CC BY
4
ния в более поздние сроки эксперимента — через 90 дней (р<0,05).
Повышение активности лактатдегидрогеназы в сыворотке крови отмечалось только у животных 1-й группы при воздействии вещества в концентрации 5,0 мг/м3 в 1-й месяц эксперимента (98,3± 1,03 ед. экст. в опыте при 126,4±6,9 ед. экст. в контроле). При воздействии 2-ЭГА в более низких концентрациях изменений этого показателя не зарегистрировано.
:( При определении содержания в крови животных глютатиона достоверное повышение .этого показателя наблюдалось однократно лишь' при воздействии вещества в концентрации 5 мг/м3 (р<0,05).
Содержание Ы-ацетилнейраминовой кислоты повышалось в крови животных в конце первого опыта при концентрации 5 мг/м3 (0,089± ±0,06 ед. экст. з опыте при 0,04±0,002 ед. экст. в контроле; р<0,05), через 60 дней при поступлении вещества в концентрации 1 мг/м3 (0,14± ±0,007 ед. экст. в опыте при 0,11 ±0,01 ед. экст. в контроле; /?<0,05). Концентрация 0,1 мг/м3 вызывала достоверное изменение этого показателя через 90 дней затравки (р<0,05). Поступление 2-ЭГА на уровне 0,01 мг/м3 не вызывало существенных различий указанного теста в опыте и контроле за все время наблюдения.
Изучение активности щелочной фосфатазы позволило установить появление первых достоверных изменений у животных при воздействии концентрации 5 мг/м3 через 30 дней опыта (0,014±0,0001 мкмоль при 0,012±0,0002 мкмоль в контроле). Воздействие продукта вызывало достоверное изменение этого теста у животных 2-й группы через 90 дней опыта (0,012± ±0,0004 мкмоль при 0,007±0,002 мкмоль в контроле), а у животных 3-й группы — через 120 дней затравки (0,006±0,0004 мкмоль при 0,004± ±0,0003 мкмоль в контроле; р<0,05). Эти изменения носили однонаправленный характер и выражались в повышении активности фермента у животных указанных групп.
При изучении количества лейкоцитов в крови
экспериментальных животных с подсчетом формулы крови не установлено достоверных изменений состава белой крови за весь период опыта (р>0,05).
Следовательно, хроническое ингаляционное отравление парами 2-ЭГА приводит к разнообразным функциональным изменениям в организме и прежде всего со стороны центральной нервной системы, печени и ферментов-окислителей.
Таким образом, на основе результатов исследований концентрацию 2-ЭГА 0,1 мг/м3 можно считать пороговой для условий длительного круглосуточного ингаляционного поступления по нарушению ферментативной активности печени (Ы-ацетилнейраминовой кислоты и щелочной фосфатазы). Концентрация 0,01 мг/м3 оказалась недействующей по всем изученным показателям. Учитывая, что недействующая концентрация 2-ЭГА по резорбтивному действию на одном уровне с установленной нами по рефлекторному влиянию (0,01 мг/м3), в соответствии с принципом нормирования химических веществ по лимитирующему признаку вредности рекомендуется для данного вещества только разовая ПДК на уровне 0,01 мг/м3, которая и утверждена Минздравом СССР (список № 5158 от 24.11.89).
Литература
1. Андреещева Н. Г., Пинигин М. А. // Гигиенические аспекты охраны окружающей среды.— М., 1978— Вып. 6.— С. 75-77.
2. Арзяева Е. ЯОсина Т. М. // Гигиена, промышленная токсикология и профпатология в производствах поли-акрилатов и сырья для них.— М., 1984.— С. 57—66.
3. Временные методические указания по обоснованию предельно допустимых концентраций (ПДК) загрязняющих веществ в атмосферном воздухе населенных мест.— М., 1989,— С. 110.
4. Комракова Е. А., Пискарев Ю. Г. // Гиг. и сан.— 1990.— № 8.— С. 86-87.
5. Ломонова Г. В. // Гиг. труда.— 1982.— № 9.— С. 52—54.
6. Чеснокова Н. Р., Берсудский С. С., Брилль Г. Е. // Гигиенические аспекты охраны окружающей среды.— Саратов, 1979.— С. 61—64.
Поступила 14.01.91
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 1991 УДК 614.715:613.155.3|-07
Р. У. Убайдиллаев, А. X. Камильджанов, Ш. М. Мирзаев, Н. X. Ашрятова, У. А. Маджидов
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ К ОБОСНОВАНИЮ ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ АЗОЦЕНА В АТМОСФЕРНОМ ВОЗДУХЕ
НИИ санитарии, гигиены и профзаболеваний Минздрава Узбекской ССР, Ташкент
Азоцен [1-(1,2,4-триазол-1 ил)-1-(4-хлорфен- масса 293,7, давление паров 1,3-10-® мм рт. ст.
окси) -3,3 диметилбутон-2 ОН) ] представляет со- при 25 °С, температура плавления 76 °С. Препарат
бой кристаллическое вещество светло-желтого хорошо растворим в органических растворителях,
цвета со специфическим запахом. Молекулярная плохо растворим в воде. При введении в желудок
ЬЭбо для белых крыс составляет 2575 (2016—3134) мг/кг, для белых мышей — 1450 (1140—1760) мг/кг, для кроликов — 1000 мг/кг, СЦ0 для белых крыс — 2450 (2295—2604) мг/м3, для белых мышей — 2337 (2166—2508) мг/м3. Порог острого действия составляет 189,2+ ±11 мг/м3, порог хронического действия — 5,0 мг/м3, ПДК в воздухе рабочей зоны — 0,5 мг/м3 (2-й класс опасности) [12].
В клинической картине интоксикации преобладают симптомы поражения центральной нервной системы. Основными показателями токсического действия являются снижение суммационно-поро-гового показателя (СПП), угнетение им активности ферментов — холинэстеразы (ХЭ), катала-зы, аминотрансфераз, а также эритро- и лейкопения. Эти сведения о токсичности азоцена в основном касаются воздействия на организм больших его концентраций [6, 7, 12]. Действие малых концентраций азоцена на организм человека и животных не изучено, и не обоснована ПДК его в атмосферном воздухе. Решению этих вопросов посвящена настоящая работа.
С целью изучения рефлекторного действия препарата изучали порог обонятельного ощущения [14]. Концентрации исследуемого вещества в нюхательном цилиндре определяли газохромато-графическим методом, разработанным в Институте химии АН Узбекской ССР А. Н. Оглобли-ной, В. М. Хасановой и одобренным методической секцией проблемной комиссии союзного значения «Научные основы гигиены окружающей среды».
В эксперименте участвовало 25 практически здоровых некурящих людей обоего пола в возрасте от 18 до 40 лет. Исследовали 7 концентраций в диапазоне от 0,08 до 1,12 мг/м3, причем каждая из них предъявлялась в течение 3 дней по 3 раза в день с интервалом 1 —1,5 ч. Всего проведено 1578 определений. Результаты эксперимента отрабатывали методом пробит-анализа [1] и аналитическим методом наименьших квадратов [19] с использованием формулы Шнейдер — Орелли [10].
Для выявления разорбтивного действия малых концентраций азоцена с целью обоснования его среднесуточной ПДК в атмосферном воздухе проведен 4-месячный ингаляционный эксперимент на 144 белых крысах массой 100—130 г, разделенных на 4 группы по 36 животных в каждой.
Крысы 1-й группы подвергались воздействию азоцена в концентрации 0,49±0,01 мг/м3 (на уровне ПДК в воздухе рабочей зоны), 2-й группы — 0,097±0,0012 мг/м3 (в 5 раз ниже ПДК в воздухе рабочей зоны), 3-й группы — 0,019±0,0007 мг/м3 (на уровне ОБУВ в атмосферном воздухе или в 2 раза ниже предлагаемой максимальной разовой ПДК). Животные 4-й группы служили контролем. Для суждения о действии малых концентраций изучали следующие показатели: общее состояние, поведение и динамику массы тела жи-
вотных, СПП [16], активность ХЭ [9], каталаз-ное число в цельной крови [2], количество БН-групп в крови [13], соотношение альбуминовых и глобулиновых фракций в сыворотке крови [4], активность щелочной фосфатазы [18], ли-зоцима( [15] и содержание мочевины в сыворотке крови '(тест-система фирмы «Лахема»), активность аспартатаминотрансферазы (АСТ), аланин-аминотрансферазы и сорбитолдегидрогеназы в сыворотке крови и в гомогенатах печени [8, 11, 17].
Биохимические и физиологические показатели у животных определяли каждые 15 сут, а также до затравки и в восстановительном периоде.
Сразу по окончании ингаляционного воздействия и после 30-дневного восстановительного периода проведены патоморфологические и гистохимические исследования внутренних органов животных.
Класс опасности вещества определялся на основе методических указаний [5] с использованием для расчета СЬ50, ЬОбо, ЬшсЬ, зоны биологического действия, порога хронического действия и максимальной недействующей концентрации азоцена.
Результаты экспериментальных исследований подвергались статистической обработке с использованием критерия I [3].
При ингаляционном поступлении азоцена в организм добровольцев в концентрациях 1,12, 0,60, 0,27 и 0,18 мг/м3 наблюдалось соответственно 100, 92,9, 60,5 и 42,9 % обонятельного ощущения запаха, а в низкой концентрации (0,08 мг/м3) — лишь 9,2 %.
По полученной прямой концентрации — эффект» определяли пороговую концентрацию, которая соответствовала 16 % обнаружению запаха (ЕС16) и была равна 0,135 мг/м3. По углу наклона этой кривой (46°) азоцен по ольфактор-ным реакциям относится к 3-му классу опасности. Коэффициент запаса, равный 2,7, найден по номограмме [1]. Недействующие концентрации по запаху на основе экспериментальных и расчетных данных установлены на уровне 0,05 и 0,04 мг/м3 соответственно; последняя рекомендована в качестве максимальной разовой ПДК азоцена в атмосферном воздухе населенных мест.
Ингаляционная затравка азоцена в концентрациях 0,49 и 0,0097 мг/м3 вызывала функциональные изменения у экспериментальных животных, причем наиболее выраженные сдвиги наблюдались у крыс 1-й группы (концентрация азоцена 0,49 мг/м3). Так, у животных этой группы к концу 45-го дня затравки статистически достоверно снизились СПП (6,33±0,18 усл. ед. при 7,33± ±0,35 усл. ед. в контроле; р<0,05), активность лизоцима (40,0 % при 51,66 % в контроле; р<0,05) и повысилось содержание мочевины в сыворотке крови (9,43 ммоль/л при 7,35 ммоль/л в контроле; р<0,05). С увеличением времени воздействия препарата изменения приобрели более
выраженный характер, и на 75-й день опыта активность ХЭ составила 211,6 мкг/(мл-мин) при 341,09 мкг/(мл-мин) в контроле (р<0,001), содержание SH-rpynn — 56,5 мг% при 71,02 мг% в контроле (р<0,05), а к концу опыта выраженные достоверные изменения наблюдались по всем изученным показателям, за исключением массы тела. Г1ри патоморфологическом исследовании обнаружены выраженные изменения, которые характеризовались в основном расстройствами кровоснабжения и дистрофическими изменениями в паренхиматозных органах (печень, почки).
При снижении концентрации азоцена в 5 раз (до 0,097 мг/м3) изменения оказались менее выраженными, кратковременными, наступили значительно позже и носили непостоянный характер. Так, у крыс 2-й группы, вдыхавших азоцен в концентрации 0,097 мг/м3, начиная с 75—90-го дня опыта отмечались снижение СПП до 6,33 имп/с при 7,5 имп/с в контроле (р<0,01), активности ХЭ до 238,2 мкг/(мл-мин) при 310,8 мкг/(млХ Хмин) в контроле (р<0,05), количества SH-rpynn в крови до 61,2 мг % при 75,7 мг % в контроле (р<0,01) и повышение уровня ACT в сыворотке крови до 1,94 ммоль/л при 1,69 ммоль/л в контроле (р<0,01).
В конце опыта (105-й и 120-й дни) наряду с указанными изменениями выявлено снижение соотношения альбуминовых и глобулиновых фракций в сыворотке крови (0,57 при 0,74 в контроле; р<0,01), активности лизоцима (34,1 % при 52,5 % в контроле; р<0,01), повышение уровня ACT (2,14 ммоль/л при 1,75 ммоль/л в контроле; р<0,05), аланинаминотрансферазы (1,72 ммоль/л при 1,47 ммоль/л в контроле; р<0,05), мочевины (9,09 ммоль/л при 7,31 ммоль/л в контроле; р<0,05) в сыворотке крови. Активность щелочной фосфатазы и ACT в гомогенатах печени не изменилась. Морфологические изменения были сходны с описанными выше при действии концентрации 0,49 мг/м3, однако эти изменения были менее выражены.
При действии азоцена в концентрации 0,019 мг/м3 на протяжении всего эксперимента по всем изученным показателям каких-либо отклонений по сразнению с контролем не выявлено.
Изменения при хроническом воздействии азоцена в концентрациях 0,49 и 0,097 мг/м3 имели обратимый характер, так как по истечении 30-дневного периода восстановления происходила нормализация изученных показателей.
Расчеты определения класса опасности позволили установить, что азоцен относится к 3-му классу опасности (умеренно опасные), коэффициент запаса равен 5,02, а интегральный показатель В — 0,45.
Выводы. 1. Азоцен при кратковременном ингаляционном воздействии в малых концентрациях оказывает рефлекторное действие. Порог обонятельного ощущения (ECie) равен 0,135 мг/м3.
Максимальная разовая ПДК азоцена в атмосферном воздухе населенных мест составляет 0,04 мг/м3.
2. Азоцен при непрерывном хроническом 4-месячном ингаляционном воздействии в концентрациях 0,49 и 0,097 мг/м3 оказывает политроп-ное действие, вызывая функциональные обратимые изменения со стороны центральной нервной системы, паренхиматозных органов, ферментных систем. Концентрация препарата 0,019 мг/м3 оказалась недействующей.
3. Среднесуточная ПДК азоцена в атмосферном воздухе населенных мест рекомендована на уровне 0,02 мг/м3, одобрена секцией «Гигиена атмосферного воздуха» проблемной комиссии союзного значения «Научные основы гигиены окружающей среды» и представлена к утверждению Минздравом СССР.
Литература
1. Андреещева Н. Г., Пинигин М. А. // Гигиенические аспекты охраны окружающей среды,— М., 1978.— Вып. 6.— С. 75—76.
2. Бах И. А. II Биохимические методы исследования в клинике,— Саратов, 1968.— С. 220—222.
3. Бирюкова Р. Н. И Гиг. и сан,— 1962 — № 7,— С. 42—46.
4. Гурвич Л. В. // Лаб. дело — 1955,— № 3,— С. 3—8.
5. Временные методические указания по обоснованию предельно допустимых концентраций (ПДК) загрязняющих веществ в атмосферном воздухе.— М., 1989.— С. 110.
6. Данилов В. В., Агаев Р. А., Рахматов Р. М. и др. // Гиг. и сан,— 1987,—№ 12,— С. 90.
7. Данилов В. Б., Рахматов Р. М. // Актуальные вопросы гигиены в условиях научно-технического прогресса.— Ташкент, 1987,—Т. 1,— С. 151.
8. Колб В. Г., Камышников В. С. // Справочник по клинической химии.— Минск, 1982.— С. 110—115.
9. Кривоглаз Б. А. // Клиника и лечение интоксикации ядохимикатами.—М., 1965,—С. 184—186.
10. Методические указания по разработке и научному обоснованию предельно допустимых концентраций в воде водоемов,— М„ 1976,— С. 34—35.
11. Определение активности сорбитолдегидрогеназы в сыворотке крови с помощью оптического теста Варбурга // Биохимические методы исследования в клинике / Под ред. А. А. Покровского,—М„ 1969.—С. 156—158.
12. Рахматов Р. М. Сравнительная токсикологическая оценка азоцена и его полупродуктов производства: Автореф. дис. ... канд. мед. наук.— М., 1989.
13. Рубина X. М., Романчук Л. А. // Вопр. мед. химии.— 1961,— № 6.— С. 652—655.
14. Рязанов В. А., Бумтуева К. А., Новиков Ю. В. // Предельно допустимые концентрации атмосферных загрязнений,—М„ 1957,—Вып. 3.—С. 117—126.
15. Селюжицкий Г. В., Белкин А. А., Пинигин М. А. и др. // Методические рекомендации по изучению аллергенного действия кормового белка при обосновании предельно допустимых концентраций кормового белка в атмосферном воздухе.— М., 1983.—С. 9—10.
16. Сперанский И. В., Павленко С. Б. // Фармакол. и токсикол.—1965,—№ 1.—С. 123.
17. Страйер Л. Биохимия.— М„ 1985.— Т. 2.— С. 312.
18. Тепикина Л. А., Щербаков В. Д. // Гигиенические аспекты охраны окружающей среды.— М., J 976.— Вып. 3.— С. 30—35.
19. Яхнина Д. П. // Лаб. дело.— 1962,—№ 10 —С. 19—21.
Поступила 21.11.90
