CC BY
78
УДК 616.13-004.6-036.1
С.д. маянская1, н.З. давлятшина1, е.в. майкова2, м.в. тихомирова2, н.н. маянская1,
о .А. крАвцОвА2
1Казанский государственный медицинский университет, 420012, г. Казань, ул. Бутлерова, д. 49 2Казанский (Приволжский) федеральный университет, 420008, г. Казань, ул. Кремлевская, д. 18
Экспрессия некоторых генов антиоксидантной системы при атеросклерозе разной степени выраженности
Маянская Светлана дмитриевна - доктор медицинских наук, профессор кафедры госпитальной терапии, тел. +7-905-316-99-66, e-mail: smayanskaya@mail.ru
давлятшина Иурфия Зуфаровна - аспирант кафедры госпитальной терапии, тел. +7-900-333-92-51, e-mail: nurfiya.20@mail.ru Тихомирова Мария владимировна - студент кафедры биохимии и биотехнологии, тел. +7-987-228-34-66, e-mail: mary20011994@mail.ru Майкова Евгения владимировна - кандидат биологических наук, ассистент кафедры биохимии и биотехнологии, тел. +7-917-917-28-63, e-mail: kazan.gen@gmail.com
Маянская Иаиля Иазибовна - доктор медицинских наук, профессор кафедры биохимии, тел. +7-903-061-14-41, e-mail: nmayansk@mail.ru кравцова Ольга Александровна - кандидат биологических наук, доцент кафедры биохимии и биотехнологии, тел. +7-905-312-99-80, e-mail: okravz@yandex.ru
Изучена активность экспрессии генов, продукты которых ответственны за активацию антиоксидантной системы (АОС), у 78 пациентов с разной степенью выраженности атеросклеротического поражения сосудов. Проводили анализ экспрессии гена NQO1, контролирующего синтез NADP-оксидоредуктазы, гена GCLC, продукт которого принимает участие в синтезе глутатиона, и гена HMOX1, участвующего в модификации свободного гема. У 48 пациентов подтвержден клинико-диагностическими методами диагноз мультифокального атеросклероза (МФА) (1 группа), у 15 чел. — ИБС, осложненная острым коронарным синдромом (ОКС) (2 группа) и у 15 чел. — без клинических признаков атеросклероза, но с наличием факторов риска (ФР) развития сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) (3 группа). Анализ экспрессии генов проводили относительно контрольной группы (10 чел.), куда вошли пациенты травматологического отделения без признаков сердечно-сосудистой патологии. Получены достоверные различия в экспрессии гена HMOX1 у пациентов с МФА, ОКС и с ФР без клинических проявлений ССЗ по сравнению с группой контроля (р=0,0000078, р=0,00299 и р=0,012267 соответственно). Относительный уровень экспрессии гена GCLC имеет тенденцию к снижению в группах пациентов с ИБС, осложненной ОКС. Различия в экспрессии гена NQO1 статистически достоверны только в группах пациентов с ИБС, осложненной ОКС и с наличием ФР развития ССЗ без клинических признаков атеросклероза (р=0,03506 и р=0,01331 соответственно).
Ключевые слова: антиоксидантная система, экспрессия генов HMOX1, GCLC, NQO1, мультифокальный атеросклероз, факторы риска, острый коронарный синдром.
s.D. mayanskaya1, n.z. davlyatshina1, e.V. maykova2, m.v. tikhomirova2, n.n. mayanskaya1, o.a. kravtsova2
1Kazan State Medical University, 39 Butlerov Str., Kazan, Russian Federation, 420012
2Kazan (Volga Region) Federal University, 18 Kremlevskaya Str., Kazan, Russian Federation, 420008
Gene expression of the antioxidant system in case of atherosclerosis of different severity
Mayanskaya s.D. - D. Med. Sc., Professor of the Department of Hospital Therapy, tel. +7-905-316-99-66, e-mail: Smayanskaya@mail.ru Davlyatshina N.Z. - postgraduate student of the Department of Hospital Therapy, tel. +7-900-333-92-51, e-mail: nurfiya.20@mail.ru Tikhomirova M.V. - student of the Department of Biochemistry and Biotechnology, tel. +7-987-228-34-66, e-mail: mary20011994@mail.ru Maykova E.V. - Cand. Biol. Sc., Assistant of the Department of Biochemistry and Biotechnology, tel. +7-917-917-28-63, e-mail: kazan.gen@gmail.com
Mayanskaya N.N. - D. Med. Sc., Professor of the Department of Biochemistry, tel. +7-903-061-14-41, e-mail: nmayansk@mail.ru Kravtsova OA - Cand. Biol. Sc., Associate Professor of the Department of Biochemistry and Biotechnology, tel. +7-905-312-99-80, e-mail: okravz@yandex.ru
In 78 patients with various manifestation rate of atherosclerotic vascular disease is studied the activity of genes expression, products of which are responsible for activation of the antioxidant system AOS. An analysis of gene NQO1 expression that controls the NADP-oxidoreductase synthesis, GCLC gene whose product is involved in the synthesis of glutathione, and HMOX1 gene involved in the modification of free heme, was made. By clinicodiagnostic methods the diagnosis of multifocal atherosclerosis (MFA) (group 1) was confirmed in 48 patients, ischemic heart disease complicated by acute coronary syndrome (ACS) (group 2) — in 15 patients, and in 15 patients — without clinical signs of atherosclerosis, but with the presence of risk factors (RF) to develop cardiovascular disease (CVD) (group 3).Gene expression analysis was performed in the control group (10 people), which included patients of the Department of traumatology with no signs of cardiovascular disease. Significant differences in expression of gene HMOX1 in patients with multifocal atherosclerosis, acute coronary syndrome and risk factor without clinical manifestations of cardiovascular disease as compared to the control group (p=0.0000078, p=0.00299 and p=0.012267, respectively) were obtained. The relative expression level of the GCLC gene tends to be low in patients with coronary heart disease complicated by ACS. Differences in the NQO1 gene expression are statistically significant only in the group of patients with coronary heart disease complicated by acute coronary syndrome, and the presence of risk factors for CVD development without clinical signs of atherosclerosis (p=0.03506 and p=0.01331, respectively).
Key words: antioxidant system, expression of genes HMOX1, GCLC, NQO1, multifocal atherosclerosis, risk factors, acute coronary syndrome.
К настоящему времени сложилось четкое представление об атеросклерозе как о мультифакторном заболевании, с генетической предрасположенностью и целым рядом факторов риска (ФР), которые в совокупности обусловливают нарушение регуляции различных биохимических процессов, приводящих к возникновению данного заболевания. Как известно, в основе развития атеросклероза лежит хроническая воспалительная реакция, о чем свидетельствует волнообразный характер ее течения со сменой фаз обострения и ремиссии. В фазу обострения наблюдается резкое повышение уровня плазменных медиаторов воспаления в сосудистом русле, прогрессирование дисфункции эндотелия, мощная активация клеток-эффекторов воспаления, что приводит к выбросу в сосудистое русло супероксид радикалов, продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), ускорению тромбогенеза и, как следствие этого, к деструкции сосудистой стенки [1, 2]. За этим процессом давно закрепился термин «окислительного или оксидативного стресса». В фазу ремиссии уровень воспалительных медиаторов и активных форм кислорода (АФК) снижается, наступает баланс в кровеносном русле и эндотелии и атерогенные бляшки вместе с содержащимися в них тромбами стабилизируются. Такая последовательность процессов может происходить в стенке любого сосуда, независимо от его локализации, что, несомненно, сказывается на клинической картине заболевания. Именно этот механизм рано или поздно приводит к дестабилизации атеросклеро-тической бляшки и развитию окклюзирующих осложнений [3]. В настоящее время сформировалась концепция о важной роли окислительного стресса в патогенезе атеросклероза [4, 5], что сопровождается нарушением баланса в системе прооксидант-антиоксидант со сдвигом в сторону накопления прооксидантов, к которым, в первую очередь, относят АФК [6]. Одним из важнейших следствий избыточного образования АФК является неконтролируемая в этих условиях активация процессов ПОЛ. Окисление молекул липидов приводит к необратимому изменению мембранных структур клеток и нарушению их проницаемости для ионов.
Как известно, для защиты от потенциально патогенных АФК в клетках имеется система защиты [7]. Антиоксидантаня система (АОС) представляет
собой разветвленную многокомпонентную сеть физиологически активных веществ, которая условно делится на специфическую и неспецифическую: специфическая АОС, включающая, прежде всего, ферменты: супероксиддисмутазу (СОД), каталазу (КАТ) и глютатионпероксидазу (ГТП), направлена на разрушение образующихся аФк и продуктов их дальнейших превращений, неспецифическая (це-рулоплазмин, трансферрин, лактоферрин и др.) предотвращает условия и возможности утечки электронов и генерации АФК в ходе окислительно-восстановительных реакций (в рамках окислительного фосфорилирования) или в процессе аутоокис-ления субстратов (микросомальное окисление) [8]. Патогенетические факторы и механизмы дисрегу-ляции работы АОС при атеросклерозе разной локализации и степени выраженности еще недостаточно исследованы, а результаты исследований носят противоречивый характер. Однако, по-видимому, чувствительность эндогенных антиоксидантов в крови может являться своеобразным индикатором накопления АФК. Окислительный стресс вносит свой вклад в патогенез атеросклероза не только путем стимуляции экспрессии воспалительных генов, но и оказывая мутагенное действие на гены АОС, тем самым ослабляя ее активность. С точки зрения физиологии гены АОС, в частности гены, кодирующие различные изоформы СОД, КАТ и гТп, могут иметь большое значение в формировании генетически детерминированной предрасположенности к различным клиническим формам атеросклероза (стенокардия, острый инфаркт миокарда, мозговой инсульт) [9].
Таким образом, в настоящее время представляется актуальной комплексная оценка вклада генетических маркеров в изменение активности АОС у пациентов с проявлениями атеросклероза разной локализации и степени выраженности. В связи с этим, целью данного исследования явилось изучение экспрессии регулирующих генов, ответственных за активацию аОс у пациентов с атеросклерозом разной степени выраженности.
Материал и методы исследования
В исследование включено 78 человек в возрасте от 30 до 75 лет, не состоящих в родстве и сопоставимых по социально-экономическому и этниче-
скому статусу. Включение больного в исследование осуществлялось после получения информированного согласия, в том числе — на проведение генетического тестирования. Протокол исследования одобрен локальным этическим комитетом КГМУ Министерства здравоохранения РФ.
В зависимости от степени выраженности клинических и морфологических проявлений атеросклероза пациенты были разделены на 3 группы: 1) 48 пациентов, с подтвержденным клинико-диагностическими методами диагнозом мультифокаль-ного атеросклероза (МФА); 2) группа больных ИБС, осложненной острым коронарным синдромом (ОКС) (15 чел.); 3) пациенты без клинических признаков атеросклеротического поражения сосудов, но с наличием ФР развития сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) (15 чел.). Критериями исключения служили: тяжелые сопутствующие заболевания, аутоиммунные болезни, диагностированные опухоли, психические заболевания, отказ от генетического тестирования. На каждого больного заполнялась специально разработанная клиническая карта. Группа контроля представлена популяционной выборкой из 10 человек (5 женщин и 5 мужчин), жителей г. Казани, без наследственной отягощенности, ФР и клинических проявлений ССЗ. Обследование контрольной группы включало: измерение АД, антропометрию (рост, вес), социально-демографические характеристики, опрос о курении, потреблении алкоголя (частота и типичная доза), уровне физической активности, оценка липидного профиля (общий холестерин (ОХ), триглицериды (ТГ), липопротеиды низкой и высокой плотности).
Выделение тотального препарата РНК проводили из 100 мкл цельной крови, взятой с антикоагулянтом ЭДТА, с использованием TRiZol (Invitrogen, США) согласно инструкции фирмы-производителя. Количественную оценку выделенных образцов РНК проводили спектрофотометрическим методом на NanoPhotometer P360 (IMPLEN, Германия). Для синтеза кДНК проводили реакцию обратной транскрипции с использованием коммерческого набора MMLV RT kit (Евроген, Россия). Анализ экспрессии
генов HMOX1, NQO1 и GCLC проводили методом ПЦР в реальном времени на амплификаторе CFX96 (BioRad, США) с использованием коммерческих наборов зондов и праймеров согласно протоколу фирмы-производителя (Applied Biosystems, США). В качестве референтного гена использовали ген бета-актина.
Относительный уровень экспрессии генов рассчитывали с использованием метода, предложенного Livak К. и Schmittgen T. [10]. Достоверность различий определялась с использованием непараметрического статистического критерия Стьюдента (t-теста), различия считались достоверными при р<0.05. Статистический анализ данных проводили с применением стандартных математических методов средствами программ Microsoft Excel 2010.
Результаты и обсуждение
Клиническая характеристика больных по группам представлена в таблице 1. Эти группы были сопоставлены по основным демографическим, антропологическим показателям, наличию ФР атеросклероза, сопутствующей патологии, распространенности атеротромботических событий в анамнезе, данным лабораторного и инструментального обследования. Больные с поражением от трех сосудистых бассейнов и более составили группу 1, пациентов с МФА. Среди них преобладали: 45,8% — с перенесенными мозговыми инсультами, 23% — с критическими стенозами артерий нижних конечностей, 66% — с хроническими формами ИБС: постинфарктным кардиосклерозом (31%), стабильной стенокардией напряжения 2-4 функционального класса (Фк) (35%), сопровождавшимися явлениями хронической сердечной недостаточности 2А-2Б стадии, 3-4 функционального класса по классификации NYHA (41,7%). Среди больных с МФА преобладали мужчины (96%). У всех больных с МФА изучалась частота основных сердечно-сосудистых ФР: АГ, курение, гиперхолестеринемия (ГХС; общий холестерин >5,5 ммоль/л), отягощенная наследственность (по АГ, ИБС) и абдоминальное ожирение (АО) (табл. 1). Вторая группа была представлена пациентами, по-
Таблица l.
Сравнительная характеристика больных в группах
Показатель 1-я группа, n=48 чел. 2-я группа, n = 15 чел. 3-я группа, n = 15 чел.
Возраст, годы (т±т) 62,3±7,2 63,4±9,2 60,8±12,9
Мужчины, п (%) Женщины, п (%) 45 чел. (93,75%), 3 чел. (6,25%) 8 чел. (53,3%), 7 чел. (46,7%) 2 чел. (13,3%), 13 чел. (86,7%)
Курение 42 чел. (87,5%) 6 чел. (40%) 2 чел. (13,3%)
Средние значения ИМТ (кг/м2) (т±т) 26,6±3,9 38,14±5,7 29,1±5,2
Гиперхолестеринемия (>5,5 ммоль/л) п (%) 21 чел. (43,75%) 9 чел. (60%) 9 чел. (60%)
Гипертриглицеридемия (>1,7 ммоль/л) п (%) 11 чел. (23%) 6 чел. (37,5%) 2 чел. (13%)
Артериальная гипертензия, п (%) 33 чел. (68,75%) 9 чел. (60%) 13 чел. (86,7%)
ао 12 чел. (25%) 6 чел. (40%) 5 чел. (33%)
Компенсированный сахарный диабет (%) 5 чел. (10,4%) 1 чел. (6,7%) 8 чел.(53,3%)
ременные проблемы диагностики в медицин
е
Таблица 2.
Относительный уровень (RQ) экспрессии генов NQO1, НМОХ1, GCLC
NQO1 НМОХ1 вас
р* р р
1 (МФА) 0.4331 0,00008 0.0007 0.00008 1.6316 0,77775
2 (ОКС) 0.0346 0.0023 0.0002 0,00299 0.5383 0,74255
3 (ФР) 0.0199 0.0124 0.0014 0,012267 2.4416 0,55245
Примечание: RQ — во сколько раз изменяется экспрессия целевых генов у исследуемых групп относительно контроля, взятого за 1; *р — уровень статистической значимости по сравнению с контролем
Рисунок 1.
Сравнение экспрессии гена NQO1 у пациентов с МФА, ИБС, осложненной ОКС и с наличием ФР при отсутствии клинической картины ССЗ, относительно контроля (контроль взят за 1); р — статистическая значимость показателя по сравнению с контролем
1
0,9 0,8 0,7 0,6 30,5 0,4 0,3 0,2 ОД 0
Р = о.сюооя
р- 0,023
Р р- 0,012
1 группа (МФА)
2 труппа (ОМС)
3 группа (ФР)
ступившими в отделение неотложной кардиологии с клиникой ИБС, осложненной ОКС, из них 8 человек с подъемом и 7 человек без подъема сегмента ST имели также наличие всех основных сердечно-сосудистых факторов риска — АГ, АО и ГХС, курение. В этой группе пациентов гемодинамически значимых стенозов сонных и периферических артерий выявлено не было. В третьей группе были пациенты со следующими ФР развития ССЗ: курение, дис-липидемия, гипертриглицеридемия, артериальная гипертензия, ожирение, компенсированный сахарный диабет, гиподинамия. До трех факторов риска развития ССЗ наблюдалось у 4 чел., больше трех факторов риска развития ССЗ — у 11 человек.
При анализе относительного уровня экспрессии исследуемых генов показано достоверное снижение активности генов NQO1 и НМОХ1, тогда как относительный уровень гена вас значимо не отличался между исследуемыми группами и относительно контроля (табл. 2).
Ген NQO1 кодирует NADP-оксидоредуктазу — фермент, катализирующий превращение потенциально токсичных хинонов в стабильные гидрохи-ноны, тем самым блокируя образование свободных радикалов семихинона и АФК [11], а его экспрессия индуцируется под действием окислительного стресса. Несмотря на то, что в литературе не найдено сведений об особенностях экспрессии гена NQO1 в ходе атерогенеза, все же было выяснено, что NQO1 может оказывать защитную функцию при развитии сердечно-сосудистой патологии. Так, по некоторым данным, у большинства людей с ИБС
и низкой активностью NQO1 обнаружены высокие уровни С-реактивного белка [12], который, как известно, является маркером обострения сердечнососудистого заболевания (ССЗ). Другими авторами было показано, что при фармакологической активации NQO1 происходило ослабление атерогенеза у экспериментальных животных [13]. Согласно нашим данным, у пациентов с разной степенью выраженности атеросклероза показатели экспрессии гена — регулятора NQO1 были существенно ниже относительно контрольных значений (табл. 2). При этом степень клинической и морфологической выраженности атеросклероза коррелировала с активностью экспрессии гена NQO1. Наиболее высокие показатели наблюдались в группе МФА, а наименее выраженные у пациентов без клинических проявлений, но с наличием ФР, таких как ожирение, дис-липидемия, курение и артериальная гипертензия (АГ) (р<0,05) (рис. 1).
Ген HMOX1 человека кодирует гемооксигеназу 1 (НО-1), которая, в свою очередь, участвует в окислении сильного прооксиданта — свободного гема и превращении его в антиоксидант билирубин. Так, с помощью этого гена реализуются два основных ци-топротективных механизма: во-первых, с помощью гемоксигеназы-1 уменьшается содержание свободного гема, который обладает цитотоксичностью и реакционной способностью; во-вторых, окись углерода и билирубин (два конечных продукта) являются ингибиторами воспалительного процесса и активных форм кислорода [14]. Имеются исследования, в которых говорится, что у ген-дефицитных
Рисунок 2.
Сравнение экспрессии гена НМОХ1 у пациентов с МФА, ИБС, осложненной ОКС и с наличием факторов риска развития ССЗ без клинических проявлений, относительно контроля (контроль взят за 1); р — статистическая значимость показателя по сравнению с контролем
RQ*10 1
по НМОХ1 мышей снижена защита против окислительного стресса, против воспаления при атеросклерозе [15]. Так же в другом исследовании [16] было показано, что снижение экспрессии НМОХ1 у человека также связано с повреждением клеток эндотелия и уязвимостью к окислительному стрессу. В исследовании [17] было показано, что с увеличением тяжести атеросклероза коронарных артерий наблюдалось снижение экспрессии НМОХ1. Эти данные сопоставимы с результатами, полученными в нашем исследовании, где регистрировалось достоверное снижение экспрессии гена НМОХ1 во всех группах пациентов, причем наиболее значительное было у больных с ОКС, что свидетельствует о возможном истощении экспрессионной активности гена НМОХ1, регулятора гемооксигеназы, связанным с напряжением АОС в процессе развития осложнений атеросклеротического процесса (рис. 2).
бас представляет собой ген, кодирующий тяжелую каталитическую субъединицу фермента глу-тамат-цистеин лигазы (бС£). Каталитическая субъединица обеспечивает каталитическую активность фермента [18]. АФК активируют транскрипцию гена бас для синтеза глутатиона (GSH), наиболее важного внутриклеточного поглотителя свободных радикалов, обеспечивающего механизм защиты при оксидативном стрессе [19]. В нашем исследовании экспрессия гена бас была резко снижена в группе больных с ОКС, что, по-видимому, свидетельствует о катастрофическом истощении системы GSH в условиях острого ишемического процесса в сосудах и миокарде. Причем в группах пациентов с «хроническими» формами атеросклероза, независимо от локализации и клинических проявлений, наблюдались более высокие, хотя и не достоверные, показатели экспрессии данного гена, что вероятно, связано с относительной устойчивостью системы GSH в условиях хронической ишемии без признаков острого повреждения и развития острой воспалительной реакции (табл. 2).
Заключение
Полученные результаты свидетельствовали о достоверном снижении уровня экспрессии гена
HMOX, регулирующего один из ключевых механизмов антиоксидантной трансформации свободного гема, во всех исследованных группах, независимо от выраженности атеросклеротического поражения сосудов. Однако наиболее существенное снижение наблюдалось у пациентов с острым коронарным синдромом, что, по-видимому, связано с выраженностью проявления окислительного стресса в условиях окклюзирующего повреждения миокарда.
Аналогичные результаты получены при исследовании экспрессии гена GCLC, отвечающего за синтез глутатиона, где также демонстрировалась тенденция к более выраженному снижению данного показателя в группе ИБС, осложненной острым коронарным синдромом.
Что же касается гена NQO1, то интерпретация его активности носит неоднозначный характер. Именно анализ экспрессии этого гена демонстрирует связь показателя с морфологической выраженностью атеросклеротического поражения сосудов. Так, наиболее высокие показатели наблюдались у пациентов с мультифокальным атеросклерозом, а наименьшие в группе с факторами риска, но без клинических проявлений.
Таким образом, исследование генов — регуляторов антиоксидантной системы представляется перспективным направлением и требует дальнейшего изучения. При этом, учитывая их определенную связь с различными проявлениями атеросклероза, оценка экспрессии генов, регулирующих разные эндогенные антиоксиданты, может иметь прогностическое значение и позволит решать вопросы профилактики и новых методов лечения.
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта №16-3400737.
ЛИТЕРАТУРА
1. Bonetti P.O., Lerman L.O., Lerman A. et al. Endothelial dysfunction. A marker of atherosclerotic risk // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. — 2003. — Vol. 23. — P. 168-175.
2. Widlansky M.E., Duffy S.J., Hamburg N.M., et al. Effects of black tea consumption on plasma catechins and markers of oxidative stress and inflammation in patients with coronary artery disease // Free Radic. Biol. Med. — 2005. — Vol. 38, №4. — P. 499-506.
3. Stocker R., Keaney J.F. Role of oxidative modifications in atherosclerosis // Physiological reviews. — 2004. — Т. 84, №4. —
C. 1381-1478.
4. Полумисков В.Ю., Михин В.П. и др. Антиоксиданты-цитопро-текторы в кардиологии // Кардиоваск. терап. и профил. — 2004. — T. 4, №6. — С. 66-74.
5. Ishida K., Morino T., Takagi K., Sukenaga Y. Nucleotide sequence of a human gene for gluta-thione peroxidase // Nucleic Acids Res. — 1987. — Vol. 15. — P. 10051.
6. Нагорная Н.В., Четверик Н.А. Оксидативный стресс: влияние на организм человека, методы оценки [Электронный ресурс] // Здоровье ребенка. — 2010. — №2. — www.mif-ua.com/archive/ issue-12604/article-12762/ (дата обращения: 01.02.2013).
7. Тодоров И.Н. Митохондрии: окислительный стресс и мутации митохондриальной ДНК в развитии патологий, процессе старения и апоптозе // Рос. хим. ж. — 2007. — Т. L1, №1. — С. 93-106.
8. Rahman I., Biswas S.K., Kode A. Oxidant and antioxidant balance in the airways and airway diseases // Eur. J. Pharmacol. — 2006. — Vol. 533, №1-3. — P. 222-239.
9. Babior B.M., Lambeth J.D., Nauseef W. The neutrophil NADPH oxidase // Arch. Biochem. Biophys. — 2002. — Vol. 397. — P. 342-344.
10. Livak K.J. Analysis of Relative Gene Expression Data Using Real-Time Quantitative PCR and the 2-AACt Method / K.J. Livak, T.D. Schmittgen // Methods. — 2001. — Vol. 25 (4). — P. 402-408.
11. Nakamura S. Polymorphism in glutamate-cysteine ligase modifier subunit gene is associated with impairment of nitric oxidemediated coronary vasomotor function / S. Nakamura, S. Sugiyama,
D. Fujioka, et al. // J. Am. Coll. Cardiol. — 2003. — Vol. 41. — P. 539-545.
12. Martin N.J. Polymorphisms in the NQO1, GSTT and GSTM genes are associated with coronary heart disease and biomarkers of oxidative stress / N.J. Martin, A.C. Collier, L.D. Bowen, et al. // Mutation Research. - 2009. - Vol. 674. - P. 93-100.
13. Lee S.O. Role of NAD(P)H: quinone oxidoreductase 1 on tumor necrosis factor-alpha-induced migration of human vascular smooth muscle cells 45 / S.O. Lee, Y.C. Chang, K. Whang, C.H. Kim, I.S. Lee // Cardiovascular Research. — 2007. — Vol. 76. — P. 331-339.
14. Otterbein L.E. Carbon monoxide has anti-inflammatory effects involving the mitogen-activated protein kinase pathway / L.E. Otterbein, F.H. Bach, J. Alam // Na. Med. — 2000. — Vol. 6. — P. 422-428.
15. Yet S.F. Absence of heme oxygenase-1 exacerbates atherosclerotic lesion formation and vascu-lar remodeling / S.F. Yet, M.D. Layne, X. Liu // FASEB J. — 2003. — Vol. 17. — P. 1759-1761.
16. Mechanisms of activation of the transcription factor Nrf2 by redox stressors, nutrient cues, and energy status and the pathways through which it attenuates degenerative disease / L.E. Tebay, H. Robertson, S.T. Durant et al. // Free Radic. Biol. Med. — 2015. — P. 108-146.
17. Apurinic/apyrimidinic endonuclease/redox factor-1 (APE1/ Ref-1) redox function negatively regulates NRF2 / M.L. Fishel, X. Wu, C.M. Devlin et al. // Journal of Biological Chemistry. — 2015. — P. 3057-3068.
18. Gipp, J. J. Structure of the human glutamate-L-cysteine ligase catalytic (GLCLC) subunit gene / J.J. Gipp, R.T. Mulcahy // Cytogenet. Cell Genet. — 2000. — Vol. 88. — P. 130-132.
19. Cho S. Protective role of glutathione synthesis in response to oxidized low-density lipoprotein in human vascular endothelial cells / S. Cho, M. Hazama, Y. Urata // Free Radic. Biol. Med. — 1999. — P. 589-602.
НОВОЕ В МЕДИЦИНЕ. ИНТЕРЕСНЫЕ ФАКТЫ
СОЗДАН ТЕСТ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСОВ В КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
Специалисты из Медицинской школы при Вашингтонском университете (Washington University School of Medicine) во главе с Грегори Сторчем (Gregory Storch) разработали уникальный диагностический инструмент. Он способен за секунды обнаружить возбудителя инфекции в крови пациента. Новый тест, получивший название ViroCap, можно использовать не только для подтверждения предварительного диагноза. Он находит и идентифицирует даже те вирусы, о присутствии которых в организме пациента ранее не было известно. Преимуществом также является высокая чувствительность - тест способен «увидеть» вирусы, присутствующие в крови в очень малой концентрации. В состав ViroCa входят фрагменты ДНК и РНК, присутствующие у вирусов из 34 различных семейств, поражающих как людей, так и животных. Для проверки эффективности нового диагностического инструмента ученые проанализировали образцы крови с помощью стандартных методов и с использованием своего изобретения. Новый тест помог выявить на 7 вирусов больше, чем традиционные лабораторные методы.
Источник: Medportal.ru
