуществляли дважды в сутки при свободном доступе к воде. Животным трех подопытных групп скармливали по 1, 5 и 30 МДУ свинца в рационе (5, 25, 150 мг/кг корма). Нитрат свинца задавали с комбикормом 1 раз в сутки во время утреннего кормления. Четвертая группа являлась контролем. Кровь отбирали из яремной вены овец утром, перед кормлением, до начала эксперимента и на 7-е, 14-е, 28-е, 42-е, 56-е, 70-е, 90-е сут исследования. Естественную резистентность овец оценивали по бактерицидной, лизоцимной, в-литической и фагоцитарной активности плазмы крови. Хроническое поступление свинца с рационом в организм овец в концентрациях 1, 5 и 30 МДУ выявило разнонаправленный характер изменения гуморальных и клеточных факторов естественной резистентности. Сравнительный анализ оцениваемых показателей продемонстрировал наличие четкой реакции бактерицидной и в-литической активности плазмы крови, а так же фагоцитарного числа на поступление металла в организм животных. Наиболее выраженные изменения гуморальных и клеточных факторов естественной резистентности отмечали при максимальной концентрации свинца в кормах. Полученные результаты свидетельствуют о снижении естественной резистентности организма. При этом степень изменения гуморальных и клеточных факторов естественной резистентности зависит не только от концентрации свинца в кормах, но и от продолжительности его поступления в организм. Поэтому, в реальных условиях ведения животноводства на техногенно загрязненных территориях, хроническое воздействие соединений свинца, поступающего в организм продуктивных животных с кормом, может быть одним из факторов повышенной заболеваемости. Полученные экспериментальные данные дают основание для более жесткого контроля содержания свинца в их рационе.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: овцы, свинца нитрат, хроническое поступление, естественная резистентность организма, бактерицидная активность, в-литическая активность, лизоцимная активность, фагоцитарное число.
В ряде регионов Российской Федерации наблюдают рост антропогенной нагрузки на окружающую среду. Одной из наиболее значимых составляющих этого процесса считают загрязнение агробиоценозов тяжелыми металлами и, в частности, свинцом. Основными источниками загрязнения являются: выбросы предприятий химической и металлургической промышленности, отходы автомобильной промышленности [1]. Загрязнение агробиоценозов увеличивает вероятность перехода свинца в продукты питания по трофической цепи почва-растение-животное [2, 3]. Для получения продукции животноводства (мясо, молоко), отвечающей требованиям санитарно-гигиенических нормативов СанПиН 2.3.2.1078-01, содержание свинца в кормах для сельскохозяйственных животных регламентируется максимально допустимыми уровнями (МДУ) [4, 5]. При этом получение экологически «чистых» продуктов питания (мясо, молоко) не исключает развитие негативных изменений в организме животных, что, в конечном итоге, может приводить к снижению естественной резистентности организма и проявлению заболеваний разной этиологии [6].
Установлено, что ежедневное поступление свинца в организм лабораторных животных приводит к снижению естественной резистентности [7]. Так, при воздействии свинца в дозах 1 и 10 мг/кг массы тела у подопытных животных отмечали тенденцию к снижению антителообразования и бактерицидной активности крови [8]. В то же время при внутрибрюшинном введении свинца крысам в течение 5 сут в дозе 2,5 мг/ кг массы тела регистрировали фазовые изменения фагоцитарной активности нейтрофилов. Аналогичный характер изменений значений показателя наблюдали при воздействии свинца в течение 20 сут в дозе 10 мг/кг массы тела [9]. Показано, что пероральное поступление ацетата свинца в организм крыс и кроликов в течение 30 сут в концентрации 25 мг/кг корма снижает фагоцитарную активность нейтрофилов на 18 и 25%, фагоцитарного индекса - на 24 и 25%, а фагоцитарной емкости - на 33 и 41%, соответственно. При этом, количество Т- и В-лимфоцитов у крыс было ниже контроля на 36 и 28%, а у кроликов на 47 и 49%, соответственно [10].
Целью настоящего исследования стала оценка гуморальных и клеточных факторов естественной резистентности овец при хроническом поступлении свинца с кормом в концентрациях 1, 5 и 30 МДУ.
Материалы и методы. Исследования были выполнены на 12 овцах романовской породы (живая масса 33,0+1,1 кг, возраст 1-1,5 года), по 3 овцы в группе. Экспериментальные животные имели ветеринарный сертификат и прошли 20 сут карантин в виварии Всероссийского НИИ физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных (г.Боровск, Калужская область). Все работы с животными были выпол-
нены в соответствии с общепринятыми этическими нормами, на основе стандартных операционных процедур, принятых во ВНИИРАЭ и правил Европейской Конвенции по защите животных, используемых для научных целей (ETS 123) [11]. Кормление овец осуществляли дважды в сутки при свободном доступе к воде. Рацион включал 0,3 кг комбикорма и 1,7 сена. Нитрат свинца задавали с комбикормом 1 раз в сут, во время утреннего кормления. Рецепт комбикорма в %: ячмень 44; пшеница 41,4; шрот подсолнечный 11,7; соль поваренная 1; обесфторенный фосфат 1; премикс 1. Состав сена в %: сырое вещество 87,9; жир 2,26; клетчатка 32,6; зола 4,26; протеин 8,89.
Все экспериментальные животные были клинически здоровы. Овцам трех подопытных групп скармливали по 10 мг, 50 мг, 300 мг свинца, что соответствовало 1; 5 и 30 МДУ в рационе (5, 25, 150 мг/кг корма). Четвертая группа, интактные животные, являлась контролем. Кровь отбирали из яремной вены овец утром, перед кормлением, до начала эксперимента и на 7-е, 14-е, 28-е, 42-е, 56-е, 70-е, 90-е сут исследования.
Плазму периферической крови получали путем осаждения форменных элементов крови на центрифуге ОПН-8 при 3000 об/мин 15 мин. Естественную резистентность овец оценивали по бактерицидной, ли-зоцимной, р-литической и фагоцитарной активности плазмы крови [12-15]. При определении бактерицидной, фагоцитарной и р-литической активности использовали эталонные штаммы Escherichia coli и Bacillus subtilis, а лизоцимной активности - ацетоновый порошок Micrococcus lysodecticus.
Статистическую обработку результатов проводили методом вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента и пакета программ Microsoft Excel 2003. Различия значений считали достоверными при p<0,05 [16].
Результаты исследования. Бактерицидная активность плазмы крови контрольных животных в течение всего периода исследования варьировала в пределах от 80,0 до 90,8 % (рис. 1).
При хроническом поступлении свинца в организм овец отмечали разнонаправленный характер изменений бактерицидной активности плазмы крови. При концентрации 1 МДУ регистрировали снижение значения показателя на 28-е (5%, р<0,05) и 42-е (11%, р<0,05) сут интоксикации, а увеличение на 56-е (4%, р<0,05). В последующие сроки исследования не наблюдали существенных отклонений значений показателя от контроля. У животных 2 (5 МДУ) и 3 (30 МДУ) групп бактерицидная активность плазмы крови была ниже контроля на 42-е (11%, р<0,05) сут интоксикации и 28-е (20%, р<0,05) и 42-е (15%, р<0,05) сут, соответственно. Сравнительный анализ бактерицидной активности плазмы крови животных, которые получали ни-
Рис. 1. Бактерицидная активность крови овец к E. coli
трат свинца в концентрациях 30 МДУ и 1 МДУ, выявил достоверные различия значений на 28-е (12%) сутки. Таким образом, при разнонаправленном характере изменений бактерицидной активности плазмы крови у овец, подвергнутых хроническому воздействию свинца, наиболее выраженные изменения показателя отмечали у животных 3 группы (30 МДУ).
У контрольных овец в-литическая активность плазмы крови в течение всего срока исследования варьировала в пределах от 23,3 до 34,6 % (рис. 2). У животных 1 группы, которые получали свинец в концентрации 1 МДУ, в-литическая активность возрастала на 28-е (20%, р<0,05) сут исследования по сравнению с контролем. В последующие сроки сохранялась тенденция к повышению значений показателя. С увеличением концентрации свинца в рационе (5 и 30 МДУ) регистрировали разнонаправленный характер изменений в-лити-ческой активности плазмы крови. Так, у овец 2 группы (5 МДУ) значения показателя были выше контроля на
42-е (30%, р<0,05) сут и ниже - на 90-е (23%, р<0,05) сут интоксикации. У животных 3 группы (30 МДУ) на 7-е сут исследования отмечали снижение в-литиче-ской активности плазмы крови (30%, р<0,05), а на 28-е (13%, р<0,05), 42-е(56%, р<0,05) и 56-е (22%, р<0,05) сут - увеличение. Сравнительный анализ в-литической активности плазмы крови животных, которые получали нитрат свинца в концентрациях 30 МДУ и 1 МДУ, 30 МДУ и 5 МДУ выявил достоверные различия на 7-е (24% в обоих случаях) сут исследования. В последующие сроки, различия показателя у животных, которые получали 30 МДУ и 1 МДУ, были достоверны на 42-е (38%), 56-е (22%) и 90-е (24%) сут, а также 5 МДУ и 1 МДУ - на 90-е (33%) сут исследования, соответственно. Отмечается, что по мере накопления токсиканта (с 70 по 90 сут исследования) в-литическая активность плазмы крови у животных, которые получали с кормом свинец в концентрациях 5 и 30 МДУ снижается в отличие от значений этого показателя овец 1 группы.
« Контроль -■ -1 МДУ МДУ ■X -30МДУ
60 70 80 90 Сроки исследования, сутки
Рис. 2. В-литическая активность крови овец
Определение лизоцимной активности в плазме крови подопытных животных 1 и 2 групп (1 и 5 МДУ) не выявила существенных изменений относительно контрольных значений. В то же время у овец 3 группы (30 МДУ) на 28-е сут интоксикации отмечали увеличение лизоцимной активности на 28% (р<0,05).
Следовательно, при хроническом поступлении свинца с рационом в организм овец в концентрациях 1, 5 и 30 МДУ изменения бактерицидной, в-литической и лизоцимной активности плазмы периферической крови носили разнонаправленный характер. Наиболее выраженные изменения гуморальных факторов естественной резистентности отмечали при максимальной концентрации свинца в кормах. Следует отметить, что степень изменения гуморальных факторов естественной резистентности зависит не только от концентрации свинца в кормах, но и от продолжительности его поступления в организм.
Изучение клеточных факторов естественной резистентности овец показало, что у интактных животных количество клеток, принимающих участие в фагоцитозе (фагоцитарный индекс), варьировало от 65,8
до 85,4%, а фагоцитарное число (среднее количество бактерий в клетке) от 1,3 до 2,0 (рис. 3, 4). Определение фагоцитарного индекса при хроническом поступлении свинца с рационом обнаружило разнонаправленный характер изменений. Достоверные различия значений показателя отмечали у животных 3 группы (30 МДУ): снижение на 28-е (9%) сут, а увеличение на 42-е (11%) сут интоксикации. В то же время фагоцитарное число (ФЧ) у овец 1 группы было ниже контроля на 42-е (17%, р<0,05) сут интоксикации и выше на 56-е (18%, р<0,05) сутки. У животных 2 (5 МДУ) группы на 42-е (18%, р<0,05) и 56-е (16%, р<0,05) сут исследования, напротив, регистрировали повышение ФЧ. Аналогичную динамику изменений ФЧ отмечали у животных 3 (30 МДУ) группы. На 42-е и 56-е сут исследования значения показателя были выше контроля на 57% (р<0,05) и 20% (р<0,05), соответственно. Сравнительный анализ ФЧ между животными, которые получали нитрат свинца в концентрациях 30 МДУ и 1 МДУ, а так же 30 МДУ и 5 МДУ, 1 МДУ и 5 МДУ вывил достоверные различия на 42-е сут (74%, 39% и 35%), соответственно.
Рис. 3. Фагоцитарный индекс крови овец
Рис. 4. Фагоцитарное число в крови овец (количество микробных тел в одном нейтрофиле)
Таким образом, оценка клеточных факторов естественной резистентности при хроническом поступлении свинца с рационом в организм овец выявила изменения ФИ и ФЧ в различные сроки исследования. Следует отметить, что на 42-е сут интоксикации различия значений ФЧ зависели от концентрации свинца в кормах.
Заключение. Хроническое поступление свинца с рационом в организм овец в концентрациях 1, 5 и 30 МДУ приводит к изменению гуморальных и клеточных факторов естественной резистентности. Сравнительный анализ оцениваемых показателей продемонстрировал наличие четкой реакции бактерицидной и в-литической активности плазмы крови, а так же фагоцитарного числа на поступление металла в организм животных. Как известно, бактерицидная активность крови обусловлена функционированием системы комплемента. Поэтому можно полагать, что угнетение бактерицидной активности крови связано со снижением выработки комплемента иммунокомпетентны-ми клетками, подвергающимися цитотоксическому воздействию свинца. Изменение в-литической активности в крови зависит от состояния гомеостаза организма и коррелирует со степенью воздействия факторов внешней среды [17]. Регистрируемое изменение поглотительной способности нейтрофилов вероятно связано с нарушением их функционального состояния.
Косвенным подтверждением этого факта является изменение функциональной активности лимфоцитов периферической крови у этих экспериментальных животных. Показано, что при хроническом поступлении свинца в организм овец в концентрациях 1, 5 и 30 МДУ изменяется содержание металлотионеинов и репа-ративный синтез ДНК в лимфоцитах периферической крови [18, 19]. Это, в свою очередь, сопровождается снижением жизнеспособности клеток белой крови.
Таким образом, гуморальные и клеточные факторы естественной резистентности в различной степени реагируют на воздействие свинца, поступающего в организм овец с рационом. Их изменение зависит не только от концентрации свинца в кормах, но и длительности воздействия. По результатам исследований, даже не высокие концентрации металла (< 5 МДУ), которые поступают в организм животных более 90 сут, могут стать причиной нарушения естественной резистентности организма. И поэтому, в реальных условиях ведения животноводства на техногенно загрязненных территориях хроническое воздействие соединений свинца, поступающего в организм продуктивных животных с кормом, может быть одним из факторов повышенной заболеваемости [20]. Полученные экспериментальные данные дают основание для более жесткого контроля содержания свинца в их рационе.
Литература
1. Снакин, В.В. Свинец в биосфере / В.В.Снакин // Вестник РАН. - 1998. - Т. 68, №3. - С. 214-224.
2. Миграция ТМ в трофической цепи лактирующих коров Подмосковья / А.Н.Сироткин [и др.] // Доклады Рос-сельхозакадемии. - 2000. - № 4. - С. 37-39.
3. Transfer of cadmium, lead, mercury and arsenic from feed into milk and varios tissues of dairy cows: chemical and pathological data / K.Vreman, N.G.Veen, E.J.Molen., W.G.Ruig // Netherlands Journal of Agricultural Science. - 1986. -V. 34. - P. 129-144.
4. Технический регламент Таможенного союза « О безопасности пищевой продукции» (ТР ТС 021/2011): утв. Решением Комиссии Таможенного Союза от 09.12.2011. - М., 2011. - 242 с.
5. Временный максимально-допустимый уровень (МДУ) содержания некоторых химических элементов и гос-сипола в кормах для сельскохозяйственных животных и кормовых добавках. Утвержден Главным управлением ветеринарии Госагропрома СССР №123-4/281-87 от 07.08.87 г.1987 / Гос. Агропромышленный комитет СССР. - М., 1987.
6. Ежкова, А.М. Изучение воздействия антропогенных загрязнений на метаболизм коров и его коррекция бентонитами / А.М.Ежкова. А.Х.Яппаров // Ветеринарная медицина 21 века: инновации, опыт, проблемы и пути решения: материалы Междунар. науч.-практ. конф. Том 2. - Ульяновск, 2011. - С. 70-73.
7. Влияние экологических факторов на организм животных / И.М.Донник [и др.] // Ветеринария. - 2007. -№ 6. - С. 38-42.
8. Товмасян, В.С. Влияние свинцового отравления на фагоцитарную активность лейкоцитов / В.С.Товмасян, М.И.Геворкян // Журнал клинической и экспериментальной медицины. - 1977. - Т. 17, №2. - С. 42-43.
9. Товмасян, В.С. Влияние хронического свинцового отравления на антителообразование/ В.С.Товмасян // Журнал клинической и экспериментальной медицины. - 1977. - Т. 17, №3. - С. 46-47.
10. Гизатуллин, Р.Р. Влияние натрия сульфида на естественную резистентность организма при отравлении животных солями тяжелых металлов: автореф. дис. ... к б н / Р.Р.Гизатуллин. - Казань, 2007. - 16 с.
11. European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purpose. Cet №:123. Date 18.03.1986. Status as of:15.03.2010 // ETS . Protection of vertebrate animals, 18.03.1986. - 48 c.
12. Модификация метода определения бактерицидной активности сельскохозяйственных животных / В.Я.Саруханов, Н.Н.Исамов., Э.Б.Мирзоев., В.О.Кобялко // Сельскохозяйственная биология. Сер. Биология животных. - 2007. - № 2. - С. 119-121.
13. Бухарин, О.В. Система бета-лизина и ее роль в клинической и экспериментальной медицине / О.В.Бухарин, Н.В.Васильев. - Томск, 1977. - 187 с.
14. Саруханов, В.Я. Метод определения лизоцимной активности крови у сельскохозяйственных животных / В.Я.Саруханов, Н.Н.Исамов, И.М.Колганов // Сельскохозяйственная биология. Сер. Биология животных. - 2012. - № 2. - С. 119-122.
15. Плященко, С.И. Естественная резистентность организма животных / С.И.Плященко, В.Т.Сидоров. - Л.: Колос, 1970. - 184 с.
16. Лакин, Г.Ф. Биометрия: учеб. пособие для биол. спец. Вузов / Г.Ф.Лакин. - 4-изд., перераб. и доп. - М.: Высш. шк, 1990. - 352 с.
17. Саруханов, В.Я. Оценка последствий внешнего Y-облучения и ранний прогноз исхода острой лучевой болезни овец / В.Я.Саруханов., Н.Н.Исамов., В.Г.Епимахов // Ветеринарный врач. - 2005. - № 1. - С. 29-33.
18. Содержание металлотионеинов и общего белка в лимфоцитах периферической крови овец при хроническом поступлении нитрата свинца с рационом / Э.Б.Мирзоев [и др.] // Токсикологический вестник. - 2014. -№ 6 (129). - С. 36-39.
19. Синтез ДНК в лимфоцитах периферической крови овец при хроническом поступлении свинца с рационом / Э.Б.Мирзоев [и др.] // Токсикологический вестник. - 2015. - № 6. - С. 32-36.
NATURAL RESISTANCE OF SHEEP IN CHRONIC INTAKE OF LEAD NITRATE WITH FEED
Sarukhanov V.Y. - Candidate of Biological Sciences; Kobyalko V.O. - Candidate of Biological Sciences;
Mirzoev E.B. - Doctor of Biological Sciences
Russian Institute of Radiology and Agroecology, RIRAE (e-mail: [email protected]).
The purpose of this research was to study the effect of lead on humoral and cellular factors of natural resistance of the sheep organism during chronic intake of metal nitrate with feed in concentrations of 1,5 and 30 MRL. The experiments were performed on 12 sheep of Romanov breed, divided into 4 groups according to the principle of analogues. Sheep feeding was performed twice a day with free access to water. The animals of the three experimental groups were fed 1, 5 and 30 MRL of lead in the diet (5, 25, 150 mg/kg of feed). Lead nitrate was fed with mixed feed once a day during morning feeding. The fourth group was a control. Blood was taken from the jugular vein of the sheep in the morning, before feeding, before the start of the experiment, and on the 7th, 14th, 28th, 42nd, 56th, 70th, and 90th day of the study. The natural resistance of sheep was assessed by bactericidal, lysozyme, p-lytic and phagocytic activity of blood plasma. Chronic intake of lead with diet in the organism of sheep in concentrations of 1, 5 and 30 MRL revealed a differently directed nature of changes in humoral and cellular factors of natural resistance. A comparative analysis of the parameters assessed showed a clear reaction of the bactericidal and p-lytic activity of the blood plasma, as well as the phagocytic number on the entrance of metal in the animals. The most pronounced changes in humoral and cellular factors of natural resistance were noted at the maximum concentration of lead in feed. The obtained results indicate a decrease in the natural resistance of the organism. And besides, the degree of change in humoral and cellular factors of natural resistance depends not only on the concentration of lead in the feed, but also on the duration of its intake into the body. So, in the real conditions of livestock keeping in technologically contaminated areas, the chronic effects of lead compounds may be the cause of an increased incidence of productive animals. The obtained experimental data give grounds for more strict control of lead contents in animals diet.
KEYWORDS: sheep, lead nitrate, chronic intake, natural resistance of the organism, bactericidal activity, P-lytic activity, lysozyme activity, phagocytic number.
References
1. Snakin, V.V. Svinets v biosere [Lead in biosphere] / V.V.Snakin // Vestnik RAN. -1998. -T.68. - № 3. - P. 214-224.
2. Migratsiya TM v troficheskoj tsepi laktiruyushchikh korov Podmoskovya [Migration of TM in the trophic chain of lactating cows near Moscow] / A.N.Sirotkin [et al.] // Doklady Rosselkhozakademii. - 2000. - № 4. - P. 37-39.
3. Vreman, K. Transfer of cadmium, lead, mercury and arsenic from feed into milk and varios tissues of dairy cows: chemical and pathological data / Vreman K., Veen N.G., Molen E.J., Ruig W.G. // Netherlands Journal of Agricultural Science. - 1986. -V.34. -P.129-144.
4. Tekhnicheskiy reglament Tamozhennogo soyuza « O bezopasnosti pishchevoy produktsii» (TR TS 021/2011): utv. Resheniem Komissii Tamozhennogo Soyuza 09.12.2011 [Technikal regulations of the Customs Yunion "On food safety": approved by the decision of the Commission of the Customs Union on 09.12.2011]. - M., 2011. - 242 p.
5. Vremenny maksimalno dopustimy uroven (MDU) soderzhaniya nekotorykh himicheskikh elementov i gossipola v kormakh dlya selskokhozyaystvennykh zhivotnykh i kormovykh dobavkakh: utverzhden Glavnym upravleniem veterinarii Gosagroproma SSSR №123-4/281-87 ot 07.08.87 g.1987 [Temporary maximum permissible level (MPL) of the contents of certain chemical elements and gossypol in feed for farm animals and feed additives: approved by the Chief Veterinary Department of Gosagroprom of the USSR (State Agroindustrial Committee). - №123-4/281-87 on 07.08.87]. - M., 1987.
6. Ezhkova, A.M. Izuchenie vozdeystviya antropogennykh zagryazneniy na metabolizm korov i ego korrektsiya bentonitami [Study of the impact of anthropogenic contaminations on metabolism of cows and its correction with bentonites] / A.M.Ezhkova. A.H.Yapparov // Veterinarnaya medicina 21 veka: innovatsii, opyt, problemy i puti resheniya: materialy mezhdunarodnoy nauchno-prakticheskoy konferentsii. - Tom 2. - [Veterinary Medicine of the 21st Century: innovation, experience, problems and solutions: materials of the Intern. scientific-practical conf. Vol. 2]. - Ulyanovsk, 2011. - P. 70-73.
7. Vliyanie ekologicheskikh faktorov na organizm zhivotnykh [Influence of environmental factors on the animal organism] / I.M.Donnik [et al.].// Veterinariya. - 2007. - № 6. - P. 38-42.
8. Tovmasyan, V.S. Vliyanie svintsovogo otravleniya na fagotsitarnuyu aktivnost leykotsitov [Effect of lead poisoning on the phagocytic activity of leukocytes] / V.S. Tovmasyan., M.I. Gevorkyan // Zhurnal klinicheskoy i eksperimentalnoy meditsiny. - 1977. - Vol. 17, №2. - P. 42-43.
9. Tovmasyan, V.S. Vliyanie khronicheskogo svintsovogo otravleniya na antiteloobrazovanie [Effect of Chronic Lead Poisoning on Antibody Formation] / V.S. Tovmasyan // Zhurnal klinicheskoy i eksperimentalnoy meditsiny. - 1977. -Vol.17, № 3. - P. 46-47.
10. Gizatullin, R.R. Vliyanie natriya sulfida na estestvennuyu rezistentnost organizma pri otravlenii zhivotnykh solyami tyazhelykh metallov: avtoref. dis. ... candidate biologicheskikh nauk [Influence of sodium sulfide on natural resistance of the organism when poisoning animals with salts of heavy metals: the author's abstract of the thesis of candidate of biological sciences] / R.R. Gizatullin. - Kazan, 2007. - 16 p.
11. European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purpose. Cet №:123. Date 18.03.1986. Status as of:15.03.2010.
12. Sarukhanov, V.Ya. Modifikatsiya metoda opredeleniya bakteritsidnoy aktivnosti selskokhozyaystvennykh zhivotnykh [Modification of the method for determining the bactericidal activity of agricultural animals] / V.Ya.Sarukhanov., N.N.Isamov., E.B.Mirzoev, V.O.Kobyalko // Selskokhozyaystvennaya biologiya. Ser. Biologiya zhivotnykh. - 2007. -№ 2. - P. 119-121.
13. Bukharin, O.V. Sistema beta-lizina i ee rol v klinicheskoy i eksperimentalnoy meditsine [Beta-lyzine system and its role in clinical and experimental medicine] / O.V.Bukharin, N.V.Vasilyev. - Tomsk, 1977. - 187 p.
14. Sarukhanov, V.Ya. Metod opredeleniya lizotsimnoy aktivnosti krovi u selskokhozyaystvennykh zhivotnykh [Method for determining lysozyme activity of blood in farm animals] / V.Ya.Sarukhanov, N.N.Isamov, I.M.Kolganov // Selskokhozyaystvennaya biologiya. Seriya "Biologiya zhivotnykh. - 2012. - № 2. - C. 119 -122.
15. Plyaschenko, S.I. Estestvennaya rezistentnost organizma zhivotnykh [Natural resistance of the animal body] / S.I.Plyaschenko, V.T.Sidorov. - L.: Kolos, 1970. - 184 p.
16. Lakin, G.F. Biometriya: ucheb. posobie dlya biol. spetsialnostey vuzov [Biometrics: a textbook for the biological specialties of higher education institutions] / G.F. Lakin. - 4-e izd., pererab. i dop. - M.: Vyssh. shk., 1990. - 352 p.
17. Sarukhanov, V.Ya. Otsenka posledstviy vneshnego y-oblucheniya i ranniy prognoz iskhoda ostroy luchevoy bolezni ovets [Assessment of the effects of external radiation and an early prognosis of the outcome of acute radiation sickness of sheep] / V.Ya.Sarukhanov, N.N.Isamov, V.G.Epimakhov // Veterinarny vrach. - 2005. - № 1. - P. 29-33.
18. Soderzhanie metallotioneinov i obschego belka v limfotsitakh perifericheskoy krovi ovets pri khronicheskom postuplenii nitrata svintsa s ratsionom [The content of metallothioneins and total protein in lymphocytes of peripheral blood of sheep with chronic intake of lead nitrate with diet] / E.B.Mirzoev [et al.] // Toksikologicheskiy vestnik. - 2014. - № 6 (129). - P. 36-39.
19. Sintez DNK v limfotsitakh perifericheskoy krovi ovets pri khronicheskom postuplenii svintsa s ratsionom [Synthesis of DNA in lymphocytes of peripheral blood of sheep with chronic intake of lead with diet] / E.B.Mirzoev [et al.] // Toksikologicheskiy vestnik. - 2015. - № 6. - P. 32-36.
