CC BY
15
УДК 617.753.2-089.844
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СКЛЕРОПЛАСТИКИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫМ ТРАНСПЛАНТАТОМ
Л.Д.АНДРЕЕВА, Е.Н.ИОМДИНА, Е.П.ТАРУТТА, Ж.Н.ИВАЩЕНКО, Г.А.МАРКОСЯН, С.И.ШКУРЕНКО, Н.В.ЕФИМОВА
Московский НИИ глазных болезней им.Гельмгольца Всероссийский НИИ синтетического волокна (Тверь)
Несмотря на несомненные успехи, достигнутые в последние годы в разработке синтетических трансплантатов для склеропластики при прогрессирующей миопии (1, 2, 3, 4, 6), поиск новых материалов, обеспечивающих высокий стабилизирующий эффект склероукрепляющей хирургии, остается актуальной научной задачей. В этом отношении перспективным является создание синтетических материалов нового поколения с заданными биологическими свойствами, в частности, стимулирующими процессы коллагенообразования и улучшающими гемодинамику в оболочках миопического глаза.
В качестве такого пластического материала был предложен трансплантат, представляющий собой трикотажное полотно из полиэфирного волокна с полимерным покрытием на основе сополиамида Е-капролактама и гексаметилен-диаммонийадипината, содержащим лекарственный препарат панаксел (патент РФ №2239421 от 10.11.2004). Полиэфирное трикотажное полотно ячеистой структуры позволяет трансплантату выполнять роль конструкционного каркасного материала. Полимерное покрытие фиксирует структуру трикотажа, не позволяет разволокняться краям трансплантата, сохраняет его форму, а также депонирует лекарственный препарат панаксел. Именно этот германийсодержа-щий препарат на основе селективных штаммов женьшеня, ускоряющий проли-феративно-репаративные процессы в тканях организма, и обусловливает комплексную биологическую активность разработанного трансплантата (5).
Цель работы - экспериментально-морфологическое изучение результатов склеропластики с использованием нового биологически активного синтетического трансплантата, содержащего препарат панаксел.
Материал и методы. Методика проведения операции склеропластики в эксперименте была следующей. После эпибульбарной анестезии 1% раствором дикаина проводили разрез конъюнктивы и теноновой капсулы длиной 2 мм в верхне-наружном квадранте глазного яблока. На поверхность этого сегмента склеры укладывали трансплантат, который подшивали к склере узловым швом, затем разрез конъюнктивы ушивали и закапывали 0.25% раствор левомицетина. В сроки от 14 дней до 10,5 месяцев оперированные глаза энуклеировали и подвергали морфологическому изучению. Экспериментальный материал (14 глаз кроликов породы «шиншилла») был разделен на 2 серии: 1 серия (контроль) -склеропластика проводилась с использованием трансплантата, не содержащего препарат панаксел; 2 серия (опыт) - для склеропластики использовали транс-
плантат, содержащий панаксел. В работе применяли гистологические и гистохимические методы исследования. Глаза фиксировали в 10% формалине, проводили по спиртам, заливали в парафин. Препараты окрашивали гематоксилин-эозином. Гликозаминогликаны (ГАГ) изучали с помощью реакций с альциано-вым и толуидиновым синим при различных рН растворов. Проводили среднеарифметический подсчет новообразованных сосудов в одном поле зрения.
Результаты и обсуждение. Через 14 дней после операции наблюдается плотное прилегание трансплантата к склере реципиента. Вокруг трансплантата - асептическая реакция с выраженной макрофагальной инфильтрацией. Среди клеточных элементов отмечены также лимфоциты, гигантские клетки инородных тел и псевдоэозинофилы (нейтрофилы). Соединительнотканная капсула окружает трансплантат со всех сторон, со стороны склеры она значительно тоньше, чем со стороны теноновой оболочки. Капсула имеет двойную структуру - внутренняя часть представлена зрелыми коллагеновыми волокнами, ориентированными параллельно друг другу, и фибробластами различной зрелости, периферия состоит из тонких рыхло и хаотически расположенных волокон. Трансплантат представлен поперечно срезанными нитями, между которыми наблюдаются грануляционная ткань с большим количеством клеточных элементов и новообразованные сосуды. Наряду с этим в центре трансплантата в небольшом количестве определяется зрелая соединительная ткань, состоящая из зрелых утолщенных коллагеновых волокон и фибробластов. По мере образования и развития соединительной ткани в результате деятельности фиброкла-стов тонкие коллагеновые волокна постепенно исчезают, одновременно образуются толстые волокна и пучки, направленность которых определяется функциональной нагрузкой на данный участок ткани. Новообразование и созревание соединительной ткани проходит несколько этапов: рост капилляров, миграция и пролиферация фибробластов, синтез и накопление ГАГ, биосинтез коллагена, фибриллогенез, созревание коллагеновых волокон. Постепенно грануляционная ткань замещается фиброзной.
Морфологическая картина приживления синтетического трансплантата, содержащего панаксел, была схожей с контролем. Однако образование и созревание соединительной ткани в опыте протекало более активно: фиброзная капсула толще, в центре имплантата новообразованная соединительная ткань более выражена, количество фибробластов увеличено. Сосуды наблюдались в фиброзной капсуле и в новообразованной соединительной ткани, в центре имплан-тата. В опыте они составляли ~3.5, в контроле ~2.0 в одном поле зрения. ГАГ обнаружены в новообразованной соединительной ткани, очаги активного накопления - в грануляционной ткани, вокруг нитей трансплантата. Между нитями наблюдаются одноядерные и многоядерные макрофаги, которые очень медленно резорбируют эти нити. Деструкция последних происходит благодаря фагоцитарной активности макрофагов и лизирующей деятельности гигантских клеток инородных тел. Активность этих клеток нарастает по мере увеличения срока пребывания трансплантата и прорастания через его поры соединительной ткани. Вслед за макрофагами в пространство между нитями трансплантата проникают молодые фибробласты, что способствует формированию соединительнотканных структур.
Через 4,5-5 месяцев наблюдается сращение трансплантата со склерой реципиента. Строение окружающей его капсулы аналогично предыдущему сроку наблюдения. Наряду с этим, отмечается большая зрелость коллагеновых волокон во внутреннем слое, большее количество веретеноклеточных фиброцитов. Воспалительная реакция снижена, количество гигантских клеток инородных тел несколько увеличено. Тонкий слой макрофагов и гигантских клеток инородных тел окружают отдельные полиэфирные волокна. Процесс разрушения последних продолжается. По периферии имплантата некоторые нити окружены самостоятельной фиброзной капсулой. Васкуляризация новообразованной ткани сохраняется, часть сосудов регрессирует. В опыте они составляют -2.25, в контроле -1.5 в одном поле зрения. ГАГ интенсивно накапливаются в молодой неорганизованной соединительной ткани, особенно вокруг нитей. В опыте процессы образования и созревания коллагеновых структур, накопление ГАГ, частичная резорбция нитей протекают интенсивнее, чем в контроле. Фиброзная капсула толще, чем в контроле и чем в предыдущий срок наблюдения.
В отдаленном периоде (через 10-11 месяцев после склеропластики) процессы развития и созревания соединительной ткани, как и в предыдущие сроки, в опыте протекают активнее, чем в контроле. Фиброзная капсула состоит из зрелых коллагеновых волокон и фиброцитов. Воспалительная реакция слабо выражена. Зрелая соединительная ткань занимает большую часть трансплантата, располагаясь между сохранившимися нитями. Однако в центре трансплантата еще наблюдается грануляционная ткань. Количество нитей уменьшено, что связано с частичной их резорбцией макрофагами, которая протекает очень медленно и наиболее выражена по периферии трансплантата. На месте разрушенных нитей наблюдается новообразованная соединительная ткань. В фиброзной ткани уменьшено количество фибробластов по сравнению с коллагеновым матриксом, снижена активность клеток. ГАГ слабо выявляются и в склере реципиента, и в фиброзной ткани, однако вокруг нитей в молодой неорганизованной ткани отмечается их активное очаговое накопление. В ткани, приобретающей фиброзный характер, начинаются инволютивные изменения. В контрольной серии глаз процессы приживления синтетического материала протекают медленнее.
Необходимо отметить, что ни в опытной, ни в контрольной серии не было отмечено повреждающего, раздражающего или токсического воздействия трансплантатов на зрительный нерв и внутренние структуры глаза.
Заключение. Таким образом, морфологические исследования показали, что депонирование препарата панаксел в полимерном покрытии полиэфирного трикотажного трансплантата приводит к интенсификации роста и развития соединительной ткани, что, по-видимому, обусловлено стимулирующим действием данного препарата. Гистологически и гистохимически в опытной серии глаз наблюдались более активная, чем в контроле, макрофагальная реакция, усиленная пролиферация фибробластов, более активный синтез коллагена и ГАГ, ускоренные фибриллогенез, образование грануляционной ткани и созревание ее в фиброзную. Фиброзная капсула в опыте толще, а зрелая соединительная ткань в центре трансплантата более выражена. Кроме того, во все сроки наблюдения сохранялась более активная васкуляризация, способствующая улучшению пи-
тания склеральной ткани. В результате формировалось плотное сращение трансплантата со склерой, образование единого тканевого комплекса. Полученные результаты позволяют считать весьма перспективным использование разработанных трансплантатов в клинической практике для склероукрепляющего лечения прогрессирующей близорукости.
Литература.
1. Аветисов Э.С., Тарутта Е.П., Иомдина Е.Н., Маркосян Г.А., Лазук А.В., Андреева Л.Д. Укрепление склеры при прогрессирующей близорукости комбинированным переплетенным биодегради-рующим - и недеградирующим шовным материалом. Методические рекомендации, Москва, 2001.
2. Андреева Л.Д., Тарутта Е.П., Иомдина Е.Н., Лазук А.В, Маркосян Г.А., Киселева О.А. Морфологические особенности приживления синтетических трансплантатов после склеропластики в эксперименте // Вестн. офтальмол.- 1999, 3, c.15-18.
3. Маркосян Г. А. Укрепление склеры при прогрессирующей близорукости новыми видами синтетических материалов. Дис. канд. мед. наук .-М., 1999, 152 с.
4. Тарутта Е.П., Иомдина Е.Н., Лазук А.В, Маркосян Г.А., Андреева Л.Д. Укрепление склеры новыми видами синтетических материалов // Вестн. офтальмол., 1999, 5, c.8-10.
5. Slepyan L.I. Selected strains of Ginseng with Ge-organic compounds and its effects //Proc. 7th Intern. Symp. On Ginseng. Seoul, 1998, p.71-82.
6. Jacob-LaBarre J., McDonald M., Assouline M. Synthetic materials for scleral reinforcement in pathological myopia //Proc. 5th Intern. Conf. on Myopia. Toronto, 1994, 293 p.
УДК 617.754-072.7_
ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ КВАНТИТАТИВНОЙ ПЕРИМЕТРИИ ПРИ ПАТОЛОГИИ ЗАДНЕГО ОТРЕЗКА ГЛАЗА
В.И.БАРАНОВ, А.Н.ЦВЕТКОВ
Курский государственный медицинский университет
При глаукоме, заболеваниях сетчатки и зрительных проводящих путей получаемые периметрические данные являются ведущими, а нередко и единственными симптомами болезни. С тех пор, как в 1553 году Batisto Porto предпринял первые попытки исследовать поле зрения, а через 300 лет Albrecht von Graefe ввел периметрию в клиническую практику, она претерпела значительные изменения и усовершенствования [1,2]. Большой вехой в развитии явился метод статической периметрии, предложенный Sloan в 1939 году [3,4]. Этот метод, значительно усовершенствованный Traquair в 1946 - 48 годах [7], получил название количественной, или квантитативной, периметрии. Он позволил строить трехмерные графики полей зрения, отражающие не только величину патологических дефектов, но их глубину, то есть степень понижения светочувствительности сетчатки. Получаемое объемное изображение поля зрения называют "холмом Traquair", хотя автор классически называл его "островом зрения в океане слепоты" [7]. Эта сложная для клинического применения методика была усовершенствована Tate и Lynn из Техаса в 1977 году [6], а затем адаптирована Н.В.Цветковым и Ю.И.Бельским к условиям отечественных клиник под руководством профессора Д.С.Кроля [5].
