CC BY
22
УДК 615.22012
(be)]
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ АНТИТРОМБОЦИТАРНОЙ АКТИВНОСТИ МИКРОЧАСТИЦ ПЕНТОКСИФИЛЛИНА НА ОСНОВЕ ПОЛИ^-ЛАКТИД-КО-ГЛИКОЛИДА В СРАВНЕНИИ С ПЕНТОКСИФИЛЛИНОМ
Цель - сравнительное экспериментальное изучение влияния перорального введения микрочастиц пентоксифиллина на основе PLGA и «стандартного» пентоксифиллина, на процесс АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов крыс. Материалы и методы. В качестве препарата сравнения использовалась субстанция пентоксифиллина (100 мг/кг), в роли исследуемого объекта - микрочастицы пентоксифиллина на основе PLGA (100 мг/кг) со средним динамическим радиусом 175,4 нм. В эксперименте использовались крысы-самцы линии Wistar (т = 300-330 г), одной возрастной группы (9 месяцев), разделенные на 3 группы по 6 животных. Антиагрегантную активность оценивали путем определения степени и скорости агрегации тромбоцитов через 1, 3, 5, 8 и 24 часа после перорального однократного введения препарата сравнения и исследуемого объекта. Аденозин дифосфат (АДФ) в концентрации 5 мкМ применяли в роли индуктора агрегации. Процесс агрегации регистрировали с применением системы двухканального лазерного анализатора агрегации тромбоцитов «АЛАТ - 2», длина волны 0.785 мкм, методом определения среднего относительного размера агрегатов.
Результаты. В ходе эксперимента было доказано следующее: микрочастицы пентоксифиллина на основе РLGA более эффективно уменьшают способность тромбоцитов к агрегации в течении 24 ч. исследования (больше, чем на 40%) относительно значений контрольной группы, кроме того следует отметить, что по эффективности фармакологического действия во время АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов микрочастицы соизмеримы со стандартным образцом - пентоксифиллином. Действие исследуемого объекта микрочастиц продолжается в течение 24 ч., в то время как действие препарата сравнения заканчивается через 3 часа и далее показатели группы сравнения не отличаются от показателей контроля.
Заключение. Микрочастицы пентоксифиллина на основе PLGA при пероральном введении существенным образом пролонгируют фармакологическое действие до 24 ч.
Ключевые слова: пентоксифиллин, поли-DL-лактид-ко-гликолид, микрочастицы пентоксифиллина, реологические свойства крови, антиагреганты
Для цитирования: Т.В. Тимченко, В.Е. Погорелый, А.В. Воронков, Л.М. Макарова, Л.И. Щербакова, В.А. Компанцев, А.И. Медвецкий, А.Ю. Платонова. Экспериментальное изучение антитромбоцитарной активности микрочастиц пентоксифиллина на основе поли^-лактид-ко-гли-колида в сравнении с пентоксифиллином. Фармация и фармакология. 2019;7(2): 97-104. DOI: 10.19163/2307-9266-2019-7-2-97-104 © Т.В. Тимченко, В.Е. Погорелый, А.В. Воронков, Л.М. Макарова, Л.И. Щербакова, В.А. Компанцев, А.И. Медвецкий, А.Ю. Платонова, 2019 For citation: T.V. Timchenko, V.E. Pogorelyi, A.V. Voronkov, L.M. Makarova, L.I. Scherbakova, V.A. Kompantsev, A.I. Medvetskyi, A.Y. Platonova. Experimental study of anti-thrombotic activity of pentoxyfillin microparticles: based on poly-dl-lactide-co-glycolide in comparison with pentoxyfillin. Pharmacy & Pharmacology. 2019;7(2): 97-104. DOI: 10.19163/2307-9266-2019-7-2-97-104
Т.В. Тимченко, В.Е. Погорелый, А.В. Воронков, Л.М. Макарова, Л.И. Щербакова, В.А. Компанцев, А.И. Медвецкий, А.Ю. Платонова
Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, Пятигорск, Россия
Поступила в редакцию: 09.02.2019
Принята к печати: 15.04.2019
ISSN 2307-9266 e-ISSN 2413-2241
ФАРМАЦИЯ И ФАРМАКОЛОГИЯ
EXPERIMENTAL STUDY OF ANTI-THROMBOTIC ACTIVITY OF PENTOXYFILLIN MICROPARTICLES: BASED ON POLY-DL-LACTIDE-CO-GLYCOLIDE IN COMPARISON WITH PENTOXYFILLIN
T.V. Timchenko, V.E. Pogorelyi, A.V. Voronkov, L.M. Makarova, L.I. Scherbakova, V.A. Kompantsev, A.I. Medvetskyi, A.Y. Platonova
Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - branch of Volgograd State Medical University 11, Kalinin ave., Pyatigorsk, Russia, 357532
Received: 09.02.2019 Accepted for publication: 15.04.2019
The aim of the work was a comparative experimental study of the effect of oral administration of Pentoxifylline microparticles based on PLGA, and "standard" Pentoxifylline, on the ADP-inducedplatelet aggregation process in rats. Materials and methods. Pentoxifylline substance (100 mg/kg) was used as a reference drug, and PLGA-based Pentoxifylline microparticles with an average dynamic radius of 175.4 nm were used as the object in study. In the experiment, male Wistar rats (m = 300-330 g), the same age group (9 months) were used. They were divided into 3 groups, each of 6 animals. The antiplatelet activity was assessed by determining the degree and rate of platelet aggregation in 1, 3, 5, 8 and 24 hours after a single oral administration of the reference drug and the object under study. Adenosine diphosphate (ADP) at the concentration of 5 pM was used as an aggregation inducer. The aggregation process was recorded using a two-channel laser platelet aggregation analyzerALAT-2, wavelength of0.785pm. by determining the average conventional size of the aggregates. Results. The experiment has proved the following: PLGA-based Pentoxifylline microparticles are more effective at reducing the possibility ofplatelets to aggregate within 24 hours of the investigation (more than 40%) conventional to the control group value. Besides, it should be noted that according to the effectiveness of the pharmacological action during AD-induced platelet aggregation, the microparticles are commensurate with the standard sample - Pentoxifylline. The action of the microparticle object under study lasts for 24 hours, while the effect of the reference drug is over after 3 hours and then the indicators of the reference group do not differ from those of the control onel.
Conclusion. When administered per os, PLGA-based Pentoxifylline microparticles prolong the pharmacological effect significantly - up to 24 hours.
Keywords: Pentoxifylline, poly-DL-lactide-co-glycolide, Pentoxifylline microparticles, rheological properties of blood, antiplatelet agents
ВВЕДЕНИЕ
В патологических состояниях, таких как инсульты и инфаркты пусковую роль играют тромбо-цитарные тромбы [1]. Задачей фармации является разработка и исследование высокоэффективных лекарственных средств, комплексно воздействующих на сосудисто-тромбоцитарный гемостаз [2-5]. В ряду средств, нацеленных на улучшение реологических свойств крови, наиболее широкое применение получил пентоксифиллин [6, 7]. У пациентов с комплексной кардиоваскулярной патологией пентоксифиллин имеет наиболее убедительную базу для коррекции перфузионных растройств [8, 9]. При цереброваску-лярных заболеваниях и заболеваниях периферических сосудов атеросклеротического генеза пентоксифиллин входит в стандарты лечения [10-13]. Его применение патогенетически и клинически обосновано для лечения больных системным атеросклерозом [14-16].
Известно, что пентоксифиллин играет роль слабого антагониста Р2Y- рецепторов, тем самым он конкурирует с АДФ за возможность связываться с этими рецепторами, в результате чего происходит уменьшение проагрегантного действия АДФ на пуриновые ре-
цепторы и процесс сборки интегральных рецепторов. Пентоксифиллин способствует снижению агрегации и адгезии тромбоцитов, а также обладает вазодилати-рующим эффектом. Так же он оказывает слабое кар-диотоническое действие, оно обусловлено процессом блокировки фосфодиэстеразы III типа в кардиомио-цитах [1]. Gентоксифиллин снижает процесс синтеза фибриногена, а возникновение тканевого активатора плазминогена (1-РА) усиливает, это ведет к усилению активности фибринолитической системы [1, 17-20].
Первичный метаболизм пентоксифиллина происходит в крови, в процессе которого формируются до семи метаболитов, двое из которых характеризуются выраженной антиагрегантной активностью. В печени происходит конечный метаболизм пентоксифиллина [21].
Пентоксифиллин характеризуется хорошей переносимостью, за счет этого можно сочетать его применение со многими другими лекарственными препаратами. Существующие сегодня на фармацевтическом рынке препараты пентоксифилинна требуют трехкратного приема в сутки, что делает процесс лечения довольно комплаентным. Кроме того, в случае если больной не принял препарат вовремя, наблюдается не
только снижение эффективности терапии, но и повышается риск нарушения гемореологических свойств крови. В связи с этим создание пролонгированного лекарственного средства пентоксифиллина является актуальным и перспективным [3, 22, 23].
Согласно литературным данным использование пролонгированных форм на основе PLGA (Сомату-лин, Сандостатин Лар и др.) позволяет увеличить биодоступность лекарственного средства и его доставку к органу мишени, поддерживать постоянную терапевтическую концентрацию в крови и уменьшить кратность приема. К достоинствам PLGA следует отнести также и то, что он обладает низкой токсичностью, а при попадании в организм полностью биодеградирует [23].
В Пятигорском медико-фармацевтическом институте проводятся исследования по созданию инновационной пролонгированной лекарственной формы пентоксифиллина на основе PLGA.
Целью исследования явилось изучение влияния перорального введения микрочастиц пентокси-филлина на основе поли-DL-лактид-ко-гликолида на АДФ- индуцированный процесс агрегации в сравнении с пентоксифиллином.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
ИССЛЕДОВАНИЯ
Животные
Лабораторные крысы были получены из вивария Пятигорского медико-фармацевтического института-филиала ФГБОУ ВО ВолгГМУ МЗ РФ. Содержание экспериментальных животных соответствовало действующей нормативной документацией, т. е. «Санитарным правилам по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев)». Животные содержались на стандартной диете, соответствующей действующим нормам. Кормление проводили в фиксированное время. Для питья лабораторных животных использовали поилки. Факторы внешней среды (температура, влажность, освещенность и кратность воздухообмена воздуха, состав подстилок) соответствовали требованиям по содержанию лабораторных животных Клетки, поилки для питья, подстил менялись не реже одного раза в неделю [24]. Содержание и все проводимые с животными манипуляции соответствовали требованиям Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментов и других научных целей (Страсбург, 1986 г.).
Дизайн исследования
В качестве препарата сравнения использовалась субстанция пентоксифиллина (100 мг/кг, «TCI», USA, Lot. BRDTB-FM, P 2050), в роли исследуемого объекта - микрочастицы пентоксифиллина на основе PLGA (100 мг/кг) со средним динамическим радиусом 175,4 нм, полученные на базе Пятигорского
медико-фармацевтического института. Разработана оптимальная технология получения пролонгированной лекарственной формы пентоксифиллина на основе PLGA, а именно соотношение пентоксифиллина и поли-DL-лактид-ко-гликолида (50:50), mol. wt 40.000-75.000 (Sigma) - 1:3. Точные навески полимера и субстанции пентоксифиллина подвергают растворению в 2 мл растворителя (хлороформ), далее капельно вводят готовый состав к водному раствору поливинилового спирта в концентрации 0,3%, процесс проходит при непрерывной работе гомогенизатора со скоростью 20000 об/мин на протяжении 15 минут. Готовый раствор подвергают центрифугированию со скоростью 6000 об/мин в течение 40 мин, далее надосадочную жидкость декантируют и отдают на последующий анализ. Извлеченный осадок микрочастиц промывается водой очищенной, после чего вновь центрифугируется (4 раза). Готовые микрочастицы переносятся в колбу объемом на 25 мл, и доводят до метки водой очищенной. Данная лекарственная форма была использована для проведения фармакологических исследований [22, 23].
В ходе эксперимента использовали здоровых половозрелых животных, крыс - самцов линии Wistar (m = 300-330 г), одинаковой возрастной группы (9 месяцев), прошедших карантин 14 дней.
С помощью метода случайной выборки создали три группы по 6 животных:
- 1 группа - это животные, получавшие per os 0,9% раствор натрия хлорида в эквиобъемном количестве (контрольная группа);
- 2 группа - животные, которым однократно per os вводили пентоксифиллин в дозе 100 мг/кг (опытная группа);
- 3 группа - животные, которым однократно per os вводили пролонгированную форму пентоксифил-лин в дозе 100 мг/кг (опытная группа).
Объекты исследования вводили в фиксированное время суток (8-00 - 8-30). Учитывая, тот факт, что пентоксифиллин широко используется в клинической практике перорально [25], то данный путь введения препарата был использован в дальнейшем исследовании. Для этого готовили суспензию на 0,9 % растворе натрия хлорида, которую затем и вводили животным с помощью специального зонда в объеме 10 мл/кг. Влияние объектов исследования на агрегацию тромбоцитов изучали в дозе 100 мг/кг (в пересчете на пентоксифиллин). Исходя из научных данных об эффективных терапевтических дозах пентоксифил-лина, а также с учетом коэффициента пересчета дозы с человека на крысу, путем расчета была определена данная доза препарата [26, 27].
Забор крови у животных проводили утром натощак. Для предотвращения процесса свертывания крови использовали 3,8% раствора натрия цитрата, добавляемого в соотношении 1:9. Использовалась силиконовая посуда, исключающая контактную ак-
ISSN 2307-9266 e-ISSN 2413-2241
ФАРМАЦИЯ И ФАРМАКОЛОГИЯ
тивность тромбоцитов. Индуцированную агрегацию тромбоцитов исследовали сразу после взятия крови на анализ.
Получали богатую тромбоцитами плазму (БТП) и вели подсчет числа тромбоцитов с помощью стандартного метода [28, 26]. При помощи метода центрифугирования (в эксперименте использовали центрифугу РС-6) при 400 g и 1800 g соответственно из проб крови взятых для анализа, была получена БТП. В камере Горяева с использованием микроскопического метода при фазовом контрасте проводили подсчет числа тромбоцитов в БТП. В норме в крови у крысы меняется количество тромбоцитов в широких пределах - от 430000 до 1 млн в 1 мм3 - после проведенного анализа числа тромбоцитов в БТП. Для анализа числа тромбоцитов БТП была проведена стандартизация количества тромбоцитов, для чего БПТ развели необходимым количеством БТП до 400±30 тыс . тромбоцитов в 1 мм3 в пробе.
Определяемые показатели
Антиагрегантную активность пролонгированной формы пентоксифиллина оценивали по степени агрегации тромбоцитов. Регистрацию показателей осуществляли через 1, 3, 5, 8 и 24 часа после однократного введения микрочастиц пентоксифиллина на основе поли-DL-лактид-ко-гликолида. В роле индуктора агрегации выступил АДФ АДФ (НПО «РЕНАМ», Россия) с итоговой концентрацией 5 мкМ [26].
Регистрация процесса агрегации кровяных пластинок происходила при помощи системы двухка-нального лазерного анализатора агрегации тромбоцитов «АЛАТ-2» (источником света служит полупроводниковый лазер, длина волны 0.785 мкм, НПФ «БИОЛА», Россия), методом определения среднего относительного размера агрегатов.
Методом лазерной агрегометрии провели обнаружение тромбоцитарных агрегатов и определение их размеров, которые сформированы на оценке степени рассеивания светового пучка и на анализе с флуктуаций оптической плотности, проводимой по кривой светопропускания и размера агрегатов. Данный метод позволяет исследовать процесс агрегации тромбоцитов, размеры и форму агрегантов. При добавлении индуктора степень агрегации имеет максимальное значение среднего размера агрегатов [29, 30]. По полученным агрегатограммам определяли степень агрегации тромбоцитов.
Условия при исследовании тромбоцитов на агре-гометре были приближенны к физиологическим, а именно: поддерживалась постоянная скорость перемешивания, моделирующая кровообращение, эксперимент проводился при температуре + 37°С.
Статистическая обработка результатов
Полученные данные обрабатывали пакетом прикладных программ STATISTICA 6.0 (StatSoft, Inc., США, для операционной системы Windows) и Microsoft Excel 2010. Определяли среднее значение и его стандартную ошибку (M±m). Нормальность распределения оценивали критерием Шапиро-Уилка. При нормальном распределении данных для сравнения средних использовали t-критерий Стьюдента для множественных сравнений. Различия считали значимыми при р<0,05.Пара-метрический t-критерий Стьюдента использовался при нормальном распределении данных [28].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Данные амплитуды АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов в стандартизованной плазме у контрольной группы животных через 1 ч составили 41,8±4,8 усл. ед. (табл. 1).
усл ед 1 ч. 3 ч. 5 ч. 8 ч. 24 ч.
Контроль 41,8 ± 4,8 47,0 ± 5,1 39,4 ± 2,9 37,8 ± 2,3 42,7 ± 4,8
Пентоксифиллин 23,9±1,9* x=57,2% 23,8± 1,9* x=50,6% 40,8 ± 6,8 x=103.6% 42,5 ± 2,8 x=112,4% 40,4±3,9 x=95,7%
Микрочастицы пентоксифиллина на основе PLGA 24,2±1,8* x=57,9% 27,0±2,2* x=57,4% 27,9±2,3#* x=70.8% 27,2±3,2#* x=72% 27,2±1,7*# x=63.7%
Таблица 1 - Действие микрочастиц пентоксифиллина на основе поли-DL-лактид-ко-гликолида и стандартного образца пентоксифиллина при пероральном введении в дозе 100 мг/кг на процесс АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов
Группа животных, Время наблюдения
Примечание:
*— статистически значимо (Ъ - критерий Стьюдента) относительно группы контроля; # - статистически значимо (Ъ - критерий Стьюдента) относительно группы пентоксифиллин
После однократного внутрижелудочного введения пентоксифиллина (в дозировке 100 мг/кг), степень АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов в стандартизованной плазме через 1 ч введения составила 23,9±1,9 усл. ед., (табл. 1) , т.е. на 42,8% ниже показа-
теля у крыс контрольной группы. Аналогичное влияние на агрегационную активность тромбоцитов через 1 ч после введения наблюдения констатировали и при введении микрочастиц пентоксифиллина на основе РLGA: исследуемый показатель составил 24,2±4,8
усл. ед., (табл. 1) т.е. на 42,1% ниже, чем в опытной группе. Высокая эффективность пентоксифиллина, а также микрочастиц пентоксифиллина на основе РLGA как антиагрегантного средства при АДФ-индуциро-ванной агрегации тромбоцитов была также зафиксирована и через 3 ч после введения (табл. 1).
Следует отметить, что антиагрегантное действие в обеих опытных группах в рассматриваемом временном интервале было сопоставимо. Так, в группе с пентоксифиллином исследуемый показатель составил 23,8±1,9 усл. ед. (табл. 1), а в группе микрочастиц пентоксифиллина на основе РLGA 27,0±2,2 усл. ед., в то время как в контроле - 47,0±5,1 усл. ед. (табл. 1). Таким образом, снижение агрегации тромбоцитов составило 49,4% для «стандартного» пентоксифиллина и 42,6% для микрочастиц пентоксифиллина на основе РLGA.
При исследовании в другие временные отрезки (5 ч., 8 ч. и 24 ч.) процесса агрегации тромбоцитов установлены существенные отличая влияния на исследуемого объекта от препарата сравнения.
Так, в группе животных, которые получали перо-рально пентоксифиллин в дозе 100 мг/кг, статистически значимых отличий от животных контрольной группы не выявлено (табл. 1). В тоже время у животных, которые получали перорально микрочастицы
120
пентоксифиллина на основе РLGA в аналогичной дозе, существенные отличия зафиксированы на протяжении анализируемого периода наблюдения. Так, спустя 5ч степень агрегации тромбоцитов составила 27,9±2,3 усл. ед., через 8 ч. - 27,2±3,2 усл. ед, и через 24 ч. - 27,2±1,7 усл. ед. (табл. 1). В контроле исследуемый показатель соответственно составил 39,4±2,9 усл. ед., 37,8±2,9 усл. ед. и 42,7±4,8 усл. ед. (табл. 1).
Таким образом, пролонгированная форма пен-токсифиллина на основе РLGA в дозе 100 мг/кг вну-трижелудочно однократно, в отличие от стандартного пентоксифиллина в аналогичной дозе, обладает выраженной антиагрегантной активностью не только на 1 ч. и 3 ч. эксперимента, но на 5 ч., 8 ч. и 24 ч. наблюдения, соответственно ингибируя процесс агрегации тромбоцитов на 29,2%, 28,04% и 36,3%.
Анализируя влияние объектов исследования на скорость агрегации тромбоцитов установлено, что микрочастицы пентоксифиллина на основе PLGA, в отличие от пентоксифиллина, значимо ингибиру-ют данный процесс в течение всего периода наблюдения. Так экспериментально показано, что в 1-й и 3-й часы наблюдения изучаемый показатель в обеих опытных группах статистически значимо был ниже, чем у животных без фармакологической коррекции (рис. 1).
100
80
60
40
20
0
11ч I 2ч 5ч 18ч 24 ч
Препарат сравнения пентоксифиллин
Исследуемый объект ■ микрочастицы пентоксифиллина
Рисунок 1 - Влияние пентоксифиллина и микрочастиц пентоксифиллина на основе РLGA на скорость АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов:
ISSN 2307-9266 e-ISSN 2413-2241
ФАРМАЦИЯ И ФАРМАКОЛОГИЯ
В контроле скорость агрегации тромбоцитов через 1ч и 3 ч составила соответственно 52,71±2,12 усл. ед. и 57,48±1,44 усл. ед., в группе животных, которые получали микрочастицы пентоксифиллина на основе PLGA 30,90 ±1,37 усл. ед. (через 1 ч) и 29,02±1,63 усл. ед. (через 3 ч.), а в группе животных, получавших «стандартный» препарат анализируемый показатель составил 32,20±0,82 усл. ед. и 33,62±1,36 усл. ед. соответственно через 1 ч. и 3 ч. наблюдения.
Дальнейшее изучение скорости агрегации тромбоцитов свидетельствует о существенном различии в действия микрочастиц пентоксифиллина на основе PLGA и препарата сравнения на динамику рассматриваемого процесса. В группе животных, которым был введен «стандартный» пентоксифиллин статистически значимых отличий от контрольных животных по воздействию на скорость агрегации тромбоцитов на 5, 8 и 24 ч. эксперимента не выявлено, т.е действие препарата заканчивается (рис. 1). В тоже время использование инновационной формы пен-токсифиллина существенным образом ограничивает процесс агрегации тромбоцитов в течение всего периода наблюдения (рис. 1). Кроме того, следует особо отметить, что выраженность данного процесса в данной группе животных в течение всего эксперимента сопоставима.
Генерация ТХА2 тромбоцитами и уменьшение
уровня цАМФ связано с тем, что АДФ является слабым агонистом. Зафиксированное влияние микрочастиц пентоксифиллина на основе РLGA на агрегиру-емость клеток необходимо связывать с изменениями свойств мембраны тромбоцитов.
На мембране тромбоцитов АДФ связывается с 3 пуринорецепторами (P2Y12, Р2Х1 и P2Y1). Ио-нотропный рецептор - Р2Х1 отвечает за вход в клетку экзогенного Са2+ и №+, остальные два Р2Y-рецепто-ра связаны с G-протеинами, несущими внутрь клетки сигнал стимуляции. Для того, чтобы развилась полная агрегация при воздействии на тромбоциты АДФ, требуется соединение данного агониста с обоими Р2Y-рецепторам [1]. Тот факт, что под влиянием АДФ происходит явная агрегация тромбоцитов, а также в связи с воздействием пентоксифиллина происходит существенное ее подавление, еще раз доказывает весомую роль пуринерегических рецепторов в реализации фармакологического ответа на данное лекарственное средство.
Сопоставимость антитромбоцитарного действия «стандартного» пентоксифиллина и его инновационной формы на основе РLGA, которое мы выявили на 1 и 3 ч. после перорального введения объектов исследования, свидетельствуют о сохранении биофазы при реализации антитромбоцитарного действия микрочастиц пентоксифиллина (рис. 2).
- Контроль
Пентоксифиллин
Микрочастицы пентоксифиллина
Рисунок 2 - Влияние пентоксифиллина и микрочастиц пентоксифиллина на основе РLGA на процесс АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов:
* - обозначены статистически достоверные (р<0,05) сдвиги параметров по сравнению с контролем;
# - обозначены статистически достоверные (р<0,05) сдвиги параметров по сравнению с пентоксифиллином
В тоже время длительность фармакологического ответа (24 ч.), которое мы наблюдали при исследовании микрочастиц пентоксифиллина на основе РLGA и в условиях АДФ-индукции агрегации тромбоцитов, позволяет предположить, что фармакодинамические изменения обусловлены особенностями фармакокинетики объекта исследования. Результаты проведенного иссле-
дования свидетельствуют, что микрочастицы пентокси-филлина на основе РLGA эффективно снижают (более, чем на 40%) агрегационную способность тромбоцитов в первые 3 ч. эксперимента, при этом по эффективности фармакологического действия при АДФ индуцированной агрегации тромбоцитов сопоставимы со «стандартным» пентоксифиллином (рис. 2).
PHARMACY & DOI: 10.19163/2307-9266-2019-7-2-97-104
PHARMACOLOGY
Согласно полученным данным в ходе эксперимента микрочастицы пентоксифиллина на основе PLGA (в отличие от пентоксифиллина) значимо ингибируют АДФ-ин-дуцированную агрегацию тромбоцитов и в течение 24 ч.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Использование микрочастиц пентоксифиллина на основе PLGA существенным образом способствует пролонгации действия пентоксифиллина как анти-агрегационного средства на 24 ч.
Результаты проведенных экспериментов показали, что микрочастицы пентоксифиллина на основе PLGA более эффективно уменьшают способность тромбоцитов к агрегации в первые 3 ч. исследова-
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Дубенко О.Е. Сосудистые и другие клинические эффекты пентоксифиллина (научный обзор) // Международный неврологический журнал. 2016. № 1 (79). С. 107-112.
2. Воронков А.В., Поздняков Д.И. Нарушение анти-тромботической функциисосудистого эндотелия и некоторых параметров плазменного гемостаза на фоне фокальной ишемии головного мозга и их коррекция гидрокси-3,5-дитретбутил коричной кислоты // Тромбоз, гемостаз и реология. 2017. № 2(70). С. 73-78. DOI: 10.25555/THR.2017.2.0788.
3. Кучерявенко А.Ф., Спасов А.А., Петров В.И., Анисимова В.А. Антиагрегантная активность нового производного бензимидазола // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2013. - № 12. - С. 760-762.
4. Dhiman S., Mishra N., Sharma S. Development of PEGylated solid lipid nanoparticles of pentoxifylline for their beneficial pharmacological potential in pathological cardiac hypertrophy // Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology. - 2016. - Vol. 44, №8. - P. 1901-1908. D0I:10.3109/21691401.2 015.1111234.
5. Jampilek J., Zaruba K., Oravec M., Kunes M., Ba-bula P., Ulbrich P., Brezaniova I., Opatrilova R., Triska J., Suchy P. Preparation of silica nanoparticles loaded with nootropics and their in vivo permeation throughblood-brain barrier // Biomed Research Interest. 2015. - Vol. 2015. - 9 p. Article ID 812673. D0I:10.1155/2015/812673.
6. Шавловская О.А., Шварков С.Б. Области применения Трентала (пентоксифиллина) в неврологии // Неврология и Психиатрия. - 2011. - №3. -C. 16-20.
7. Guyatt G.H., Norris S.L., Schulman S. American College of Chest Physicians (2012) Methodology for the development of antithrombotic therapy and prevention of thrombosis guidelines: Antithrombotic Therapy and Prevention of Thrombosis, 9th ed: American College of Chest Physicians Evidence-Based Clinical Practice Guidelines // Chest. - 2012. - №141(2 Suppl). - P. 53S-70S. D0I:10.1378/chest.11-2288.
8. Fernandes J.L., de Oliveira R.T., Mamoni R.L. Pentoxifylline reduces pro-inflammatory and increases anti-inflammatory activity in patients with
ния (больше, чем на 40%). Следует отметить, что по эффективности фармакологического действия во время АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов микрочастицы соизмеримы со стандартным образцом. Согласно полученным данным в ходе эксперимента микрочастицы пентоксифиллина на основе поли-DL-лактид-ко-гликолида (в отличие от пенток-сифиллина) значимо ингибируют АДФ-индуциро-ванную агрегацию тромбоцитов и в течение 24 ч.
БЛАГОДАРНОСТИ
Работа выполнена при поддержке гранта Всероссийского молодежного научно-инновационного конкурса «УМНИК-2015» №7894ГУ/2015.
coronary artery disease - a randomized placebo-controlled study // Atherosclerosis. - 2008. - Vol. 196, No1. - P. 434-442. DOI:10.1016/j.atherosclero-sis.2006.11.032.
9. Jull A, Arroll B, Parag V Pentoxifylline for treating venous leg ulcers // Cochrane Database Syst. Rev. 2007. - No3: CD001733. DOI:10.1002/14651858. CD001733.pub2.
10. Моисеев С. Пентоксифиллин (Трентал) в лечении хронической дисциркуляторной энцефалопатии В // РМЖ. - 2010. - Т. 18, № 3. - С. 159-163.
11. Парфенов В.А. Диагноз и лечение хронического цереброваскулярного заболевания, применение пентоксифиллина // Неврология, нейропсихиа-трия, психосоматика. - 2016. - Т. 8, №3. - С. 4-9. DOI: 10.14412/2074-2711-2016-3-4-9.
12. Танашян М.М., Домашенко М.А. Трентал при ишемических цереброваскулярных заболеваниях (обзор литературы) // Нервные болезни. - 2005. -№ 4. - С. 21-24.
13. Мохорт Т.В. Хронические осложнения сахарного диабета: фокус на пентоксифиллин // Медицинские новости. - 2015. - №4. - С. 4-9.
14. Кузнецов М.Р., Магнитский Л.А. Возможности амбулаторного лечения хронической ишеми нижних конечностей // Стационарозамещающие технологии: Амбулаторная хирургия. - 2017. -№ 3-4. - С. 30-35.
15. Heinze H., Rosemann C., Weber C. A single prophylactic dose of Pentoxifylline reduces high dependency unit time in cardiac surgery - a prospective randomized and controlled study // Eur. J. Cardio-thorac. Surg. - 2007. - Vol. 32, No1. - P. 83-89. DOI:10.1016/j.ejcts.2007.04.011.
16. Nisi A., Panfili M., De Rosa G., Boffa G., Grop-pa F., Gusella M., Padrini R. Pharmacokinetics of pentoxifylline and its main metabolites in patients with different degrees of heart failure following a single dose of a modified-release formulation // J Clin Pharmacol. - 2013. - Vol. 53, No1. - P. 51. DOI:10.1177/0091270011433435.
17. Мироджов Г.К., Азимзода С.М., Пулатова С.Д. Пентоксифилин в терапии цирроза печени // Здравоохранение Таджикистана. - 2017. - № 3. - С. 45-51.
18. Cernea S., Cahn A., Raz I. Pharmacological man-
ISSN 2307-9266 e-ISSN 2413-2241
ФАРМАЦИЯ И ФАРМАКОЛОГИЯ
agement of nonalcoholic fatty liver disease in type 2 diabetes // Expert Rev Clin Pharmacol. - 2017. -Vol. 10, No5. - P. 535-547. D01:10.1080/17512433 .2017.1300059.
19. Eshraghi A., Naranji-Sani R., Pourzand H., Pour-zand H., Vojdanparast M., Morovatfar N., Ramezani J., Khamene-Bagheri R., Nezafati P. Pentoxifylline and prevention of contrast-induced nephropathy: Is it efficient in patients with myocardial infarction undergoing coronary angioplasty // ARYA Atheroscler. - 2016. - Vol. 10, No5. - P. 238-242.
20. Сорокин Э.П., Пономарев С.В., Шиляева Е.В. Грицан А.И. Влияние применения пентоксифиллина на показатели свертывающей системы у пациентов с торакоабдоминальными травмами // Медицинский вестник Юга России. - 2016. -№ 2. - С. 72-74.
21. Струков М.А., Резников К.М., Василенко И.В. Фирсова Л.И. Фармакокинетика пентоксифиллина и его активного метаболита у больных с черепно-мозговой травмой // Прикладные информационные аспекты медицины. 2015. № 4. С. 15-21.
22. Тимченко Т.В., Блинов А.В., Серов А.В., Щербакова Л.И., Компанцев В.А., Маркова О.М., Медвецкий А.И., Платонова А.Ю. влияние скорости, времени гомогенизации, вида поверхностно-активного вещества на размер и форму наночастиц пентоксифиллина на основе поли-DL-лактид-ко-гликолида // Фармация и фармакология. - 2017. - Т. 5, №2. - С. 177-194. DOI: 10.19163/2307-9266-2017-5-2-177-194
23. Тимченко Т.В., Щербакова Л.И., Компанцев В.А. Поли-DL-лактид-ко-гликозид: методы получения, свойства и использование для разработки лекарственных препаратов со средствами микро - и нанодоставки // Современные проблемы науки и образования. - 2015. - № 4.
24. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник. - М.: Медицина, 1987. - 368 с.
25. Скворцов А.А., Габбасов З.А., Попов Е.Г., Наумов В.Г., Окур Ф.М., Мухарлямов Н.М. Новые подходы в изучении агрегации тромбоцитов у больных с дилатационной кардиомиопатией // Терапевтический архив. - 1989. - № 2. - С. 95-97.
26. Меньшиков В.В. Клиническая лабораторная диагностика. Т. 3. Частные технологии в клинической лаборатории. - М.: Лабпресс, 2000. - 384 с.
27. Хабриева Р.У Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: Медицина, 2005. -832 с.
28. Сернов Л.Н., Гацура В.В. Элементы экспериментальной фармакологии. - М., 2000. - 352 с.
29. Габбасов З.А., Попов Е.Г., Гаврилов И.Ю. Новый высокочувствительный метод анализа агрегации тромбоцитов // Лабораторное дело. - 1989. -№ 10. - С. 15-18.
30. Габбасов З.А., Попов Е.Г., Гаврилов И.Ю. Позин Е.Я., Маркосян Р. А. Новый методический подход к исследованию агрегации тромбоцитов in vitro // БЭБМ. - 1989. - № 10. - С. 437-439.
КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
АВТОРЫ
Тимченко Татьяна Викторовна - аспирант кафедры неорганической, физической и коллоидной химии, Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия. Е-тт1:а^кап@таП.
Погорелый Василий Ефимович - доктор биологических наук, профессор кафедры фармакологии с курсом клинической фармакологии Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия.
Воронков Андрей Владиславович - доктор медицинских наук, доцент, заведующий кафедрой фармакологии с курсом клинической фармакологии Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия.
Макарова Лариса Михайловна - кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры патологии Пятигорского медико-фармацевти-
ческого института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия.
Щербакова Лариса Ивановна - кандидат фармацевтических наук, доцент, заведующий кафедрой Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России, г. Пятигорск, Россия.
Компанцев Владислав Алексеевич - доктор фармацевтических наук, профессор кафедры неорганической, физической и коллоидной химии, Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России.
Медвецкий Александр Игоревич - кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры неорганической, физической и коллоидной химии Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России.
Платонова Анна Юрьевна - студентка 5 курса Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолГМУ Минздрава России.
