CC BY
93
Оригинальные статьи
© 2003, СПб РО РААКИ _ «>»
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ТРАНКВИЛИЗАТОРОВ И АНТИОКСИДАНТОВ УЛИЦ С ПСИХОНЕЙРОИММУННЫМИ НАРУШЕНИЯМИ
Ширинский И.В., Ширинский B.C., Козлов В.А.
ГУ НИИ Клинической Иммунологии СО РАМН, г. Новосибирск
Резюме. Изучались клинико-иммунологическая эффективность транквилизатора гидроксизина гидрохлорида, антиоксиданта а-токоферола и комбинации этих препаратов у соматически здоровых лиц, страдающих социально-стрессовыми расстройствами. Испытуемыми были 36 женщины - преподаватели общеобразовательных школ, со стажем работы не менее 4 лет. У всех обследованных выявлены объективные признаки длительного влияния стресса, характеризующиеся эмоциональной напряженностью и психологическими нарушениями: невротические расстройства, невротические состояния, невротическое развитие личности.
При анализе изменений иммунного статуса до и после лечения внутри каждой группы было выявлено стимулирующее воздействие терапии на содержание CD3+, CD4+ лимфоцитов и активность фагоцитирующих клеток. При прямом сравнении а-токоферол превосходил гидроксизина гидрохлорид по влиянию на оксидантную функцию нейтрофилов, что, по всей видимости, связано с его мощными антиоксидантными свойствами. Статистически значимых различий между действием всех трех режимов лечения на фенотипические показатели Т-лимфоцитов не было выявлено. Сравнение действия комбинированного лечения и обоих режимов монотерапии на функцию моноцитов позволяет предположить, что а-токоферол и гидроксизина гидрохлорид действуют синергично на это звено врожденного иммунитета.
Установлено достоверно более выраженное снижение уровня тревоги в группе обследуемых, получавших а-токоферол, по сравнению с группой, принимавшей гидроксизина гидрохлорид. Это можно объяснить более широким спектром биологической активности а-токоферола.
Ключевые слова: социально-стрессовые расстройства, стресс, иммунная система, гидроксизин, токоферол.
Shirinsky I.V., Shirinsky V.S., Kozlov V.A.
EFFICACY OF TRANQUILIZER AND ANTIOXIDANT TREATMENT IN PSYCHONEUROIMMUNE DISORDERS
Abstract.We evaluated the effect of hydroxysine, a-tocoferol and their combination in persons with social stress disorder. Subjects of our study were 36 female teachers with more than 4 years length of service. After 1 year follow-up treatment induced activation of T-cells and phagocytes in all three groups. When compared with hy-droxysine, a-tocoferol appeared to be more effective in stimulating neutrophil function probably due to its pronounced antioxidative properties. There were no significant differences between groups in changes of T-cell counts. Dual therapy was superior to both monotherapies in effect on monocytes.
Quite unexpectedly, a-tocoferol was more effective in reducing degree of anxiety than hydroxisine. It can be explained by broader biological spectrum of the former or by small sizes of compared groups leading to bias. (Med.Immunol., 2003, vol.5, N1-2, pp 81-90)
Адрес для переписки: В В6Д6 Н И 6
630099 Новосибирск, Ядринцевская 14, Проблема стресса, социально-стрессовых воздей-
ГУ Институт Клинической Иммунологии ствий в современной физиологии, психонейроимму-
СО РАМН, лаборатория иммунофармакологии, нологии, вегетологии включает в себя представле-
профессор Ширинский B.C. ние о связи стресса с изменениями в различных си-
Тел.: 3832-282547, факс: 3832-227028 стемах организма (центральная и вегетативная не-
E-mail:ivs@online.nsk.su рвные системы, эндокринные органы, иммунная
система и т.д.) и способность противодействовать этим изменениям [6]. В соответствии с этими представлениями стресс определяется как неспецифическая реакция организма на предъявляемые к нему требования, причем характер этих реакций относительно независим от вызвавших его факторов. Так называемые социально-стрессовые воздействия являются актуальной медицинской проблемой, поскольку было показано, что среди факторов, отрицательно влияющих на здоровье населения России, они стоят на первом месте [2].
Ранее нами было установлено [7], что длительные стрессогенные воздействия приводят у соматически здоровых людей к изменениям психоэмоциональной сферы, вегетативным и иммунным нарушениям. Психологические расстройства ассоциировались с изменениями вегетативного тонуса и изменением параметров имунной системы признаками иммунокомпроментации. Следует задаться вопросом - может ли быть прервана цепь психонейроим-мунных нарушений при стрессогенных воздействиях с помощью тех или иных вмешательств? Ответ на этот вопрос важен, поскольку положительный результат мог бы свидетельствовать об обратимости изменения вышеупомянутых связей и помог бы разработать превентивные программы, корригирующие психологические, вегетативные и иммунные расстройства у лиц, испытывающих длительные стрессогенные воздействия.
В задачу настоящего исследования входило изучение влияния на психологические и иммунологические параметры у лиц с длительными стрессогенными воздействиями а-токоферола, гидроксизина гидрохлорида и комбинации этих препаратов.
Дизайн исследования: контролируемое нерандомизированное сравнительное исследование.
Материалы и методы
Обследуемые - 36 учителей женского пола 3 общеобразовательных школ г. Новосибирска. Критериями включения были: возраст от 20 до 55 лет, стаж работы в школе не менее 4 лет, отсутствие клинических признаков вторичного иммунодефицита (ВИД), другой иммунопатологии.
Базовая оценка
Методом простого опроса выяснялась частота острых инфекций верхних дыхательных путей за предшествующий год. Для объективной оценки состояния вегетативной нервной системы использовалась компьютерная версия экспертной оценки сердечного ритма по P.M. Баевскому - программа “Pulsar” (институт физиологии СО РАМН, г. Новосибирск). В программе использованы интегративные классификаторы состояния регуля-
ции ритма сердца по P.M. Баевскому [3]. Для постановки диагноза социально-стрессовых расстройств и вегетативной дистонии использовались классификация и критерии диагноза Ю.А. Александровского и А.М. Вейна, соответственно [1, 4]. Уровень стресса количественно оценивался в соответствии с пересмотренным третьим изданием «Руководства по диагностике и статистике психических расстройств» Американской психиатрической ассоциации (DSM III-R) [8]. Выраженность реактивной тревоги определялась по шкале тревоги Спилбергера [28].
Оценка иммунного статуса (ИС) включала комплекс показателей, принятый в клинике иммунопатологии НИИКИ СО РАМН для диагностики ВИД и заключавшийся в следующем. Лейкоциты выделяли общепринятым методом осаждения эритроцитов путем инкубации гепаринизи-рованной венозной крови с 1% раствором желатина в течение 40 минут при 37 °С. Активность фагоцитирующих клеток оценивали следующим образом. В лунки 96-луночного планшета разносили по 10 мкл 0,1% латекса, нагруженного иммуноглобулином человека (РАО «БИОПРЕПАРАТ», Санкт-Петербург), меченного ФИТЦ, и добавляли по 50 мкл лейковзвеси, находящейся над эритроцитарным осадком. Планшет инкубировали во влажной камере 1 час при 37 °С, клетки суспендировали и переносили в пробирки для иммуноцитометрии, содержащие 450 мкл лизиру-юще-фиксирующего раствора (ЛФР - Beckton-Dickinson, США). Процент позитивных клеток (Fc - фагоцитоз моноцитов и нейтрофилов) определяли при комнатной температуре на иммуно-цитометре FACS (Beckton Dickinson, США).
Для определения поверхностных детерминант клетки лейковзвеси однократно отмывали забуфе-ренным физраствором (ЗФР) с 0,1% раствором азида натрия, 0,02% ЭДТА и 10% пулированной сыворотки IV группы (ЗФР+) и после подсчета суспендировали в ЗФР в концентрации 5 млн/мл. Поверхностные маркеры выявляли с помощью моноклональных антител против CD3, CD4, CD8, меченных фикоэритрином (ФИ), CD20, меченных ФИТЦ (МедБиоСпектр, Москва), CD16 и HLA-DR, меченных ФИТЦ, немеченных CD3 с последующим использованием антимышиных Fab, меченных ФИТЦ (Сорбент, Москва) в соответствии с прилагаемыми инструкциями. В 96-луночные планшеты разносили по 20 мкл меченных антител производства МедБиоСпектр или по 5 мкл - Сорбент, добавляли по 50 мкл лейковзвеси, инкубировали 15 мин при комнатной температуре, отмывали в 200 мкл ЗФР+ и переносили в пробирки для иммуноцитометрии, как описано выше. В случае использования немеченных антител к отмытым клеткам добавляли по 50 мкл разведенных
1:100 антимышиных РаЬ-ФИТЦ, инкубировали 15 мин. При комнатной температуре отмывали и переносили в пробирки цитометра, как описано выше. При исследовании двух детерминант в одном тесте использовали два антитела, меченных разными метками - СБ4-ФЭ и НЬА-БИ-ФИТЦ. Уровень НЬЛ-БИ - экспрессии определялся как частное от деления процентного содержания вы-сокоэкспрессирующих НЬА-011 моноцитов к общему проценту моноцитов, экспрессирующих НЬЛ-ОИ.
Исследование продукции перекиси водорода фагоцитами проводили в 96-луночных планшетах. К 50 мкл дважды отмытых раствором Хенкса лейкоцитам или мононуклеарам, выделенным на растворе верографин-фиколл, доведенным до концентрации 2,5 млн/мл, добавляли по 50 мкл латекса (опыт) или раствора Хенкса (контроль), инкубировали 20 мин при 37°С во влажной камере, добавляли по 25 мкл ортофенилендиамина и продолжали инкубацию еще в течение 1 часа. После инкубации в лунки добавляли по 100 мкл 25% серной кислоты и учитывали оптическую плотность (ОП) с ИФА-ридера МиШэсап МБ (ЬаЬзу51етз, Финдляндия) в режиме с двумя фильтрами: 492 и 620 нм. Все опытные и контрольные пробы делали в дублях. Стимуляцию продукции перекиси водорода выражали как показатель активации нейтрофилов (ПАН) в пробах с лейкоцитами и показатель активации моноцитов в пробах с мо-понуклеарами (ПАМ) в виде частного отделения ОП в опыте на ОП в контроле.
Активность ГЗТ-эффекторов в условиях поликлональной стимуляции оценивали как описано ранее [5]. Лейкоциты дважды отмывали на холоде средой 199 с 10% пулированной сывороткой IV группы, 5мл осадка лейкоцитов смешивали с 1 мл такой же среды и разносили по 50 мкл в круглодонные лунки 96-луночных планшетов. В лунки добавляли по 50 мкл среды 199 (контроль), 50 мкл фитогемагглютинина-Р (Б11со, США) в конечном разведении 1:5000 (опыт 1) или 50 мкл в разведении 1:1000 (опыт 2). После 1-часовой инкубации на холоде и 18 часового культивирования в С02-инкубаторе планшеты устанавливали на 10 мин на ребро, удаляли пипеткой неприлипшие клетки, собравшиеся на нижних стенках лунок, остатки неприлипших клеток осторожно смывали средой, в лунки добавляли по 80 мл холодной среды и инкубировали 1 час при 4°С. После инкубации и энергичного суспендирования в лунки добавляли по 40 мкл 10% уксусной кислоты и в камере Горяева подсчитывали количество клеток. Стимуляцию миграции клеток субопти-мальной дозой митогена учитывали как индекс миграции (ИМ - частное от деления количества клеток в опыте 1 на таковое в контроле), ингиби-
цию миграции оптимальной дозой митогена учитывали как индекс ингибиции миграции (ИИМ
- частное от деления количества клеток в опыте
2 на таковое в контроле), интегральную активность поликлональных ГЗТ-эффекторов учитывали как показатель эффекторных функций (ПЭФ - частное от деления количества клеток в опыте 1 на таковое в опыте 2).
Вмешательство
Обследуемым 1 группы (п = 10) был назначен а-токоферол (витамин Е, ОАО «Уфавита») по 200 мг
3 раза в день в течение 3 недель, 2 группы (п= 16) -гидроксизина гидрохлорид (Атаракс, UCB) по 25 мг 2 раза в день 3 недели, 3 группы (п = 10) - комбинация гидроксизина гидрохлорида и а-токоферола по чередующейся схеме. Подобные курсы повторяли ежеквартально в течение года.
Оценка конечных точек
Конечными точками в нашем исследовании были изменения параметров иммунного статуса, уровня реактивной тревоги, выраженности вегетативных расстройств. Повторные изменения всех параметров проводились через 1 год после включения в исследование.
Анализ
Анализ проводился с учетом того, что все участники получали назначенное лечение.
Поскольку ни один из изучаемых признаков не подчинялся нормальному распределению, их описательная статистика представлена медианой и меж-квартильным интервалом. Для выявления различия параметров до и после лечения внутри каждой группы применялся критерий Уилкоксона. С целью сравнения параметров между группами использовался тест Крускала-Уоллиса. При выявлении статистически значимых различий между тремя группами проводилось попарное сравнение между каждыми группами с использованием U-критерия Манна-Уитни, корректированного с учетом числа сравнений. Для статистических вычислений использовался программный пакет SPSS for Windows, версия 9.
Результаты
В исследование было включено 36 человек. Обследуемые были поделены на 3 сопоставимые по демографическим, психологическим и большинству иммунологических параметров, выраженности вегетативной дистонии группы (табл.1). Следует отметить, что во всех 3-х группах обследуемых в 60-100%
Табл.1. БАЗОВЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ОБСЛЕЦУЕМЫХ
Показатель Токоферол (п = 10) Гидроксизина гидрохлорид (П =16) Гидроксизина гидрохлорид + токоферол (п = 10)
Выраженность стресса (баллы) 1,5 (1-2) 2(1,5-2) 2(1-2)
Частота ОРЗ за предыдущий год 3(2-4) 4(2-4) 3(2-4)
Возраст (годы) 40,5(38-45) 41,5(40-43) 40 (32-43)
Выраженность умеренной реактивной тревоги (баллы) 42 (38-46)** 45,5 (36-50) 37(34,5-40,5)**
Выраженность вегетативной дистонии (баллы) 27(19,5-30) 36 (28-43) 26,5(16-38)
С016+ (%) 12(9,5-15,5)* 17,5(14-20,75)* 15(10-22,25)
С020+ (%) 14,5 (9,5-20,25) 14(11,25-19,5) 16,5(10,75-21,25)
С03+ (%) 55 (50-58,5)** 54(50-61) 65,5 (51,75-70)**
С04+ (%) 20,5(19-26,5)** 20(18,25-30)*** 31 (26-34,25)*****
С08+ (%) 25 (23-27,75) 24 (20,5-26) 26 (20,5-29,25)
Н1А ОН эксп. (%) 83 (74,5-84,5)** 83,5 (80,5-84,75) 72 (70-73,75)**
Н1А йЯ ур. эксп. (уел. ед.) 0,38 (0,35-0,4) 0,36 (0,32-0,4) 0,35 (0,31-0,4)
ПЭФ (уел. ед.) 2,9(1,93-3,25) 1,9(1,53-2,55) 2,9 (1,9-3,7)
Рс-ф.мон. (%) 60(55,5-64,5) 64 (58,5-70) 50,5 (47,5-62,5)
Рс-ф. нейтр. (%) 61,5(57,5-65) 66,5 (58,5-78,5) 62 (60-64,25)
ИИМ (уел. ед.) 1,1 (0,87-1,2)*** 2,425 (2,6-2,8)* 1,1 (0,9-1,2)**
ИМ (уел. ед.) 0,8 (0,62-1,2) 1,3 (0,9-1,68) 0,9(0,78-1,2)
ИРИ (уел. ед.) 0,83 (0,78-0,95) 0,8 (0,7-1,2) 1,15(0,92-1,79)
ПАМ (уел. ед.) 2,9(1,97-4,08) 2,8 (2,7-3) 2,05(1,6-3,4)
ПАН (уел. ед.) 2,6 (2,4-3) 2,8 (2,52-3) 2,80 (2,5-3,75)
Примечание: *р<0,05 между группами а-токоферола и гидроксизина гидрохлорида,
**р<0,05 между группами а-токоферола и комбинированной терапии,
***р<0,05 между группами гидроксизина гидрохлорида и комбинированной терапии.
Сокращения: Н1_А ОИ эксп. - моноциты, экспрессирующие ША-ОР, Н1_А ОЯ ур. эксп. - уровень экспрессии Н1А-0Р1 молекул на моноцитах, ПЭФ - показатель эффекторной функции Т-лимфоцитов, Рс-ф.мон. -Рс-фагоцитоз моноцитами, Рс-ф. нейтр. - Рс-фагоцитоз нейтрофилами, ИИМ - индекс ингибиции миграции, ИМ - индекс миграции, ИРИ - иммунорегуляторный индекс, ПАМ - показатель активности моноцитов,
ПАН - показатель активности нейтрофилов.
Табл. 2. ИЗМЕНЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИММУННОГО СТАТУСА В ДИНАМИКЕ ЛЕЧЕНИЯ ВНУТРИ ГРУПП
о. о 5 Показатель До лечения После лечения
С016+ (%) 17,5(14-20,75) 18(16-20)
С020+(%) 14(11,25-19,5) 16,5(10,5-18,75)
С03+(%)* 54(50-61) 61 (52,5-64,75)
СО X С04+(%)* 20(18,25-30) 27 (22,5-29,5)
2! СО X С08+(%) 24 (20,5-26) 24(16,5-25,75)
ы НІ.А ОК эксп. (%)* 83,5 (80,5-84,75) 86 (85,25-89,5)
§ Н1А ЭЯ ур. эксп. (уел. ед.) 0,36(0,32-0,4) 0,34 (0,32-0,38)
|_ ф ПЭФ (уел. ед.)* 1,9(1,53-2,55) 2,7 (2,22-2,95)
X 3 ей Рс-ф.мон. (%) 64(58,5-70) 62(56,5-69,5)
со 5, Рс-ф. нейтр. (%)* 66,5(58,5-78,5) 60(58,5-70)
§ г— ИИМ (уел. ед.)* 2,425 (2,6-2,8) 2,2 (2,45-2,775)1
з~ ИМ (уел. ед.) 1,3 (0,9-1,68) 1,25 (0,95-1,37)
>— X си ИРИ (уел. ед.) 0,8 (0,7-1,2) 1,2 (0,92-1,6)
03 ПАМ (уел. ед.) 2,8 (2,7-3) 2,8 (2,6-3)
с ПАН (уел. ед.) 2,8 (2,52-3) 2,8 (2,62-3)
С016+ (%) 12(9,5-15,5) 12(10-15,25)
С020* (%) 14,5(9,5-20,25) 15,5(11,5-17,25)
ш X С03+ (%)* 55 (50-58,5) 60(53,50-60,5)
2 со С04+ (%)* 20,5(19-26,5) 28,5 (23,75-30)
Р Ш Сй8+ {%) 25 (23-27,75) 24(23,75-26,25)
Ф НІА ЭЯ+ эксп. (%)* 83 (74,5-84,5) 86(81-88)
Э со Н1_А йР ур. эксп. (уел. ед.) 0,38 (0,35-0,4) 0,36(0,31-0,42)
со 5. ПЭФ (уел. ед.) 2,9(1,93-3,25) 3 (2,45-3,2)
§ X Рс-ф. мон. (%) 60(55,5-64,5) 58 (55,75-62,5)
з~ Рс-ф. нейтр. (%) 61,5 (57,5-65) 60(56-62,5)
X ф ИИМ (уел. ед.)* 1,1(0,87-1,2) 1,25(1,18-1,32)?
=г СО ИМ (уел. ед.) 0,8(0,62-1,2) 0,95(0,8-1,2)
с ИРИ (уел. ед.)* 0,83 (0,78-0,95) 1,08 (0,97-1,18)
ПАМ (уел. ед.) 2,9(1,97-4,08) 2,9 (2,28-3,7)
ПАН (уел. ед.)* 2,6 (2,4-3) 3 (2,75-3,85)
СЭ16+ (%) 15(10-22,25) 14(13,5-20)
СО С020+ (%) 16,5(10,75-21,25) 15(11,5-17,75)
X х со С03+ (%)* 65,5 (51,75-70) 65,5 (62-72)
О ш Сй4+ (%) 31 (26-34,25) 34 (28,25-36)
8.1 С08+ (%) 26 (20,5-29,25) 26 (25-30)
І: І Н1_А ОРТ эксп. (%)* 72 (70-73,75) 86 (84-87,5)
Ф ^ X 00 Н1А ОР ур. эксп. (уел. ед.) 0,35 (0,31-0,4) 0,36 (0,34-0,4)
со ^ ПЭФ (уел. ед.) 2,9 (1,9-3,7) 2,9 (2,5-3,2)
II Рс-ф. мон. (%)* 50,5(47,5-62,5) 61 (57,5-63,25)
§1 Рс-ф. нейтр. (%) 62 (60-64,25) 64 (60-65,25)
І Э ИМ (уел. ед.) 1,1 (0,9-1,2) 1,05 (0,78-1,23)
X ИИМ (уел. ед.) 0,9 (0,78-1,2) 0,95(0,78-1,13)
СО с ИРИ (уел. ед.) 1,15(0,92-1,79) 1,2(1-1,32)
ПАМ (уел. ед.) 2,05(1,6-3,4) 2,9 (2,75-3,7)
ПАН (уел. ед.) * 2,80 (2,5-3,75) 3,4(2,95-4,1)
Примечание: р<0,05.
Сокращения: Н1А ЭЯ эксп. - моноциты, экспрессирующие Н1А0Я, Н1А ОЯ ур. эксп. - уровень экспрессии Н1_А-0Я молекул на моноцитах, ПЭФ - показатель эффекторной функции Т-лимфоцитов, Рс -ф. мон. - Рс-фагоцитоз моноцитами, Рс-ф. нейтр. - Рс-фагоцитоз нейтрофилами, ИИМ - индекс ингибиции миграции, ИМ - индекс миграции, ИРИ - иммунорегуляторный индекс, ПАМ - показатель активности моноцитов, ПАН - показатель активности нейтрофилов.
случаев выявлено снижение показателей иммунного статуса, характеризующие содержание и функциональные свойства субпопуляций Т-лимфоцитов периферической крови, фагоцитирующих клеток, относительно референтных величин. Помимо это-
го, у всех обследованных зарегистрированы наличие стрессогенных воздействий средней степени, клинически выраженные признаки умеренной реактивной тревоги и вегетативной дистонии. Участники в двух группах по 10 человек получали моноте-
Г Е Г+Е Г Е Г+Е
Г Е Г+ Н Г Е Г+Е
Рис.1. Динамика показателей иммунного статуса в процессе лечения. Представлены медианы, межквартильный интервал и крайние значения изменений (последние не указаны, если выходят за пределы графика). Г - гидроксизина гидрохлорид, Е - витамин Е, Г+Е - комбинированная терапия. Левый верхний угол - ПАН (уел. ед.), правый верхний угол - моноциты, экспрессирующие Н1А-0И (%), левый нижний угол - СЭЗ (%), правый нижний угол - СЕМ (%)
Табл. 3. ИЗМЕНЕНИЯ ПСИХОЛОГИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ В ДИНАМИКЕ ЛЕЧЕНИЯ ВНУТРИ ГРУПП
Группа Показатель До лечения После лечения
Гидроксизина гидрохлорид Уровень реактивной тревоги (баллы)* 37 (34,25-40,75) 35 (28,5-38)
Выраженность вегетативной дистонии(баллы) 27(18,75-30) 27(18-32)
а-токоферол Уровень реактивной тревоги (баллы)* 42 (37-48) 30(21,75-34,25)
Выраженность вегетативной дистонии (баллы) 26,5(15,75-38,5) 26,5(15,5-37)
Комбинированная терапия Уровень реактивной тревоги (баллы)* 45,5 (36-50) 27(23-30)
Выраженность вегетативной дистонии (баллы)* 36 (27,25-43,25) 28
* - р<0,05
рапию витамином Е или комбинацию гидроксизи-на гидрохлорида и а-токоферола. Группа, состоявшая из 16 человек, получала монотерапию гидрокси-зина гидрохлоридом. Все обследуемые завершили участие в исследовании.
Иммунологические параметры
Различия показателей иммунного статуса до и после лечения во всех группах представлены в таблице 2. Из таблицы видно, что в сравниваемых группах в процессе лечения претерпел статистически значимые изменения ряд показателей, характеризующих содержание и функциональные свойства субпопуляций Т-лимфоцитов и фагоцитирующих клеток. Однако степень изменения показателей в большинстве случаев не была существенной. Так, в группе, получавшей гидроксизина гидрохлорид, после завершения лечения было зарегистрировано статистически значимое изменение параметров иммунного статуса - снижение ИИМ на 0,2 (-0,4-0,75), повышение содержания экспрессирующих НЬА-В11 моноцитов на 4% (2,25-5%), СБЗ позитивных лимфоцитов на 2% (0,25-8,2%) и С04 позитивных на 2,5% (-2%-8%), ПЭФ на 0,5 (-0,1-1,2), снижение Ес-фагоцитоза нейтрофилами на 4% (-8%-1%). В группе лиц, которым был назначен а-токо-ферол, произошло достоверное повышение ПАН на 0,4 (0,2-0,65) НЬА-011 экспрессирующих моноцитов на 2% (0-5%), содержания СЭЗ и СБ4 - позитивных клеток на 2% (0,75-6%) и 2,5% (1,75-9,25%), соответственно, иммунорегуляторного индекса на 0,2 (0,11-0,33), ИИМ на ОД (0,075-0,275). У обследуемых, пролечившихся комбинацией витамина Е и гидроксизина гидрохлорида, было выявлено достигавшее статистической значимости повышение Ес-фагоцитоза моноцитами на 9 (0,25-12), ПАН на
0,4 (0,1-0,65), содержания экспрессирующих НЬА-ОЯ моноцитов на 14% (9-15%), СБЗ-позитивных лимфоцитов на 2,5%. Таким образом, наиболее выраженные изменения в процессе лечения претерпели показатели содержания БЛ-позитивные моноцитов, ПЭФ и ПАН.
Поскольку при анализе динамики показателей иммунного статуса внутри каждой группы однонаправленные статистические значимые изменения были установлены по четырем параметрам: содержанию СБЗ и СБ4 позитивных клеток, НЬА-011 экспрессирующих моноцитов, ПАН, дальнейший анализ между группами осуществлялся именно по этим параметрам (Рис 1).
Из рисунка следует, что статистически значимые различия были выявлены лишь в изменении процентного содержания моноцитов, экспрессирующих НЬА-011-антиген при сравнении групп участников, получавших гидроксизина гидрохлорид и комбинированную терапию и принимавших а-токоферол и
Ы= 16 10 10
Г Е Г+Е
Рис. 2. Изменения уровня тревожности в динамике лечения. Представлены медианы, межквартильный интервал и крайние значения изменений (последние не указаны, если выходят за пределы графика). Г - гидроксизина гидрохлорид, Е - витамин Е, Г+Е - комбинированная терапия.
комбинированную терапию. При этом действие комбинированной терапии превосходило оба вида монотерапии.
Психологические параметры
Различия показателей психологического статуса до и после лечения во всех группах представлены в таблице 3. Из таблицы видно, что в сравниваемых группах в процессе лечения статистически значимо уменьшились показатели тревоги во всех трех группах. Выраженность вегетативных расстройств снизилась лишь в группе участников, получавших комбинированное лечение. Далее было проведено сравнение динамики уровня тревоги между тремя группами лечения. Было показано, что снижение уровня тревоги было более выражено в группе лиц, получавших а-токоферол и комбинированную терапию по сравнению с группой, принимавшей гидроксизина гидрохлорид. Статистически значимых различий между группой, получавшей комбинированную терапию и группой, получавшей монотерапию а-токоферо-лом, выявлено не было (Рис 2).
Обсуждение
За последние годы был проведен ряд работ, выявивших ассоциацию психоэмоционального стресса и изменений как фенотипических, так и функциональных параметров иммунной системы. Использовались различные модели острых и длительных стрессирующих ситуаций у различных групп людей
- семейный конфликт [10,16,18], экзаменационная сессия у студентов медиков [11,15,20,22,25,31,31]
и кадетов - выпускников Вест-Пойнта [14], уход за больным взрослым или ребенком [13, 21, 26] и стихийные бедствия [9]. Почти параллельно с этими исследованиями начались попытки воздействовать на иммунную систему различными психотерапевтическими методиками - такими как стресс-снижаю-щие вмешательства [12,30], релаксационные воздействия [17,32], раскрытие пациентом травмирующих психику событий [24]. Влияние вышеперечисленных методов на состояние иммунной системы характеризовалось увеличением содержания Т-лимфоци-тов периферической крови, повышением активности ЫК-клеток, усилением пролиферации мононук-леаров в ответ на Т-клеточные митогены. Исследования, посвященные изучению возможности иммуномодуляции при стрессогенных воздействиях с помощью психоактивных препаратов и антиоксидантов, единичны.
В нашем исследовании в качестве модели длительного психоэмоционального стресса были взяты женщины - учителя общеобразовательных школ, проработавшие не менее 4 лет. У всех них были выявлены признаки социально-стрессового расстройства - умеренно повышенный уровень реактивной тревожности и вегетативные расстройства. Были также обнаружены отклонения от нормы базовых показателей иммунного статуса, затрагивающие все звенья иммунитета, кроме В-лимфоцитов и ЫК-клеток. Уместным представлялось изучить влияние антиоксидантов на стресс-индуцированные изменения иммунитета, поскольку гиперпродукция свободных радикалов кислорода является одним из механизмов повреждающего влияния стресса на органы и системы [29], в том числе и иммунную. В последние годы было показано, что антиоксиданты способны влиять на передачу сигнала и экспрессию генов в лимфоидных клетках [27]. В частности, известно, что один из антиоксидантов а-токоферол обладает иммуномодулирующими свойствами, характеризующимися преимущественным влиянием на Т- лимфоциты [23]. С целью воздействия на более ранние этапы вызванной социально-стрессовым расстройством имму-нокомпроментации нами был выбран анксиоли-тик гидроксизина гидрохлорид. Особо следует отметить, что в группе лиц, принимавших гидроксизина гидрохлорид, позитивные изменения в психоэмоциональной сфере, вегетативной функции были сопряжены с положительной динамикой ряда показателей иммунного статуса. Это позволяет предполагать, что при назначении транквилизаторов, вызванные стрессом нейроиммун-ные нарушения могут быть обратимыми. При анализе изменений иммунного статуса до и после лечения внутри каждой группы было выявлено стимулирующее влияние терапии на феноти-
пические и функциональные показатели Т-лим-фоцитов и моноцитов периферической крови, а также функцию нейтрофилов. При прямом сравнении а-токоферол превосходил гидроксизина гидрохлорид по влиянию на функцию нейтрофилов, что, по всей видимости, связано с его мощными антиоксидантными свойствами. Эти данные согласуются с исследованиями на животных, показавших, что сильный стресс подавляет функцию нейтрофилов посредством возможной гиперпродукции свободных радикалов,токсически влияющих на клетки [19]. Статистически значимых различий между влиянием всех трех режимов лечения на фенотипические показатели Т-лимфоцитов не было выявлено. Сравнение действия комбинированного лечения и обоих режимов монотерапии на функцию моноцитов позволяет предположить, что а-токоферол и гидроксизина гидрохлорид действуют синергично на это звено иммунитета.
Неожиданным оказалось достоверно более выраженное снижение уровня тревоги в группе обследуемых, получавших а-токоферол, по сравнению с группой, принимавшей гидроксизина гидрохлорид. Это можно объяснить более широким спектром биологической активности а-токоферола или небольшими размерами групп, приведшими к возникновению случайной ошибки.
В заключение следует сказать, что выполненное нами исследование относится к пилотным и позволяет сделать лишь предварительные выводы. Для подтверждения клинической значимости наших данных требуется проведение более масштабных рандомизированных испытаний, оценивающих кроме параметров иммунного статуса и клинические исходы.
Список литературы
1. Александровский Ю.А. Социально-стрессовые расстройства. // Русский Медицинский Журнал.-
1996,- №3, С.689-695.
2. Алферова Т.С., Шиган В.Б., Гаптов В.Б. Шаталова Е.Ю. Проблемы и перспективы медико-социальной и социально-психологической реабилито-логии // Российский Медицинский Журнал .-1998.
- №6.- С.14-18.
3. Баевский P.M., Тазединов И.Г., Барсуков Т.В. Математический анализ сердечного ритма как метод оценки функционального состояния организма. М.: Медицина, 1986. - 125с.
4. Вейн А.М. Заболевания вегетативной нервной системы. М.: Медицина, 1990. - 345с.
5. Лозовой В.П., Кожевников B.C. Методы оценки клеточных эффекторных функций ГЗТ (методические рекомендации) М3 СССР. Москва.: 1990.
- 11с.
6. Соколова Е.Д., Березин Ф.Б., Барлас Т.В. Эмоциональный стресс: психологические механизмы, проявления, терапия // Materia Medica.-1996.- Т.9.-№1.-С.5-56.
7. Ширинский B.C., Малышева О.А., Труфакин
C.В. Ширинский И.В. Старостина Н.М. Психоней-роиммунные нарушения при социально-стрессовых воздействиях // Медицинская Иммунология,- 2001.
- Т.З. - №1.-С.89-94.
8. American Psychiatric Association. American Psychiatric Association Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, ed. III-R // Washington, DC.,1987
9. Baum A., Gatchel R.J., Schaeffer M.A. Emotional, behavioral, and physiological effects of chronic stress at Three Mile Island //J. Consult. Clin. Psychol.-1983.
- Vol.51.- P.565-572.
10. Bloom B.L., Asher S.J., White S.W. Marital disruption as a stressor: a review and analysis // Psychol. Bull. - 1978. - Vol.85. - P.867-894.
11. Borella P., Bargellini A., Rovesti S., Pinelli М., Vivoli R., Solfrini V., Vivoli G. Emotional stability, anxiety, and natural killer activity under examination stress // Psychoneuroendocrinology.-1999. - Vol.24. -P.613-627.
12. Coates T.J., McKusick L., Kuno R., Stites D.P. Stress reduction training changed number of sexual partners but not immune function in men with HIV // Am. J. Public. Health. -1989. - Vol.79. - P.885-887.
13. Gennaro S., Fehder W., Nuamah I.F., Campbell
D.E., Douglas S.D. Caregiving to very low birthweight infants: a model of stress and immune response // Brain. Behav. Immun.-1997. - Vol.ll.- P.201-215.
14. Glaser R., Friedman S.B., Smyth J., Ader R., Bijur P., Brunell P., Cohen N., Krilov L.R., Lifrak S. Т., Stone A., Toffler P. The differential impact of training stress and final examination stress on herpesvirus latency at the United States Military Academy at West Point // Brain. Behav. Immun.-1999.-Vol.13.- P.240-251.
15. Kang D.H., Coe C.L., McCarthy D.O. Academic examinations significantly impact immune responses, but not lung function, in healthy and well-managed asthmatic adolescents // Brain. Behav. Immun.-1996.
- Vol.10.- P.164-181.
16. Kiecolt-Glaser J.K., Fisher L.D., Ogrocki P., Stout J.C., Speicher C.E., Glaser R. Marital quality, marital disruption, and immune function // Psycho-som. Med.-1987. - Vol.49. - P.13-34.
17. Kiecolt-Glaser J.K., Glaser R., Williger D., Stout J., Messick G., Sheppard S., Ricker D., Romisher S.C., Briner W„ Bonnell G. Psychosocial enhancement of immunocompetence in a geriatric population // Health. Psychol.-1985. - Vol.4. - P.25-41.
18. Kiecolt-Glaser J.K., Kennedy S., Malkoff S., Fisher L., Speicher C.E., Glaser R. Marital discord and
immunity in males // Psychosom. Med.-1988. - Vol.50.-P.213-229.
19. KuriyamaT., Machida K„ Suzuki K. Importance of correlations between phagocytic activity and superoxide production of neutrophils under conditions of voluntary exercise and stress. // J. Clin. Lab. Anal. -
1996,- Vol.10. - P.458-464.
20. Lacey K., Zaharia M.D., Griffiths J., Ravindran
A.V., Merali Z., Anisman H. A prospective study of neuroendocrine and immune alterations associated with the stress of an oral academic examination among graduate students // Psychoneuroendocrinology. - 2000. -Vol.25. - P.339-356.
21. Leblanc A.J., London A.S., Aneshensel C.S. The physical costs of AIDS caregiving // Soc. Sci. Med. -
1997. - Vol.45. - P.915-923.
22. Marshall G.D.Jr, Agarwal S.K., Lloyd C., Cohen L., Henninger E.M., Morris G.J. Cytokine dysreg-ulation associated with exam stress in healthy medical students // Brain. Behav. Immun. - 1998. - Vol.12. -P.297-307.
23. Moriguchi S. Muraga M. Vitamin E and immunity. // Vitam. Horm. - 2000. - Vol.59. - P.305-336.
24. Pennebaker J.W., Kiecolt-Glaser J.K., Glaser R. Disclosure of traumas and immune function: health implications for psychotherapy //J. Consult. Clin. Psychol. - 1988. - Vol.56. - P.239-245.
25. Sarid O., Anson O., Yaari A., Margalith M. Ep-stein-Barr virus specific salivary antibodies as related to stress caused by examinations //J. Med. Virol.-2001.
- Vol.64. - P.149-156.
26. Schulz R., Visintainer P., Williamson G. M. Psychiatric and physical morbidity effects of caregiving // J. Gerontol.-1990.- Vol.45.- P.181-191.
27. Serafini M. Dietary vitamin E and T cell-mediated function in the elderly: effectiveness and mechanism of action. //J. Dev. Neurosci. - 2000. - Vol.18. -P.401-410.
28. Spielberger C.D. , Gorsuch R.L., Lushene R.E. Manual for the state-trait anxiety inventory // Consulting Psychologist Press.- Palo Alto, CA.,1970
29. Tsopanakis C. Tsopanakis A. Stress hormonal factors, fatigue, and antioxidant responses to prolonged speed driving. // Pharmacol.-1998. - Vol.60. - P.747-751.
30. van der Pompe G., Duivenvoorden H.J., Antoni M.H., Visser A., Heijnen C.J. Effectiveness of a shortterm group psychotherapy program on endocrine and immune function in breast cancer patients: an exploratory study // J. Psychosom. Res. - 1997. - Vol.42. -P.453-466.
31. Vedhara K„ Nott K. The assessment of the emotional and immunological consequences of examination stress //J. Behav. Med. - 1996. - Vol.19. - P.467-478.
32. Whitehouse W.G., Dinges D.F., Orne E.C., Keller S.E., Bates B.L., Bauer N.K., Morahan P., Haupt
B.A., Carlin M.M., Bloom P.B., Zaugg L., Orne M.T.
Psychosocial and immune effects of self-hypnosis train- ter of medical school // Psychosom. Med. - 1996. -
ing for stress management throughout the first semes- Vol.58. - P.249-263.
поступила в редакцию 27.09.2002 принята к печати 30.12.2002
