CC BY
6
и цинеб в дозе 185 мг/кг, при которой наблюдалось повышение активности. Через 3 мес произошло резкое снижение активности арилсульфатаз А и В, которое к 4-му месяцу сменялось выраженным ее повышением при всех дозах воздействия пестицидов. Исключение составил хлорофос в дозе 10 мг/кг, не вызвавшей изменения, и в дозе 52 мг/кг, при которой уровень активности фермента оставался пониженным (Я<0,05). Несколько иной характер носили изменения активности (3-глюкуронндазы. Уже через 1 мес после воздействия активность фермента в миокарде резко возросла, затем по мере увеличения длительности интоксикации через 3 мес активность достоверно снизилась (исключение составили дозы медного купороса и цинеба, при которых уровень (5-глюкуронидазы оставался повышенным). К 4-му месяцу интоксикации вновь была выявлена тенденция к увеличению активности фермента (рис. 1 и 2).
Изменения активности указанных выше ферментов в сыворотке крови обнаруживают обратную зависимость по сравнению с соответствующими показателями в гомогена-те миокарда. Так, активность арилсульфатазы в сыворотке крови к концу 1-го месяца интоксикации имела тенденцию к снижению, к 3-му месяцу снижение сменилось повышением, а к концу эксперимента (через 4 мес) активность фермента во всех сериях опытов либо возвращалась к уровню, близкому к контролю, либо оставалась ниже этого уровня (рис. 3).
Активность Р-глюкуронидазы существенно увеличилась через 3 мес интоксикации и практически мало изменялась в остальные сроки исследования (рис. 4).
Резкому повышению активности ферментов на 3-м месяце в сыворотке крови соответствовало ее понижение в го-могенате миокарда. Обнаруженная зависимость связана, по-видимому, с нарушением целостности клеточных мембран, что приводит к повышенному выбросу ферментов в кровь.
Определенный интерес представляют данные исследования концентрации сиаловых кислот в миокарде при воздействии пестицидов. Как видно на рис. 5, содержание сиаловых кислот существенно уменьшалось с 1-го месяца, на 3-м месяце это снижение достигало максимума, а на 4-м месяце интоксикации наблюдалась тенденция к восстановлению показателя до исходной величины в контроле. Следует отметить, что малые дозы пестицидов вызывали более выраженные изменения содержания сиаловых кислот.
Таким образом, при интоксикации изученными пестицидами обнаруживается отчетливая корреляционная связь между динамикой изменения концентрации сиаловых кислот и активности исследуемых ферментов в миокарде животных.
Выявленное нами снижение концентрации сиаловых кислот, по-видимому, обусловлено непосредственным их участием в процессах детоксикации ядов, снижением скорости синтеза сиаловых кислот, усилением выхода из лнзосом в цитоплазме клеток нейраминидаз и повышением их каталитической активности. Возможно, что все эти факторы имеют место, но доля участия каждого из них на разных этапах интоксикации неодинакова. Изменение содержания сиаловых кислот в миокарде при интоксикации пестицидами может играть существенную роль в нарушении проницае-
мости клеточных мембран, в том числе лизосомальных, и выходе ферментов в цитоплазму клеток и кровь, что приводит к усилению катаболических процессов и накоплению продуктов распада макромолекул.
Периодическая активация лизосомальных ферментов при интоксикации пестицидами может способствовать усилению обратной связи, необходимой для активации генома, и ускорению репаративных процессов и других молекулярных перестроек, направленных на устранение повреждающего действия пестицидов на миокард. Это предположение совпадает с результатами морфологического исследования сердца, в котором при длительном воздействии малых доз пестицидов наряду с признаками повреждения выявлена активация внутриклеточной регенерации кардиомиоцитов.
Таким образом, можно сделать вывод об участии кислых лизосомальных гидролаз и сиаловых кислот в патогенезе повреждения миокарда при воздействии пестицидов. Изучение данных показателей может быть использовано для выявления кардиотоксического действия химических веществ. .
4
Литература
1. Асатиани В. С. Ферментные методы анализа. — М.. 1969. — С. 508—509.
2. Каган 10. С., Трахтенберг И. М„ Радионов Г. А. и др. Ii Гиг. и сан. — 1974. — № 3. — С. 23—27.
3. Коровкин Б. Ф. //Вести. АМН СССР. — 1982. — № 9. — С. 69—74.
4. Покровский А. А., Тутельян В. А. Лизосомы. — М„ 1976.
5. Покровский А. А., Арчаков А. И. // Современные методы в биохимии. — М., 1968. — Т. 2.— С. 5.
6. Сабурова А. М. // Некоторые вопросы нормальной и патологической биохимии. — Душанбе, 1967. — С. 62— 64.
7. Трахтенберг И. М. // Токсикология. М., 1978. — Т. 10, —С. 51.
8. Трахтенберг И. М., Тычинин. В. А., Всрич Г. Е. // Гигиена труда. — Киев, 1978. — Вып. 14. — С. 74—85.
9. Трахтенберг И. М„ Тычинин В. А., Верич Г. В., Крас-нокутская Л. М. // Современные вопросы токсикологии и гигиены применения пестицидов и полимерных материалов. — Киев, 1985. — С. 120.
10. Цветкова И. В.// Всесоюзный биохимический съезд, 2-й: Тезисы докладов на симпозиумах. — Ташкент, 1969, —С. 332—333.
11. Чекунова М. П., Фролова А. Д. // Гиг. и сан. — 1983, — № 4, — С. 11—12.
12 Шкребнева И И. // Здравоохр. Белоруссии. — 1983. — №2, —С. 48-51.
13 .Bradford М. М.// Analyt. Biochem. — 1976. —
Vol. 72,—P. 248—254.
14 Horgan J. E. //Clin. chim. Acta. — 1981.— Vol. 116,— P. 409—415.
Поступила 13.12.85
УДК 614.37:667.61-07:612.616.2
А. Н. Боков, Р. Ф. Комарова, Т. П. Ряб ко, С. Я. Федорчук
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКИХ ВИДОВ БИОЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЛАКОКРАСОЧНЫХ МАТЕРИАЛОВ НА ОСНОВЕ СИНТЕТИЧЕСКИХ СМОЛ
Ростовский медицинский институт
Массовое применение лаков и красок в жилой среде ний сперматогенеза у мужчин и невынашивания беремен-
среди прочих полимерных строительных материалов в зна- ности у женщин, ухудшение здоровья детей и пр.). Между
чительпой степени обусловливает рост химической нагрузки тем этот аспект биологической активности лакокрасочных
на современного человека [I], с чем связано, по мнению материалов совершенно не изучен. В задачи данного иссле-
исследователей |10], учащение расстройств репродуктивной дования входили выявление и оценка специфичности воз-
функции (увеличение частоты бесплодных браков, наруше- можного влияния лакокрасочнных материалов на репродук-
Таблица 1
Результаты санитарно-химических исследований образцов лакокрасочных материалов (М±т)
Материал Исследуемое вешество Концентрация вещества, мг/м3
Эмаль ЭП-525 Эпихлоргидрии 0,057^0,019
Гексаметилендиамин Н/о
Ацетон 2,025±1,056
Ксилол 2,9874=1,262
Бутилацетат Н/о
Эмаль ФЛ-62 Фенол Н/о
Формальдегид Н/о
Дифенилолпропан 0,707±0,071
Дивинил 0,280+0,051
Акрилонитрил Н/о
Эпихлоргидрии Н/о
Бутилацетат 3,800 + 0,528
Этнлцеллозольв 6,300+1,049
Ксилол 7,990±0,180
Примечание. Н/о — не обнаружен.
тивную функцию мужского организма. Представлены материалы исследования эмалей ЭП-525 (на основе эпоксидной смолы Э-41) н ФЛ-62 (на основе смеси эпоксидной 3-40 и фенолоформальдегиднон СФ-302 1 С смол). Работа выполнялась в рамках общей методической схемы гигиенической оценки новых полимерных строительных материалов, рекомендованной к применению [6]. Специфика настоящего исследования потребовала некоторой модификации указанной методики в соответствии с разработками С. Я. Федор-чук [11]: в камерах-генераторах моделировали процесс пульверизацнонного напыления лакокрасочных материалов с учетом норм их расхода и прочих технологических требований. Проводили санитарно-химические, токсикологические, цитогенетнческие исследования, а также изучали репродуктивную функцию мужского организма.
На основании анализа рецептуры изучаемых материалов был составлен перечень веществ, способных мигрировать в воздушную среду в процессе нанесения. Содержание этих соединений в воздухе определяли описанными в литературе современными методами санитарно-химнческого анализа, ' включая тонкослойную хроматографию (гексаметиленди-амин [4]) и газожидкостную хроматографию (ацетон, бу-тилацетат, ксилол, эпихлоргидрии, этнлцеллозольв [5]. Было показано, что оба исследуемых материала являются источниками выделения в воздушную среду комплексов биологически активных веществ, суммарное содержание которых в долях от ПДК для воздуха рабочей зоны было значительно ниже единицы: 0,117 для эмали ЭП-525 и 0,203 для эмали ФЛ-62 (табл. 1).
Следующим этапом исследований явился хронический токсикологический эксперимент. В опытах использовано 57 белых крыс-самцов, разбитых на 3 группы. Животные 1-й группы подвергались воздействию эмали ЭП-525, 2-й группы — эмали ФЛ-62, 3-я группа служила контролем. Затравку осуществляли по 4 ч ежедневно, кроме субботы и воскресенья, в течение 2'/г "ее. В затравочные камеры с контрольными животными подавали чистый атмосферный воздух; к животным опытных групп воздух поступал из камер-генераторов, в которых моделировали условия нанесения эмалей методом пульверизацнонного напыления.
Состояние подопытных животных оценивали с использованием следующих интегральных и специфических тестов: поведение, внешний вид, динамика массы тела, морфологический состав периферической крови, содержание гемоглобина, уровень общего белка сыворотки крови, активность ряда сывороточных ферментов (холинэстераза, ала-нинаминотрансфераза, перокендаза), суммационно-порсго-вого показателя (СПП). Оценивали также состояние печени с помощью пробы Квика — Пытеля, состояние выдели-
Таблица 2
Функциональные и морфометрические показатели сперматогенеза
Группа животных
Показатели контрольная 1-я 2-я
Сперматозоиды:
время подвижности, мин
концентрация, млн/мл количество мертвых, % количество живых, % Индекс сперматогенеза Количество нормальных
слерматогоннев Количество канальцев со слущенным эпителием. %
Количество канальцев с 12-й стадией мейоза
308.0±8.70 •19.2±7.51 15.9±3,П 84.10±3,!1 2.92+0,10
56,10±1,21
2.60±|,06 1.30±0.68
283.5±3,21 • 16.86± 10.81 •19,90±2,71 51,10±2,12* * 2.72+0,15
•15.20+0.93*'
1.90±0,98 8.10±2,35
¡.ОгЗ.бО' 11-4.67
и)=4.22» о ■ - 5.65* Г.1 - 0.22
17.6 ' 1.68*
,0и+1.26 30+3.17
П р и м с ч а н и е. Здесь и в табл. 3 одна звездочка — различия достоверны прн £><0,05, две звездочки—при £><0,01.
тельной системы с помощью бромсульфалеиновой пробы. Исследования выполняли 1 раз в неделю. По окончании затравочного периода животных забивали методом прерывания спинного мозга в шейном отделе; определяли массовые коэффициенты внутренних органов, проводили их па-тогнстологнческое исследование.
На основании результатов санитарно-химических и токсикологических исследований оба материала получили положительную гигиеническую оценку. Однако ряд химических соединений из числа фактически мигрирующих в воздушную среду обладает, по данным литературы, мутагенной и гонадотронной активностью (эпихлоргидрии |12|, фенол [9], ацетон [8], формальдегид [2]), что обусловило необходимость специальных исследований.
Цитогенетическое действие материалов изучали согласно методическим рекомендациям [3]. Были проанализированы 2610 препаратов от 17 животных контрольной и опытных групп. У животных 1-й группы при неизмененной структуре аберраций в клетках костного мозга отмечалось достоверное увеличение их общего числа (7,03±0,89 % анафаз против 4,40±0,65 % в контроле, Р< 0,05). что доказывает наличие цитогенетнческого действия данного материала. Эмаль ФЛ-62 не вызвала достоверных изменений ни в структуре, ни в частоте аберраций.
Состояние репродуктивной функции самцов оценивали в соответствии с методическими указаниями [7]; для этой цели дополнительно использовали 51 интактную самку. Макроскопически определяли размеры и коэффициенты
Таблица 3
Показатели развития костного скелета у эмбрионов едыс на 21-й день беременности (М±т)
Группа животных
Показатель
Длина эмбрионов, см Число позвонков Коэффициент длины зачатка:
плечевой кости
локтевой 9
лучевой »
бедренной >
болыпеберцовой « малоберцовой » ключи цы лопатки
подвздошной кости лонной »
седалищной »
пижнечелюстной »
0.10^0.001 0.105+0.003 0.080±0,002 0.079±0,002 0.091 ±0,002 0.082 ±0,002 0.0й9±0.003 и, 091 ±0,003 0, С 62 ±0,002 0,038+0,002 0.032±0,001 0.027±0,007
3,2±0,0в 31,0±0,30
0,083 + 0, 0.080"л0, 2,067±0, 0,061+0, 0,072±0, 0.066±С 0,(18-1+0. 0,081+0, 0.052+0, 11,030+0 0,020±0, 0,023 ±0,
003** 005*' ОСЗ*-002'* 001«* 002** 006* 003* 001 *» 002** 001** 001*
3.2±0,05 33,2+0. !4
0,100±0,002 0.105±0,004 0.080±0.00о 0,075±0,002 0,088±0.001 0,080±0,001 0,098+0.007 0,091 ±0.003 0.059±0,001 0,036+0.002 0,025±0.ад** 0,025±0,001
•^тУ
массы семенников, оценивали оплодотворяющую способность животных, изучали эмбриональный материал, полученный при спаривании подопытных самцов с интактными самками. Прямую оценку сперматогенеза осуществляли по ряду функциональных и морфометрическнх показателей, таких, как соотношение живых и мертвых сперматозоидов, индекс сперматогенеза по Fogg и Cowing, количество нормальных сперматогониев в канальцах, доля канальцев со спущенным эпителием и с 12-й стадией мейоза.
Результаты исследований представлены в табл. 2. Как видно из табл. 2, отмечаются статистически достоверное уменьшение времени подвижности сперматозоидов, уменьшение количества нормальных сперматогониев в канальцах семенников, изменение соотношения живых и мертвых сперматозоидов в сторону увеличения доли последних. Установлено возрастание послеимплантационной гибели плодов во 2-й группе: 25,48±8,68 % против 3,66±1,01 % в контроле (Я<0,05). Выявлено снижение доли забеременевших самок, несмотря на наличие у всех у них желтых тел: забеременели 76,5 % самок, спаренных с самцами 1-й группы (Я< <0,05) и 72,2 % самок, спаренных с самцами 2-Я группы (Я<0,05). Полученные данные свидетельствуют о явном ухудшении оплодотворяющей способности самцов опытных групп, что, очевидно, отмечено уменьшением процента живых сперматозоидов и сокращением времени их подвижности.
Воздействие газовыделений из изучаемых образцов лакокрасочных материалов на организм самцов отразилось и на развитии их потомства. Эмбрионы в опытных группах имели меньшие размеры по сравнению с контрольными, а у тех из них, которые были зачаты от самцов 1-й группы, отмечалось замедление развития костного скелета: коэффициенты длины зачатков окостенения были достоверно меньше, чем у потомства интактных животных (табл. 3). Кроме того, у эмбрионов обеих опытных групп достоверно чаще встречались врожденные аномалии развития: в 1-й группе число эмбрионов с дефектами развития составило 44,7±4,8 % (Я<0,05), во 2-й — 31,3±4,1 % (Я<0,01) при 6,3±1,3% в контроле. В опытных группах встречались такие аномалии, как нарушения развития глаз (микрофталь-мия, монофтальмня), скелетные аномалии, отсутствующие в контроле, где преимущественно наблюдались внутренние и подкожные кровоизлияния.
На основании результатов исследования разработаны гигиенические регламенты применения эмалей ЭП-525 и ФЛ-62 с точки зрения условий труда при их нанесении. Эти материалы рекомендованы для окраски вспомогательных помещений группы «Г» с кратковременным пребыванием людей; они включены в «Дополнение к перечню полимер-
пых материалов и изделий, разрешенных к применению в стронтельстве> (1981).
Результаты настоящего исследования свидетельствуют, что положительная гигиеническая характеристика полимерных лакокрасочных материалов по их общетоксическому действию, даже подтвержденная благоприятными результатами цнтогенетнческих исследовании, еще не гарантирует безопасности материалов в отношении влияния их на репродуктивную функцию мужского организма. Поэтому необходимо изучение последней в рамках общей методической схемы гигиенической оценки новых полимерных материалов |6].
Литература
1. Боков А. Н., Станкевич К■ И.. Стяжкин В. М. и др.// Гигиена и токсикология высокомолекулярных соединений и сырья, используемого для их синтеза. — Л., 1979._С. 113_117
2. Гусева В. А. // Гиг. и сан. — 1972. — № Ю. —С. 102— -103. f
3. Гуськова С. И. Цигогенетические исследования полимерных строительных материалов (Метод, рекомендации). — Ростов н/Д., 1978.
4. Духовная И. С. // Гиг. и сан. — 1980. — № 8. — С. 49.
5. Методические указания на определение вредных веществ в воздухе. — М., 1979. — С. 101—103.
6. Методические указания по санитарно-гигиеническому контролю полимерных строительных материалов, предназначенных для применения в строительстве жилых и общественных зданий. — М., 1980.
7. Методы экспериментального исследования по установлению порогов действия промышленных ядов на генеративную функцию с целью гигиенического нормирования/Саноцкий А. В., Фоменко В. Н., Сальникова Л. С. и др. —М.. 1978.
8. Низяева И. В. // Гиг. труда. — 1982. — № 6. — С. 24-29.
9. Никифоров В. Г. //Общая генетика. — М.. 1965. — С. 113—172.
10. Саноцкий И. В., Фоменко В. И. Отдаленные последствия влияния химических соединений на организм.— М„ 1979.
11. Федорчук С. Я.//Гигиенические аспекты применения полимерных материалов в строительстве. — Ростов н/Д., 1981. —Вып. 4.— С. 79—82.
12. Picciano D. //Mutât. Res. — 1979.— Vol. 66. — P. 169— 173. V»
Поступила 01.04.86
УДК 614.37:1615.462:678.41.033:615.011.17
Ю. Г. Чикишев, Т. П. Зеленева, Е. А. Кузнецова, Э. 3. Ольпинская
ЗАВИСИМОСТЬ УРОВНЯ МИГРАЦИИ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ИЗ МЕДИЦИНСКИХ РЕЗИН ОТ УСЛОВИЙ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ВЫТЯЖЕК
НИИ резиновых и латексных изделий, Москва
Степень пригодности медицинских резиновых изделий определяется в первую очередь их саннтарно-хнмическимн свойствами.
Ранее нами были изучены зависимости миграции низко-молекулярных веществ из резин медицинского назначения от рецептурного состава в водные вытяжкн [4). Данная работа посвящена установлению зависимости уровня миграции химических соединений из резин медицинского назначения от эксплуатационных факторов (температуры, времени, удельной поверхности образца) в водные вытяжки и воздушную среду.
Исследованы вещества, мигрирующие из реальных и модельных резин, изготовленных на основе натурального
(ИК) и бутилового (БК) каучуков с тиурамом (ТМТД), сульфенамндом Ц (СА-Ц) в качестве ускорителей вулканизации и белой сажей БС-50 и смесью мел — литопон в качестве наполнителей. Остальная часть рецепта смесей одинакова.
Качество водных вытяжек оценивали по параметрам, приведенным в таблице.
Среди газообразных веществ исследовались соединения, способные образовываться во время вулканизации: сероводород, сернистый ангидрид, меркаптаны, амины, непредельные соединения. Вышеуказанные вещества определяли наиболее чувствительными физико-химическими методами: тонкослойной и газовой хроматографией, УФ-спектроскопи-
