CC BY
185
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ОБЗОРЫ
Эпигенетика в гинекологии и онкогинекологии: Ш^и реальность
Киселев В.И.1, Муйжнек Е.Л.2, Ашрафян Л.А.1, Сухих Г.Т.3
1 Институт онкогинекологии и маммологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва
2 AO «МираксБиоФарма», Москва
3 ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии
им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва
В настоящее время эпигенетические подходы в диагностике и лечении предопухолевых и опухолевых заболеваний женской репродуктивной системы получают все большее распространение и признание. В обзоре обсуждаются данные литературы, а также собственные данные авторов, свидетельствующие о диагностической и прогностической клинической значимости статуса промоторного метилирования гена WIF-1 при комплексном лечении интраэпителиальных поражений шейки матки, а также миомы матки. Применение инновационных препаратов с ДНК-деметилирующей эпигенетической активностью, восстанавливающих опу-холь-супрессорные функции гена WIF-1, является новым перспективным подходом при проведении патогенетической терапии пролиферативных заболеваний женской репродуктивной системы в составе их комплексного лечения.
Ключевые слова:
эпигенетика, ДНК-метилирование, Wnt-каскад, ген WIF-1, цервикальная интраэпителиальная неоплазия (CIN), лейомиома матки
Акушерство и гинекология: новости, мнения, обучение. 2018. № 1. С. 18-26.
Статья поступила в редакцию: 05.12.2017. Принята в печать: 22.12.2017.
Epigenetics in gynecology and oncogynecology: WIF and reality
Kiselev V.I.1, Muyzhnek E.L.2, 1 Institute of Oncogynecology and MammoLogy, V.I. KuLakov Obstetrics,
Ashrafyan L.A.1, Sukhikh G.T.3 Gynecology and Perinatology Research Center of Ministry of Healthcare
of the Russian Federation, Moscow
2 MiraxBioPharma, Moscow
3 V.I. Kulakov Obstetrics, Gynecology and Perinatology Research Center of Ministry of Healthcare of the Russian Federation, Moscow
Currently, epigenetic approaches in diagnostics and treatment of pretumor and tumor diseases of the female reproductive system are becoming increasingly widespread and recognized. Literature data and authors' own data, which provide evidence of the diagnostic and prognostic clinical significance of WIF-1 gene promoter methylation status in complex treatment of cervix uteri intraepithelial lesions as well as uterine myoma are discussed in the review. Administration of innovative drugs with epigenetic DNA demethylation activity that restore tumor suppressor functions of WIF-1 gene is a promising new approach in pathogenetic therapy of proliferative diseases of the female reproductive system (as part of their complex treatment).
J
Keywords:
epigenetics, DNA methylation, Wnt-cascade, WIF-1 gene, cervical intraepithelial neoplasia (CIN), uterine leiomyoma
Obstetrics and Gynecology: News, Opinions, Training. 2018; (1): 18-26.
Received: 05.12.2017. Accepted: 22.12.2017.
0 том, кто вы есть, что-то написано пером, что-то карандашом.
Написанное пером изменить нельзя - это ДНК. Но все, что написано карандашом, изменить можно - это эпигенетика.
(М. Мелони, Дж. Теста. Эпигенетическая революция в пристальном рассмотрении. ВюБосШеБ, 2014)
Миф - это повествование, передающее представление людей о мире, месте человека в нем, о происхождении жизни.
(Википедия)
Важнейшим событием последних десятилетий является стремительное развитие молодой научной дисциплины - эпигенетики и ее самостоятельного направления - эпигенетики рака [1]. В настоящее время для подавляющего большинства злокачественных новообразований известен свой характерный набор специфических обратимых эпигенетических нарушений, не затрагивающих первичную структуру ДНК, но существенно подавляющих экспрессию генов противоопухолевой защиты организма. К таким генам относятся опухоль-супрессорные гены, гены ДНК-репарации, гены ферментов детоксикации, гены ядерных (в том числе гормональных) рецепторов, гены клеточной дифференцировки, гены «иммунного ускользания», а также гены сигнальных белков, подавляющих гиперпролиферацию, патологический неоангиогенез, воспаление, инвазию и метастазирование. Доказано, что при спорадических раках как минимум половина всех инактивированных генов опухолевой супрессии являются транскрипционно неактивными вследствие обратимых эпигенетических модификаций, а не в результате необратимых генетических нарушений (мутаций), как считалось ранее [2].
Такие обратимые и, следовательно, потенциально регулируемые эпигенетические модификации возникают уже на самых ранних этапах канцерогенеза и сегодня рассматриваются как перспективные диагностические и прогностические маркеры злокачественных новообразований, как факторы клинического мониторинга в процессе их терапевтического лечения, а также как перспективные лекарственные мишени при разработке таргетных противоопухолевых препаратов, обладающих эпигенетической активностью.
Тремя основными эпигенетическими механизмами считаются метилирование ДНК, модификации гистонов хроматина и экспрессия некодирующих микроРНК.
ДНК-метилирование происходит под действием фермента ДНК-метилтрансферазы (точнее, семейства данных ферментов) по цитозиновому остатку в строго определенных участках гена - так называемых динуклеотидных CpG-островках, значительная часть которых сосредоточена
в его регуляторной промоторной области. Именно в зоне промотора гена происходят связывание транскрипционных комплексов и инициация процесса считывания генетической информации. Установлено, что от 40 до 60% генов млекопитающих в составе своих промоторов содержат участки, обогащенные СpG-островками, которые в норме находятся в низкометилированном состоянии и обусловливают активную генную экспрессию [3]. Промоторное метилирование гена приводит к его функциональной блокаде - «эпигенетическому умолканию». При канцерогенезе в результате промоторного метилирования генов, подавляющих процессы патологического клеточного роста и опухолевой прогрессии, наблюдается ингибирование продукции кодируемых ими белков и, как следствие, снижается общий уровень противоопухолевой защиты организма.
В настоящее время диагностическая и прогностическая значимость теста на определение статуса ДНК-метилирования генов-маркеров при развитии раковых и предраковых заболеваний считается общепризнанной. Для некоторых патологий, например для обусловленных вирусом папилломы человека (ВПЧ) неопластических процессов шейки матки, такие коммерческие тест-системы уже выходят на фармацевтический рынок и рассматриваются некоторыми авторами как более информативные, чем существующие тесты на ВПЧ-генотипирование, и эффективно дополняющие стандартные цитологический и иммуногисто-химический диагностические методы [4]. Необходимость разработки и активного внедрения в клиническую практику новых современных методов комплексной диагностики ВПЧ-ассоциированных заболеваний в ряде случаев диктуется недостаточной чувствительностью и специфичностью стандартных диагностических методов, неоднозначностью получаемых при этом результатов, а также необходимостью смещения приоритетов в область профилактики предраковых и раковых заболеваний шейки матки и обнаружения их на как можно более ранних стадиях развития.
К числу наиболее перспективных генов-маркеров, с точки зрения диагностической и прогностической зна-
чимости статуса их промоторного метилирования при канцерогенезе, относится ген, кодирующий фактор WIF-1 (Wnt Inhibitory Factor-1). WIF-1 является ключевым ин-гибиторным белком сигнального Wnt-каскада, названным в соответствии с инициирующими его секреторными Wnt (штд1е$$^уре)-белками. Wnt-белки составляют обширное семейство и участвуют в регуляции многих физиологических и патологических процессов [5]. Wnt-каскад регулирует процессы клеточной пролиферации, дифференцировки, выживаемости и миграции, которые являются основополагающими в фазе эмбрионального развития, а также при поддержании тканевого гомеостаза во взрослом организме. При патологии Wnt-каскад играет ключевую роль в реализации пролиферативного потенциала и канцерогенной активности опухолевых стволовых, или опухоль-инициирующих, клеток [6]. Согласно современным представлениям, активация минорной популяции туморогенных опухолевых стволовых клеток (ОСК), устойчивых к стандартной химио-и радиотерапии, является главной причиной образования опухолевых рецидивов и метастазов, а также развития опухолевой резистентности [7].
Ключевым эффекторным компонентом Wnt-зависимой сигнальной системы является белок р-катенин, первоначально идентифицированный как регулятор активности белков адгезии - кадгеринов. В норме, в отсутствие Wnt-сигналов, р-катенин не активен благодаря ингибирующему действию мультимерного комплекса, в состав которого, кроме него самого, входят два фермента [киназа-3р гли-когенсинтазы (GSK3P) и казеинкиназа 1а (CKla)], опу-холь-супрессорный белок АРС (adenomatous polyposis coLi) и проапоптотический белок аксин [6]. Связывание Wnt-лигандов с рецепторами двух типов [Frizzled и LRP (Low-density lipoprotein-related receptor protein)] приводит к ингибированию киназ GSK3P и СК1а и разрушению белкового комплекса p-катенин-APC-аксин-GSK3p-CКlа. В результате нефосфорилированный р-катенин транслоцируется
в ядро, где связывается с факторами (Т^Де^ и кофакторами (СВР, р300, ТШК, Вс19, Pygopus) транскрипции, в результате чего индуцируется экспрессия целевых генов (с-тус, ци-клина D1, теломеразы, сурвивина), опосредующих процессы пролиферации, дифференцировки и метастазирования [8, 9]. Ингибирование Wnt-каскада и, как следствие, низкий уровень р-катенина в клетке обеспечиваются за счет экспрессии и секреции двух видов антагонистов Wnt-каскада: белков, связывающих Wnt-лиганды, и белков, связывающих Wnt-рецепторы. Главным ингибиторным белком первой группы является фактор WIF-1 (рис. 1).
Ключевая роль аберрантного Wnt-каскада в канцерогенезе показана для злокачественных опухолей различного происхождения. Поэтому компоненты данного сигнального каскада рассматриваются как новые перспективные лекарственные мишени в таргетной противоопухолевой терапии [10].
В последнее время в литературе стали появляться данные, свидетельствующие о важности данного сигнального каскада, а также регулируемых им стволовых клеток и их потомков -прогениторных клеток - для нормального функционирования эндо- и миометрия в ходе менструального цикла, при морфогенезе, а также в патогенезе пролиферативных гинекологических заболеваний: лейомиомы матки, эндометриоза, аденомиоза и гиперплазии эндометрия [11-13]. Установлено, что в пролиферативной фазе менструального цикла эстрадиол стимулирует Wnt/p-катенин-сигнальный каскад, в то время как в секреторной фазе прогестерон его ингибирует. При усиленном пролиферативном эстрогенном сигнале, не уравновешенном действием прогестерона, конститутивная активация Wnt/p-катенин-сигнального каскада вызывает гиперплазию эндометрия, которая при определенных условиях может привести к развитию рака эндометрия [14]. Есть данные, что в зрелых клетках миометрия, а также в клетках миоматозного узла Wnt/p-катенин-каскад выполняет роль паракринного регулятора, который позволяет им в ответ на действие эстро-
Рис. 1. Wnt-каскад в опухолевой клетке
Рис. 2. Промоторное метилирование/деметилирование гена как механизм функциональной блокады и реактивации фактора WIF-1 - эндогенного ингибитора Wnt-каскада
Ген WIF-1 деметилирован и активен, синтез белка WIF-1
ф^Т)
Нормальный гомеостаз
WNT-каскад заблокирован
Wnt
Здоровая ткань
Ген WIF-1 метилирован , ch и неактивен, нет синтеза ^ 3 белка WIF-1
WNT-каскад активен
Wnt
Гиперпролиферация, канцерогенез
JjoToL
ПРОМИСАН®, ЭПИГАЛЛАТ®
Ген WIF-1 деметилирован и активен, синтез белка WIF-1
WNT-каскад заблокирован
Wnt
Стабилизация/регрессия 1 патологического пролиферативного процесса
О О
А
Б
В
гена и прогестерона посылать сигналы расположенным поблизости стволовым клеткам и, таким образом, стимулировать рост миомы матки [15].
Известно, что в опухолевых клетках при разных видах рака фактор WIF-1 находится в функционально неактивном состоянии. И, напротив, восстановление экспрессии WIF-1 приводит к повышению опухолевой супрессии, ин-гибированию пролиферации, усилению апоптоза, уменьшению миграционной активности, снижению инвазивного и метастатического потенциала опухолевых клеток, обращению процесса эпителиально-мезенхимального перехода и, в целом, к снижению уровня клеточной стволовости и уменьшению количества туморогенных ОСК [16-18]. Основным механизмом инактивации фактора WIF-1 является промоторное метилирование и, как следствие, эпигенетическое выключение кодирующего его гена, происходящее на ранних этапах онкогенеза (рис. 2А, Б) [19-22]. Появляется все больше данных, свидетельствующих о том, что статус метилирования гена, кодирующего фактор WIF-1, может рассматриваться как достоверный диагностический и прогностический клинический маркер в процессе комплексного лечения онкозаболеваний [18, 23, 24].
В двух своих исследованиях мы подтвердили, что статус статуса метилирования гена Ш¥-1 может рассматриваться как потенциальный диагностический и прогностический клинический маркер в комплексном лечении плоскоклеточных интраэпителиальных поражений шейки матки, а также лейомиомы матки - пролиферативных заболеваний женской половой системы, широко распространенных в популяции женщин репродуктивного возраста.
В первое исследование были включены 62 пациентки в возрасте от 18 до 55 лет, обратившиеся в ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушер-
ства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России c февраля по август 2016 г. [25]. Всем пациенткам при первичном обследовании проводили количественное и качественное тестирование на ВПЧ, гистологическое исследование биоптата шейки матки, расширенную кольпоскопию, а также жидкостную цитологию шейки матки. Уровень промоторного метилирования гена WIF-1 в эпителиальных клетках шейки матки в 62 образцах, взятых из церви-кального канала с помощью зонда «Cervix Brush», определяли методом бисульфитного секвенирования. ВПЧ-тестирование проводили методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, позволяющим провести генотипирование и количественное определение 21 типа ВПЧ (HPV КВАНТ-21).
В соответствии с поставленным диагнозом ВПЧ-забо-левания, согласно системе Bethesda (Terminology Bethesda System, TBS, 2014), были сформированы три группы пациенток: 1-я группа - пациентки с верифицированным диагнозом LSIL (n=19), 2-я группа - пациентки с HSIL (n=18). 3-ю (контрольную) группу составили 25 здоровых женщин, у которых по данным цитологического исследования атипические клетки не выявлены (NILM), тест на ВПЧ отрицательный и при проведении расширенной кольпоскопии изменений шейки матки не обнаружено. Окончательную верификацию диагноза SIL проводили на основании гистологического исследования.
В итоге было установлено, что в нормальном церви-кальном эпителии средний уровень метилирования промо-торной области гена WIF-1 составляет 2,3±5,4%. У женщин с диагнозами LSIL и HSIL наблюдалось статистически значимое по сравнению с нормой (р<0,0001) аномальное гиперметилирование промоторных участков гена WIF-1 со средней частотой 29,2+17,2 и 54,8+18,7% соответственно. Полученные нами данные свидетельствуют о том, что уро-
вень метилирования промоторного участка гена WIF-1 в эпителии шейки матки достоверно коррелирует со стадией ВПЧ-ассоциированных заболеваний шейки матки и прогрессией цервикальных дисплазий. Этот вывод полностью согласуются с данными других авторов [20, 26].
Цель второго исследования состояла в изучении патогенетической роли промоторного метилирования гена WIF-1, а также генов эстрогенового рецептора ESR1a и прогесте-ронового рецептора PgR-B у пациенток с миомой матки [27]. Уровень метилирования определяли методом би-сульфитного секвенирования в образцах биоптатов мио-матозного узла (МУ), полученных в ходе консервативной ми-омэктомии или экстирпации матки у 30 пациенток в возрасте от 35 до 52 лет (средний возраст - 43 года). В качестве контроля служили образцы биоптатов нормального миометрия, взятые у тех же пациенток.
В результате проведенного исследования в биоптатах МУ выявлено статистически значимое по сравнению с неизмененным миометрием гипометилирование промоторной области гена эстрогенового рецептора ESR1a у 90,0% пациенток (р<0,05) и гена прогестеронового рецептора PgR-B у 93,3% пациенток (р<0,05). В то же время в 73,3% биоптатах МУ было выявлено статистически значимое промоторное гиперметилирование гена WIF-1 (p<0,05). В контрольной группе (биоптаты нормального миометрия) ни в одном случае не наблюдалось метилирования гена эстрогенового рецептора ESR1a, гена прогестеронового рецептора PgR-B и гена фактора WIF-1.
Полученные нами данные о статусе промоторного метилирования генов рецепторов женских половых гормонов при миоме матки согласуются с немногочисленными данными литературы [28, 29] и свидетельствуют о том, что статус метилирования промоторной области генов эстрогенового и прогестеронового рецепторов, по всей вероятности, малозначим в патогенезе миомы матки. В то же время в отличие от генов половых гормонов промоторное метилирование гена WIF-1 и, как следствие, подавление экспрессии кодируемого им белка - ингибитора пролиферативного и потенциально про-канцерогенного Wnt-каскада, может играть ключевую роль в инициации и поддержания роста миоматозной опухоли. Однако для подтверждения данного вывода требуются дальнейшие исследования.
Необходимо сказать, что в последнее время стремительно развивается новое направление таргетной терапии злокачественных опухолей, основанное на применении фармакологических агентов, обладающих эпигенетической противоопухолевой активностью, как в виде монотерапии, так и в составе комплексного лечения. В 2000-х гг. впервые два эпигенетических препарата: Вайдаза® (активное вещество - 5-аза-цитидин) и родственный ему Дакоген® (активное вещество - 5-аза-2'-дезоксицитидин, или деци-табин), - были официально зарегистрированы и разрешены к клиническому применению американским Управлением по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных препаратов (FDA). Данные препараты являются ингибиторами ДНК-метилирования и предназначены для лечения больных с миелодиспластическим синдромом. Однако наряду с доказанной терапевтической активностью они продемонстрировали и значительную токсичность, которая
становилась частой причиной возникающих при их использовании серьезных осложнений и отрицательных побочных эффектов. Поэтому основными требованиями к эпигенетическим препаратам нового поколения, кроме их высокой эффективности и селективности, являются максимально сниженная токсичность и минимизация возникающих при их применении побочных эффектов. Еще одной важной задачей является получение новых эпигенетических препаратов в удобной для практического использования таблетированной форме, поскольку оба вышеуказанных лицензированных препарата предназначены для внутривенного введения.
В связи с этим все большее внимание и интерес исследователей привлекают вещества природного происхождения, обладающие опухолеспецифической эпигенетической активностью. Среди нетоксичных веществ с эпигенетической активностью в настоящее время самыми перспективными являются флавоноид эпигаллокатехин-3-галлат (EGCG), а также индолы - индол-3-карбинол (I3C) и его физиологический метаболит - 3,3'-дииндолилметан (DIM). В многочисленных исследованиях достоверно установлено, что данные соединения, известные как вещества с доказанной мультитаргетной противооопухолевой активностью, будучи абсолютно безопасными в терапевтических дозах, обладают выраженной способностью ингибировать ферменты ДНК-метилтрансферазу и гистондеацетилазу, а также подавлять экспрессию проканцерогенных микроРНК в опухолевых клетках различного происхождения [30-39].
Как ДНК-деметилирующий агент EGCG по эффективности ставится в один ряд с активным компонентом лицензированного эпигенетического препарата Дакоген® - 5-аза-2'-дезоксицитидином [40], а по таким параметрам, как специфичность и безопасность, даже превосходит последний [30, 39, 41, 42].
В 2009 г. Gao и соавт. было установлено, что EGCG эффективно деметилирует и реактивирует экспрессию эпигенетически «молчащего» гена WIF-1 [43].
I3C, DIM и EGCG являются активными компонентами препаратов Промисан®, Индинол® и Эпигаллат® («МираксБио-Фарма», г. Москва). Результаты клинических исследований, проведенных в российских медицинских центрах, показали, что применение данных фармакологических агентов индивидуально, а также в составе комплексного лечения миомы матки, аденомиоза, гиперпластических процессов эндометрия и цервикальных дисплазий приводит к существенному снижению уровня метилирования и, как следствие, к функциональной реактивации генов противоопухолевой защиты. Данный эффект сопровождается улучшением результатов лечения и резким снижением числа рецидивов заболевания, а также оказывает выраженное онкопрофилактическое действие [44-50].
Таким образом, применение инновационных препаратов с ДНК-деметилирующей эпигенетической активностью, восстанавливающих функции гена WIF-1, а также функции других генов опухолевой супрессии, можно рассматривать как новый перспективный подход при проведении патогенетической терапии пролиферативных заболеваний женской репродуктивной системы в составе их комплексного лечения, а также эффективной химиопрофилактики репродуктивных раков (рис. 2В).
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Киселев Всеволод Иванович - член-корреспондент РАН, доктор биологических наук, профессор, заместитель директора Института онкогинекологии и маммологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва E-mail: [email protected]
Муйжнек Екатерина Леонидовна - кандидат биологических наук, директор по науке АО «МираксБиоФарма», Москва E-mail: [email protected]
Ашрафян Лев Андреевич - академик РАН, доктор медицинских наук, профессор, заместитель директора ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, директор Института онкогинекологии и маммологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва E-mail: [email protected]
Сухих Геннадий Тихонович - академик РАН, доктор медицинских наук, профессор, директор ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В. И. Кулакова» Минздрава России, Москва E-mail: [email protected]
ЛИТЕРАТУРА
1. EsteLLer M. Epigenetics in cancer // N. Engl. J. Med. 2008. Vol. 358, N 11. P. 1148-1159.
2. Issa J.-P. Cancer prevention: epigenetics steps up to the pLate // Cancer Prev. Res. 2008. VoL. 1, N 4. P. 219-222.
3. HaLuskova J. Epigenetic studies in human diseases // FoLia BioL. (Praha). 2010. VoL. 56. P. 83-96.
4. Lorincz A.T. Virtues and weaknesses of DNA methyLation as a test for cervicaL cancer prevention // Acta CytoL. 2016. VoL. 60. P. 501-512.
5. Hsieh J.C., Kodjabachian L., Rebbert M.L., Rattner A. et aL. A new secreted protein that binds to Wnt proteins and inhibits their activities // Nature. 1999. VoL. 398. P. 431-436.
6. Curtin J.C., Lorenzi M.V. Drug discovery approaches to target Wnt signaLing in cancer stem ceLLs // Oncotarget. 2010. VoL. 1, N 7. P. 552-566.
7. Wicha M.S., Liu S., Dontu G. Cancer stem ceLLs: an oLd idea -a paradigm shift // Cancer Res. 2006. VoL. 66, N 4. P. 1883-1890.
8. Davidson G., Wu W., Shen J., BiLic J. et aL. Casein kinase 1 gamma coupLes Wnt receptor activation to cytopLasmic signaL transduction // Nature. 2005. VoL. 438. P. 867-872.
9. BiLic J., Huang Y.L., Davidson G., Zimmermann T. et aL. Wnt induces LRP6 signaLosomes and promotes disheveLLed-dependent LRP6 phosphoryLation // Science. 2007. VoL. 316. P. 1619-1622.
10. Anastas J.N., Moon R.T. WNT signaLLing pathways as therapeutic targets in cancer // Nat. Rev. Cancer. 2003. VoL. 13, N 1. P. 11-26.
11. Mangioni S., Vigano P., Lattuada D., Abbiati A. et aL. Overexpression of the Wnt5b gene in Leiomyoma ceLLs: impLications for a roLe of the Wnt signaLing pathway in the uterine benign tumor // J. CLin. EndocrinoL. Metab. 2005. VoL. 90. P. 5349-5355.
12. Maruyama T., Masuda H., Ono M., Kajitani T. et aL. Human uterine stem/progenitor ceLLs: possibLe roLe in uterine physioLogy and pathoLogy // Reproduction. 2010. VoL. 140, N 1. P. 11-22.
13. Kiewisz J., Wacniewski T., Kmiec Z. Participation of WNT and b-catenin in physioLogicaL and pathoLogicaL endometriaL changes: association with angiogenesis // Biomed. Res. Int. 2015. ArticLe ID 854056.
14. Wang Y., van der Zee M., Fodde R., BLok L.J. Wnt/p-catenin and sex hormone signaLing in endometriaL homeostasis and cancer // Oncotarget. 2010. VoL. 1, N 7. P. 674-684.
15. Ono M., Yin P., Navarro A., Moravek M.B. et aL. Paracrine activation of WNT/p-catenin pathway in uterine Leiomyoma stem ceLLs
promotes tumor growth // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2013. Vol. 110, N 42. P. 17053-17058.
16. Yee D.S., Tang Y., Li X., Liu Z. et al. The Wnt inhibitory factor 1 restoration in prostate cancer cells was associated with reduced tumor growth, decreased capacity of cell migration and invasion and a reversal of epithelial to mesenchymal transition // Mol. Cancer. 2010. Vol. 9. P. 162.
17. Ramachandran I., Thavathiru E., Ramalingam S., Natarajan G. et al. Wnt inhibitory factor 1 induces apoptosis and inhibits cervical cancer growth, invasion and angiogenesis in vivo // Oncogene. 2012. Vol. 31, N 22. P. 2725-2737.
18. Ramachandran I., Ganapathy V., Gillies E., Fonseca I. et al. Wnt inhibitory factor 1 suppresses cancer stemness and induces cellular senescence // Cell Death Dis. 2014. Vol. 5. Article ID e1246.
19. Ai L., Tao Q., Zhong S., Fields C.R. et al. Inactivation of Wnt inhibitory factor-1 (WIF1) expression by epigenetic silencing is a common event in breast cancer // Carcinogenesis. 2006. Vol. 27, N 7. P. 1341-1348.
20. Delmas A.L., Riggs B.M., Pardo C.E., Dyer L.M. et al. WIF1 is a frequent target for epigenetic silencing in squamous cell carcinoma of the cervix // Carcinogenesis. 2011. Vol. 32, N 11. P. 1625-1633.
21. Chmelarova M., Dvorakova E., Spacek J., Laco J. et al. Promoter methylation of GATA4, WIF1, NTRK1 and other selected tumour suppressor genes in ovarian cancer // Folia Biol. (Praha). 2013. Vol. 59, N 2. P. 87-92.
22. Zheng Y., Li X., Jiang Y., Xu Y. et al. Promoter hypermethylation of Wnt inhibitory factor-1 in patients with lung cancer: A systematic metaanalysis // Medicine (Baltimore). 2016. Vol. 95, N 49. Article ID e5433.
23. Urakami S., Shiina H., Enokida H., Hirata H. et al. Wnt antagonist family genes as biomarkers for diagnosis, staging, and prognosis of renal cell carcinoma using tumor and serum DNA // Clin. Cancer Res. 2006. Vol. 12, N 23. P. 6989-6997.
24. Amiot A., Mansour H., Baumgaertner I., Delchier J.C. et al.; CRC Group of Val De Marne. The detection of the methylated Wif-1 gene is more accurate than a fecal occult blood test for colorectal cancer screening // PLoS One. 2014. Vol. 9, N 7. Article ID e99233.
25. Cухих Г.Т., Ашрафян Л.А., Байрамова Г.Р., Бабкина И.О. и др. Метилирование гена WIF-1 при цервикальных плоскоклеточных интраэ-пителиальных поражениях // Акуш. и гин. 2017. № 5. С. 114-123.
26. Van Der Meide W.F., Snellenberg S., Meijer C.J., Baalbergen A. et al. Promoter methylation analysis of WNT/ß-catenin signaling pathway
regulators to detect adenocarcinoma or its precursor lesion of the cervix // Gynecol. Oncol. 2011. Vol. 123, N 1. P. 116-122.
27. Киселев В.И., Радзинский В.Е., Шалаев О.Н., Есенеева Ф.М. и др. Особенности ДНК-метилирования при миоме матки // Молекул. мед. 2017. Т. 15, № 3. С. 45-50.
28. Hori M., Iwasaki M., Shimazaki J., Inagawa S. et al. Assessment of hypermethylated DNA in two promoter regions of the estrogen receptor alpha gene in human endometrial diseases // Gynecol. Oncol. 2000. Vol. 76, N 1. P. 89-96.
29. Asada H., Yamagata Y., Taketani T., Matsuoka A. et al. Potential link between estrogen receptor-alpha gene hypomethylation and uterine fibroid formation // Mol. Hum. Reprod. 2008. Vol. 14, N 9. P. 539545.
30. Lee W.J., Shim J.-Y., Zhu B.T. Mechanisms for the inhibition of DNA methyltransferases by tea catechins and bioflavonoids // Mol. Pharmacol. 2005. Vol. 68, N 4. P. 1018-1030.
31. Haefele A., Word B., Yongmei X., Hammons G.J. et al. Indole-3-carbinol (I3C) modulates expression of DNA methyltransferases 1, 3a, and 3b in pancreatic cancer cells: Effects of gender and a novel (C^T) polymorphism in the promoter region of DNMT 3b // Int. J. Cancer Prev. 2007. Vol. 2, N 4. P. 245-255.
32. Fang M., Chen D., Yang C. Dietary polyphenols may affect DNA methylation // J. Nutr. 2007. Vol. 137, N 1. P. 223S-228S.
33. Lyn-Cook B.D., Mohammed S.I., Davis C., Word B. et al. Gender differences in gemcitabine (Gemzar) efficacy in cancer cells: effect of indole-3-carbinol // Anticancer Res. 2010. Vol. 30, N 12. P. 4907-4913.
34. Li Y., Tollefsbol T.O. Impact on DNA methylation in cancer prevention and therapy by bioactive dietary components // Curr. Med. Chem. 2010. Vol. 17, N 20. P. 2141-2151.
35. Li Y., Kong D., Wang Z., Sarkar F.H. Regulation of microRNAs by natural agents: an emerging field in chemoprevention and chemotherapy research // Pharm. Res. 2010. Vol. 27, N 6. P. 1027-1041.
36. Beaver L.M., Yu T.W., Sokolowski E.I., Williams D.E. et al. 3,3'-Diindo-lylmethane, but not indole-3-carbinol, inhibits histone deacetylase activity in prostate cancer cells // Toxicol. Appl. Pharmacol. 2012. Vol. 263, N 3. P. 345-351.
37. Wu T.Y., Khor T.O., Su Z.Y., Saw C.L. et al. Epigenetic modifications of Nrf2 by 3,3'-diindolylmethane in vitro in TRAMP C1 cell line and in vivo TRAMP prostate tumors // AAPS J. 2013. Vol. 15, N 3. P. 864-874.
38. Mirza S., Sharma G., Parshad R., Gupta S.D. et al. Expression of DNA methyltransferases in breast cancer patients and to analyze the effect of natural compounds on DNA methyltransferases and associated proteins // J. Breast Cancer. 2013. Vol. 16, N 1. P. 23-31.
REFERENCES
1. Esteller M. Epigenetics in cancer. N Engl J Med. 2008; 358 (11): 1148-59.
2. Issa J.-P. Cancer prevention: epigenetics steps up to the plate. Cancer Prev Res. 2008; 1 (4): 219-22.
3. Haluskova J. Epigenetic studies in human diseases. Folia Biol. (Praha). 2010; 56: 83-96.
4. Lorincz A.T. Virtues and weaknesses of DNA methylation as a test for cervical cancer prevention. Acta Cytol. 2016; 60: 501-12.
5. Hsieh J.C., Kodjabachian L., Rebbert M.L., Rattner A., et al. A new secreted protein that binds to Wnt proteins and inhibits their activities. Nature. 1999; 398: 431-6.
39. Khan M.A., Hussain A., Sundaram M.K., Alalami U. et al. (-)-Epigal-locatechin-3-gallate reverses the expression of various tumor-suppressor genes by inhibiting DNA methyltransferases and histone deacetylases in human cervical cancer cells // Oncol. Rep. 2015. Vol. 33, N 4. P. 19761984.
40. Falahi F., van Kruchten M., Martinet N., Hospers G.A. et al. Current and upcoming approaches to exploit the reversibility of epigenetic mutations in breast cancer // Breast Cancer Res. 2014. Vol. 16, N 4. P. 412.
41. Juttermann R., Li E., Jaenisch R. Toxicity of 5-aza-2'-deoxycytidine to mammalian cells is mediated primarily by covalent trapping of DNA methyltransferase rather than DNA demethylation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. Vol. 91, N 25. P. 11797-11801.
42. Laird P.W. Cancer epigenetics // Hum. Mol. Genet. 2005. Vol. 14. P. R65-R76.
43. Gao Z., Xu Z., Hung M.-S., Lin Y.-C. et al. Promoter demethylation of WIF-1 by epigallocatechin-3-gallate in lung cancer cells // Anticancer Res. 2009. Vol. 29, N 6. P. 2025-2030.
44. Сидорова И.С., Унанян А.Л., Коган Е.А., Леваков С.А. Новые аспекты патогенеза и патогенетически обоснованной терапии адено-миоза // Эффективная фармакотерапия. Акушерство и гинекология. 2006. № 9. С. 9-14.
45. Сидорова И.С., Унанян А.Л., Коган Е.А., Игнатьева Н. и др. Миома матки в сочетании с аденомиозом. Пути фармакологической коррекции // Врач. 2007. № 3. С. 21-23.
46. Доброхотова Ю.Э., Бенедиктова М.Г., Задонская Ю.Н., Литвинова Н.А. Применение комбинации препаратов Индинол и Эпигаллат у женщин с гиперпластическими процессами эндометрия // Рос. вестн. акуш.-гин. 2008. Т. 8, № 4. С. 84-89.
47. Станоевич И., Ищенко А., Кудрина Е., Коган Е. Эффективность гормонотерапии и таргетных медикаментозных средств при гиперплазии эндометрия // Врач. 2008. № 7. С. 14-17.
48. Сидорова И.С., Унанян А.Л., Киселев В.И., Залетаев Д.В. и др. Прогнозирование и профилактика онкотрансформации шейки матки с учетом метилирования генов-супрессоров опухолевого роста // Эффективная фармакотерапия. Акушерство и гинекология. 2011. № 1. С. 58-61.
49. Ашрафян Л.А., Киселев В.И., Алешикова О.И., Пономарева Ю.Н. и др. Результаты консервативной терапии пациенток с цервикальной неоплазией I-II степени (CIN I-II) // Акуш. и гин. 2015. № 12. С. 103109.
50. Киселев В.И., Пальцев М.А. Регуляция активности генов и новые лекарственные средства // Вестн. РАН. 2016. Т. 86, № 6. С. 512-518.
6. Curtin J.C., Lorenzi M.V. Drug discovery approaches to target Wnt signaling in cancer stem cells. Oncotarget. 2010; 1 (7): 552-66.
7. Wicha M.S., Liu S., Dontu G. Cancer stem cells: an old idea -a paradigm shift. Cancer Res. 2006; 66 (4): 1883-90.
8. Davidson G., Wu W., Shen J., Bilic J., et al. Casein kinase 1 gamma couples Wnt receptor activation to cytoplasmic signal transduction. Nature. 2005; 438: 867-72.
9. Bilic J., Huang Y.L., Davidson G., Zimmermann T., et al. Wnt induces LRP6 signalosomes and promotes dishevelled-dependent LRP6 phosphorylation. Science. 2007; 316: 1619-22.
10. Anastas J.N., Moon R.T. WNT signalling pathways as therapeutic targets in cancer. Nat Rev Cancer. 2003; 13 (1): 11-26.
11. Mangioni S., Vigano P., Lattuada D., Abbiati A., et al. Overexpression of the Wnt5b gene in leiomyoma cells: implications for a role of the Wnt signaling pathway in the uterine benign tumor. J Clin Endocrinol Metab. 2005; 90: 5349-55.
12. Maruyama T., Masuda H., Ono M., Kajitani T., et al. Human uterine stem/progenitor cells: possible role in uterine physiology and pathology. Reproduction. 2010; 140 (1): 11-22.
13. Kiewisz J., Wacniewski T., Kmiec Z. Participation of WNT and b-catenin in physiological and pathological endometrial changes: association with angiogenesis. Biomed. Res Int. 2015; Article ID 854056.
14. Wang Y., van der Zee M., Fodde R., Blok L.J. Wnt/ß-catenin and sex hormone signaling in endometrial homeostasis and cancer. Oncotarget. 2010; 1 (7): 674-84.
15. Ono M., Yin P., Navarro A., Moravek M.B., et al. Paracrine activation of WNT/ß-catenin pathway in uterine leiomyoma stem cells promotes tumor growth. Proc Natl Acad Sci USA. 2013; 110 (42): P. 17053-8.
16. Yee D.S., Tang Y., Li X., Liu Z., et al. The Wnt inhibitory factor 1 restoration in prostate cancer cells was associated with reduced tumor growth, decreased capacity of cell migration and invasion and a reversal of epithelial to mesenchymal transition. Mol Cancer. 2010; 9: 162.
17. Ramachandran I., Thavathiru E., Ramalingam S., Natarajan G., et al. Wnt inhibitory factor 1 induces apoptosis and inhibits cervical cancer growth, invasion and angiogenesis in vivo. Oncogene. 2012; 31 (22): 2725-37.
18. Ramachandran I., Ganapathy V., Gillies E., Fonseca I., et al. Wnt inhibitory factor 1 suppresses cancer stemness and induces cellular senescence. Cell Death Dis. 2014; 5. Article ID e1246.
19. Ai L., Tao Q., Zhong S., Fields C.R., et al. Inactivation of Wnt inhibitory factor-1 (WIF1) expression by epigenetic silencing is a common event in breast cancer. Carcinogenesis. 2006; 27 (7): 1341-8.
20. Delmas A.L., Riggs B.M., Pardo C.E., Dyer L.M., et al. WIF1 is a frequent target for epigenetic silencing in squamous cell carcinoma of the cervix. Carcinogenesis. 2011; 32 (11): 1625-33.
21. Chmelarova M., Dvorakova E., Spacek J., Laco J., et al. Promoter methylation of GATA4, WIF1, NTRK1 and other selected tumour suppressor genes in ovarian cancer. Folia Biol. (Praha). 2013; 59 (2): 87-92.
22. Zheng Y., Li X., Jiang Y., Xu Y., et al. Promoter hypermethylation of Wnt inhibitory factor-1 in patients with lung cancer: A systematic meta-analysis. Medicine (Baltimore). 2016; 95 (49). Article ID e5433.
23. Urakami S., Shiina H., Enokida H., Hirata H., et al. Wnt antagonist family genes as biomarkers for diagnosis, staging, and prognosis of renal cell carcinoma using tumor and serum DNA.Clin Cancer Res. 2006; 12 (23): 6989-97.
24. Amiot A., Mansour H., Baumgaertner I., Delchier J.C., et al.; CRC Group of Val De Marne. The detection of the methylated Wif-1 gene is more accurate than a fecal occult blood test for colorectal cancer screening. PLoS One. 2014; 9 (7). Article ID e99233.
25. Sukhikh G.T., Ashrafyan L.A., Bayramova G.R., Babkina I.O., et al. WIF-1 gene methylation in cervical squamous intraepithelial lesions Akusherstvo i ginekologiya [Obstetrics and Gynecology]. 2017; (5): 114-23. (in Russian)
26. Van Der Meide W.F., Snellenberg S., Meijer C.J., Baalbergen A., et al. Promoter methylation analysis of WNT/ß-catenin signaling pathway regulators to detect adenocarcinoma or its precursor lesion of the cervix. Gynecol Oncol. 2011; 123 (1): 116-22.
27. Kiselev V.I., Radzinskiy V.E., Shalaev O.N., Eseneeva F.M., et al. The peculiarities of DNA-methylation in uterine myoma. Molekulyarnaya meditsina [Molecular Medicine]. 2017; 15 (3): 45-50. (in Russian)
28. Hori M., Iwasaki M., Shimazaki J., Inagawa S., et al. Assessment of hypermethylated DNA in two promoter regions of the estrogen receptor alpha gene in human endometrial diseases. Gynecol Oncol. 2000; 76 (1): 89-96.
29. Asada H., Yamagata Y., Taketani T., Matsuoka A., et al. Potential link between estrogen receptor-alpha gene hypomethylation and uterine fibroid formation. Mol Hum Reprod. 2008; 14 (9): 539-45.
30. Lee W.J., Shim J.-Y., Zhu B.T. Mechanisms for the inhibition of DNA methyltransferases by tea catechins and bioflavonoids. Mol Pharmacol. 2005; 68 (4): 1018-30.
31. Haefele A., Word B., Yongmei X., Hammons G.J. et al. Indole-3-carbinol (I3C) modulates expression of DNA methyltransferases 1, 3a, and 3b in pancreatic cancer cells: Effects of gender and a novel (C^T) polymorphism in the promoter region of DNMT 3b. Int J Cancer Prev. 2007; 2 (4): 245-55.
32. Fang M., Chen D., Yang C. Dietary polyphenols may affect DNA methylation. J Nutr 2007; Vol. 137 (1): 223S-8S.
33. Lyn-Cook B.D., Mohammed S.I., Davis C., Word B., et al. Gender differences in gemcitabine (Gemzar) efficacy in cancer cells: effect of indole-3-carbinol. Anticancer Res. 2010; 30 (12): 4907-13.
34. Li Y., Tollefsbol T.O. Impact on DNA methylation in cancer prevention and therapy by bioactive dietary components. Curr Med Chem. 2010; 17 (20): 2141-51.
35. Li Y., Kong D., Wang Z., Sarkar F.H. Regulation of microRNAs by natural agents: an emerging field in chemoprevention and chemotherapy research. Pharm Res. 2010; 27 (6): 1027-41.
36. Beaver L.M., Yu T.W., Sokolowski E.I., Williams D.E., et al. 3,3'-Diindolylmethane, but not indole-3-carbinol, inhibits histone deacetylase activity in prostate cancer cells. Toxicol Appl Pharmacol. 2012; 263 (3): 345-51.
37. Wu T.Y., Khor T.O., Su Z.Y., Saw C.L., et al. Epigenetic modifications of Nrf2 by 3,3'-diindolylmethane in vitro in TRAMP C1 cell line and in vivo TRAMP prostate tumors. AAPS J. 2013; 15 (3): 864-74.
38. Mirza S., Sharma G., Parshad R., Gupta S.D., et al. Expression of DNA methyltransferases in breast cancer patients and to analyze the effect of natural compounds on DNA methyltransferases and associated proteins. J Breast Cancer. 2013; 16 (1): 23-31.
39. Khan M.A., Hussain A., Sundaram M.K., Alalami U., et al. (-)-Epigallocatechin-3-gallate reverses the expression of various tumor-suppressor genes by inhibiting DNA methyltransferases and histone deacetylases in human cervical cancer cells. Oncol Rep. 2015; 33 (4): 1976-84.
40. Falahi F., van Kruchten M., Martinet N., Hospers G.A., et al. Current and upcoming approaches to exploit the reversibility of epigenetic mutations in breast cancer. Breast Cancer Res. 2014; 16 (4): 412.
41. Juttermann R., Li E., Jaenisch R. Toxicity of 5-aza-2'-deoxycytidine to mammalian cells is mediated primarily by covalent trapping of DNA methyltransferase rather than DNA demethylation. Proc Natl Acad Sci USA. 1994; 91 (25): 11797-801.
42. Laird P.W. Cancer epigenetics. Hum Mol Genet. 2005; 14: R65-
R76.
43. Gao Z., Xu Z., Hung M.-S., Lin Y.-C., et al. Promoter demethylation of WIF-1 by epigallocatechin-3-gallate in lung cancer cells. Anticancer Res. 2009; 29 (6): 2025-30.
44. Sidorova I.S., Unanyan A.L., Kogan E.A., Levakov S.A. New aspects of pathogenesis and pathogenetic-related therapy of adenomyosis. Effektivnaya farmakoterapiya. Akusherstvo i ginekologiya [Effective Pharmacotherapy. Obstetrics and Gynecology]. 2006; (9): 9-14. (in Russian)
45. Sidorova I.S., Unanyan A.L., Kogan E.A., Ignat'eva N., et al. Uterine myoma in conjunction with adenomyosis. Ways of pharmacological correction. Vrach [Doctor]. 2007; (3): 21-3. (in Russian)
46. Dobrohotova Yu.E., Benediktova M.G., Zadonskaya Yu.N., Litvi-nova N.A. The application of combination of medications Indinol and Epigallat in women with hyperplastic processes of endometrium Rossiyskiy vestnik akushera-ginekologa [Russian Messenger of Obstetrician-Gynecologist]. 2008; 8 (4): 84-9. (in Russian)
47. Stanoevich I., Ishchenko A., Kudrina E., Kogan E. The effectiveness of hormone therapy and targeted drugs in treatment
of hyperplasia endometrium. Vrach [Doctor]. 2008; (7): 14-7. (in Russian)
48. Sidorova I.S., Unanyan A.L., Kiselev V.I., Zaletaev D.V. Prediction and prevention of oncology transformation of cervix based on methylation suppressor-gene of tumour growth Effektivnaya farmakoterapiya. Akusherstvo i ginekologiya [Effective Pharmacotherapy. Obstetrics and Gynecology]. 2011; (1): 58-61. (in Russian)
49. Ashrafyan L.A., Kiselev V.I., Aleshikova O.I., Ponomareva Yu.N., et al. The results of conservative therapy of patients with cervical neoplasia of I-II degree (CIN I-II). Akusherstvo i ginekologiya [Obstetrics and Gynecology]. 2015 (12): 103-19. (in Russian)
50. Kiselev V.I., Paltsev M.A. Regulation of gene activity and new drugs.Vestnik Rossiyskoy akademii meditzinskikh nauk [Bulletin of RAMS]. 2016; 86 (6): 512-18. (in Russian)
