CC BY
29
МОЛОДЫЕ УЧЁНЫЕ
И. А, Кочергжа, Г. А. Тряпицьта
ОЦЕНКА КОМБИНИРОВАННОГО ДЕЙСТВИЯ ТОКСИНОВ ЦИАНОБАКТЕРИЙ РОДА МУСКОСУвТК И у-ОБЛУЧЕНИЯ НА СОСТОЯНИЕ КОСТНОГО МОЗГА У МЫШЕЙ СВА
Регуляция апоптоза и процесса клеточного деления является важнейшим механизмом ггпттттярцгяття гомеостаза. Канцерогенное действие ионизирующих излучений—давно установленный факт. Из литературных источников также известно, что токсины цианобактерий рода Мусгосу8& относятся к ингибиторам протеинфосфатаз, для которых характерно, помимо влияния на активацию апоптоза, еще и влияние на клеточный цикл. «Цветение» водоемов питьевого назначения представляет серьезную угрозу для здоровья населения. Токсичное «цветение» воды чаще всего вызывается представителями рода цианобактерий —Мусгосувйв. Люди, проживающие на радиоактивно загрязненных территориях, могут подвергаться комбинированному действию токсинов цианобактерий и облучения.
В связи с этим целью нашего исследования является оценка комбинированного действия токсинов цианобактерий рода Мусгосузйз и у-облучения на состояние костного мозга у мышей СВА.
Материалы и методы. Выполнено тестирование пробы цианобактерий, которая содержала 98 % клеток цианобактерий рода Мусгосуэйв. ЛД50 пробы (метанольная вытяжка) для самцов мышей СВА при внутрибрюшинном введении составляла 48,4 мг/кг; ЛД16 — 42 Д мг/кг. Внутрибрюшинно мышам вводили пробу цианотоксинов в дозах ЛД16, 1/2ЛД]б, 1/10ЛД1ё; через сутки после воздействия подсчитывали количество ЯСК в костном мозге, делали мазки костного мозга и подсчитывали в них частоту клеток на стадии митоза и апоптоза. В настоящее время проводится оценка комбинированного действия тохссинов цианобактерий рода Мусгоиэ^ (в дозе 1/10ЛД16) и у-облучения (в дозе 2 Гр) на состояние костного мозга у мышей СВА с использованием тех же методик.
Результаты исследования. Выявлено, что введение токсинов цианобактерий рода Мусгосув^ в дозе ЛД16,1/2ЛД16,1/10ЛД16 приводит к достоверному снижению количества ЯСК в костном мозге у мышей СВА относительно контроля, к достоверному, дозозависимому увеличению частоты апоптозной гибели клеток, а также к повышению частоты клеток на стадии митоза.
Р. Д Яминова, Г. А. Тряпицына
ОЦЕНКА ФАГОЦИТАРНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ И МОНОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА В ОТДАЛЁННЫЙ ПЕРИОД ХРОНИЧЕСКОГО РАДИАЦИОННОГО
ВОЗДЕЙСТВИЯ
В период с 1949 по 1960 г. происходил неконтролируемый сброс отходов радиохимического производства ПО «Маяк» в реку Течу, в результате чего население прибрежных сел подверглось хроническому радиационному облучению.
Иммунная система, наряду с кроветворной, является критической при воздействии ионизирующего излучения. Важная составляющая иммунной защиты организма—фаго-
цитарное звено. Фагоцитоз представляет собой филогенетически наиболее древнюю иммунную реакцию и является первой реакцией иммунной системы на внедрение чужеродных антигенов, которые могут поступать в организм.
Целью данной работы является оценка фагоцитарной активности нейтрофилов и моноцитов периферической крови в условиях хронического радиационного воздействия.
Материалы и методы. Было обследовано две группы людей: основная — липа, постоянно проживающие в прибрежных селах реки Течи, имеющие реконструированную дозу облучения на красный костный мозг и не имеющие серьезной клинической патологии (рак, сахарный диабет, инфаркт миокарда и др.), и группа сравнения—лица сходного возраста и национальности, проживающие в аналогичных социальных условиях, но не подвергавшиеся облучению. Объектом исследования являлась периферическая венозная кровь. Количество лейкоцитов в периферической крови определяли методом автоматического подсчета клеток на анализаторах «СеИозсоре». Подсчет лейкоцитарной формулы проводили по мазкам периферической крови, окрашенных по методу Романовского-Гимза. Фагоцитарную активность нейтрофилов и моноцитов периферической крови определяли с использованием НСТ-теста и по количеству поглощенных клеткой частиц латекса (рассчитывали фагоцитарный индекс, интенсивность фагоцитоза, фагоцитарное число). Статистическая обработка будет выполнена с использованием метода описательной статистики и метода двухвыборочного 1-теста с различными дисперсиями для определения достоверности различий, будет проведен однофакторный и многофакторный анализ влияния параметров на исследуемые показатели.
Результаты исследования. В результате исследования будут получены данные о влиянии радиационного фактора и факторов не радиационной природы (возраст, национальность, пол) на фагоцитарное звено иммунитета человека при хроническом облучении.
И. В. Ивлев, О. Г. Площанская
ПРИМЕНЕНИЕ SSCP-АНАЛИЗА МУТАЦИЙ В ГЕНЕ ТР53 У ЛИЦ, ПОДВЕРГШИХСЯ ХРОНИЧЕСКОМУ ОБЛУЧЕНИЮ В РЕЗУЛЬТАТЕ ПРОИЗВОДСТВЕННОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ ПО «МАЯК»
Ген Тр53 относится к генам-супрессорам опухолей, Он высококонсервативен и практически идентичен у всех млекопитающих. Синтезируемый с него белок р является фактором транскрипции, который играет роль связующего звена между системо о на ружения повреждений в ДНК и системами репарации, контроля клеточного цикла и запрограммированной клеточной гибели (апоптоз).
Вслучае повреждения г^наТрбЗ происходит дестабилизация геномакл^^и^ есть вероятность злокачественного перерождения. Мутации в гене р Лункдиони-более чем в 50 % опухолей человека разной локализации. Поскольку Ф^и
РУет в форме тетрамера, то может быть достаточно п«ГкГ~™не щихся в клетке аллелей для практически полной потери фу • Р ^ к проти_
мутации могут усиливать рост опухолевых клеток и излучением,
воопухолевым препаратам. Мутации могут быть вызван v
курением и некоторыми вирусами, полиморфизма конформаций
Для анализа гена Тр53 используется метод аналй^ , ;* ом разделении
однонитевых фрагментов (SSCP). Он основан на электрофоретическом р д
денатурированных фрагментов ДНК в неденатурирующих условиях. Однонитевые фрагменты при Прохождении в геле образуют вторичные структуры, зависящие от последовательности ДНК и изменяющиеся при замене даже одного нуклеотида.
Целью настоящего исследования является выявление мутаций в гене Тр53 у лиц, подверг-шяхся хроническому облучению в результате производственной деятельности ПО «Маяк».
Для проведения ЗЭСР-анализа производится забор крови от облученных лиц, находящихся в клинике ФГУН УНПЦ РМ. Для выделения ДИК из ядросодержащих клеток крови используется быстрая фенольная методика (модификация Ю. Е. Дуброва). Проведено выделение ДНК у 62 пациентов. Проводится амплификация анализируемых последовательностей — 5, 6, 7 и 8 экзонов гена Тр53 методом ПЦР с использованием наборов для определения мутаций (производитель ЗАО «Генетические технологии и анализы», г, Москва). Для детекции результатов используется электрофорез в 12 %-м полиакриламидном геле и окрашивание нитратом серебра.
Ю. А. Латыпова, О. Г. Площанская
ПОЛОВОЕ ПОВЕДЕНИЕ В ЛИНИЯХ DROSOPHILA MELANOGASTER В УСЛОВИЯХ РАЗНОЙ ПЛОТНОСТИ ПОПУЛЯЦИИ
Плотность популяции является одним из важных эволюционных и стрессовых факторов. По данным литературы (Раушебах И. Ю., 1990; Вожова Н. Е., 2006), на физиологическом уровне перенаселенность приводит к изменениям гормонального статуса особей. Эти изменения могут отражаться на способности особи осуществлять ритуал ухаживания, так как правильность его выполнения контролируется при помощи сложной цепи нейрогуморальных реакций.
Целью настоящего исследования являлось изучение влияние генетического фона и разной плотности популяции на половую активность (ПА) самцов и половую рецептив-ность (ПР) самок линий Drosophila melanogaster.
В качестве объекта исследования использовались линии Dr. melanogaster: Canton S —дикого типа, Vg — зачаточные крылья, 310h — зазубренные крылья. Линии содержались в стандартных условиях на дрожжевой среде. Плотность популяции задавали количеством пар родительских особей на стаканчик. Было задано четыре варианта плотности: 1,3,5 и 7 пар. Половое поведение оценивали у потомков по показателям ПА самцов и ПР самок. В культуру помещали самцов (п) и самок (т) в соотношении 2n: m и фиксировали процент особей мужского пола, осуществивших спариваний за 1 час. Анализ ПР самок проводили аналогично, при соотношении п: 2га.
Установлено, что фактор плотности популяции приводит к достоверному угнетению поведенческих признаков. Предполагается, что в этих условиях подавляется секреция гормона, играющего ключевую роль в процессах стимуляции копулятивной активности насекомых - проторактропный гормон (corpora cardiaica). Также показано, что в условиях разной плотности популяции происходит снижение многих жизненно важных показателей: плодовитость, продолжительность жизни, размеры личинок и имаго.
Проводится дальнейшее изучения действия фактора перенаселения в комбинации с внешними факторами (ионизирующее и неионизирующее облучение) на поведенческие признаки, в частности на половое поведение, которое является важным компонентом приспособленности.
