CC BY
12
УДК 615.279.035.4:616.153.963.43-02:547.551.1
Канд. мед. наук М. 3. Аграновский
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЛИПАМИДА КАК СРЕДСТВА ПРОФИЛАКТИКИ АНИЛИНОВОЙ МЕТГЕМОГЛОБИНЕМИИ
Кафедра общей гигиены Ленинградского санитарно-гигиенического медицинского
нститута
Анилин (аминобензол) — весьма распространенный и высокотоксичный промышленный яд. В основе его токсического действия лежит, как известно, окисление гемоглобина в патологический дериват — метгемоглобин.
В настоящее время на промышленных предприятиях, имеющих дело с анилином, осуществляется широкий комплекс оздоровительных мер. Кроме того, для лиц, подвергающихся воздействию нитро- и аминопроизвод-ных бензола, предусмотрен рацион № 4 лечебно-профилактического питания. Будучи одновременно рекомендован для ряда производств, связанных с использованием и других вредных веществ, часто различных по характеру первичного токсического процесса, этот рацион, по-видимому, обладает не специфическим, а скорее общезащитным действием. Ввиду этого приобретает актуальность изыскание патогенетически мотивированного средства диетической профилактики анилиновой метгемоглобинемии.
В предпринятых нами поисках такого средства мы исходили из современных представлений о роли биологических тиолов в защите молекулы гемоглобина от окислительного разрушения (ЮеЬапо!!; А. Е. Громов и В. В. Соколовский) и литературных данных о возможности восстановления метгемоглобина БН-соединениями (М. С. Кушаковский; Н. И. Луганский и Ю. И. Лобода). Эти соображения обусловили целесообразность экспериментального изучения деметгемоглобинемической активности относительно недавно синтезированного амида липоевой кислоты (липамида) — биологически активной субстанции, близкой к витаминам группы В (Бкко; В. Е. Анисимов; В. Н. Букин).
Опыты были проведены на крысах, разделенных на 2 группы — контрольную и опытную. Им ежедневно в течение 2 недель с помощью зонда однократно вводили в желудок анилин в дозе 50 мг/кг(5% раствор в растительном масле). Подопытным животным за 30 мин. до затравки и через 3 часа после нее также с помощью зонда внутрижелудочно вводили липамид в количестве 5 мг/кг. Были использованы 63 крысы, часть из них в специальных опытах по установлению фоновых показателей.
При выборе тестов, позволяющих наиболее адекватно выявить защитный эффект липамида, мы исходили главным образом из того, что анилин является прежде всего гемическим ядом. В соответствии с этим определяли концентрацию метгемоглобина в крови (Л. Э. Горн), количество телец Гейнца и ретнкулоцитов. Последние 2 показателя изучали в середине и конце опыта, так как в отличие от метгемоглобина, который образуется в эритроцитах очень быстро, тельца Гейнца и ретикулоциты выявляются значительно позже (А. М. Рашевская и Л. А. Зорина). Для суждения о возможности вмешательства с помощью липамида в биологическую судьбу анилина в организме определяли концентрацию общего парааминофенола в моче (01й-
Из гистологических и гистохимических методов применяли окрашивание гематоксилин-эозином, окрашивание на гликоген по )'1абадашу — Хочкиссу с контролем амилазой слюны, липиды выявляли Суданом III с докрашиванием гематоксилином, дезоксирибонуклеопротеиды (ДНП) и рибонуклеопротеиды (РНП) определяли по Эйнарсону, а РНП, кроме того, по Браше; общий белок — по Даниелли, суммарный белок — по Бонхагу, железо — по Перлсу.
Как показано на рисунке выраженность анилиновой интоксикации, обусловливаемая в конечном итоге процессом кумуляции яда, в ходе опы-
„ / _ в 7 _ М Дни исследования до опыта
а б в г
Анилиновая метгемоглобинемия у животных, получавших и не получавших липа-мид.
Парааминофенол: / — контроль; 2 — опыт; а — опыт; контроль: б — метгемоглобнн; в— ретикулоциты; г — тельца Гейнца.
та закономерно прогрессировала. Однако у животных, дополнительно получавших липамид, динамика развития наиболее характерных проявлений анилиновой метгемоглобинемии была почти в 2 раза замедлена по сравнению с контролем.
Полученные нами данные могут быть объяснены в свете современных представлений о механизме метгемо-глобинообразующего действия анилина. Согласно им, непосредственно ответственным за окисление гемоглобина признают не сам анилин, а продукты биотрансформации этого яда в организме (Н. В. Лазарев). Отсюда мы предположили, что липамид вызывает защитный эффект его антиоксидантными свойствами. Последние позволяют ему вмешиваться в метаболизм анилина, об интенсивности которого судят по уровню экскреции с мочой параамикофенола (И. Д. Гадаскина и В. А. Филов).
Результаты определения уровня парааминофенолурии подтвердили справедливость подобного предположения. Так, если после первого введения анилина экскреция парааминофенола в контрольной группе возрастала до 667±21 мкг/мл, то в опытной группе она составляла лишь 412± ±13 мкг/мл. Такое соотношение в дальнейшем устойчиво сохранялось. Это указывало на то, что липамид тормозит окисление анилина в организме. Поскольку в механизме действия анилина на систему крови основная роль принадлежит его дериватам, постольку у животных, дополнительно получавших липамид, анилиновая интоксикация носила более легкий характер.
Известно, в частности, что образование в эритроцитах дегенеративных изменений в виде телец Гейнца является результатом ослабления внутримолекулярной связи гема с глобином, вызываемого метгемоглобинемией (Л. Э. Горн). Тем самым меньшая интенсивность формирования телец Гейнца у подопытных животных хорошо коррелировала с уменьшенным уровнем метгемоглобинемии.
Это в свою очередь обусловило у них и меньший по сравнению с контрольными животными ретикулоцитоз — один из наиболее тонких показателей регенерации красной крови.
В конце опыта мы определяли весовые коэффициенты внутренних органов. Оказалось, что в контрольной группе они были достоверно увеличены по сравнению с опытной: например, весовой коэффициент селезенки был повышен на 240%, сердца — на 173%, надпочечников — на 154% и печени — на 137%.
Важным показателем защитного действия липамида является его влияние на патоморфологическую картину анилиновой интоксикации. Анилиновая интоксикация приводила к развитию четко выраженных дистрофических, а иногда и некробиотических изменений клеток печени, проявлявшихся в нарушении структуры печени и дискомплексации печеночных балок. Возникали резкие, очевидно, взаимосвязанные метаболические расстройства; наиболее существенным из них было снижение содержания гликогена в гепатоцитах.
У подопытных животных практически не удалось выявить заметных отклонений от морфологической картины печени, свойственной интактным белым крысам.
Патоморфологические изменения в селезенке, вызванные анилином, характеризовались прежде всего резким уменьшением количества лимфо-идных фолликулов белой пульпы и утратой ими реактивных центров. Красная пульпа почти полностью замещалась распадающимися эритроцитами, содержала обширные отложения гемосидерина. Реактивные процессы в белой пульпе селезенки подопытных животных протекали значительно интенсивнее, а гемосидероз и обеднение красной пульпы клеточными формами крови по сравнению с контрольными животными были менее выражены.
Таким образом, липамид оказывает отчетливо нормализующее влияние на гистологические и гистохимические изменения тканевых и клеточных структур печени и селезенки, вызванные анилином. Это еще раз свидетельствует о том, что липамид не только препятствует накоплению метгемогло-бина в крови, но и снижает общетоксическое действие яда на организм.
Важно отметить результаты отдельной серии опытов на кроликах(п=21) и кошках (п=5), в которой липамид оказался эффективным и на фоне уже развившейся анилиновой метгемоглобинемии. Нами установлено, что он значительно превосходит цистамин — наиболее активный из предложенных до сих пор в качестве восстановителей метгемоглобина SH-соединений и даже метиленовую синь — общепризнанный сейчас антидот метгемогло-бинообразователей. Если к тому же принять во внимание, что липамид в отличие от обоих этих препаратов принадлежит к природным веществам, то его преимущества являются еще более очевидными.
Полученные данные характеризуют липамид как высоко надежный физиологический антидот. Они являются экспериментальным обоснованием несомненной целесообразности его применения в качестве пищевой добавки к рациону лечебно-профилактического питания при работах с анилином и весьма вероятно — с другими метгемоглобинообразователями.
Что касается вопроса о рекомендуемых количествах липамида, то здесь следует прежде всего исходить из его тесной взаимосвязи в процессах метаболизма с витамином Вх, а также близости уровня физиологической потребности организма человека в указанных веществах. Поскольку величина применяемой в лечебно-профилактическом питании дневной выдачи тиамина составляет 3—4 мг, можно с достаточным основанием предложить использовать в этих целях ориентировочно такие же количества липамида.
ЛИТЕРАТУРА. АнисимовВ. Е. Биохимия и клиническое применение липоевой кислоты (витамины N). Казань, 1969. — Букин В. Н. Казанск. мед. ж., 1970, № 3, с. 125. —ГадаскинаИ. Д., Филов В. А. Превращения и определение промышленных органических ядов в организме. Л., 1971. — Горн Л. Э. Цитохимическое исследование свойств и кинетики образования метгемоглобина в отдельных эритроцитах. Автореф. дисс. докт. Л., 1968.—Громов А. Е., Соколовский В. В. Биохимия, 1968, в. 5, с. 976. — Кушаковский М. С. Клинические формы повреждения гемоглобина. Л., 1968. — Лазарев Н. В. (ред.) Вредные вещества в промышленности. Л., 1971, ч. 1, с. 542. — Луганский Н. И., Л о б о -д а Ю. И. В кн.: Фармакология и токсикология. Киев, 1968, в. 4, с. 171. — Р а ш е в-с к а я А. М., 3 о р и н а Л. А. Профессиональные заболевания системы крови химической этиологии. М., 1968. — D t k i е w i с z Т., Med. Pracy, 1960, т. 11, с. 167. — К 1 е Ь а n о f f S. J., Biochim. biophys. Acta., 1962, v. 64, p. 554. — S i с h о V., В kh.i Vitamine. Chemie und Biochemie. Jena, 1965, Bd 2, S. 1103.
Поступила 17/IV 1973 г.
4 Гигиена и санитария Ni 10
