Научная статья на тему 'Экспериментальная модель распространенного калового перитонита'

Экспериментальная модель распространенного калового перитонита Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
1121
210
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Область наук
Ключевые слова
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МОДЕЛЬ / ПЕРИТОНИТ / КАЛОВАЯ ВЗВЕСЬ / EXPERIMENTAL MODEL / PERITONITIS / FECAL SUSPENSION

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Лазаренко В. А., Липатов В. А., Блинков Ю. Ю., Скориков Д. В.

Исследования выполняли на 100 крысах-самцах линииВистар массой 200-250 г. В ходе эксперимента разработан способ моделирования распространенного калового перитонита, основанный на введении 10% каловой взвеси в дозе 0,5 мл на 100 г массы животного в брюшную полость интактных крыс пункционным методом. Данная модель отличается простотой выполнения, сходностью клинических, лабораторных и патоморфологических изменений у всех экспериментальных животных, что позволяет адекватно воспроизводить в условиях опыта близкую к клинике патологическую ситуацию.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Лазаренко В. А., Липатов В. А., Блинков Ю. Ю., Скориков Д. В.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Experimental model of diffuse fecal peritonitis

The research was conducted on 100 male rats Vistar weighed 200-250 g. In the experiment there was developed a model of diffuse fecal peritonitis based on the introduction of 10% fecal suspension in the dosage of 0,5 ml per 100 g of the animal's weight into the abdominal cavity of rats by puncture. The suggested model is simple to be conducted and provides the similar clinical, laboratory and pathomorphological changes in all experimental animals. It enables to reproduce an experimental pathological condition very similar to naturally occurring clinical situation.

Текст научной работы на тему «Экспериментальная модель распространенного калового перитонита»

часто встречающимся прописям. Стоимость лечения в этом случае составляет от 26-58 руб. до 32-26 руб. В данной ситуации решающую роль играют назначения врачей как в амбулаторных условиях, так и в условиях стационара ЛПУ.

Таким образом, изучение ценовой чувствительности покупателей к разработанным нами суппозиториям и существующему ассортименту препаратов для лечения воспалительных заболеваний женской половой сферы показало высокую однородность ценовых ожиданий большинства покупателей и высокую чувствительность к цене данного сегмента рынка. Использование разработанных нами суппозиториев позволяет удовлетворять требования потребителей по приобретению суппозиториев в ценовом диапазоне от 78 до 118 рублей. При успешном продвижении

группы товаров с указанным диапазоном цен суппозитории могут занять устойчивую позицию как в розничных продажах, так и в обеспечении стационаров.

ЛИТЕРАТУРА

1. Максимкина Е.А., Лоскутова Е.Е., Дорофеева В.В. Конкурентоспособность фармацевтических организаций. - М.: МЦФЭР, 1999. -256 с.

2. Омарова Т.Ю., Брусин А.В. Ценовая чувствительность покупателей на рынке ЛС // Российские аптеки. - 2007. - № 12. - С. 12-15.

3. Пашутин С.Б. Маркетинг фарминдустрии. -М.: Вершина, 2006. - 200 с.

4. Траут Дж., Райс Эл. Позиционирование: битва за умы, пер. с англ. - СПб.: Питер, 2007. -272 с.

Методика исследования УДК 616.381 - 003.235-092.9

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МОДЕЛЬ РАСПРОСТРАНЕННОГО КАЛОВОГО ПЕРИТОНИТА

© Лазаренко В.А., Липатов В.А., Блинков Ю.Ю., Скориков Д.В.

Кафедра хирургических болезней ФПО Курского государственного медицинского университета, Курск

E-mail: skorikovd81@mail.ru

Исследования выполняли на 100 крысах-самцах линииВистар массой 200-250 г. В ходе эксперимента разработан способ моделирования распространенного калового перитонита, основанный на введении 10% каловой взвеси в дозе 0,5 мл на 100 г массы животного в брюшную полость интактных крыс пункционным методом. Данная модель отличается простотой выполнения, сходностью клинических, лабораторных и патоморфологических изменений у всех экспериментальных животных, что позволяет адекватно воспроизводить в условиях опыта близкую к клинике патологическую ситуацию.

Ключевые слова: экспериментальная модель, перитонит, каловая взвесь.

EXPERIMENTAL MODEL OF DIFFUSE FECAL PERITONITIS Lazarenko V.A., Lipatov V.A., Blinkov Yu. Yu., Skorikov D.V.

Surgery Department of Postgraduate Faculty of the Kursk State Medical University, Kursk

The research was conducted on 100 male rats Vistar weighed 200-250 g. In the experiment there was developed a model of diffuse fecal peritonitis based on the introduction of 10% fecal suspension in the dosage of 0,5 ml per 100 g of the animal's weight into the abdominal cavity of rats by puncture. The suggested model is simple to be conducted and provides the similar clinical, laboratory and pathomorphological changes in all experimental animals. It enables to reproduce an experimental pathological condition very similar to naturally occurring clinical situation.

Key words: experimental model, peritonitis, fecal suspension.

Одной из актуальных и до настоящего времени нерешенной проблемой общей хирургии является острый перитонит. Разработку и апробацию новых методов его лечения традиционно производят в условиях эксперимента [1]. Анализ литературы показал, что существует большое количество экспериментальных моделей перитонита, которые разделены на 5 групп [1, 4, 5, 8]. В первой группе животным в брюшную полость вводили инородные тела: куски дерева, пробки, марли [1]. Во второй - различные химические вещества, такие как: деготь, скипидар, амниотическую жидкость коровы, формалин, дистиллированную воду [1]. Третья группа объединяла модели перитонита, полученных введением чистых культур микроорганизмов [2, 7]. Четвертая группа характеризовалась механическим повреждением желудочно-кишечного тракта с нарушением целостности его просвета [6]. Пятая группа моделей основана на введении в брюшную полость взвеси кала других животных [3, 4].

Недостатком описанных моделей является отсутствие четкой клинической картины и фазности течения перитонита [1, 2].

Наиболее приемлемой моделью острого перитонита, с нашей точки зрения, является методика [2], заключающаяся во введении через катетер лабораторным животным в брюшную полость аутокрови и микробной взвеси стафилококка, кишечной палочки, сине-зелёного гноя и пептококка в равных соотношениях. Однако этот метод трудоемок, требует затрат материальных средств и времени для получения и введения микробной взвеси. При этом не всегда моделируется стандартное воспаление брюшной полости в силу вариабельности показателей патогенности и вирулентности используемой для моделирования флоры.

В связи с этим целью данного исследования явилась разработка стандартизованной экспериментальной модели острого распространенного перитонита, схожего с перитонитом человека.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследования проводили на 100 крысах самцах линии Wistar, массой 200-250 г, полученных из питомника РАМН "Столбовая" (г. Москва). Для выполнения работы использовали животных без внешних признаков заболевания, прошедших карантинный режим в условиях вивария Курского государственного медицинского университета. Животные содержались в одинаковых условиях, на стандартном пищевом режиме. Все манипуляции с животными проводили в соответствии с Санитарными правилами по устройству, оборудованию и содержанию экспериментальнобиологических клиник (вивариев) № 1045-73 от 06.04.1973, Конвенцией по защите животных, используемых в эксперименте и других научных целях (г. Страсбург, Франция, 1986), и Директивой Совета 86/609/EEC от 24.11.86 по согласованию законов, правил и административных распоряжений стран-участниц в отношении защиты животных, используемых в экспериментальных и других научных целях.

В опытные группы входили животные одного возраста, полученные из питомника одновременно. Все исследования проводили в одно и то же время суток. Проведение экспериментов на крысах обусловлено удобством в обращении, относительной простотой выполнения манипуляций и получения стандартных условий для анатомо-гистологических и клинико-иммунологических исследований в динамике.

Животных, находившихся под наркозом, выводили из опыта методом декапитации. Производили макроскопическое описание органов и тканей брюшной полости, забирали экссудат брюшной полости для цитологического исследования, также было проведено гистологическое исследование париетальной брюшины, печени, почек, селезенки, тимуса и периферических лимфатических узлов.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Нами разработан способ моделирования калового перитонита, который близок по этиопатогенезу, клиническим проявлениям и

фазности течения к таковому у человека (патент № 233826). Поставленная задача достигается введением каловой взвеси в брюшную полость опытных крыс. Данную взвесь получали путем смешивания изотонического раствора и кала из слепой кишки двух-трех интактных животных, затем ее дважды фильтровали через двойной слой марли. Полученную взвесь не позднее чем через 20 минут после приготовления вводили интактным животным под наркозом пункционным способом. Во избежание повреждения внутренних органов при введении каловой взвеси в брюшную полость, животных располагали вертикально, каудальным концом вверх. Методом пункции вентральной стенки в центре средней линии живота, направляя конец иглы поочередно то в правое и левое подреберья, то в правую и левую подвздошные области, вводили необходимое количество взвеси.

В динамическом аспекте на животных изучались условия возникновения, закономерности развития, течения и исход перитонита. С целью индуцирования перитонита животным вводили каловую взвесь в различной концентрации (5%, 10%, 15%, 20%) и дозировке (0,5 и 1 мл на 100 г массы животного) и изучали их влияние на летальность.

Нами установлено, что при использовании 5% каловой взвеси, перитонит в 90% случаев не развивался. При увеличении концентрации до 15% и 20% в дозе 0,5 мл на 100 г массы тела животного, летальность в первые сутки после моделирования перитонита составляла 70% и 90% соответственно и достигала 100% на четвертые и седьмые сутки, что не допустимо для выполнения эксперимента. Увеличение дозировки каловой взвеси до 1 мл на 100 г массы, приводило к 100% летальности на первые сутки при 20% концентрации и 100% летальности на 4 сутки при 15% концентрации. При использовании 10% непро-фильтрованной каловой взвеси с дозировкой 1 мл на 100 г массы тела животного, летальность в первые сутки составила 40%, к десятым суткам - 100%, что также не удовлетворяло целям нашего эксперимента.

При использовании профильтрованной 10% каловой взвеси в дозе 0,5 мл на 100 г массы животного летальность в 1 сутки составила 20%, к 14-м суткам она достигала 60%. Такая летальность является приемлемой

для проведения нашего эксперимента. Полученные данные отражены в табл.

Клинически через сутки после моделирования - крысы малоподвижны, заторможены, группируются в углу клетки, выглядят вялыми, апатичны к еде, отмечается частое поверхностное дыхание, сухость кожи и взъерошенность шерсти.

Под эфирным наркозом производилась срединная лапаротомия. При ревизии брюшной полости у наркотизированного животного визуально отмечено, что париетальная и висцеральная брюшина тусклая, гиперемиро-вана с налетом нитей фибрина. Во всех отделах брюшной полости содержится мутная жидкость, отмечается вздутие петель кишечника с вялой перистальтикой. Макроскопическая картина соответствовала распространенному фибринозно-гнойному перитониту, париетальная брюшина гиперемирована, отечна.

При бактериологическом исследовании экссудата из брюшной полости выделялась кишечная палочка, стафилококки, протей в количестве 106-7 микробных тел/мл. При цитологическом исследовании выпота брюшной полости выявлено большое количество лейкоцитов, лимфоцитов и микроорганизмов (рис. 1).

Установлено, что у всех экспериментальных животных на 1-е сутки гистологическая картина характеризуется развитием воспаления, которое проявляется отеком, набухани-

ем, инфильтрацией сегментоядерными лейкоцитами париетальной брюшины (рис. 2).

В печени выявлены очаги некроза и белковой дистрофии печеночных клеток, нарушение оттока в венах, венулах и синусоидных капиллярах, выход моноцитов и макрофагов из кровеносных сосудов (рис. 3). Поступление токсических продуктов в кровоток вызывает тяжелое повреждение почек, проявляющееся в нарушении проницаемости всех слоев париетального листка капсулы Шум-лянского-Боумена, сморщивании и гибели части клубочков, расширению канальцев не-фронов и накоплению в них белковых продуктов. Это сопровождается расстройством циркуляции в корковом и мозговом веществе почки, проявляющимся расширением кровеносных сосудов (в основном венозного русла) и застоем крови в капиллярном звене в различных отделах почки. В вилочковой железе - картина типичной акцидентальной инволюции (что характерно для одномоментного и очень объемного поступления антигенного материала в организм). В лимфоузлах отмечается опустошение коркового вещества. Фолликулы отсутствуют или чрезвычайно разрыхлены. Герминативные центры не определяются. Т- и В- зоны не дифференцируются. В селезенке увеличен объем красной пульпы и утолщена мантийная зона фолликулов, также увеличено количество мегакарио-цитов в поле зрения и активизированных макрофагов.

Таблица

Летальность животных при экспериментальном перитоните, в зависимости от концентрации

и количества вводимой каловой взвеси

Условия моделирования перитонита - % каловой взвеси, дозировка на 100 г массы крыс, фильтрация, исходное количество 5%, 0,5 мл нефильт рован-ная 10 крыс 15%, 0,5 мл нефиль трован-ная 10 крыс 15%, 1 мл нефиль трован-ная 10 крыс 20%, 0,5 мл нефиль трован-ная 10 крыс 20%, 1 мл нефиль трован-ная 10 крыс 10%, 0,5 мл нефиль трован-ная 10 крыс 10%, 1 мл нефиль трован-ная 10 крыс 10%, 0,5 мл фильтрован-ная 30 крыс

Сутки леталь- леталь- леталь- леталь- леталь- леталь- леталь- леталь-

ность ность ность ность ность ность ность ность

1-е сутки 0% 70% 80% 90% 100% 20% 40% 20%

4-е сутки 10% 80% 100% 100% - 60% 80% 23%

7-е сутки 10% 80% - - - 90% 80% 36%

10-е сутки 10% 100% - - - 90% 100% 53%

14-е сутки 10% - - - - 100% - 60%

ИТОГО: 10% 100% 100% 100% 100% 100% 100% 60,0%

Рис. 1. Цитологическое исследование экссудата из брюшной полости при экспериментальном перитоните, окраска по Романовскому, увеличение 8х40.

Рис. 2. Гистологическое исследование вентральной стенки брюшной полости. Окр. Г+Э; ув. 8^8x6.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.