Ентеросорбція як перспективний метод усунення порушень в умовах індукованого канцерогенезу Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

BIOLOGICAL SCIENCES

Качур Оксана 1гор1вна], Фгра Людмила Степатвна2, Лихацький Петро Григорович3

1асистент кафедра загально'1' хгми, Тернопшьський нацiональний медичний утверситет шет 1. Я.Горбачевського

МОЗ Украти, Тернопшь, Украна 2доктор бiологiчних наук, професор кафедри медично'1' бюхшп, завiдувач кафедри фармацП НН1 пклядипломно'1' освiти, Тернопшьський нацюнальний медичний утверситет iменi 1. Я.Горбачевського

МОЗ Украти, Тернопшь, Украна 3 доктор бiологiчних наук, професор кафедри медично'1' бiохiмi'i, декан медичного факультету, Тернопшьський нацiональний медичний унiверситет iменi 1. Я.Горбачевського

МОЗ Украти, Тернопшь, Укра'та ORCID 0000-0002-8997-4797 DOI: 10.24411/2520-6990-2020-11387 ЕНТЕРОСОРБЦ1Я ЯК ПЕРСПЕКТИВНИЙ МЕТОД УСУНЕННЯ ПОРУШЕНЬ В УМОВАХ

1НДУКОВАНОГО КАНЦЕРОГЕНЕЗУ

Kachur Oksana Igorivna1, Fira Lyudmila Stepanivna2, Likhatsky Petro Grigorovich3

1Assistant, Department of Foreign Studies, Ternopil National Medical University imeni 1. Y.Gorbachevsky Ministry of Health of Ukraine, Ternopil, Ukraine 2Doctor of Biological Sciences, Professor, Department of Medical Biomedical Sciences, Head of the Department of Pharmacy NNI Supervisory Education, Ternopil National Medical University imeni 1. Y. Gorbachevsky Ministry of Health of Ukraine, Ternopil, Ukraine 3Doctor of Biological Sciences, Professor of the Department of Medical Biochemistry

Dean of the Faculty of Medicine, Ternopil National Medical University imeni 1. Y. Gorbachevsky Ministry of Health of Ukraine, Ternopil, Ukraine ORCID 0000-0002-8997-4797

ENTEROSORBTION AS A PROMISING METHOD OF ARRESTED DESTRUCTION IN THE MINDS

OF INDUCED CARCINOGENESIS

АнотацЯ

Метою даного до^дження було до^дити сорбцтну активтсть вуглецевого ентеросорбентуАУТ при аденокарциномi товсто'1' кишки. Для моделювання канцерогенезу 70 щурам протягом 30 тижтв вводили 1,2-диметилгiдразин (ДМГ) в дозi 7,2 мг/кг. Шддо^дш тварини були роздшеш на 3 групи: 1 - контроль, 11 - ураженi щурi, 111 - тварини, яким пiсля 30-тижневого введення ДМГ, проводили ентеросорб-цшну терапiю. Виявлено, що тривале введення канцерогену супроводжуеться порушенням цiлiсностi клтинних мембран, про що свiдчить пiдвищення активностi органоспецифiчних ензимiв у сироватцi кровi. Шсля 21-денно'1' ентеросорцтно'1' терапп вказаш показники покращилися. Отримаш результати т-дтвердили позитивний вплив сорбенту АУТ на показники цитолiзу в ураженому органiзмi, що може бути зумовлено його сорбтивними властивостями i зменшенням кiлькостi ендогенних токсинiв, що чинять де-структивний вплив на плазматичнi мембрани miтин.

Abstract

The purpose of this study was to investigate the sorption activity of carbon enterosorbent AUT in adenocarcinoma of the colon. For the simulation of carcinogenesis, 1,2-dimethylhydrazine (DMG) at a dose of 7.2 mg / kg was administered to rats for 30 weeks. The experimental animals were divided into 3 groups: I - control, II -affected rats, III - animals that underwent enterosorption therapy after 30 weeks of DMG administration. It has been found that prolonged carcinogen administration is accompanied by impaired cell membrane integrity, as evidenced by an increase in the activity of organ-specific enzymes in the serum. After 21 days of enterosor therapy, these indicators improved. The results obtained confirmed the positive effect of the sorbent AUT on the cytolysis indices in the affected organism, which may be due to its sorptive properties and a decrease in the number of endogenous toxins that have a destructive effect on the plasma membranes of cells.

<<шу1©здим-шигма1>>,#шшш©2© / biological sciences_9

Ключовi слова: 1,2-диметилг1дразин, алантамгнотрансфераза, аспартатамтотрансфераза, лужна фосфатаза, сечовина, АУТ.

Key words: 1,2-dimethylhydrazine, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, urea, A UT.

Вступ

Колоректальний рак входить до тршки найча-спше дiагностованих онколопчних захворювань. Зпдно з тдрахунками GLOBOCAN у 2018 р. бь льше 1 млн людей захворши на рак товсто! кишки. Щороку смертнiсть ввд раку шлунково-кишкового тракту зростае [1]. Дана статистика вимагае постш-ного пошуку нових методiв лiкування. Експериме-нтальнi модел1 iндукованого канцерогенезу в лабо-раторних тварин дають можливiсть для досль дження рiзних аспектiв онкогенезу, як1 не можуть бути ефективно вивченi безпосередньо на людсь-кому органiзмi [2]. Для вивчення морфологiчних та бiохiмiчних змiн, що виникають при колоректаль-ному канцерогенезi використовують диметилпдра-зинову модель (ДМГ). Змiни, що виникають при ш-дукци пухлинного процесу за допомогою 1,2-ДМГ близью до тих, яш мають мiсце в тканинах людини при розвитку раку товсто! кишки [2].

Встановлено, що ДМГ, як ксенобютик, мета-бол1зуеться в печiнцi та за допомогою ряду хiмiч-них реакцш утворюеться кiнцевий високотоксич-ний канцерогенний метаболiт - метилдiазонiум -йон, який запускае каскад метаболiчних порушень в органiзмi за дано! експериментально! модел1. В1д-повiдно, при розвитку канцерогенезу товсто! кишки, вщбуваеться порушення фукцiонального стану печiнки. Тому для оцшки рiвня печiнково! дисфункци доцiльним е визначення активностi ор-ганоспецифiчних ензимiв, що служать маркерами порушення проте!нового обмiну та тдвищення ак-тивностi iндикаторних ензимiв у кровi [4,5].

У зв'язку зi зростаючою частотою та пошире-шстю онкологiчних захворювань травно! системи у сучасному суспiльствi гостро сто!ть питання пошуку та дослiдження ефективних та малотоксичних методiв детоксикацiйно! терапп. Одним iз сучасних напрямкiв терапи е ентеросорбцiя [6]. Вуглецевi ад-сорбенти рiзного походження широко використо-вуються в методах сорбцшно! детоксикацi! при зло-як1сних новоутвореннях. Зокрема, АУТ- вуглеце-вий гранульований ентеросорбент з питомою поверхнею пор близько 2000-2500 м2/г. Численнi дослвдження вказують, що фiзико-хiмiчнi властиво-сп сорбуючого препарату здатнi зв'язувати та виво-дити з органiзму токсичш продукти катабол1зму [7,8]. Це робить доцшьним його застосування при експериментальному канцерогенезi з метою зни-ження проявiв ендогенно! iнтоксикацi! та токсичного впливу ендогенних токсинiв на цито- та плаз-матичнi мембрани кл1тин.

Матерiали i методи

Експериментальш дослiдження проведенi на 70 бших щурах-самцях, яких утримували на стандартному рацюш вiварiю Тернопiльського нацю-нального медичного унiверситету iменi I. Я. Горбачевского. Маса тша тварин становила 180-220 г. Уа манiпуляцi! з експериментальними тваринами

проводили з дотриманням правил «£вропейсько! конвенцп про захист хребетних тварин, що викори-стовуються для дослвдних та шших наукових цшей», а також зпдно «Науково-практичних реко-мендацiй з утримання лабораторних тварин та ро-боти з ними» [9].

Дослвдних щурiв було подiлено на 3 групи: 1 -контрольна (штактш тварини); 2 - тварини, уражеш 1,2-ДМГ; 3 - тварини, уражеш 1,2-ДМГ, яким пiсля 30 тижневого введення канцерогену застосовуу-вали ентеросорбент АУТ.

Штучно iндукований онкогенез товсто! кишки моделювали шляхом введення несиметричного 1,2-диметилгвдразин гiдрохлориду ^рми «SIGMA-ALDRICH CHEMIE», виробництва Япони), попе-редньо розведеного iзотонiчним розчином натрш хлориду. ДМГ вводили шдшшрно в мiжлопаткову дiлянку в дозi 7,2 мг/кг один раз на тиждень упро-довж 30 тижшв вiдповiдно до маси тварини. Ентеросорбент АУТ вводили штрагастрально щоденно впродовж 21 доби пiсля 30-ти тижневого моделю-вання онкопроцесу. Добова доза сорбенту - 1 мл за-вису (що ввдповвдае 0,2 г чисто! маси препарату) на 100 г маси тша тварини [10,11].

Кожного мюяця ввд початку дослвдження ура-жених тварин виводили з експерименту шляхом ев-танази пiд тiопенталовим наркозом. Досл1дженням тддавали сироватку кровi. Забiр кровi для бiохiмiч-ного дослiдження проводили в один i той же час доби у спещальному примiщеннi при температурi повiтря 18-20 С0. Кров забирали iз серця тварин, яку центрифугували при 3000 об. /хв протягом 30 хв. Отриману сироватку кровi (надосадову родину) ви-користовували в подальних досл1дженнях.

Оцiнку ступеня деструктивних змiн у печiнцi здшснювали шляхом визначення в сироватцi кровi активностi аланiнамiнотрансферази (АлАТ) i аспа-ртатамiнотрансферази (АсАТ) [12], лужно! фосфа-тази (ЛФ) [13] та вмюту сечовини [14] з викорис-танням напiвавтоматичного бiохiмiчного аналiза-тора Humalyzer 2000 та наборiв реактивiв фiрми Human (Hiмеччина).

Результати дослiджень тддавали статистич-ному аналiзу [15] за допомогою статистично! про-грами STATISTICA 6.0 з використанням парамет-ричного кри- терш Стьюдента та непараметрич-ного критерiю Вiлкоксона для зв'язаних вибiрок. Змiни вважали достовiрними при р < 0,05.

Результати й обговорення

Встановлено, що змодельована форма 1,2-ДМГ - шдукованого канцерогенезу товстого кишшвника супроводжуеться змiнами проникносп плазматичних мембран кл1тин печiнки, що прояв-ляеться пвдвищенням активностi мембранозалеж-них ензимiв у сироватцi кров^

Ведомо, що амiнотрансферази (АЛТ та АСТ) -це внутршньоклтгинш ензими, яш в основному де-понуються в цитоплазмi гепатоцитiв, тому в нормi

!х вмiст у сироватцi невисокий [16,17]. При пошко-дженнi або руйнуванш кл1тин печiнки вiдбуваеться елiмiнацiя амшотрансфераз в кров, що пiдтверджуе розвиток цитолтгичного синдрому в органiзмi. За даних умов у сироватцi кровi пiдвищуеться актив-нiсть ЛФ, яка е маркером холестазу та запальних

Таблиця 1

Динамжа активностi амшотрансфераз у сироватщ кров1 щурiв з iндукованим онколопчним проце-

процесiв у печiнцi [18].

Процес моделювання онкопроцесу канцерогеном 1,2-ДМГ супроводжуеться вiдвищенням активносп зазначених ензимiв порiвняно з контролем (табл.1).

Групи тварин / термiни ураження диметилгiдразином АлАТ, мкат/л АсАТ, мкат/л

1нтактний контроль (1К) 1,58±0,06 1,18±0,03

1 мюяць ураження 2,15±0,13* 1,49±0,06*

2 мюяць ураження 1,98±0,07* 1,74±0,05*

3 мюяць ураження 2,31±0,09* 1,91±0,05*

4 мюяць ураження 2,47±0,13* 2,19±0,05*

5 мюяць ураження 2,25±0,06* 2,45±0,07*

6 мюяць ураження 2,05±0,10* 2,84±0,07*

7 мюяць ураження 1,98±0,07* 3,22±0,06*

7 мюящв ураження + АУТ-М (14 дтв) 1,88±0,02 3,05±0,05

7 мюящв ураження + АУТ-М (21 день) 1,77±0,03 2,45±0,06**

Примтка: * - вiрогiднi змти мiж показниками тварин штактного контролю та ураженими 1,2-ДМГ тваринами; ** - вiрогiднi змiни мiж показниками уражених канцерогеном тварин та тваринами, ят отримували ентеросорбент

Встановлено, що через 1 мюяць вщ початку експерименту рiвень АлАТ зрю на 36 % порiвняно з показниками активносп даного ензиму у тварин штактного контролю. Збшьшення активносп АлАТ спостерiгаеться протягом уах термiнiв до-слвдження, проте найвищим цей показник був на 4 мюящ ураження (на 56 % вище ввд iнтактного контролю). Очевидно, дат результати вказують на розвиток гепатоцелюлярного пошкодження печшки протягом 4-ьох мiсяцiв. У наступш термiни до-слвдження спостерiгаеться тенденщя до зменшення активностi АлАТ (5 мю - активнiсть ензиму лише на 42 % вище 1К, 7 мю - лише на 25 % перевищуе рiвень штактних тварин). Так1 данi можуть вказу-вати або на поступове зменшення шлькосп зруйно-ваних гепатоцитiв за рахунок компенсаторних про-цесiв у печшщ, або ж на повну деградащю кл1тин паренхiми печiнки, яш е джерелом даних ензимiв [8,18].

Паралельно, нами встановлено вiрогiдне шд-вищення автивностi АсАТ. Так, тсля 1-ого мiсяця ураження активнiсть ензиму зросла до 126 % порь вняно з групою тварин штактного контролю, в наступних термiнах дослщження активнiсть АсАТ продовжувала зростати. Зокрема, на 5 мюяць експерименту активнють АсАТ зросла на 107 %, на 7 мь сяць - на 172 % порiвняно з нормою.

Застосування сорбенту АУТ призвело до зни-ження активносп амiнотрансфераз у сироватцi кровi. У термш 14 та 21 день тсля його введення ураженим ДМГ щурам спостерталась тенденцiя до зниження активностi АлАТ, вiрогiдних змiн вщзна-чено не було. Стосовно активносп АсАТ, 21 день застосування АУТ викликало вiрогiдне Г! зниження (р < 0,05), яке становило 65 % щодо рiвня уражених тварин.

Наступним етапом наших досл1джень було до-сл1дити активнiсть дужно! фосфатази, специфiч-ного для печiнки ензиму, який е чутливим iндика-тором !! стану. Пiдвищення активностi ЛФ у сироватщ кровi свiдчить про розвиток запальних процеав у даному органi та холестазу.

П1д час моделювання канцерогенезу було встановлено прогресуюче зростання активностi ЛФ у сироватщ кровi щурiв, уражених 1,2 ДМГ порiв-няно з штактним контролем. Це може вказувати на штенсифшащю процесiв дефосфорилювання, що тдтримують внутрiшньоклiтинну концентрацiю фосфору. Так, актившсть ЛФ на 1-ому мiсяцi тсля введення канцерогену тдвищилася на 46 % , 3-ьому мiс - на 114 %, 5-ому мю - 127 %, 7-ому мю -на 129 % (табл. 2). Уа змши були вiрогiдними (р<0,05).

Таблиця 2

Димамжа активностi лужмоТ фосфатази у сироватщ кров1 щурiв з шдукованим онкологiчним про-

Групи тварин / термши ураження диметилгiдразином ЛФ, мкат/л

1нтактний контроль 2,19±0,06

1 мюяць ураження 3,20±0,07*

2 мiсяць ураження 4,83±0,04*

3 мюяць ураження 4,69±0,09*

4 мюяць ураження 4,59±0,05*

5 мiсяць ураження 4,99±0,04*

6 мюяць ураження 5,01±0,07*

7 мiсяць ураження 5,03±0,06*

7 мюящв ураження + АУТ-М (14 днiв) 4,72±0,12

7 мiсяцiв ураження + АУТ-М (21 день) 4,54±0,12**

Примтка: * - вiрогiднi змти мiж показчиками тварин ттактного контролю та ураженими 1,2-ДМГ тваринами; ** - вiрогiднi змти мiж показчиками уражених канцерогеном тварин та тваринами, як отримували ентеросорбент.

Введения ентеросорбенту АУТ протягом 21 доби, з моменту припинення ураження тварин канцерогеном, проявляеться деякою стабшзацше функщонального стану печшки. Так, тд дiею ентеросорбенту актившсть ЛФ у сироватщ кровi уражених щурiв знизилась на 22 %.

О^м лужно! фосфатази на розвиток запального процесу в печiнцi може вказувати i вмiст сечо-вини у кров^ Азот сечовини дозволяе визначити функщю печiнки, активний запальний процес, рев-матичний процес, а також порушення водно-сольо-вого обмiну i дисбаланс мiкроелементiв [19,20].

Сечовина синтезуеться в печшщ при знешко-дженш амiаку, який утворюеться в реакщях дезамь

нування амiнокислот та виводиться з оргашзму ни-рками. Ввдповвдно, якщо iз кровi сечовина виводиться повшьно, то це е ще й ознакою порушення видшьно! функцп нирок [21,22].

Отже, концентращя сечовини як кiнцевого продукту обм^ проте1шв та основно! складово! частини залишкового азоту в експериментальних тварин залежить ввд iнтенсивностi И синтезу та ви-ведення. Тому И визначення е важливим дiагно-стичним тестом для печiнки.

Вмiст сечовини в сироватщ кровi уражених тварин у процеа моделювання канцерогенезу тд-вищувався в усi термiни експерименту вщносно ш-тактного контролю (2 мю - на 15 %, 3 мю - на 20 %, 7 мю - на 12%) (табл.3).

Таблиця 3

Динамжа вмiсту сечовини у сироватщ кровi щурiв з iндукованим омкологiчмим процесом та тсля

Групи тварин / термши ураження диметиллдразином Вмют сечовини, ммоль/л

1нтактний контроль 40,96±1,11

1 мюяць ураження 40,48±0,46

2 мiсяць ураження 47,00±0,85*

3 мюяць ураження 49,08±0,53*

4 мюяць ураження 51,68±0,76*

5 мiсяць ураження 46,13±0,78*

6 мюяць ураження 46,09±0,84*

7 мiсяць ураження 45,91±0,62*

7 мюящв ураження + АУТ-М (14 дтв) 44,83±0,27

7 мiсяцiв ураження + АУТ-М (21 день) 44,02±0,35

Примтка: * - вiрогiднi змши мiж показниками тварин ттактного контролю та ураженими 1,2-ДМГ тваринами; ** - вiрогiднi змти мiж показниками уражених канцерогеном тварин та тваринами, як отримували ентеросорбент

Максимальт змши вiдмiченi на 4 мюящ вщ моменту введення 1,2 ДМГ. У цьому термш вмiст сечовини у сироватщ кровi щурiв тдвищився на 26 %. У наступт термiни даний показник в уражених тварин знижувався, але й надал1 перевищував рiвень сечовини у тварин групи iнтактного контролю.

Отриманi результата сввдчать про посилення процесiв катабол1зму бiлкiв i порушення у процесах дезамiнування амiнокислот в органiзмi уражених

щурiв. Однiею iз причин цього може бути прогре-суюче ураження печшки тд дiею використаного нами екзогенного токсиканта, а також та пошко-джувальний вплив ендогенних токсишв саме на ге-патоцити [23,24,25].

Застосований нами ентеросорбент АУТ проявив позитивний вплив на вмют сечовини, знижу-ючи його через 14 та 21 день дослвдження тсля ро-звитку колоректального раку. Вiрогiдних змiн при цьому не вiдмiчено.

Отже, в умовах тдукованого розвитку онкоп-роцесу в товстiй кишцi нами B^Mi4eTO змiни у бю-xiMi4Hm показниках, як1 е маркерами ушкоджува-льного впливу канцерогену на печшку (пiдвищення показнишв цитолiзу гепатоцитiв у сироватщ кровi та показник1в холестазу та запальних процесiв у жовчних шляхах). Ефективнють сорбенту АУТ при визначент бiоxiмiчниx маркерiв печiнки у мовах розвитку пухлини товсто! кишки у щурiв найбiльш виразно проявилася через 21 його введения в орга-нiзм, що, очевидно, робить дощльним бiльш три-вале його застосування заа дано! патологи.

Висновки

1. В умовах 1,2-диметилгвдразинового канцерогенезу товсто! кишки вiдмiчено тдвищення ак-тивностi амiнотрансфераз та лужно! фосфатази в сироватщ кров^ що вказуе на розвиток цитолггич-ного синдрому та холестазу в ураженому оргашзмг

2. Встановлено, що за колоректального раку вiдбуваються змiни функщонального стану печь нки, про що сввдчить пiдвищення вмiсту сечовини у сироватщ кровi щурiв протягом семи мюящв мо-делювання онкопроцесу.

3. Ентеросорбент АУТ, який застосовувався протягом 21 дня, б№ш ефективним виявився у ш-нцi дослвдження. Пвд його впливом вiрогiдного зни-ження зазнала активнiсть аспартатамшотрансфе-рази та лужно! фосфатази у сироватщ кровi уражених тварин. При дослвджент активносп аланiнамiнотрансферази та вмюту сечовини у сиро-ватцi кровi спостерiгалась тенденцiя до !х зниження пiсля введення АУТу.

4. Отримаш результати дають змогу рекоме-ндувати бiльш тривале застосування сорбтивно! те-рапi! за онкопатологi! шлунково-кишкового тракту.

Список лггератури

1. Ferlay J, Soerjomataram I, Dikshit R, et al. Cancer incidence and mortality worldwide: sources, methods and major patterns in GLOBOCAN 2012 // Int J Cancer.2015. №136 (5). Р. 359-86.

2. Maskens A.P. Dujardin-Loits R.M. Experimental adenomas of the large intestine behave as distinct entities: most carcinomas arise de novo in flat mu-cosa//Cancer. 1981. № 47 (1). Р. 81-89.

3. Martina Perse M., Cerar A., Morphological and Molecular Alterations in 1,2 Dimethylhydrazine and Azoxymethane Induced Colon Carcinogenesis in Rats. //Journal of Biomedicine and Biotechnology Volume. 2011.

4. Sivaranjani A., Sivagami G., Namasivayam Nalini N. Chemopreventive effect of carvacrol on 1,2-dimethylhydrazine induced experimental colon carcinogenesis.// Journal of Cancer Research and Therapeutics. 2016. №12(2). Р. 755-762

5. Glauert H. P., Bennink M. R., Metabolism of 1,2-dimethylhydrazine by cultured rat colon epithelial cells//Nutrition and Cancer.1983. № 5 (2). Р. 78-86.

6. Вивчення антимжробно! та поглинально! активносп волокнистих вуглецевих адсорбенпв з iммобiлiзованим полiгексаметиленгуанiдином. Сахно Л.О., Пархоменко Н.А., Сарнацька В.В., Юшко Л.О., Снежкова £.О., Сидоренко О.С., Корнеева Л.М., Школаев В.Г. //Сучаст проблеми

токсикологi!, харчово! та xiмiчно! безпеки. 2014. №3-4. С. 79-84.

7. Augmentation of diethylnitrosamine-in-duced early stages of rat hepatocarcinogenesis by 1,2-dimethylhydrazine. Punvittayagul C., Chariyakornkul A., Chewonarin T., Jarukamjorn K., Wongpoomchai R. // Drug and Chemical Toxicology. 2018. № 3. Р. 1-8.

8. Metformin prevents hormonal-metabolic disturbances and colon carcinogenesis induced by 1,2-dimethylhydrazine in non-diabetic rats. V. Bekusova, V. Patsanovskii, A. Nozdrachev, A. Trashkov, M. Arte-menko, V. Anisimov. // Cancer Biology and Medicine.

2017. №14 (1). Р. 100-107.

9. Науково-практичш рекомендаци з утри-мання лабораторних тварин та роботи з ними. Ю. М. Кожем'яшн, О. С. Хромов, М. А. Фшоненко, Г.

A. Сайфетдшова. - К.: Авщена, 2002. - С. 156.

10. Qing-chun Li, Yun Liang, Guang-rui Hu, Yuan Tian. Enhanced therapeutic efficacy and amelioration of cisplatin-induced nephrotoxicity by quercetin in 1, 2-dimethyl hydrazine-induced colon cancer in rats// Indian J Pharmacol. 2016. № 48(2). Р. 168-173.

11. Fridman L. I., Lysenko A. A. Carbon-Fiber Adsorbents // Fibre Chemistry. 2018. №50. Р. 230232.

12. Tarrant J. Use of optimized aminotransferase methods in regulated preclinical studies / J. Tarrant, D. Meyer, P. Katavolos // Vet. Clin. Pathol. - 2013. - Vol. 42 (4). - Р. 535-538.

13. Тогайбаев А. А. Способ диагностики эндогенной интоксикации / А. А. Тогайбаев, А. В. Кур-гузкин, И. В. Ри- кун // Лаб. дело. - 1988. - № 9. -С. 22-24.

14. Комаров Ф. И. Биохимические исследования в клинике / Ф. И. Комаров, Б. Ф. Коровкин, В.

B. Меншиков. Элиста: АПП "Джангар", 1988. □ 250 с.

15. Okeh U. Statistical problems in medical research. //East. Afr. J. Public. Health. 2009. №6 (1). Р.1-7.

16. Aspartate aminotransferase (AST/GOT) and alanine aminotransferase (ALT/GPT) detection techniques. Xing-Jiu Huang, Yang-Kyu Choi, Hyung-Soon Im, Oktay Yarimaga, Euisik Yoon, Hak-Sung Kim. // Basel. 2006. №7 (6). Р. 756-782.

17. The ameliorative effect of Vitamin C in experimentally induced colon cancer in rats. Omnia, M. Abdel-Hamid, Abeer, A.N., Emam, M.A., Elshimaa, M.A. Abdel-Hamid. // Benha veterinary medical journal.

2018. № 34(1). Р. 329-343.

18. Dietary fish oil modulates the effect of dime-thylhydrazine-induced colon cancer in rats. Rasmy G.E., Khalil W.K.B., Moharib S.A., Kawkab A.A., Jwanny E.W. // Chemistry. 2011.№ 62(3). Р. 253-267.

19. Rewiring urea cycle metabolism in cancer to support anabolism. Keshet R., Szlosarek P., Carracedo A., Erez A. // Nat Rev Cancer. 2018.№ 18(10). Р. 634645.

20. Qing-chun Li, Yun Liang, Guang-rui Hu, Yuan Tian. Enhanced therapeutic efficacy and amelioration of cisplatin-induced nephrotoxicity by quercetin in 1,2-dimethyl hydrazine-induced colon cancer in rats// Indian J Pharmacol. 2016. № 48(2). Р. 168-173.

21. Sandesh C.S., Nagamani, Ayelet Erez. A metabolic link between the urea cycle and cancer cell proliferation.// Molecular Cellular Oncology. 2016. №3(2).

22. Rewiring urea cycle metabolism in cancer to support anabolism. Keshet R., Szlosarek P., Carracedo A., Erez A. // Nat Rev Cancer. 2018.№ 18(10). P. 634645.

23. Sandesh C.S., Nagamani, Ayelet Erez. A metabolic link between the urea cycle and cancer cell proliferation.// Molecular Cellular Oncology. 2016. №3(2).

24. Rewiring urea cycle metabolism in cancer to support anabolism. Keshet R., Szlosarek P., Carracedo A., Erez A. // Nat Rev Cancer. 2018 № 18(10). P. 634645.

25. Association between survivin gene polymorphism and colorectal cancer. Waleed M Fathy, Mohamed S Amar, Belal Montaser, Mona Maamoun Ahmed.// Menoufia Medical Journal. 2019. №32 (1). P.296-300.