CC BY
18
КРеати1н1я1ницуРпиЯ1и1онкошпиЯ
ИЗ НАУЧНЫХ ЛАБОРАТОРИЙ
71
ЭКСПРЕССИЯ МУЦИНОВ КАРЦИНОМАМИ ЖЕЛУДКА (СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ
ИССЛЕДОВАНИЕ)
Л.Е. Гаганов, Н.А. Корсакова
Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского (МОНИКИ)
Гаганов Леонид Евгеньевич, канд. мед. наук, старший научный сотрудник МОНИКИ, 129110, Россия, г. Москва, ул. Щепкина, д.61/2, тел.: +7903 629 4636, e-mail: leo-gann@mail.ru
Представлены результаты сравнительного иммуногистохимического изучения экспрессии муцинов в карциномах, желудка, развившихся в кардиальном, фундаль-ном, антральном отделах, и переходных зонах, вне зависимости от гистологического типа опухоли.
Ключевые слова: муцины, карциномы желудка, иммуногистохимическая экспрессия.
MUCINS EXPRESSION BY STOMACH CARCINOMAS (COMPARATIVE
IMMUNOHISTOLOGICAL ANALYSIS)
L.E. Gaganov, N.A. Korsakova
Vladimirsky Moscow Regional Clinical Scientific and Research Institute
The results of the comparative immunohistological research of the mucins expression in the stomach carcinomas developed in forestomachs, in fundic stomach parts, in antrums and in transition zones rtegardless histologocal tumor type are represented in the article. The key words: mucins, stomach carcinomas, immunohistological expression.
Введение
Муцины (МиС), экспрессируемые карциномами, являются важными диагностическими и прогностическими маркерами, а также отражают морфологические и функциональные особенности опухолей. МиС относят к высокомолекулярным гликопротеинам, подразделяют на трансмембранные и секреторные [2].
В норме слизистая оболочка желудка содержит МиС1, 5АС и 6 типов, осуществляющих функцию защиты, регуляции межклеточной адгезии, передачи сигналов, стимулирующих иммунные реакции [4]. Экспрессия МиС1 наблюдается в слизистых клетках покровно-ямочного эпителия антрального отдела, фокально - в эпителиоцитах желёз фундального и антрального отделов; МиС5АС интенсивно вырабатывается фовеолярным эпителием всех отделов; МиС6 продуцируется железами антрального типа, а также мукопептидными клетками шеечной зоны желез антрального и фундального отделов. В очагах кишечной метаплазии появляется экспрессия МиС2, в норме синтезируемого бокаловидными клетками кишечника.
В карциномах нарушаются как количественные, так и качественные показатели экспрессии MUC [8,10], что послужило основой для создания различных иммунофенотипических классификаций, однако результаты этих исследований фрагментарны [1,3,5,6,7].
Цель настоящего исследования - изучить имму-ногистохимическую (ИГХ) экспрессию MUC1, -5АС, -6 и -2 в карциномах, развившихся в кардиальном, фундальном и антральном отделах желудка и переходных зонах между ними вне зависимости от гистологического типа опухоли.
Материалы и методы
Исследован операционный материал 55 гаст-рэктомий пациентов 27-75 лет, из них 30 мужчин и 25 женщин. В кардии локализовалось 11 карцином, на границе кардии и тела (переходная зона I) - 8, теле - 9, на границе тела и антрального отдела (переходная зона II) - 10, в антральном отделе - 17. Стадийность: Tins - 1 наблюдение, I - 1, II - 14, III - 39. Гистологически: аденокарциномы - 12 наблюдений,
12
ИЗ НАУЧНЫХ ЛАБОРАТОРИЙ
ЙДЕативиаявйидиВпиягошнКВлппия
аденокарциномы с перстневидноклеточным компонентом - 22, перстневидноклеточный рак - 20, недифференцированный рак - 1.
ИГХ исследование проводили с использованием моноклональных антител к муцинам «Novocastra» и KIT «DAKO» (invision, Mouse/Rabbit). В качестве хромогена использовали диаминобензидин - ДАВ+ «DAKO». Ядра клеток докрашивали гематоксилином Майера. Инкубация с первичными антителами проводилась после обработки срезов в СВЧ режиме. Экспрессию оценивали по количеству иммуно-реактивных клеток на 100 учтенных при увеличении х400. По результатам сформированы 4 группы: I - слабая иммунореактивность (окрашено 6-25 опухолевых клеток), II - умеренная (26-50), III - высокая (более 50), IV - отсутствие ИГХ окрашивания или окрашено 1-5 клеток. В качестве условного контроля была использована внеопухолевая слизистая оболочка соответствующих отделов желудка. Статистическую обработку проводили посредством пакета программ «SigmaPlot 11.0» и «Microsoft Excel».
Результаты и обсуждение
Экспрессия MUC1, -5АС, -6 и -2 в большинстве опухолевых клеток была диффузной цитоплазма-тической, мембранно-цитоплазматической и апикальной (таблица 1). Количество карцином, экс-прессирующих MUC1 (52 наблюдения), достоверно больше карцином, экспрессирующих MUC5AC, -6, -2 (Хи-квадрат=37,645, при 3d / р<0,001). Количество карцином, экспрессирующих MUC5AC, -6, -2, примерно одинаково (28, 26 и 25 наблюдений соответственно, различия недостоверны). Наименьшее число карцином экспрессировали MUC2 (при сравнении с MUC5AC и -6 различия недостоверны Хи-квадрат=0,340, при 2d/ р=0,844).
Таблица 1
Распределение карцином, экспрессирующих муцины по анатомическим отделам желудка
Тип MUC Отделы и переходные зоны M s
антр-й зона II фунд-й зона I кардия
1 16 (n=17) 9 (n=10) 9 (n=9) 7 (n=8) 11 (n=11) 10,4 3
5АС 11 (n=17) 6 (n=10) 1 (n=9) 7 (n=8) 3 (n=11) 5,6 4
6 9 (n=17) 5 (n=10) 1 (n=9) 6 (n=8) 5 (n=11) 5,2 3
2 9 (n=17) 3 (n=10) 1 (n=9) 5 (n=8) 7 (n=11) 5,0 3
Хи-квад-рат при 3 df 8,607 7,673 24,000 2,011 13,162 - -
Р 0,035 0,053 <0,001 0,57 0,004 - -
Карциномы кардии и фундального отдела экс-прессировали МиС1 во всех случаях. Самая редкая экспрессия МиС5АС, -6 и -2 была в фундальном отделе (по 1 наблюдению). На границах отделов различия в частоте экспрессии были несущественными.
Распределение карцином по степени иммуно-реактивности представлено на рис. 1.
1 |И1ШНННЕ±]
В 5АС ЯШШ........"......
| 5 ИОН т * " " »
и--:--1—77--------1 _ I---------1 . I-п-1-1--1
Число наблюдении
О 5 ТО 15 20 26 30 35 40 45 50 55
Сщгэвт«, мчмунюрвдргмччлттр
слабая р: умеренная я высокая онет реакции
Рис. 1. Распределение карцином по степени иммунореактивности к муцинам
Изложенные различия недостоверны (Хи-квад-рат=12,345 при 6d/ р=0,055).
В таблице 2 представлены показатели иммунореактивности карцином к муцинам в зависимости от анатомического отдела (в каждом отделе для каждого из муцинов учтено по 1000 репрезентативных опухолевых клеток).
Таблица 2
Число иммунореактивных к муцинам клеток в карциномах различных анатомических
отделов желудка
Тип MUC Отделы и переходные зоны M s
антр-й зона II фунд-й зона I кардия
1* 401 551 524 546 6 4 4 СП 4 67
5AC** 222 229 7 354 116 186 131
6*** 121 135 6 293 125 136 102
2**** 102 19 2 106 151 76 63
т t-i? 5 § ^ 7 3 874,6 1732,8 449,9 454,3 - -
Р <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 - -
Наиболее высокие показатели наблюдались в карциномах экспрессирующих МиС1, иммунореактивность была наибольшей в переходной зоне II, наименьшей - в антральном отделе (при сравнении результатов между отделами различия достоверны (* Хи-квадрат=71, при 4d/ р<0,001)).
Иммунореактивность карцином к МиС5АС и МиС6 была наибольшей в переходной зоне I, наименьшей - в фундальном отделе (при сравнении результатов между отделами различия достоверны (** Хи-квадрат=452, при 4d/ р<0,001 и *** Хи-квадрат=356, при 4d/ р<0,001 соответственно).
Иммунореактивность карцином к МиС2 была наибольшей в кардии, отсутствовала в фундальном отделе (при сравнении результатов между отделами различия достоверны (**** Хи-квадрат=227, при 4d/ р<0,001).
КРедВН1я1Хицу5пиЯ1и1дНкоЯ1пиЯ
ИЗ НАУЧНЫХ ЛАБОРАТОРИЙ
73
Наиболее высока иммунореактивность в карциномах, развившихся на границах анатомических отделов желудка. Исключением явились карциномы, экспрессирующие MUC2, показатели, иммуноре-активности которых в переходных зонах I и II были ниже, чем в кардии и антральном отделе. Следует отметить, что частота и интенсивность экспрессии муцинов не зависела от стадии рака желудка по системе TNM.
Выводы
1. Экспрессия муцинов в карциномах разных отделов желудка неоднородна, что может иметь значение для прогноза течения заболевания.
2. Наиболее частым экспрессируемым муцином является MUC1, наиболее редким - MUC2.
3. Наибольшая иммунореактивность к муцинам наблюдалась в карциномах, развившихся на границах анатомических отделов.
4. Частота и интенсивность экспрессии муцинов не зависела от глубины инвазии опухоли.
5. Предполагается, что показатели функциональной активности опухолевых клеток по продукции муцинов в карциномах разных анатомических отделов желудка могут коррелировать с иммунофе-нотипом опухоли (определённый набор кератинов), степенью экспрессии молекул адгезии (Е-кадхерин) и пролиферативной активностью, что может иметь значение для прогноза течения заболевания.
Список литературы
1. DNA methylation profiles of differentiated-type gastric carcinomas with distinct mucin phenotypes / J.
Motoshita, N. Oue, H. Nakayama // Japanese Cancer Association. - 2005. - Vol. 96. - № 8. - P. 474-479.
2. Gastric Mucus Alterations Associated With Murine Helicobacter Infection / J.M. Schmitz, C.G. Durham, S.B. Ho, R.G. Lorenz // J. Histochem. Cytochem. -2009. - Vol. 57. - № 5. - P. 457-467.
3. Mucin s MUC1, MUC2, MUC5AC and MUC6 expression in the evaluation of differentiation and clinico-biological behavior of gastric carcinoma / J. Pinto-de-Sousa, L. David, A. Reis Celso et al. // Virchows Archiv. - 2002. - Vol. 440. - P. 304-310.
4. MUC1 inhibits cell proliferation by a beta-catenin-dependent mechanism / E.P. Lillehoj, W. Lu, T. Kiser et al. // Biochim Biophys Acta. - 2007. - Vol. 1773. - № 7. - P. 1028-1038.
5. Relationship between immunoexpression of mucin peptide cores MUC1 and MUC2 and Lauren's histologic subtypes of gastric carcinomas / V. Barresi, E. Vitarelli, M. Grosso et al. // Eur. J. Histochem. - 2006. - Vol. 50. - № 4. - P. 301-309.
5. The Clinicopathological and Prognostic Significance of MUC-1 Expression in Japanese Gastric Carcinomas: An Immunohistochemical Study of Tissue Microarrays / X-H. Li, H-C. Zheng, Z-G. Wang et al. // Anticancer Research. - 2008. - Vol. 28. - № 2A. - P. 1061-1067.
7. Transmembrane and secreted MUC1 probes show trafficking-dependent changes in O-glycan core profiles / K. Engelmann, C.L. Kinlough, S. Müller et al. // Glycobiology. - 2005. - Vol. 15. - № 11. - P. 11111124.
ПОЛУЧЕНИЕ КОМПЛЕКСА АЛЬФА-ЛАКТАЛЬБУМИНА
