CC BY
21УДК: 616.21-08:615.33 + 544.77
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРЕПАРАТОВ, СОДЕРЖАЩИХ НАНОЧАСТИЦЫ СЕРЕБРА, В МЕСТНОЙ ЭМПИРИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЛОРОРГАНОВ, ВЫЗВАННЫХ Р. АERUGINOSA И ACINETOBACTER SP.
Ф. В. Семенов, С. А. Бабичев, О. А. Качанова, К. М. Фидарова
EXPERIMENTAL BASE FOR USE OF TOPICAL PRESCRIPTIONS CONTAINING SILVER NANOPARTICLES IN TREATMENT OF P. AERUGINOSA AND ACINETOBACTER SP. INFECTIONS IN OTORHINOLARYNGOLOGY
F. V. Semenov, S. A. Babichev, O. A. Kachanova, K. M. Fidarova
ГБОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет», г. Краснодар (Зав. каф. ЛОР-болезней - проф. Ф. В. Семенов; зав. каф. микробиологии - доцент С. А. Бабичев)
Несмотря на небольшой удельный вес Р. ueruginosa и Acinetobacter sp. в этиологической структуре инфекционной патологии ЛОРорганов, терапия этих заболеваний представляет большой интерес в связи с высокой природной резистентностью возбудителей к антибактериальным препаратам. Альтернативным препаратом для консервативного лечения таких пациентов является «Арговит», созданный на основе нанотехнологий. Целью настоящей работы являлось сравнение антибактериальной активности препарата, содержащего наночастицы серебра, и ряда антибиотиков, наиболее часто использующихся в местной эмпирической терапии заболеваний ЛОРорганов. Исследование проводилось в микробиологической лаборатории на базе КубГМУ в 2012 году. Для исследования использовались образцы препарата, содержащего наночастицы серебра и антибиотики (цефтриаксон, ципрофлоксацин, линкомицин). В ходе исследования было выявлено, что наиболее выраженной антибактериальной активностью по отношению к Р. neruginosa и Acinetobacter sp. обладали цефтриаксон и препарат, содержащий наночастицы серебра (раствор с концентрацией 5, 10% и гель в 20% концентрации).
Ключевые слова: наночастицы серебра, антибиотики.
Библиография: 6 источников.
Despite the modest incidence of P. aeruginosa and Acinetobacter spp. infections in otorhinolaryngology, treatment of these inflamatory disease causes is of great interest due to high resistence of these bacteria to antibiotics. "Argovit" is a topical drug created on the base of nanotechnology, which could be a therapeutic alternative for medical treatment. The purpose of this study was comparison of an antibacterial activity of topical silver nanoparticles-containing drug and several contemporary antibiotics. The study took place in Department of Microbiology, Kuban State Medical University in 2012. In our study we used samples of silver nanoparticles-containing drug and antibiotics (ceftriaxon, ciprofloxacin, lincomycin). We found that P. aeruginosa and Acinetobacter sp. were sensitive to ceftriaxon and silver nanoparticle-containig drug (5%, 10% and 20% solution).
Key words: silver nanoparticles, antibiotics.
Bibliography: 6 sources.
Неферментирующие грамотрицательные бактерии (НГОБ) являются возбудителями различных гнойно-воспалительных заболеваний ЛОРорганов в 1,3-11,4% случаев [2]. По частоте встречаемости в этой группе первое место занимает Р. aeruginosa, затем следуют представители р. Acinetobacter.
Несмотря на небольшой удельный вес Р. aeruginosa и Acinetobacter sp. в этиологической структуре инфекционной патологии ЛОР-органов, терапия этих заболеваний представляет большой интерес в связи с высокой природной резистентностью возбудителей к антибактериальным препаратам. Естественной восприимчивостью синегнойная палочка и Acinetobacter обладают к цефалоспоринам III и IV поколений, карбапенемам, фторхинолонам, аминоглико-
зидам. В качестве препаратов первого ряда для лечения заболеваний, вызванных этими патогенами, рекомендованы цефтазидим, цефепим, ме-ропенем, имипенем, ципрофлоксацин, гентами-цин, амикацин [5].
Однако монотерапия зачастую оказывается неэффективной в связи с распространенностью полиантибиотикорезистентных штаммов, особенно в госпитальных условиях. Поэтому при эмпирической терапии целесообразнее использовать комбинированные схемы [6]. В то же время применение высокоэффективных комбинаций не всегда возможно в ЛОР-практике по причине ото-токсичности отдельных препаратов.
По этим причинам поиск новых средств антибактериальной терапии ЛОР-инфекций,
вызванных Р. aeruginosa и Acinetobacter sp., является актуальным научно-исследовательским направлением. Таким средством могут быть препараты, содержащие наночастицы серебра, которые успешно применяются в клинической практике при широком круге заболеваний, в том числе и ЛОРорганов [1, 3]. Препараты, содержащие наночастицы серебра, представляют собой высокодисперсное (кластерное) серебро, стабилизированное полимером медицинского назначения - низкомолекулярным поливинил-пирролидоном. По сравнению с препаратами коллоидного серебра (колларгол, протаргол, по-виаргол) размер кластерных частиц серебра в на-нопрепарате значительно меньше, что обусловливает агрегационную устойчивость его растворов и более высокую активность [3, 4].
Цель работы. Сравнить антибактериальную активность препарата, содержащего наночасти-цы серебра, и ряда антибиотиков, наиболее часто использующихся в местной эмпирической терапии при заболеваниях ЛОРорганов.
Материалы и методы. Исследование проводилось на базе кафедры микробиологии КубГМУ в 2012 году. Для исследования использовали образцы препарата, содержащего наночастицы серебра (раствор в концентрации 0,2, 2, 5 и 10%, гель в концентрации 20%) и антибиотики в концентрациях коммерческих препаратов [цефтри-аксон (0,5 г/мл), ципрофлоксацин (2 мг/мл), линкомицин (300 мг/мл)]. В рекомендациях по использованию препарата, содержащего наноча-стицы серебра, указывались концентрации 3; 5 и 10%. Помимо указанных нами исследовано антибактериальное действие препарата и при более низких концентрациях.
В качестве тест-культур использовано 10 клинических штаммов (5 - Р. aeruginosa и 5 -Acinetobacter sp.), идентификация которых производилась на автоматическом анализаторе.
Чувствительность тест-культур к препаратам определяли методом диффузии в агар на среде АГВ с учетом стандартных методических рекомендаций [5]. Образцы препаратов наносили на
Научные статьи
газон тест-культур бактериологической петлей диаметром 2 мм. Антибактериальную активность препаратов оценивали по диаметру зоны задержки роста после 20-часовой инкубации посевов в термостате при 370 °С. Диаметр зоны задержки роста - это зона подавления роста микроорганизмов в результате диффузии антибактериального вещества в питательную среду (мм).
Результаты. Проведенное исследование показало, что к ципрофлоксацину были устойчивы 6 из 10 изученных штаммов (3 - Р. aeruginosa и
3 - Acinetobacter sp.). У остальных культур диаметр зоны задержки роста варьировал от 20 до 32 мм.
К линкомицину были устойчивы 6 из 10 изученных штаммов бактерий (2 - Р. aeruginosa и 4 - Acinetobacter sp.). У 3 оставшихся штаммов синегнойной палочки диаметр зоны задержки роста составлял от 3 до 8 мм, причем 2 штамма дали «нулевой» рост. Один штамм Acinetobacter sp. демонстрировал высокую чувствительность к препарату, диаметр зоны задержки роста у него составил 42 мм.
К цефтриаксону оказались восприимчивы 8 тест-штаммов (4 - Р. aeruginosa и 4 - Acinetobacter sp.), диаметр зоны задержки роста варьировал у них от 15 до 38 мм.
Раствор препарата, содержащего наночасти-цы серебра в концентрации 0,2%, подавлял рост
4 изученных штаммов (1 - Р. aeruginosa и 3 -Acinetobacter sp.). Диаметры зоны задержки роста составляли от 3 до 8 мм, 2 штамма давали «нулевой рост». Использование 2% раствора задерживало рост всех исследуемых культур, но у 3 штаммов с самыми низкими диаметрами зоны стерильности (3-5 мм) наблюдался «нулевой» рост. У остальных штаммов диаметр зоны задержки роста составил 6-14 мм. Образцы препарата с концентрацией 5 и 10%, а также гель были эффективны в отношении всех штаммов, причем диаметр зоны задержки роста составил 7-20 мм. Достоверных различий в размерах зоны задержки роста при использовании 5 и 10% раствора препарата, а также раствора или геля мы не отметили.
Выводы
Наиболее выраженной антибактериальной активностью по отношению к Р. aeruginosa и Acinetobacter sp. обладали цефтриаксон и препарат, содержащий наночастицы серебра (раствор с концентрацией 5, 10% и гель 20% в концентрации).
ЛИТЕРАТУРА
1. Бурмистров В. А., Симонова О. Г. Опыт практического применения препаратов кластерного серебра «Аргоника», «Арговит» // Ответы на вопросы: сб. мат. науч.-практ. конф. с междунар. участием. - Новосибирск, 2007. - Ч. 2. - С. 50-64.
2. Извин А. И., Катаева Л. В. Микробный пейзаж слизистой оболочки верхних дыхательных путей в норме и патологии // Вестн. оторинолар. - 2009. - № 2. - С. 64-68.
3. Использование кластерного серебра в лечении ЛОР-заболеваний у детей / Н. А. Воронцова [и др.]: сб. мат. науч.-практ. конф. с междунар. участием. - Новосибирск, 2007. - Ч. 2. - С. 70-76.
4. Лечение больных с остеомиелитами и гнойными ранами с использованием микрохирургической техники и нанопрепаратов серебра / А. А. Ангельский [и др.]. - Там же. - С. 7-13.
5. Методические указания по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: метод. указания. - 2004. - 75 с.
6. Шагинян И. А., Чернуха М. Ю. Неферментирующие грамотрицательные бактерии в этиологии внутриболь-ничных инфекций: клинические, микробиологические и эпидемиологические особенности // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2005. - № 3. - С. 25.
Семенов Федор Вячеславович - докт. мед. наук, профессор, зав. каф. оториноларингологии КубГМУ. 350063, Краснодар, ул. Седина, д. 4; Краевая клиническая больница № 3, Краснодар, ул. Захарова, д. 59; тел.: + 7-918-43127-02, e-mail: ent@mail.kuban.ru
Бабичев Сергей Анатольевич - канд. мед. наук, доцент, зав. каф. микробиологии КубГМУ. 350063, Россия, Краснодар, ул. Седина, д. 4; тел.: +7-903-449-20-87, e-mail: sababster@gmail.com
Качанова Ольга Анатольевна - ассистент каф. микробиологии КубГМУ. 350063, Краснодар, ул. Седина, д. 4, тел.: +7-909-450-87-16, e-mail: olga_1005@rambler.ru
Фидарова Карина Михайловна - аспирант кафедры ЛОР-болезней КубГМУ Минздрава России. 350063, Россия, Краснодар, ул. Седина, тел.: +7-918-951-23-26, e-mail: FKM8@yandex.ru
УДК: 616.21: 611-018.73: 575.172.1
ИЗУЧЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА БЕТА-ДЕФЕНСИНА-2 ЧЕЛОВЕКА В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ ВЕРХНИХ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ
Е. В. Тырнова1, Г. М. Алешина2, Ю. К. Янов1, В. Н. Кокряков2 INVESTIGATION OF HUMAN BETA-DEFENSIN-2 GENE EXPRESSION IN THE UPPER AIRWAY MUCOSA
E. V. Tyrnova, G. M. Aleshina, Yu. K. Yanov, V. N. Kokryakov
1 ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт уха, горла, носа и речи»
Минздрава России
(Директор - засл. врач РФ, член-корр. РАМН, проф. Ю. К. Янов)
2 ФГБУ «Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины» СЗО РАМН,
Санкт-Петербург
(Директор - з. д. н. РФ, акад. РАМН, проф. Г. А. Софронов)
Антимикробный пептид эпителиального происхождения бета-дефенсин-2 человека (hBD-2) рассматривают в качестве одного из ключевых компонентов врожденных защитных механизмов. Цель работы: оценить экспрессию гена hBD-2 в поверхностном эпителии слизистой оболочки верхних дыхательных путей. Исследован операционный материал от больных хроническим декомпенсированным тонзиллитом (n = 4), гипертрофией аденоидов (n = 4), заболеваниями носа и околоносовых пазух (n = 8) (носовые полипы, нижние носовые раковины в качестве контроля). Оценку экспрессии матричной рибонуклеиновой кислоты (мРНК) hBD-2, а также мРНК бета-2-микроглобулина проводили методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. В нижних носовых раковинах контрольной группы экспрессия гена hBD-2 не детектирована. В носовых полипах очень низкая экспрессия выявлена в 25% образцов. Экспрессия гена hBD-2 установлена во всех образцах небных миндалин и аденоидов, достоверные различия экспрессии мРНК hBD-2 в этих тканях не обнаружены (р > 0,05; тест Манна-Уитни). Экспрессия hBD-2 может рассматриваться в качестве возможного маркера воспалительных процессов инфекционной этиологии.
Ключевые слова: аденоиды, бета-дефенсин-2 человека, небные миндалины, нижние носовые раковины, носовые полипы, полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Библиография: 36 источников.
Human beta-defensin (HBD)-2, an antimicrobial peptide, has been discovered to be produced by a number of epithelial cells. It is identified as a key component in the innate host defense mechanism. The aim of this study was to investigate the hBD-2 gene expression in the surface epithelium of the upper airway mu-
