CC BY
13
18. Pchelina, S. N. Screening for LRRK2 mutations in patients with Parkinson's disease in Russia: identification of a novel LRRK2 variant / S. N. Pchelina [et al] // Eur. J. Neurol. - 2008. - Vol. 15. -P. 692-696.
19. Sogorb, M. A. Enzymes involved in the detoxification of organophosphorus, carbamate and pyrethroid insecticides through hydrolysis / M. A. Sogorb, E. Vilanova // Toxicol Lett. - 2002. -Vol. 128. - P. 215-228.
20. Zintzaras, E. Association of paraoxonase 1 gene polymorphisms with risk of Parkinson's disease: a meta-analysis / E. Zintzaras, G. M. J. Hadjigeorgiou // J. Hum. Genet. - 2004. -Vol. 49. - P. 474-481.
резюме
С. Н. Пчелина, А. С. Дроздова, В. И. Мирошни-кова, Т. И. Родыгина, А. К. Емельянов, А. Ф. Яки-мовский, А. Л. Шварцман
Влияние генотипов и активности параоксоназы 1 (PON1) на возраст начала LRRKl-ассоциированной болезни Паркинсона
Мутации в гене обогащенной лейциновыми повторами ки-назы 2 (LRRK2) являются наиболее распространенной причиной развития наследственных форм болезни Паркинсона (БП). Широкий диапазон возраста начала LRRK2-ассоции-рованной БП предполагает модифицирующее влияние внешних и/или генетических факторов на проявления данной формы заболевания. Вполне вероятно, что факторы риска развития спорадических форм БП, связанные с повышенной чувствительностью организма к действию экзогенных ней-ротоксинов, могут оказывать влияние на возраст начала LRRK2-ассоциированной БП. В настоящем исследовании мы оценили влияние генотипов и активности параоксоназы 1 (PON1) на возраст начала заболевания у 13 пациентов с БП,
обусловленной мутациями в гене LRRK2 (8 с мутацией G2019S, 2 - V1613A и 1- R1441C). Отсутствие ассоциации генотипов или активности PON 1 с возрастом начала LRRK2-ассоциированной БП предполагает участие множественных факторов, модифицирующих течение заболевания, не обязательно связанных с PON1, и указывает на необходимость продолжения исследований на расширенной выборке пациентов с LRRK2-ассоциированной БП.
Ключевые слова: болезнь Паркинсона, LRRK2, PON1.
summary
S. N. Pchelina, A. S. Drosdova, V. I. Miroshnikova, T. I. Rodigina, A. K. Emelyanov, A. F. Yakimovskii, A. L. Schvartsman
Influence of genotypes and of paraoxonase 1 (PON1) activity on the age at onset of LRRK2-associated Parkinson's disease
Mutations in the Leucine Reach Repeat Kinase 2 (LRRK2) gene are the most frequent cause of familial Parkinson's disease (PD). High variability in age at the disease onset suggests that environmental and/or genetic factors may influence the course of LRRK2-associated PD. The risk factors for sporadic PD, associated with high sensitivity to neurotoxin poisoning, may be viewed as potential disease onset modifiers. We investigated the disease onset modulation by genotypes and activity of paraoxonase 1 (PON1) in 13 patients with LRRK2-associated PD (8 with G2019S, 2 -V1613A and 1- R1441C). Lack of association suggests that a lot of factors not always related to PON1 may contribute to phenotypic heterogeneity observed in LRRK2-associated PD and indicates the need for further studies with a larger number of LRRK2 mutation carriers.
Key words: Parkinson's disease, LRRK2, PON1.
© Коллектив авторов, 2011 г. УДК 616.248:616.214]:612.285.1
А. А. Бибкова, А. М. Халиль, К. А. Сысоев, В. И. Трофимов, Арег А. Тотолян
ЭКСПРЕССИЯ МРНК ХЕМО-КИНОВ И ХЕМОКИНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ В СЛИЗИСТОЙ НОСОГЛОТКИ БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВНУТРИКЛЕТОЧНОЙ ИНФЕКЦИИ
Кафедра госпитальной терапии, Научно-методический центр по молекулярной медицине Санкт-Петербургского государственного медицинского университета имени академика И. П. Павлова
введение
В последние годы особое внимание в генезе хронического воспалительного процесса у больных бронхи-
альной астмой (БА) уделяется персистирующей респираторной вирусной и внутриклеточной бактериальной инфекции, с которой связывают формирование стойкой гиперреактивности бронхов на фоне прогрессирующей иммунологической недостаточности. Известно, что около 50 % обострений БА у детей и взрослых связаны с риновирусной инфекцией. Обострению заболевания также способствуют вирусы гриппа А и В или их сочетание с парагриппозной и аденовирусной инфекцией. В последние годы в зарубежной литературе описывается участие респираторно-синцитиального (РС) вируса как в обострениях, так и в этиопатогенезе БА. По данным группы зарубежных авторов [10], в 2003 г. в структуре РС-вируса обнаружен О-пептид, который определяет развитие как инфекционного воспаления с участием ТЫ-клеток, так и аллергического, где ведущую роль играют ТИ2-клетки.
Увеличению частоты обострений БА на фоне ослабленного иммунитета способствует присоединение бактериальной флоры, в частности, микоплазменной и хламидийной инфекции, с развитием хронического воспалительного процесса дыхательных путей [6].
Общепринято считать, что в развитии воспаления при БА ведущую роль играют эозинофилы, концент-
рирующиеся в бронхиальном секрете и стенке бронхов больных лиц [5, 6]. Хемоаттрактантами для эози-нофилов являются высокоспецифичные хемокины эотаксин/ССЬ11 и эотаксин-2/ССЬ24, действующие через рецептор ССЯ3, находящийся на цитоплазмати-ческих мембранах. В последнее время, учитывая большое значение инфекционного фактора как в развитии обострений, так и в этиопатогенезе БА, уделяется внимание и другим клеткам воспаления, в частности, нейтро-филам. По данным зарубежных [10] и отечественных [1] авторов, нейтрофильное воспаление может быть ведущим у части больных БА. Специфичным хемоаттрак-тантом для нейтрофилов является интерлейкин-8 (1Ь-8), который осуществляет свое действие через рецепторы СХСЯ1, СХСЯ2. Вопрос об участии нейтрофилов в формировании гиперреактивности дыхательных путей в настоящее время остается открытым.
По данным литературы, известно около 50 хемоки-нов и 20 рецепторов к ним [7]. Целью работы явилось изучение того узкого спектра хемокинов и их рецепторов, который позволит характеризовать как аллергическое, так и инфекционное воспаление при наличии инфекционного фактора у больных в период обострения БА.
материал и методы исследования
В исследование были включены 70 пациентов, из них 39 женщин и 31 мужчина в возрасте от 17 до 68 лет, легкой и средней степеней тяжести. 66 (94 %) больных были обследованы в фазу обострения БА и только 4 (6 %) больных - в фазу ремиссии. У 54 (82 %) из 66 пациентов обострение развивалось после перенесенного острого респираторного заболевания (ОРЗ), причем у 42 (78 %) из них имели место такие симптомы, как малопродуктивный кашель со слизисто-гной-ной мокротой у 27 (64 %) пациентов, першение в горле -у 6 (14 %), субфебрильная температура - у 4 (10 %), явления ринита - у 2 (5 %), сочетание малопродуктивного кашля со слизисто-гнойной мокротой с субфеб-рильной лихорадкой - у 3 (7 %). У остальных 12 (22 %) больных подобных явлений не наблюдалось. Пациенты с легким течением БА вне обострения обследовались амбулаторно. Пациенты с обострением средне-тяжелого течения БА были обследованы в условиях клиники госпитальной терапии СПбГМУ им. акад. И. П. Павлова.
У всех пациентов был собран анамнез заболевания, аллергологический анамнез, выполнялся клинический анализ крови, при наличии мокроты - цитологический анализ. Проводилось также исследование функции внешнего дыхания, определялись газы крови и кислотно-основное состояние (КОС). На основании анамнеза, клинических данных, показателей спирографии устанавливали степень тяжести БА по общепринятым критериям [2].
В нашем исследовании всем пациентам в осенне-зимне-весенний период дополнительно выполнялся
браш-биоптат слизистой носоглотки на наличие инфекционных агентов (вируса парагриппа, PC-вируса, аденовируса, M. pneumoniae, Ch. Psitaci) и на мРНК-хе-мокинов (CCL11/эотаксина, ССЬ24/эотаксина-2, CXCL8/IL-8, CCL5/RANTES, CCL3/MIP-1a, CCL4/ MIP-1ß) и их рецепторов (CCR1, CCR3, CCR5, CXCR1, CXCR2) методом ОТ-ПЦР. Такой выбор хемокинов и их рецепторов был сделан для оценки системы хемо-кинов в комплексе.
До поступления в стационар большинству пациентов (66, или 94 %) проводилось лечение базисными препаратами - ингаляционными глюкокортикостероида-ми (ИГКС) в сочетании с Ь2-агонистами короткого или пролонгированного действия или комбинацией ИГКС и Ь2-агонистов пролонгированного действия, и только 4 (6 %) пациента с легкой степенью тяжести вне обострения получали монотерапию бронхолитиками. В условиях стационара всем больным с обострением БА средней степени тяжестью проводилась терапия системными ГКС парентерально.
Контрольную группу составили 17 практически здоровых лиц, не имеющих признаков ОРЗ (лихорадки, катаральных явлений) и аллергических заболеваний в анамнезе.
Биоптат получали по общепринятой методике [4]. Вращательными движениями по нижнему носовому ходу поочередно в обе ноздри вводили цитощетку «Юнона» в носоглотку. Одновременно крылья носа прижимали к цитощетке и носовой перегородке для более плотного контакта со слизистой оболочкой.
В пластиковую пробирку типа «Эппендорф», содержащую 0,1м р-р ЭДТА 0,5 мл, вносили браш-биоптат слизистой носоглотки, затем добавляли 300 мкл лизи-рующего раствора D и оставляли на 5 мин в термостате при температуре 65 оС, затем добавляли 400 мкл изопропилового спирта и центрифугировали пробирку при 13 000 об./мин в течение 5 мин. Затем убирали надосадочную жидкость, добавляли к осадку 500 мкл этанола и снова при тех же условиях центрифугировали. Удаляли надосадок, после чего добавляли ацетон 500 мкл, порядок повторялся. После удаления надоса-дочной жидкости осадок высушивался при температуре 65 оС в течение 5 мин и растворяли его в ДЭПК-Н2О. Обратную транскрипцию проводили с использованием набора «Реверта» («Амплисенс», Москва) согласно инструкции производителя. Следующим этапом являлась постановка ПЦР со специфическими праймерами. Режим ПЦР: денатурация ДНК при 95 оС - 4 мин, 30 циклов амплификации (95 оС - 30 с, 60оС - 30 с, 72 оС - 30 с), элонгация 72 оС - 7 мин. В качестве референс-гена использовали ß-актин. Визуализацию полученных ПЦР-продуктов осуществляли в 1,5 %-м агарозном геле, окрашенном бромистым этидием, при УФ-освещении на трансиллюминаторе «Волна» (Россия). Полуколичественную оценку проводили с помощью программы Gel-Pro, принимая за 100 % интенсивность флюоресценции ß-актина. Ста-
тистическая обработка осуществлялась с помощью пакета SPSS (версия 13.0). Использовали следующие статистические методы: непараметрический анализ двух переменных (критерий Манна-Уилкоксона-Уитни), корреляционный анализ (критерий Спирмена), графическое представление данных (гистограммы). Достоверными считались различия между группами при р<0,05.
результаты исследования
и их обсуждение
В ходе исследования было показано, что в слизистой оболочке носоглотки у здоровых добровольцев эк-спрессируются все гены хемокинов и их рецепторов, включенные в исследование. Уровни мРНК эотакси-на, эотаксина-2, MIP-1a, MIP-10 составляли 1 %, а IL-8 и RANTES - 10 % (в процентном соотношении к b-актину). Уровни экспрессии генов рецепторов как для семейства СС - CCR1, CCR3, CCR5, так и для CXC -CXCR1, CXCR2, составляли 100 %.
В группе больных лиц (70 человек) также экспрес-сировались гены всех хемокинов и их рецепторов. Уровни мРНК эотаксина, эотаксина-2, IL-8, RANTES, MIP-1a, MIP-1P составляли 18 %, а уровни рецепторов - 90 %. При сравнении показателей группы больных БА со здоровыми лицами были выявлены достоверно повышенные уровни мРНК генов эотаксина,
Экспрессия мРНК хемокинов и их рецепторов в слизистой оболочке носоглотки у больных БА в зависимости от наличия инфекции: * - достоверность отличий при р<0,05
эотаксина-2, MIP-1a, MIP-10 и CXCR1 (р=0,041; 0,034; 0,0005; 0,002; 0,004 соответственно).
В зависимости от инфекционного компонента все пациенты были разделены на 2 подгруппы. Первую подгруппу составили 16 (23 %) больных с выявленной инфекцией (M. Pneumoniae встречалась у 5 пациентов, Ch. Psitaci - у 4, вирус парагриппа - у 1, РС-вирус -у 1, аденовирус - у 1, сочетание M. Pneumoniae и Ch. Psitaci - у 2, сочетание Ch. Psitaci и аденовируса -у 1, сочетание M. Pneumoniae и РС-вируса - у 1).
Во вторую подгруппу вошли 54 (77 %) пациента с невыявленной инфекцией. Достоверных различий показателей между подгруппами не было получено. Однако у пациентов с выявленной инфекцией по сравнению с контрольной группой были выявлены достоверно повышенные мРНК для MIP-1 a и CXCR1 (р=0,02; 0,003 соответственно) и сниженные мРНК для CCR1 (р=0,003).
При проведении корреляционного анализа зависимости показателей выраженности бронхиальной обструкции от уровня синтеза некоторых хемокинов при наличии инфекции выявлено не было.
Имеются доказательства, что респираторная вирусная инфекция вызывает обострение БА, а у детей раннего возраста клинически проявляется приступами удушья, которые могут явиться дебютом заболевания БА. W. W. Busse et al. (2010) к этим вирусам относят респираторный синцитиальный вирус, человеческий риновирус, метапневмовирус, парагрипп и коронави-рус [11]. К тому же длительная персистенция РС-виру-са увеличивает вероятность развития бронхиолита у детей.
Хемокины представляют собой группу биологически активных пептидов, которые регулируют миграцию лейкоцитов, а также способствуют активации этих клеток, в частности, участвуют в высвобождении гранул с биологически активными веществами [9]. Хемокины вносят свой вклад в формирование иммунного ответа во время вирусной инфекции [10].
Среди всех хемокинов RANTES наиболее изучен в активации иммунного ответа при вирусной инфекции. По данным ряда зарубежных авторов, персистенция РС-ви-руса и аденовирусной инфекции в эпителиальных клетках бронхов приводит к повышению экспрессии RANTES [9, 10].
MIP-1a, так же как и RANTES, почти всегда связан с внутриклеточными инфекциями. Было обнаружено, что экспрессия RANTES статистически коррелировала с активностью воспалительного процесса у пациентов с хронической внутриклеточной инфекцией [8].
В нашем исследовании у пациентов с выявленной инфекцией по сравнению с контрольной группой были достоверно повышены мРНК MIP-1a в 25 раз и CXCR1 в 2,5 раза и снижены мРНК CCR1 в 1,3 раза (р=0,02; 0,003; 0,003 соответственно), что подтверждает литературные данные об экспрессии про-
воспалительных хемокинов в ответ на инфекционный фактор.
В настоящее время изучается протекторная роль рецепторов при наличии инфекционного фактора. В экспериментальных исследованиях N. S. Louise et al. (2003) показали, что у мышей с недостаточностью рецептора CCR1 повышались титры антител к вирусной инфекции нижних дыхательных путей, которые коррелировали со случаями повышенной смертности. А при снижении экспрессии CCR5 у мышей повышалась инфильтрация макрофагами в слизистой бронхов, увеличение смертности, но титры антител к вирусной инфекции не изменялись по сравнению с контрольными мышами. Таким образом, в экспериментах показана протекторная роль рецепторов CCR1 и CCR5 в присутствии инфекционного фактора [10].
Снижение мРНК CCR1 в 1,3 раза у больных БА с выявленной инфекцией по сравнению с контрольной группой в нашем исследовании может свидетельствовать о снижении протективной барьерной функции слизистой оболочки носоглотки.
Что касается повышенного уровня мРНК MIP-1a, полученные нами результаты подтверждают литературные данные об участии этого хемокина в инфекционном воспалении при внутриклеточных инфекциях [10]. Наличие повышенного уровня этого хемокина, по нашим предположениям, может косвенно подтверждать присутствие инфекционного возбудителя в исследуемом материале, в нашем случае - слизистой оболочке носоглотки.
Повышение мРНК CXCR1-рецептора к IL-8 также свидетельствует о присутствии инфекционных агентов. мРНК IL-8 у больных БА с выявленной инфекцией также была повышена в 1,2 раза по сравнению с контрольной группой, но статистически это повышение не было достоверно. По данным B. Moser et al. (2004), IL-8 вызывает хемотаксис нейтрофилов в очаг воспаления и экспрессируется при многих вирусных инфекциях [8]. Фактически нейтрофилы играют непосредственную роль в иммунной защите, требующей их раннего прибытия в очаг воспаления, создавая идеальные условия для контроля над привлечением других клеток в очаг [7].
По данным С. В. Рязанцева и А. В. Полевщикова [3], состояние верхних дыхательных путей при БА отражает также состояние бронхолегочного аппарата. Исходя из этого, нами предположено, что количественное определение мРНК хемокинов и их рецепторов в слизистой оболочке носоглотки может являться дополнительным методом диагностики, определяющим степень активности воспаления, в том числе и в бронхо-легочном аппарате.
Экспрессия мРН хемокинов и их рецепторов в слизистой оболочке носоглотки у больных БА в зависимости от наличия инфекции
Хемокины Группы обследуемых Р
Больные БА с выявленной инфекцией Больные БА с не выявленной инфекцией Здоровые лица
Эотаксин 3,5(0-67) 6(0-59) 0,4(0-6)
Эотаксин-2 4(0-77) 3(0-130) 0,4(0-20)
IL-8 11(0-48) 6(0-113) 9(0-52)
MIP-1 12,5(0-31) 14,5(0-73) 0,5(0-36) Р(1-3)=0,02
MIP-1 5,5(0-34) 10(0-58) 0,2(0-20)
RANTES 3,5(0-71) 10(0-61) 6(0-98)
CCR1 80(0-134) 81,5(13-167) 126(80-225) Р(1-3)=0,003
CCR3 99,5(16-125) 80,5(50-162) 103(36-122)
CCR5 85(26-129) 73,5(20-137) 97(18-211)
CXCR1 93(35-127) 77,5(30-200) 36(18-177) Р(1-3)=0,003
CXCR2 72,5(31-114) 75,5(30-240) 90(41-144)
литература
1. Волкова, Л. И. Диагностические возможности морфологического и цитологического исследования биоптатов слизистой бронхов при бранхиальной астме и хроническом бронхите / Л. И. Волкова, А. А. Будкова, В. И. Кустова // Сибир. мед. журн. - Томск,
2000. - № 3. - С. 42-47.
2. Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы (GINA) / пер. с англ. - М.: Атмосфера, 2008. - 160 с.
3. Рязанцев, С. В. Иммунологические механизмы аллергических реакций / С. В. Рязанцев, А. В. Полевщиков // Аллергология. Т. 2: Общая аллергология. - СПб.: Нордмед-издат,
2001. - С. 423-459.
4. Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории: метод. указ. / утв. главным гос. санитарным врачом РФ. - 2005.
5. Трофимов, В. И. Руководство по диагностике, лечению и профилактике бронхиальной астмы / В. И. Трофимов. - М., 2005.
6. Федосеев, Г. Б. Бронхиальная астма / Г. Б. Федосеев, В. И. Трофимов. - СПб.: Нордмед-издат, 2006.
7. Фрейдлин, И. С. Иммунологические механизмы аллергических реакций / И. С. Фрейдлин, А. А. Тотолян // Аллергология. Т. 2: Общая аллергология. - СПб.: Нордмед-издат, 2001. - С. 169-382.
8. Bernhard Moser. Chemokines : multiple levels of leukocyte migration control / Bernhard Moser, Marlen Wolf // TRENDS in immunology. - 2004. - № 1. - Р. 25-32.
9. Federica Sallusto. The role of chemokine receptors in primary, effector and memory immune responses / Federica Sallusto, R. Charles Mackay, Antonio Lanzavecchia //Annu. Rev. Immunol. -2000. - № 18. - Р. 593-620.
10. Louise, N. Expression and function of chemokines during viral infections: from molecular mechanisms to in vivo function / N. Louise N. Sorensen, R. Soren // Journal of Leukocyte Biology. -2003. - № 1. - Р. 331-343.
11. William, W. Role of respiratori infections in asthma and asthma exacerbations / W. William [et al] // URL: www.thelancet.com. -2010 - № 376. - Р. 826-834.
резюме
Д. Д. Бибкова, А. М. Халиль, К. А. Сысоев, В. И. Трофимов, Арег А. Тотолян
Экспрессия мРНК хемокинов и хемокиновых рецепторов в слизистой носоглотки больных бронхиальной астмой в зависимости от внутриклеточной инфекции
В исследование были включены 70 больных БА, распределенные на подгруппы в зависимости от внутриклеточной инфекции,
выявленной методом ОТ-ПЦР. Всем больным БА определяли мРНК хемокинов и их рецепторов в браш-биоптате слизистой оболочки носоглотки. Нами показано наличие экспрессии провоспалительных хемокинов, характеризующих инфекционное воспаление в слизистой носоглотки у больных БА и предположено, что по уровню мРНК хемокинов и их рецепторов в слизистой оболочке носоглотки можно оценить степень активности воспаления, в том числе и в бронхолегочном аппарате.
Ключевые слова: хемокины, хемокиновые рецепторы, иммунный ответ, внутриклеточная инфекция.
боммаяу
Д. Д. БШкооа, А. М. СНаШ, К. А. Бузово, V. I. Тго^шоо, А. А. То01уап
Expression of mRNA of chemokins and of their receptors in the nasopharynx mucosa of bronchial asthma patients and its dependence on the intracellular infection
The study was carried out in 70 bronchial asthma (BA) patients who were divided into several subgroups according to the intracellular infection. The level of mRNA of chemokins and of their receptors was measured in the brush-biopsy from the nasal mucosa of all BA patients. The analysis showed presence of proinflammatory chemokin expression characteristic of infectious inflammation in the nasal mucosa in BA patients. The level of mRNA of chemokins and of their receptors in the nasal mucosa may prove to be helpful in assessment of inflammation activity in the bronchopulmonary apparatus as well.
Key words: chemokines, chemokine receptors, immune response, intracellular infection.
© А. Г. Козырев, Е. А. Суркова, 2011 г. УДК 616.248:611.018.74
А. Г. Козырев, Е. А. Суркова
МОЛЕКУЛЫ АДГЕЗИИ СОСУДИСТОГО ЭНДОТЕЛИЯ 1 ТИПА У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ
НИИ пульмонологии , Научно-методический центр по молекулярной медицине Санкт-Петербургского государственного медицинского университета имени академика И. П. Павлова
Молекулы адгезии сосудистого эндотелия 1 типа (vascular cellular adhesion molecule-1, VCAM-1) -трансмембранные гликопротеины из суперсемейства иммуноглобулинов, которые экспрессируются на эндотелии при развитии воспалительных процессов. Основной функцией VCAM-1 является опосредование адгезии лимфоцитов, моноцитов и эозинофилов к эндотелию с последующей их миграцией из крови в очаг воспаления [8]. Уровень растворимых VCAM-1 (sVCAM-1) в сыворотке крови повышен при ряде воспалительных заболеваний, одним из которых является бронхиальная астма (БА).
Цель работы - изучить содержание sVCAM-1 у больных БА, в том числе с учетом степени тяжести заболевания, на этапе обострения болезни и после курса лечения.
материал и методы исследования
Обследованы 82 больных БА, обратившихся к пульмонологу в связи с ухудшением течения заболевания. Среди пациентов, средний возраст которых составил 53,2±0,8 года, было 26 мужчин и 66 женщин. В 6 случаях была диагностирована БА легкой степени тяжести (БАЛТ), в 57 - средней степени тяжести (БАСТ),
в 19 - тяжелой степени тяжести (БАТТ). У 20 больных БА была выявлена гипертоническая болезнь (ГБ) I стадии, у 20 - ГБ II стадии. Обследовались амбулаторные пациенты без клинически выраженных/перенесенных осложнений сердечно-сосудистых заболеваний (ишемическая болезнь сердца, инсульты) и поражений почек, никогда не курившие, с нормальным уровнем глюкозы натощак в сыворотке. Контрольную группу составили 9 здоровых лиц (2 мужчин и 7 женщин, средний возраст - 57,1±1,7 года), без признаков респираторных и сердечно-сосудистых заболеваний. До участия в исследовании у каждого пациента было получено информированное согласие.
Пациенты обследовались дважды - до и после лечения обострения БА (промежуток между первичным и повторным обследованиями составлял от 1,5 до 2 месяцев). Забор крови осуществлялся в утреннее время (845-900), натощак. За 6 часов до забора крови пациенты воздерживались от ингаляций Р2-агонистов короткого действия, за 24 часа - Р2-агонистов пролонгированного действия. Содержание sVCAM-1 анализировалось в сыворотке методом иммуноферментно-го анализа с помощью тест-систем Bender MedSystems GmbH (Австрия). Показатели оптической плотности образцов измеряли на фотометре «ELM-3000» (DRG, США) при 450 нм с длиной волны сравнения 620 нм. Сатурация кислорода в крови (SaO2) оценивалась с помощью пульсоксиметрии. Среди других характеристик определялось содержание холестерина и его фракций в сыворотке с расчетом коэффициента ате-рогенности.
Терапия БА включала в себя ингаляционные глю-кокортикостероиды (ИГКС) и Р2-агонисты, в том числе короткого действия и пролонгированные; системные кортикостероиды не использовались.
Статистическую обработку полученных данных проводили общепринятыми методами с использованием программы STATISTICA 6,0. Математическое обеспечение работы включало расчет среднего ариф-
