CC BY
42
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
EXPERIMENTAL INVESTIGATIONS
© Коллектив авторов, 2001 УДК 006.04:575.117.2
С. С. Шуманов, А. А. Шишкин, О. В. Губина, И. Ю. Давыдова,
Е. А. Мусаткина, В. К. Кобзева, А. А. Ставровская,
А. Ф. Карамышева
ЭКСПРЕССИЯ мРНК ФАКТОРА РОСТА ЭНДОТЕЛИЯ СОСУДОВ УЕвЕс и ДВУХ ИЗОФОРМ ЕГО РЕЦЕПТОРА УЕОИО В НОРМЕ И ОПУХОЛЯХ ЧЕЛОВЕКА
НИИ канцерогенеза, НИИ клинической онкологии
Одним из основных молекулярных механизмов, стимулирующих образование новых кровеносных сосудов в опухоли, является взаимодействие факторов роста эндотелия с их рецепторами, локализованными на мембранах клеток эндотелия [5, 15]. Семейство факторов роста эндотелия сосудов (УЕвБ) включает в настоящее время 5 ростовых факторов: \TEGF а, Ъ, с, ¿1 и плацентарный фактор роста РШР [15]. Известны три рецептора, взаимодействующие с ростовыми факторами семейства УЕвЕ, это - УЕОРЬи (ИЯ1), УЕвЕК2 (ЕШ/КОЯ) и УЕСЕЛЗ (ЕПГ4) [15]. Фактор роста \TSGFa связывается с рецепторами УЕСЕШ и \TiGFR2, РЮЕ и \TiGFb являются лигандами УЕОРШ, а УЕвЕс и \TiGFd могут связываться с рецепторами УЕОЕЫ2 и МШЕКЗ.
В многочисленных исследованиях было показано, что экспрессия гена ростового фактора УЕвРа в целом раде опухолей повышена, что является плохим прогностическим признаком [6,7]. Было показано, что подавление действия УЕСРа на клетки приводит в экспериментах на мышах к подавлению неоан-гиогенеза и угнетению роста опухолей [9,17]. Роль других членов семейства УЕСЖ в опухолевом росте исследована мало.
Целью данной работы является исследование роли фактора роста эндотелия сосудов УЕвРс и его рецептора \TEGFR3 (РНГ4) в процессе развития злокачественных новообразований и сравнение роли этой системы с ролью УЕСРа и его рецепторов. Ранее при исследовании заболеваний щитовидной железы мы нашли, что в злокачественных новообразованиях этого органа экспрессия мРНК рецептора УЕбРЮ ниже, чем в аденомах и зобных изменениях. Несколько снижена также и экспрессия гена ростового фактора УЕвЕс [13]. В данной работе мы предполагали сравнить экспрессию мРНК генов УЕвРс и двух изоформ его рецептора \TDGFR3 при раке щитовидной железы, молочной железы и шейки матки с их экспрессией
S.S.Shushanov, A.A.Shishkin, O.VGubina, I.Yu.Davydova, EA.Musatkina, VK.Kobzeva, AA.Stavrovskaya, A.F.Karamysheva
EXPRESSION OF mRNA OF VASCULAR ENDOTHELIAL GROWTH FACTOR VAGFc AND TWO ISOFORMS OF ITS RECEPTOR VEGFR3 IN NORMAL TISSUE AND TUMORS OF HUMANS
Institute of Carcinogenesis, Institute of Clinical Oncology
Interaction of endothelial growth factors with their receptors on endothelial cell membranes is an important stimulation mechanism for generation of new vessels in tumors [5,15]. The family of vascular endothelial growth factors (VEGF) presently includes 5 growth factors, i.e. VEGF a, b, c, d and a placental growth factor PIGF [15]. There are 3 VEGF receptors known by now, such as VEGFR1 (FLT1), VEGFR2 (Flkl/KDR) and
FLT4s
FLT4I
VEGFc,
(52M
Рис. 1. Экспрессия изоформ рецептора FLT4 и ростового фактора VEGFc в норме и в аденокарциномах щитовидной железы человека.
1—3 — нормальные ткани щитовидной железы;
4—11 — аденокарциномы.
Здесь и на рис. 2, 3: К+ — положительный контроль: К— отрицательный контроль.
Fig. 1. Expression of receptor FL.T4 isoforms and growth factor VEGFc in normal human thyroid tissue and thyroid adenocarcinoma.
1 -3, normal thyroid tissues; 4-11, thyroid adenocarcinoma. Here and in figs.2,3: C+ is positive control, C- is negative control.
K+K" 1234 56789 10 11
K+K" 123456789 10 11
K+K" 123456789 10 11
K' 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
в нормальных тканях этих органов. Рецептор УЕОГИЗ (РЕГ4) представлен в клетках двумя изоформами, короткой (ИЗМв) и длинной (РЬТ41), и функции этих изоформ в клетке, очевидно, различаются [2, 3,10].
Материалы и методы. Исследованные больные. В работе исследовано 8 образцов аденокарцином щитовидной железы различного гистогенеза (3 — из С-клеток и 5 — из А-клеток) и 3 образца окружающей опухоль нормальной ткани (рис. X). Все образцы были взяты от разных больных. Проанализировано 7 образцов биопсий рака молочной железы человека и 4 образца окружающей опухоль нормальной ткани. В одной из опухолей был гистологически выявлен дольковый инфильтративный рак, который дал метастазы в шейно-надклю-чичные лимфоузлы (рис. 2, № 5), а в остальных случаях — протоковый инфильтративный рак. Исследованы 7 случаев плоскоклеточного рака шейки матки человека, причем у одной из больных (рис. 3, № 13) при гистохимическом исследовании были обнаружены метастазы. У каждой из этих больных была исследована также и окружающая опухоль гистологически нормальная ткань. Дополнительно исследован материал еще от 5 больных плоскоклеточным раком шейки матки. Исследованные образцы ткани представляли собой послеоперационный материал.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) с обратной транскрипцией. Полуколиче-ственный метод (ПЦР) с обратной транскрипцией в нашей модификации описан ранее [1]. Для проведения реакции были использованы продукты реакции обратной транскрипции и праймеры, указанные в табл. 1.
Результаты и обсуждение. Исследование экспрессии мРНК гена УЕОРс и двух изоформ его рецептора в норме и в аденокарциномах щитовидной железы человека. С помощью метода ПЦР с обратной транскрипцией была исследована экспрессия мРНК гена УЕвРс и двух изоформ его рецептора (РЦМй и РЕГ41) в 8 образцах аденокарцином щитовидной железы различного гистогенеза: из С-клеток (рис. 1, № 4—6) и А-клеток (рис. 1, № 7—11), а также в образцах нормальной тиреоидной ткани (рис. 1, № \— 3). Обе изоформы рецептора и ростовой фактор экспрессировались во всех образцах нормальной ткани в достаточно высокой степени (см. рис. 1, № 1—3). В образцах опухолевой ткани мРНК РЬТ48 обнаружена в 3 из 8 случаев (см. рис. 1, № 5,8,10), а мРНК РЕГ41 — лишь в одном случае, и уровень ее экспрессии был очень низким (см. рис. 1, № 8). Экспрессия мРНК гена УЕвРс в опухолях отмечена в 5 из 8 случаев, при этом в двух случаях она была очень слабой (см. рис. 1). Во всех трех образцах нормальной ткани щитовидной железы отмечена коэкс-прессия мРНК гена УЕвРс и двух изоформ его рецептора, тогда как в аденокарциномах коэкспрессия этих генов найдена лишь в 3 из 8 случаев (см. рис. 1). Таким образом, экспрессия обеих форм рецептора УЕ6Р113, так же, как и ростового фактора УЕОБс в аденокарциномах щитовидной железы, обнаруживается с более низкой частотой, чем в нормальной ткани.
Исследование экспрессии мРЫК гена УЕСРс и двух изоформ его рецептора в нормальной и опухолевой ткани молочной железы человека. В нормальной ткани молочной железы мРНК УЕвРс, и Р1Т41 была обнаружена во всех 4
случаях. Уровень экспрессии короткой формы рецептора в двух случаях был достаточно низким (рис. 2, № 1, 2), в одном из этих же случаев был низок и уровень экспрессии УЕбРс, тогда как значительных различий в экспрессии длинной формы рецептора не наблюдалось. В опухолях молочной железы мРНК ИЯМв экспрессировалась в 5 из 7 случаев, причем уровень экспрессии в большинстве случаев был незначительным (рис. 2, № 5—11). Таким образом, существенных различий в уровне экспрессии мРНК ИМэ при раке молочной железы по сравнению со степенью ее экспрессии в нормальной ткани обнаружено не было.
FL.T4S
FLT4I
VEGFc
р2М
К+К" 1234 56 7 89 10 11
К+ К' 123456789 10 11
К+ К" 123456789 10 11
К" 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Рис. 2. Экспрессия изоформ рецептора FLT4 и ростового фактора VEGFc в норме и при раке молочной железы человека.
1 —4—нормальные ткани молочной железы; 5—дольковый инфильтративный рак; 6—11 — протоковый инфильтративный рак. Fig.2. Expression of receptor FLT4 isoforms and growth factor VEGFc in normal human breast tissue and breast carcinoma.
1 -3, normal breast tissues; 5, lobular infiltrative carcinoma; 6-11, ductal infiltrative carcinoma.
VEGFR3 (FLT4) [15]. The VEGFa binds to VEGFR1 and VEGFR2, PIGF and VEGFb are ligands for VEGFR1, while VEGFc and VEGFd may bind to VEGFR2 and VEGFR3.
Many investigations demonstrated elevated expression of VEGFa gene in several tumors which was thought a poor prognosis factor [6,7]. Inhibition of VEGFa action on cells in mice led to inhibition of neoangiogenesis and tumor growth [9,17]. The role of other factors from the VEGF family was studied insufficiently.
The purpose of this study was to evaluate the role of the endothelial growth factor VEGFc and its receptor VEGFR3 (FLT4) in human cancer development and to compare the roles of the system in question and VEGFa with its receptors. We found
FLT4s
FLT4I
VEGFc
P2M
Рис. 3. Экспрессия изоформ рецептора FLT4 и ростового фактора VEGFc в норме и при раке шейки матки.
Нечетные номера — нормальная ткань, четные — рак шейки матки (материал взят от той же больной).
Fig.3. Expression of receptor FLT4 isoforms and growth factor VEGFc in normal human cervical tissue and cervical carcinoma.
Odd numbers demonstrate normal tissue, even numbers demonstrate cervical carcinoma from the same patient.
Таблица 1 Table 1
Праймеры, использованные для изучения экспрессии мРНК исследуемых генов Primers used to study expression of gene mRNA
Исследуемый ген Наименование праймера Нуклеотидная последовательность праймера Размер фрагмента кДНК, п. о.
VEGFc VEGFc-F VEGFc-R 5--CAGTTACGGTCTGTGTCCAGTGTAG-3' 5'-GGACACACATGGAGGTTTAAAGAAG-3' 300
FLT4* FG-4 FG-5 5--CCCACGCAGACATCAAGACG-3' 5'-TGCAGAACTCCACGATCACC-3’ 381*
FLT4s CTER1 SHORT2 5'-TCCTCCAGGATGAAGACATTTGAG-3' 5'-TGCTCCACCAGCTTCTTG-3' 420
FLT41 CTER1 CTER2 5'-TCCTCCAGGATGAAGACATTTGAG-3’ 5'-GCTCTAGAGCATTAGTAGCTGTTG-3' 370
P2M A3 B3 5'-CCCATCATTGCAATAGCAGG-3' 5'-GTTCAAACTTCTGCTCCTGA-3' 120
Gene under study Primer Primer nucleotide sequence cDNA fragment size (b.p.)
‘фрагмент кДНК, общий для обеих изоформ FLT4.
* cDNA fragment is common for both FL.T4 isoforms.
В отличие от короткой формы рецептора экспрессия FIT41 при раке молочной железы (см. рис. 2, № 5—11) была снижена по сравнению с ее экспрессией в нормальной ткани (рис. 2, № 1—4). Экспрессия мРНК VEGFc была выявлена во всех случаях рака молочной железы, и ее уровень не превышал уровня экспрессии этого гена в нормальной ткани (см. рис. 2).
Исследование экспрессии мРНК гена VEGFc, FLT4s и FLT41 в нормальной и малигнизированной ткани шейки матки человека. Результаты исследования экспрессии генов VEGFc и 2 изоформ его рецептора VEGFR3 приведены на рис. 3. В одном случае экспрессия мРНК FLT4s заметно ниже в норме по сравнению с опухолью (рис. 3, № 7 и 8 соответственно). В остальных случаях экспрессия мРНК FLT4s была заметно снижена по сравнению с ее экспрессией в норме (рис. 3, № 4, 10 и 3, 9 соответственно) либо существенной разницы между экспрессией мРНК FLT4s в норме и опухоли не отмечалось. Эти данные свидетельствуют в пользу того, что экспрессия FLT4s в ма-лигнизированных тканях не повышается. мРНК FLT4I выявлена всего в 2 из 14 исследованных образцов — в одном образце нормальной ткани (см. рис. 3, № 7) и в одном случае — в ткани опухоли (рис. 3, № 6). Таким образом, эта изоформа рецептора, по-видимому, редко обнаруживается как в норме, так и в опухолях данной локализации. Экспрессия мРНК гена VEGFc была отмечена во всех исследованных парах образцов ткани шейки матки человека (см. рис. 3), причем выраженных различий в экспрессии этого гена в нормальной и опухолевой ткани немного. Результаты этой серии опытов свидетельствуют о том, что для рака шейки матки также не отмечено увеличения экспрессии мРНК VEGFc и его рецепторов по сравнению с нормальной тканью.
Исследование 5 дополнительных случаев плоскоклеточного рака шейки матки подтвердило эти выводы (табл. 2). Особенностью этой серии образцов является то, что от больных № 4 и 5 было взято несколько образцов. В этой серии образцов экспрессии FLT41 обнаружено не было. мРНК короткой изоформы
previously that mRNAVEGFR3 expression in thyroid cancer was lower than in thyroid adenoma and goiter. VEGFc gene expression was also decreased [[13]. In this investigation we compared expression of mRNAs of VEGFc gene and two isoforms of the factor receptor VEGFR3 in carcinomas of the thyroid, breast and cervix against normal tissues of these organs. The receptor VEGFR3 (FLT4) is found in two, a short (FLT4s) and a long (FLT41), isoforms, each of the isoforms evidently having different functions in cells [2,3,10].
Materials and Methods. Patients. We analyzed 8 specimens of thyroid adenocarcinomas of different origin (3 from C-cells and 5 from A-cells) and 3 specimens of normal tissue surrounding the tumors (fig.l). The specimens were harvested from different patients. We also analyzed 7 breast cancer biopsy specimens and 4 specimens of normal surrounding tissue. By histology 1 specimen was lobular infiltrative carcinoma with cervicosupraclavicular nodal involvement (fig.2, No.5), the remaining specimens were ductal infiltrative carcinomas. The analysis was also performed in 7 specimens of squamous-cell human cervical carcinoma including 1 case with métastasés (fig.3, No.13). Normal tissue adjacent to the tumors was also taken for the analysis from the same patients. Specimens of 5 squamous-cell cervical carcinomas were studied in addition. All materials analyzed were operative specimens.
Polymerase chain reaction (PCR) with reverse transcription. Our modification of semiquantitative PCR with reverse transcription was described elsewhere [1]. The reverse transcription product and primers listed in table 1 were used in the reaction.
Results and Discussion. Expression of mRNAs of VEGFc gene and two receptor isoforms in normal tissue and human thyroid adenocarcinomas. We studied expression of mRNAs of VEGFc gene and receptor isoforms (FLT4s and FLT41) in 8 specimens of thyroid adenocarcinomas of different origin (from C-cells, fig.l, Nos.4-6; from A-cells, fig.l, Nos.7-11) and in normal thyroid tissue specimens using the PCR with reverse transcription. Both receptor isoforms and the growth factor demonstrated rather high expression in all normal tissue specimens (see fig.l, Nos.l-3). mRNAFLT4s was found in 3/8 tumor specimens (see fig.l, Nos.5,8,10) and mRNAFLT41 in one tumor specimen only, the expression level being very low (see fig.l, No.8). mRNAVEGFc expression was discovered in 5/8 tumor specimens including two specimens with very low expression level (see fig.l). All three normal thyroid specimens demonstrated coexpression of mRNA of VEGFc gene and two receptor isoforms, in contrast to thyroid adenocarcinomas that coexpressed these genes in 3/8 cases (see fig.l). Thus, expression of both isoforms of VEGFR3 and VEGFc was found in thyroid adenocarcinoma less frequently than in normal thyroid tissue.
Expression of mRNAs of VEGFc gene and two receptor isoforms in normal tissue and carcinoma of the breast. VEGFc, FLT4s and FLT41 mRNAs were found in all 4 specimens from normal breast tissue. Expression of the receptor short form was low in 2 specimens (fig.2, Nos. 1,2) including 1 with low VEGFc expression, while expressions of the long form were equally marked. mRNAFLT4s was expressed in 5/7 breast tumors, the expression level being rather low in all the positive
Таблица 2 Table 2
Характеристика образцов, взятых от больных раком шейки матки (последняя серия)
Characteristics of specimens from patients with cervical cancer (last series)
№ n/n Гистологический диагноз Экспрессия FLT4s Экспрессия VEGFc
1 Плоскоклеточный рак Squamous-cell carcinoma + -
2 Плоскоклеточный рак Squamous-cell carcinoma + +
3 Плоскоклеточный рак Squamous-cell carcinoma +/- -
4a Плоскоклеточный рак Squamous-cell carcinoma - +/-
46 Плоскоклеточный рак Squamous-cell carcinoma + +/-
4b Метастаз в лимфоузел Lymph node metastasis - -
5a Лейомиома Leiomyoma + -
56 Плоскоклеточный рак Squamous-cell carcinoma +/' -
5b Плоскоклеточный рак Squamous-cell carcinoma +/- -
5r Лимфоузел, реактивная гиперплазия Lymph node, reactive hyperplasia + -
5Д Лимфоузел, реактивная гиперплазия Lymph node, reactive hyperplasia + -
№ Histological diagnosis FLT4s expression VEGFc expression
рецептора обнаружена в 9 из 11 образцов и уровень ее экспрессии был довольно низким. мРНК УЕвРс экспрессировалась всего в 3 образцах из 11 (№ 2, 4а и 46). Таким образом, частота и характер экспрессии исследованных генов в этих 2 сериях образцов существенно не различались.
В нашей работе сравнение нормальных тканей щитовидной железы, молочной железы и ткани шейки матки с опухолями соответствующих локализаций не позволило обнаружить ни для одного типа новообразований повышения экспрессии генов УЕвРс и УЕвРКЗ в опухолях. В то же время исследование экспрессии мРНК \Т£СЕа в норме и при аденокарциномах щитовидной железы выявляет заметное повышение уровня мРНК гена УЕбРа [16]. В опухолях шейки матки также было обнаружено значительное повышение экспрессии мРНК гена УЕбГа по сравнению с его экспрессией в нормальной ткани, причем повышение экспрессии УЕвЕа коррелировало с увеличением количества кровеносных сосудов в ткани рака шейки матки [4]. Эти данные свидетельствуют в пользу того, что изменение экспрессии \TEGFc, по крайней мере в злокачественных опухолях
cases (fig.2, Nos.5-11). Thus, there were no considerable differences in mRNAFLT4s expression between normal tissue and carcinoma of the breast. In contrast, FLT41 expression in breast carcinoma (see fig.2, Nos.5-11) was lower than in normal breast tissue (fig.2, Nos.1-4). Expression of
mRNAVEGFc was discovered in all breast carcinomas and was not higher than in normal breast tissues (see fig.2).
Expression of mRNAs of VEGFc gene and two receptor isoforms in normal tissue and carcinoma of the human cervix. Fig.3 presents results of our study of expression of VEGFc and two isoforms of its receptor VEGFR3. In one case mRNAFLT4s expression in normal tissue was much lower than in carcinoma (fig.3, Nos.7,8 respectively). In the remaining cases mRNAFLT4s expression in carcinomas was less (fig.3, Nos.4,10 and 3,9, respectively) or equally marked as compared to normal tissues. These findings suggest that FLT4s expression is not increased in carcinoma. mRNAFLT41 was discovered in 2 of 14 specimens including 1 normal tissue (see fig.3, No.7) and 1 carcinoma (see fig.3, No.6). This receptor form seems to be a rare finding both in normal and neoplastic tissue of the cervix. The mRNAVEGFc was expressed in all human cervical tissue pair specimens (see fig.3) with practically no difference between normal and cancer tissues. Results of this series also suggested that cervical cancer does not demonstrate elevation of mRNA of VEGFc or its receptors as compared to normal tissue.
Study of 5 additional cases of squamous-cell cervical cancer confirmed these conclusions (see table 2). This series of specimens was characterized by harvesting several samples from patient No.4. There was no FLT41 expression in this series. mRNA of the receptor short isoform was found in 9/11 specimens, the expression level being rather low. mRNAVEGFc was expressed in 3/11 specimens (Nos.2, 4a and 4b) only. So, there were no considerable differences in frequency and character of expression of the genes in question between these 2 series of specimens.
The comparison of normal thyroid, breast and cervix tissues with tumors of these sites in our study failed to find elevation in genes VEGFc and VEGFR3 in tumors. While expression of mRNAVEGFa in thyroid adenocarcinoma was markedly increased as compared to normal thyroid tissue [16]. Similarly there was a considerable increase in expression of mRNAVEGFa in cervical tumors in comparison with normal cervical tissue, the expression being related to enhancement in vascularization in cervical tissue [4]. These findings are in favor of the supposition that there is a difference between changes in expressions of VEGFa and VEGFc at least in thyroid and cervical cancers, and that these factors may play different roles in cancer development.
Our findings concerning different expression of mRNAVEGFc in tumors from different sites are in agreement with recent publications on immunohistochemical study of VEGFc and VEGFR3 proteins in normal tissue and in breast cancer [14] (though one should bear in mind that expressions of mRNA and proteins are not always similar). A study of 8 specimens from intraductal breast adenocarcinoma demonstrated heterogenous VEGFc expression by tumor cells: most adenocarcinoma cells were VEGFc-positive in some cases while in others only single cells were demonstrated staining with antibodies to this protein [15].
щитовидной железы и шейки матки, отлично от изменения экспрессии VEGFa, и, по-видимому, им принадлежит разная роль в развитии злокачественных новообразований.
Данные о гетерогенности экспрессии мРНК гена VEGFc, полученные нами при исследовании опухолей различных органов, согласуются с недавно опубликованными данными им-муногистохимического исследования экспрессии белков VEGFc и VEGFR3 в норме и при раке молочной железы [14] (хотя при сравнении этих данных надо иметь в виду, что уровни экспрессии мРНК и белка не всегда коррелируют). В 8 исследованных авторами случаях внутрипротоковой аденокарциномы молочной железы было выявлено, что экспрессия VEGFc опухолевыми клетками была гетерогенной: в некоторых случаях VEGFc-позитивными было большинство клеток аденокарциномы, тогда как в других случаях только отдельные клетки опухоли были окрашены антителами к этому белку [15].
В исследованных нами типах опухолей экспрессия мРНК двух изоформ VEGFR3 не повышалась по сравнению с ее экспрессией в нормальной ткани. Этот факт свидетельствует о том, что VEGFR3 отличается от двух других родственных рецепторов, VEGFR1 и VEGFR2, гиперэкспрессирующихся в злокачественных новообразованиях, и такая гиперэкспрессия связана с ростом новых кровеносных сосудов. Возможно, что эти различия в экспрессии отражают особенности лимфангио-генеза в опухолевой ткани: в настоящее время белок VEGFR3 рассматривается как маркер лимфатических сосудов [8]. Частота экспрессии мРНК FLT4s в опухолях по сравнению с нормой в целом была снижена в меньшей степени, чем частота экспрессии длинной изоформы рецептора. При этом нельзя исключить тканевоспецифический характер изменения экспрессии как FLT4s, так и FLT41: так, частота экспрессии мРНК FLT4s более всего была снижена при раке щитовидной железы, а длинная изоформа рецептора практически не была экспрессирована в образцах опухолей шейки матки. Различия в экспрессии изоформ рецептора VEGFR3 обнаружены нами впервые. Возможно, две изоформы VEGFR3 имеют различные функции in vivo аналогично двум близкородственным рецепторам VEGFR1 и VEGFR2, которые также по-разному экспрессируются в одной и той же ткани и выполняют разные функции, хотя являются рецепторами одного и того же лиганда [4,12,16].
Полученные нами результаты вместе с данными других авторов позволяют полагать, что системы передачи сигналов в клетке, связанные с функционированием двух родственных факторов роста VEGFc и VEGFa активируются на разных этапах опухолевой прогрессии. Не исключено также, что VEGFc аналогично некоторым другим ростовым факторам является кофактором, модулирующим активность VEGFa [11].
ЛИТЕРАТУРА / RERERENCES
1. Шушанов С. С., Загрекова Е. И., Ермилова В. Д., КарамышеваА. Ф.
//Вестн. ОНЦ РАМН. - 1998. - № 4. - С. 6-11.
2. Borg}. P., DeLapeyriere О., Noguchi Т. et al. //Oncogene. — 1995. —
Vol. 10. - P. 973-984.
3. Fournier E., Dubreuil P., Birnbaum D., Borg J. P. //Ibid. — Vol. 11. — P.
921-931.
4. Fujimoto J., Sakaguchi H., Hirose R. et al. //Br. J. Cancer. — 1999. — Vol.
80. — P. 827-833.
Expression of mRNA of two VEGFR3 isoforms was not elevated against normal tissues in the tumor types studied. This finding suggests that VEGFR3 is different from two other relative receptors, i.e. VEGFR1 and VEGFR2, that demonstrate hyperexpression in cancer tissue which correlates with neovascularization*. Frequency of expression of mRNAFLT4s in tumors as compared to normal tissue was decreased to a less extent than expression of the long isoform. The changes in expression of both FLT4s and FLT41 may be tissue-specific because expression of mRNAFLT4s was decreased most of all in thyroid cancer and the long isoform was practically not expressed in cervical cancers. We were the first to find the differences in expression of VEGFR3 isoforms. These isoforms may have different functions in vivo like their close relatives VEGFR1 and VEGFR2 that also demonstrated different expression in the same tissue and function differently though being receptors of the same ligand [4,12,16].
Our findings as well as published results suggest that cellular signal transmission systems associated with fiinctioning of two relative growth factors, i.e. VEGFc and VEGFa, are activated at dilferent stages of tumor progression. It is also possible that VEGFc like some other growth factors is a cofactor modulating VEGFa activity [11].
These differences in the expression may be a reflection of tumor Iymphangiogenesis since VEGFR3 is presently considered to be a lymph vessel marker [8].
5. Hanahan D., Folkman J. //Cell. - 1996. — Vol. 86. — P. 353-364.
6. Inoue K., Ozeki Y., Suganuma T. et al. //Cancer. — 1997. — Vol. 79.
- P. 206-213.
7. Jacquemier J., Penault—Llorka F., Bertucci E. et al. //J. Pathol. —
1998. - Vol. 184. - P. 130-135.
8. Kaipainen A., Korhonen J., Mustonen T. et al. //PNAS USA. —
1995. - Vol. 92. - P. 3566-3570.
9. Kim K. J., Li B., Winer J. et al. //Nature (Lond.) - 1993. - Vol.
362.-P. 841-844.
10. Pajusola K., Aprelikova O., Armstrong E. et al. //Oncogene. — 1993.
- Vol. 8. - P. 2931-2937.
11. ParkJ. E., Chen H., Winer J. etal. //J. biol. Chem. — 1994. — Vol. 269. - P. 25646-25654.
12. Peters K. G., de Vries C., Williams L. T. //PNAS USA. - 1993. -Vol. 90. - P. 8915-8919.
13. Shushanov S., Bronstein M., Adelaide J. et al. //Int. J. Cancer. — 2000. - Vol. 86. - P. 47-52.
14. Valtola R., Salven P., Heikkila P. etal. //Am. J. Pathol. — 1999. — Vol. 154.-P. 1381-1390.
15. Veikkola T., Alitalo K. //Semin. Cancer Biol. — 1999. ~ Vol. 9 —
P. 211-220.
16. Viglietto G., Maglione D., Rambaldi M. et al. //Oncogene. — 1995.
- Vol. 11. - P. 1569-1579.
17. Warren R. S., Yuan H., Matli M. R. et al. //J. clin. Invest. — 1995.
- Vol. 95. - P. 1789-1797.
Поступила 06.10.2000 / Submitted 06.10.2000
