Научная статья на тему 'Эпидемиологические аспекты инфекций, обусловленные Pseudomonas aeruginosa в отделении реанимации и интенсивной терапии'

Эпидемиологические аспекты инфекций, обусловленные Pseudomonas aeruginosa в отделении реанимации и интенсивной терапии Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
599
64
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Политравма
Scopus
ВАК
Область наук
Ключевые слова
ВНУТРИБОЛЬНИЧНЫЕ ИНФЕКЦИИ / NOSOCOMIAL INFECTIONS / СИНЕГНОЙНЫЙ БАКТЕРИОФАГ / PSEUDOMONAS AERUGINOSA / ОТДЕЛЕНИЕ РЕАНИМАЦИИ И ИНТЕНСИВНОЙ ТЕРАПИИ / THE RESUSCITATION AND INTENSIVE CARE DEPARTMENT / ПРОФИЛАКТИКА / PREVENTION / PSEUDOMONAS BACTERIOPHAGE

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Егорова О.Н.

Цель: Изучить причины, условия циркуляции и распространенность Pseudomonas aeruginosa в отделении реанимации и интенсивной терапии. Оценить эффективность применения синегнойного бактериофага в комплексе противоэпидемических мероприятий. Материалы и методы: В отделении реанимации и интенсивной терапии проводили проспективное эпидемиологическое наблюдение с ежедневным микробиологическим исследованием основных локусов пациентов и объектов внешней среды. Всего изучено 1314 проб клинического материала от 888 пациентов, 488 смывов объектов больничной среды, идентифицировано 211 штаммов Pseudomonas aeruginosa микробиологическими, серологическими и молекулярно-генетическими методами. Для элиминации Pseudomonas aeruginosa использован синегнойный бактериофаг. Результаты: Выявлена интенсивная циркуляция эпидемического варианта Pseudomonas aeruginosa преимущественно О12 серогруппы, продуцирующего экзоферменты S, U, нейраминидаза, пили IV типа. Основными источниками инфекции являлись пациенты с гнойно-воспалительными процессами и влажные объекты внешней среды стационара, наиболее значимыми факторами передачи руки медицинского персонала и наркозно-дыхательная аппаратура. Наибольшую активность антибактериальных препаратов в отношении Pseudomonas aeruginosa наблюдали у карбапенемов. Показана высокая эффективность синегнойного бактериофага как средства биологической дезинфекции Pseudomonas aeruginosa. Выводы: Применение синегнойного бактериофага в отделении реанимации и интенсивной терапии относится к числу высокоэффективных, экономичных и безопасных мер, позволяющих в короткие сроки элиминировать синегнойную палочку с объектов внешней среды и существенно снизить заболеваемость внутрибольничными инфекциями.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Егорова О.Н.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

EPIDEMIOLOGICAL ASPECTS OF THE INFECTIONS CAUSED BY PSEUDOMONAS AERUGINOSA IN THE RESUSCITATION AND INTENSIVE CARE DEPARTMENT

Purpose: to study the causes, circulation's conditions and prevalence of the Pseudomonas aeruginosa in the resuscitation and intensive care unit; to estimate the effectiveness of the Pseudomonas aeruginosa bacteriophage's use in the antiepidemic measures' complex. Materials and methods: Prospective epidemiological study with daily microbiological analysis of patients' basic loci and objects of the environment was performed in the Resuscitation and Intensive Care Department. 1314 samples of the clinical material taken from 888 patients, 488 swabs of the hospital environment objects were analyzed. 211 strains of the Pseudomonas aeruginosa were identified by microbiological, serological and moleculargenetic methods. Pseudomonas aeruginosa was eliminated using Pseudomonas bacteriophage. Показана высокая эффективность синегнойного бактериофага как средства биологической дезинфекции Pseudomonas aeruginosa. Results: The intensive circulation of the Pseudomonas aeruginosa's epidemic variant was observed, there was predominantly O12 serogroup producing S, U exoenzymes, neuraminidase and type IV pili were found. The main sources of infection were the patients with pyoinflammatory processes and the humid objects of the external medium of the in-patient department. The most significant factors of the transmission of infection were hands of the nursing staff and anesthesia-respiratory apparatus. The carbapenems demonstrated the maximal activity of the antimicrobial drug as for Pseudomonas aeruginosa. There was a high efficiency of the Pseudomonas bacteriophage as a mean of the biological disinfection of the Pseudomonas aeruginosa. Conclusion: The use of Pseudomonas bacteriophage in the department of resuscitation and intensive care is one of the cost-effective and safe measures able to eliminate the Bacillus aeruginosa of the objects in the environment and to decrease the nosocomial infections during short period

Текст научной работы на тему «Эпидемиологические аспекты инфекций, обусловленные Pseudomonas aeruginosa в отделении реанимации и интенсивной терапии»

Статья поступила в редакцию 10.06.2011 г.

ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ИНФЕКЦИЙ, ОБУСЛОВЛЕННЫЕ PSEUDOMONAS AERUGINOSA В ОТДЕЛЕНИИ РЕАНИМАЦИИ И ИНТЕНСИВНОЙ ТЕРАПИИ

EPIDEMIOLOGICAL ASPECTS OF THE INFECTIONS CAUSED BY PSEUDOMONAS AERUGINOSA IN THE RESUSCITATION AND INTENSIVE CARE DEPARTMENT

Егорова О.Н. Yegorova O.N.

МУЗ «Городская клиническая больница № 3 City clinical hospital N 3

им. М.А. Подгорбунского», by the name of M.A. Podgorbunsky,

г. Кемерово, Россия Kemerovo, Russia

Цель: Изучить причины, условия циркуляции и распространенность Pseudomonas aeruginosa в отделении реанимации и интенсивной терапии. Оценить эффективность применения синегнойного бактериофага в комплексе противоэпидемических мероприятий.

Материалы и методы: В отделении реанимации и интенсивной терапии проводили проспективное эпидемиологическое наблюдение с ежедневным микробиологическим исследованием основных локусов пациентов и объектов внешней среды. Всего изучено 1314 проб клинического материала от 888 пациентов, 488 смывов объектов больничной среды, идентифицировано 211 штаммов Pseudomonas aeruginosa микробиологическими, серологическими и молекулярно-генетическими методами. Для элиминации Pseudomonas aeruginosa использован синегнойный бактериофаг.

Результаты: Выявлена интенсивная циркуляция эпидемического варианта Pseudomonas aeruginosa преимущественно О12 серогруппы, продуцирующего экзоферменты S, U, нейраминидаза, пили IV типа. Основными источниками инфекции являлись пациенты с гнойно-воспалительными процессами и влажные объекты внешней среды стационара, наиболее значимыми факторами передачи - руки медицинского персонала и нар-козно-дыхательная аппаратура. Наибольшую активность антибактериальных препаратов в отношении Pseudomonas aeruginosa наблюдали у карбапенемов. Показана высокая эффективность синегнойного бактериофага как средства биологической дезинфекции Pseudomonas aeruginosa. Выводы: Применение синегнойного бактериофага в отделении реанимации и интенсивной терапии относится к числу высокоэффективных, экономичных и безопасных мер, позволяющих в короткие сроки элиминировать синегнойную палочку с объектов внешней среды и существенно снизить заболеваемость внутрибольничными инфекциями. Ключевые слова: внутрибольничные инфекции; Pseudomonas aeruginosa; отделение реанимации и интенсивной терапии; профилактика; си-негнойный бактериофаг.

Purpose: to study the causes, circulation's conditions and prevalence of the Pseudomonas aeruginosa in the resuscitation and intensive care unit; to estimate the effectiveness of the Pseudomonas aeruginosa bacteriophage's use in the antiepidemic measures' complex.

Materials and methods: Prospective epidemiological study with daily microbiological analysis of patients' basic loci and objects of the environment was performed in the Resuscitation and Intensive Care Department. 1314 samples of the clinical material taken from 888 patients, 488 swabs of the hospital environment objects were analyzed. 211 strains of the Pseudomonas aeruginosa were identified by microbiological, serological and molecular-genetic methods. Pseudomonas aeruginosa was eliminated using Pseudomonas bacteriophage. Показана высокая эффективность синегнойного бактериофага как средства биологической дезинфекции Pseudomonas aeruginosa.

Results: The intensive circulation of the Pseudomonas aeruginosa's epidemic variant was observed, there was predominantly O12 serogroup producing S, U exoenzymes, neuraminidase and type IV pili were found. The main sources of infection were the patients with pyoinflammatory processes and the humid objects of the external medium of the in-patient department. The most significant factors of the transmission of infection were hands of the nursing staff and anesthesia-respiratory apparatus. The carbapenems demonstrated the maximal activity of the antimicrobial drug as for Pseudomonas aeruginosa. There was a high efficiency of the Pseudomonas bacteriophage as a mean of the biological disinfection of the Pseudomonas aeruginosa. Conclusion: The use of Pseudomonas bacteriophage in the department of resuscitation and intensive care is one of the cost-effective and safe measures able to eliminate the Bacillus aeruginosa of the objects in the environment and to decrease the nosocomial infections during short period. Key words: nosocomial infections; Pseudomonas aeruginosa; the resuscitation and intensive care department; prevention; Pseudomonas bacterio-phage.

Pseudomonas aeruginosa — один из основных возбудителей гнойно-воспалительных процессов в отделении реанимации и интенсивной терапии [1, 2]. Клинически важной особенностью P. aeruginosa является природная устойчивость ко многим антибиотикам, способность к быстрому формированию приобретенной резистентности к

различным классам антимикробных препаратов и дезинфектантам, высокий риск колонизации пациентов и персонала [3]. Помимо этого, важной особенностью Pseudomonas aeruginosa является наличие факторов патогенности, проявление которых влияет на течение и исход заболевания [4]. Наиболее частым осложнением синегнойной инфек-

ции у больных, находящихся в отделении реанимации и интенсивной терапии, является пневмония, связанная с искусственной вентиляцией легких и составляющая более 30 % среди всех инфекционных осложнений [5, 6]. Присоединение синегнойной инфекции к основному заболеванию ухудшает прогноз болезни и является ведущей причи-

■ ■ 4

ПОЛИТРАВМА

ной летальности пациентов, достигающей 75 % [7]. Один из альтернативных методов предупреждения внутрибольничных инфекций, вызванных полирезистентными штаммами Pseudomonas aeruginosa — фагопрофилактика [8].

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В отделении реанимации и интенсивной терапии крупной многопрофильной больницы, оказывающей неотложную помощь пациентам с тяжелыми сочетанными травмами, в течение 244-дневного периода методом микробиологического мониторинга обследованы 888 пациентов. Возрастной диапазон больных — от 18 до 89 лет, из них 372 женщины и 516 мужчин. Средний возраст женщин составил 52,29 ± 2,86 года, мужчин — 47,03 ± 2,72 лет. На искусственной вентиляции легких через эндотрахеальные или трахе-остомические трубки (продолжительность от 48 часов до 35 суток, в среднем 8,0 ± 2,0 суток) находились 522 пациента.

Исследовали микробиологически 1314 проб патологического материала из различных биологических локусов: дыхательных, мочевыво-дящих путей, кровеносного русла, полостей и ран. Параллельно исследовали микрофлору объектов больничной среды — 488 смывов. Этиологическая структура микроорганизмов определялась классическими микробиологическими методами посева на питательные среды с использованием дополнительных микробиологических тестов. Изучали чувствительность Pseudomonas aeruginosa к антимикробным средствам — антибиотикам (методом двукратных серийных разведений), определяли значение минимальных концентраций, подавляющих рост 50 % (MIC50) и 90 % (MIC90) бактерий в исследуемом образце к амикаци-ну, азтреонаму, гентамицину, до-рипенему, имипенему, левофлок-сацину, меропенему, нетилмицину, пиперациллину, пиперациллину/ тазобактаму, полимиксинуВ, це-фепиму, цефоперазону, цефопера-зону/сульбактаму, цефтазидиму, ципрофлоксацину, фосфомицину [9].

Внутренний контроль качества проводили параллельным тестированием контрольного штамма Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853. При характеристике чувствительности к антибиотикам использовали общепринятые показатели «чувствительные — S», «умеренно-резистентные — I», и «резистентные

— R». Интерпретацию результатов осуществляли в соответствии с рекомендациями CLSI. Параллельно изучали чувствительность Pseudomonas aeruginosa к дезинфектантам: 2 % абсолюциду окси, 6 % перекиси водорода, 0,5 % сульфохлорантину, 0,3 % ультрахлорантину [10].

Определение продукции металло-бета-лактамаз расширенного спектра (МБЛРС) проводили методом «двойных дисков с ЭДТА» [11].

Для исследования действия бактериофага на культуру Pseudomonas aeruginosa использовали бактериофаг синегнойный жидкий (Микроген, Россия) [12]. Сероти-пирование P. aeruginosa проводили методом агглютинации на стекле с использованием набора, состоящего из 4 поливалентных антисывороток к 16 групповым О-антигенам, и с моновалентными антисыворотками. Одновременно с исследуемыми культурами проводили контроль сывороток с 0,9 % физиологическим раствором. Учет результатов

- в течение 1 минуты, визуально над темной поверхностью.

Наличие ДНК Pseudomonas aeru-ginosa во всех исследуемых пробах подтверждали молекулярно-генети-ческим анализом. Выделение ДНК в исследуемом материале выполняли с помощью полимеразной цепной реакции «GenePak DNA PCR test». В работе применяли набор реагентов для обнаружения ДНК возбудителей инфекционных заболеваний. При выделении чистой ДНК использовали «ускоренную подготовку». Параллельно с клиническими образцами исследовали контрольные образцы: заведомо положительную и заведомо отрицательную пробы. Амплификацию выделенной ДНК проводили в ДНК-амплификаторе Терцик. Для детекции ПЦР продукта методом электрофореза использовали ТВЕ — буфер в 1 % агарозном геле при напряженности электрического поля

3 В/см. Результаты учитывали на УФ трансиллюминаторе с соблюдением требований безопасности. Гены факторов патогенности Pseudomonas aeruginosa идентифицировали методом ПЦР по методике Lanotte et al. [13] с использованием праймеров к 3 известным генам факторов патогенности синегной-ной палочки, в отношении которых у клинически значимых вариантов наблюдается наибольшая степень внутривидовой вариабельности.

Кроме того, был осуществлен дизайн олигонуклеотидных прайме-ров, комплементарных фрагменту острова патогенности PAPIl [14], исходя из нуклеотидных последовательностей входящего в его состав гена pilV2 представленных в GeneBank ( AAP84203.1), проведена ПЦР-идентификация данного гена в изучении штаммов синегнойной палочки. Реакционная смесь (25 мкл) содержала 5 мкл 10-кратного ПЦР-буфера (10 mM Tris/HCl, 50 mM KCl, 1,5 mM MgCl2, pH 8,3), по 200 |M каждого нуклеотидтрифос-фата, 12,5 pmol/мкл каждого прай-мера, 1 U Tag-полимеразы и 2 мкл бактериальной ДНК. Детекцию продуктов амплификации (12 мкл) осуществляли электрофоретически в агарозном геле, варьируя концентрацию агарозы от 1 до 1,5 % в зависимости от размера ампликонов.

На начальном этапе статистической обработки материала использовалась программа Microsoft Office Excel 2003 для работы с электронными таблицами (лицензионное соглашение 74017640-0000106-57177). Исследование проводилось на достаточном объеме наблюдений, в работе представлены статистически значимые результаты. Для статистического анализа материала использовался пакет прикладных программ Statis-tica 6.1 (лицензионное соглашение BXXR006B092218FAN11). Сравнение частот проводили, используя критерий Пирсона х2. Критическое значение уровня статистической значимости при проверке нулевых гипотез принималось равным 0,05. В случае превышения достигнутого уровня значимости (р) статистического критерия этой величины принималась нулевая гипотеза. Качественные бинарные признаки

№ 4 [декабрь] 2011

^ 35

представлены в работе в виде относительной частоты (%) и ее 95 % доверительного интервала (95% CI).

Для группировки данных использовали кластерный анализ методом древовидной кластеризации (метод полной связи, Евклидово расстояние).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ Микробиологический мониторинг выявил высокую распространенность штаммов P. aeruginosa в отделении реанимации. Из 1314 отобранных образцов выделены 211 штаммов Pseudomonas aeruginosa, что составило 16,05 ± 1,01 случаев на 100 исследований.

Частота выделения Pseudomonas aeruginosa из различных локусов пациентов представлена в таблице 1.

Наиболее часто Pseudomonas ae-ruginosa обнаруживали в дыхательных путях: бронхолегочном аспирате — 30,73±2,95 и дренажных системах — 24,40 ± 3,81 случаев на 100 исследований. Статистически значимые различия наблюдались между группами дыхательных путей и мочевыделительной системы (p = 0,0000). Следует отметить, что в 14,6 % случаев Pseudomonas aeruginosa встречалась в ассоциациях с другими возбудителями. Из 888 пациентов Pseudomonas aeruginosa обнаружена у 113, частота инфицирования составила 12,73 ± 1,12 на 100 обследованных. Показатель заболеваемости си-негнойной инфекцией у мужчин составил 13,95 ± 1,52 случаев на 100 исследований, у женщин

— 11,02 ± 1,62. Удельный вес Pseudomonas aeruginosa между мужчинами и женщинами статистически значимо не различался (p = 0,19).

Всего в отделении реанимации и интенсивной терапии умерли 326 человек, из них с синегнойной инфекцией — 46 человек. Общая летальность у реанимационных больных за анализируемый период составила 36,71 ± 1,61 случаев на 100 пациентов. Летальность у пациентов с Pseudomonas aeru-ginosa составила 40,70 ± 4,62 на 100 пациентов. Показатели летальности пациентов в отделении реанимации и интенсивной терапии статистически значимо не различались (р = 0,4077). При этом летальность у мужчин составила 38,9 ± 5,74 %, у женщин - 43,9 ± 7,75 % (p = 0,43209). Инфекционный процесс, как правило, развивался на 3-4 сутки с момента госпитализации в отделение реанимации и интенсивной терапии. К 7 суткам 80 % пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии были инфицированы внутрибольничным штаммом Pseudomonas aeruginosa.

Установлена зависимость заболеваемости синегнойной инфекцией от применения искусственной вентиляции легких. Заболеваемость в группе больных, находившихся на аппаратах ИВЛ (всего заболевших 94, умерли 46), составила 18,00 ± 2,52 на 100 пациентов. Показатель заболеваемости синегнойной инфекцией в группе пациентов, которым ИВЛ не проводилась (5,19 ± 1,19; заболели 19, умерли 6) была в 3,5 раза ниже, чем в первой группе (p = 0,00000). Летальность у пациентов, находящихся на ИВЛ,

с присоединившейся синегнойной инфекцией в 1,5 раза больше, чем у пациентов, находившихся на самостоятельном дыхании - 41,7 ± 6,9 % и 31,6 ± 5,1 %, соответственно (p = 0,0003).

Контроль аппаратов искусственной вентиляции легких на микробную обсемененность показал, что из 198 проб в 54-х обнаружена Pseudomonas aeruginosa — 27,27 ± 3,79 на 100 исследований. Следует отметить, что выделенная микрофлора обнаруживалась на клапане выдоха в 2 раза чаще (35,5 %), чем на клапане вдоха (13,0 %), увлажнитель был контаминирован в 11,1 % случаев (р = 0,008). Исследование объектов внешней среды выявило наличие Pseudomonas aeruginosa в 35 смывах из 290 исследованных, что составило 12,06 ± 1,91 на 100 исследований.

Установлено, что чаще всего обсеменялись влажные объекты больничной среды — раковины в палатах (34,0 ± 6,9 %), жидкое мыло (6,8 ± 3,8 %) и руки медицинского персонала (5,3 ± 5,1 %). Длительность циркуляции штаммов Pseudomonas aeruginosa с идентичными характеристиками была равна 244 дням (период наблюдения).

Для предупреждения переноса микрофлоры персоналом необходимо применение спиртосодержащих антисептиков для рук, использование индивидуальных укладок при работе с пациентами, систематическое обучение персонала технологии профилактики внутрибольнич-ного инфицирования.

Результаты исследований анти-биотикочувствительности представлены в таблице 2.

Таблица 1 Частота выделения Pseudomonas aeruginosa из различных локусов пациентов

Точки выделения (локусы пациентов) Всего исследований Всего выделено Pseudomonas aeruginosa Частота на 100 исследований, P ± m [95% ДИ]

Бронхо-легочной аспират 244 75 30,73 ± 2,95 [24,83; 36,63]

Отделяемое дренажей 127 31 24,40 ± 3,81 [16,78; 32,02]

Слизистая оболочка зева 187 35 18,71 ± 2,85 [13,01; 23,41]

Слизистая оболочка носа 227 40 17,62 ± 2,52 [12,58; 22,66]

Отделяемое ран 133 16 12,03 ± 2,82 [6,39; 17,67]

Моча 208 12 5,76 ± 1,61 [2,54; 8,98]

Копрофильтрат 188 2 1,06 ± 0,74 [0; 2,54]

Итого: 1314 211 16,05 ± 1,01 [14,03; 18,07]

ПОЛИТРАВМА

Таблица 2

Результаты исследований антибиотикочувствительности штаммов Pseudomonas aeruginosa

Чувствительность штаммов P. Aeruginosa

Наименование антибиотика MIC50 (мг/л) MIC90 (мг/л) к антибактериальным препаратам (%)

S I R

Амикацин 32 64 35,0 15,0 50,0

Азтреонам 16 64 25,0 25,0 50,0

Цефепим 16 64 40,0 15,0 45,0

Цефоперазон 256 256 10,0 0 90,0

Цефоперазон/сульбактам 64 128 25,0 15,0 60,0

Цефтазидим 4 16 60,0 35,0 5,0

Ципрофлоксацин 32 32 15,0 0 85,0

Колистин 1 1 100,0 0 0

Дорипинем 2 2 100,0 0 0

Фосфомицин 128 128 25,0 75,0 0

Гентамицин 256 256 10,0 0 90,0

Имипенем 2 16 60,0 5,0 35,0

Левофлоксацин 32 64 15,0 0 85,0

Меропенем 4 16 60,0 5,0 35,0

Нетилмицин 16 16 15,0 75,0 10,0

Пиперациллин 256 256 10,0 0 90,0

Пиперациллин/тазобактам 256 256 15,0 0 85,0

Наибольшую активность антибактериальных препаратов в отношении P. aeruginosa наблюдали у дорипинема, колистина, меропенема, имепенема и цеф-тазидима, MIC50 (1-4 мг/л), MIC90 (1-16 мг/л). Наименьшая частота резистентности выявлена к цефтазидиму и нетилмицину — нечувствительными оказались 5,0 ± 1,9 % и 10,0 ± 2,7 % штаммов, соответственно. Из бета-лактамных антибиотиков наибольшей чувствительностью обладали меропенем и имипенем, частота резистентных штаммов составила по 35,0 ± 5,0 %, соответственно. Далее, в порядке убывания доли чувствительных штаммов, следовали цефепим (45,0 ± 5,7 % резистентных штаммов), амикацин и азтреонам (по 50,0 ± 5,9 %), цефоперазон/суль-бактам (60,0 ± 6,5 %). К левофлок-сацину, ципрофлоксацину и пипе-рациллину/тазобактаму были не чувствительны 85,0 ± 7,6 % штаммов Pseudomonas aeruginosa. Наибольшее число устойчивых штаммов Pseudomonas aeruginosa (90,0 ± 7,8 %) наблюдали к пиперацилли-ну, цефоперазону и гентамицину.

Несмотря на то, что карбапене-мы на сегодняшний день являются препаратами резерва, уже появились устойчивые к ним штаммы. Наиболее частой причиной

№ 4 [декабрь]

резистентности к бета-лактамным антибиотикам является приобретение патогенным штаммом гена фермента металло-бета-лактамазы. Исследование 74 штаммов Pseudomonas aeruginosa, резистентных к меропенему и имипенему, дали отрицательный результат на наличие продукции металло-бета-лактамаз. Таким образом, у исследуемых культур P. aeruginosa преобладали другие механизмы резистентности, не связанные с продукцией метал-ло-бета-лактамаз. По результатам исследований чувствительности к дезинфектантам 56,3 ± 3,4 % выделенных штаммов Pseudomonas aeruginosa оказались устойчивы к 0,5 % раствору сульфохлорантина, применявшемуся в отделении. Все исследуемые штаммы проявляли высокую чувствительность к синег-нойному бактериофагу.

В отделениях, проблемных по синегнойной инфекции, следует отдавать предпочтение дезинфек-тантам с кислой pH и тщательно исключать избыточное увлажнение поверхностей, влажные коврики, хранение влажной ветоши, открытых емкостей с водой или растворами. Поддержание оптимальной степени микробиологической чистоты больничной среды предотвращает возможность накопления P. aerugi-nosa на объектах внешней среды.

■ШИВ ^

Агглютинация с моновалентными антисыворотками показала, что из 211 исследуемых культур 115 штаммов P. aeruginosa принадлежали к серогруппе 012, 36 штаммов — к серогруппе 011, 13 штаммов — к другим серогруп-пам.

Таким образом, в наблюдаемом отделении интенсивно циркулировали госпитальные штаммы Pseudomonas aeruginosa двух серогрупп 011 и 012 с классическими свойствами.

Результаты амплификации генов факторов патогенности представлены в таблице 3.

Анализ свидетельствует, что у клинических штаммов Pseudomonas aeruginosa чаще всего встречаются продукция экзофермента U — 12 из 17 исследуемых штаммов (70,58 ± 1,10) и продукция экзофермента S

- 10 штаммов из 17 (58,82 ± 1,19). Экзоферменты являются важным фактором патогенности. Способность Pseudomonas aeruginosa к образованию экзоферемента S и U определяет инвазивность бактерий

- возможность проникать через слизистые и соединительнотканные барьеры, а также диссеминировать из первичного очага инфекции и циркулировать в крови. Нейроминида-за выделена у 2 штаммов (11,76 ± 7,81), синтез пилей IV типа — у

Таблица 3 Результаты амплификации генов факторов патогенности P. aeruginosa

Порядковый номер исследуемых штаммов P. aeruginosa Факторы патогенности P. aeruginosa

Экзотоксин S (exo S) Нейроминидаза (nan 1) Экзотоксин U (exo U) Пили ГОтипа (PAPI1)

1. -* - + -

2. +* - - +

3. - - - -

4. + - + -

5. - - + -

6. + - + +

7. + - + +

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

8. - + + +

9. + + + +

10. + - + +

11. - - - +

12. + - + -

13. + - + +

14. + - + +

15. + - + +

16. - - - -

17. - - - -

Итого: -7 штаммов +10 штаммов -15 штаммов +2 штамма -5 штаммов +12 штаммов -7 штаммов +10 штаммов

Примечание: -* отсутствие фактора патогенности; +* наличие фактора патогенности.

10 (58,82 ± 1,19), основная функция пилей — прикрепление Pseudomonas aeruginosa к субстратам (например, к поверхности слизистых оболочек), что делает ее важным фактором колонизации и патоген-ности. Выработка нейроминидазы облегчает преодоление слоя слизи, проникновение внутрь клетки и распространение в межклеточном пространстве. Таким образом, 14 из 17 исследуемых культур (82,4 ± 9,2 %) обладали факторами патогенности, способствующими быстрому проникновению, колонизации и тяжести клинических проявлений. Кластерный анализ позволил выделить 3 кластера. В 1 кластер (кластерное расстояние 1,00) вошли 2 штамма P. aeruginosa — № 8 и № 9. Во 2 кластер (кластерное расстояние 1,41) вошли 8 штаммов — №№ 2, 6, 7, 10, 11, 13, 14, 15. В 3 кластер (кластерное расстояние 1,41) вошли 7 штаммов — №№ 1, 3, 4, 5, 12, 16, 17.

Учитывая наличие высоко патогенных и полирезистентных штаммов Pseudomonas aeruginosa, высокую их чувствительность к синег-нойному бактериофагу, в отделении реанимации и интенсивной терапии

проводили биологическую дезинфекцию синегнойным бактериофагом. Синегнойный бактериофаг наносили распылением на объекты внешней среды, поверхности оборудования, аппараты искусственной вентиляции легких из расчета 1 мл/м2. Эффективность оценивали

микробиологически исследованием проб из внешней среды отделения до и после фагирования (290 и 90 проб, соответственно). Рисунок демонстрирует эффективность биологической дезинфекции объектов больничной среды синегнойным бактериофагом.

Рисунок

Дендрограмма кластерного анализа по параметру факторы патогенности P. aeruginosa

38

ПОЛИТРАВМА

Контрольные смывы через 24 часа показали, что количество обнаруженных штаммов Pseudomonas aeruginosa на объектах внешней среды сократились в 10,8 раз. Из 90 смывов только в одном смыве была обнаружена Pseudomonas ae-ruginosa (p = 0,0018). Частота контаминации объектов внешней среды составила 1,11 ± 1,10 на 100 исследований. Повторное применение бактериофага через сутки позволи-

Литература:

ло полностью удалить синегнойную палочку с объектов больничной среды. В результате проведенных профилактических мероприятий заболеваемость синегнойной инфекцией снизилась в 1,9 раза — с 12,75 до 6,75 на 100 пациентов, соответственно (p = 0,018).

ВЫВОДЫ:

Применение синегнойного бактериофага в отделении реанимации и

интенсивной терапии показало его высокую эффективность, позволив в короткие сроки элиминировать синегнойную палочку с объектов внешней среды и снизить заболеваемость синегнойной инфекцией в 1,9 раза. Микробиологический мониторинг имеет первостепенное значение для профилактики вну-трибольничных инфекций и обеспечения качества лечения пациентов.

1. Брусина, Е.Б. Экологические аспекты внутрибольничных гнойно-септических инфекций в хирургии /Е.Б. Брусина, И.П. Рычагов //Материалы межрегиональной научно-практической конференции. - Кемерово, 2006. - С. 12-18.

2. Брусина, Е.Б. Внутрибольничные гнойно-септические инфекции и экологические аспекты хирургического стационара /Е.Б. Брусина //Главная медицинская сестра. - 2008. - № 3. - С. 137-141.

3. Predictors of 30-day mortality among patients with Pseudomonas aeruginosa bloodstream infections: impact of delayed appropriate antibiotic selection /T.P. Lodise, Ir.N. Patel, A. Kwa et al. //Antimic-rob. Agents Chemother. - 2007. - Vol. 51. - P. 3510-3515.

4. Сергевнин, В.И. Внутрибольничные инфекции и направления микробиологического мониторинга /В.И. Сергевнин, Н.И. Маркович //Эпидемиология и вакцинопрофилактика. - 2008. - № 2.

- С. 25-28.

5. Вентилятор-ассоциированная пневмония: диагностика, профилактика, лечение /И.Н. Егорова, А.В. Власенко, В.В. Мороз и др. //Общая реаниматология. - 2010. - Т. 4, № 1. - С. 79-88.

6. Нозокомиальная пневмония у больных в отделении реанимации и интенсивной терапии: диагностика и антимикробная химиотерапия /Б.Р. Гельфанд, Б.З. Белоцерковский, Д.Н. Проценко и др. //Consilium medicum. - 2008. - Т. 10, № 3. - С. 40-44.

7. Зубков, М.Н. Неферментирующие бактерии: классификация, общая характеристика, роль в патологии человека. Идентификация Pseudomonas spp. и сходных микроорганизмов /М.Н. Зубков //Инфекции и антимикробная терапия. - 2006. - № 1. - С. 24-30.

8. Брусина, Е.Б. Новые технологии диагностики и профилактики вну-трибольничных инфекций на основе бактериофагов /Е.Б. Брусина, О.М. Дроздова //Материалы научно-практической конференции.

- Кемерово, 2010. - С. 8-9.

9. Методические указания МУК 4.2.1890-04. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам.

- М., 2004. - С. 9-11.

10. Методические рекомендации по ускоренному определению устойчивости бактерий к дезинфекционным средствам. МР № 1100-26-0-117. - М., 2000. - С. 2-3.

11. Шевченко, О.В. Металло-р-лактамазы: значение и методы выявления у грамотрицательных неферментирующих бактерий /О.В. Шевченко, М.В. Эйдельштейн, М.Н. Степанова //Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2007.

- № 3. - С. 211-214.

12. Фагопрофилактика госпитальных гнойно-септических инфекций в реанимационных отделениях: методические рекомендации. - Кемерово, 1997. - С. 5-7.

№ 4 [декабрь] 2011

13. Genetic features of Pseudomonas aeruginosa isolates from cystic fibrosis patients compared with those of isolates from other origins /P. Lanotte, S. Watt, L. Mereghetti et al. //Journal of Medical Microbiology. - 2004. - Vol. 53. - P. 73-81.

14. The broad host range pathogen Pseudomonas aeruginosa strain PA14 carries two pathogenicity islands harboring plant and animal virulence genes /J. He, R.L. Baldini, E. Deziel et al. //PNAS. - 2004.

- Vol. 101, N 8. - P. 2530-2535.

Сведения об авторе: Information about author:

Егорова О.Н., врач-бактериолог, заведующая бактериологиче- Egorova O.N., bacteriologist, head of bacteriologic laboratory, City

ской лабораторией, МУЗ «Городская клиническая больница № 3 им. clinical hospital N 3 by the name of M.A. Podgorbunsky, Kemerovo,

М.А. Подгорбунского», г. Кемерово, Россия Russia.

Адрес для переписки: Address for correspondence:

Егорова О.Н., ул. Н. Островского, 22, г. Кемерово, 650000, Россия, Egorova O.N., Ostrovskogo st., 22, Kemerovo, 650000, Russia,

МУЗ «Городская клиническая больница № 3 им. М.А. Подгорбун- City clinical hospital N 3 by the name of M.A. Podgorbunsky.

ского».

Тел: моб. +7-909-515-6254; раб: 8 (3842) 36-85-28; Tel mob: +7-909-515-6254; off. 8 (3842) 36-85-28;

факс: 8 (3842) 36-69-83 fax: 8 (3842) 36-69-83

Электронная почта: egorovaon@mail.ru E-mail: egorovaon@mail.ru

m

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.