88 || Зоогигиена
_www.agroyug.ru
ft
УДК 619:578:648.63
Дорожкин1 В.И., академик РАН, доктор биологических наук, профессор, руководитель Кулица2 М.М., кандидат ветеринарных наук, доцент. E-mail: kulitsa02@mail.ru Мирзаев2 М.Н., доктор биологических наук, профессор, зав.лаб. иммунобиотехнологии 1ВНИИ ВСГЭ - филиал ФГБНУ ФНЦ «ВИЭВ им К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко» РАН 2ФГОУ ВПО «МГАВМиБ им. К.И. Скрябина»
к__ Per"
1 * • ч
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПОЛИКОМПОНЕНТНЫХ ДЕЗИНФЕКТАНТОВ В ЖИВОТНОВОДСТВЕ
Получение высоких экономических показателей и использование в полной мере генетического потенциала сельскохозяйственных животных требует не только хорошего уровня кормления и грамотного использования лекарственных препаратов, но и чёткого проведения ветеринарно -санитарных мероприятий. В промышленном животноводстве из-за высокой концентрации поголовья на ограниченной площади количество микроорганизмов в помещениях резко возрастает, и особенно резко растёт количество патогенной микрофлоры. Вследствие этого, в системе противоэпизоотиче-ских мероприятий все больше возрастает роль ве-теринарно-санитарных мер, ключевое значение в которых играет дезинфекция. А дезинфекция должна быть, прежде всего, надежной.
В связи с известным явлением постепенного формирования у микроорганизмов резистентности как к лекарственным, так и иным веществам, необходимо внедрение в практику новых дезинфицирующих средств. При этом важно, чтобы выбранное средство строго выполняло свои прямые функции -снижало микробное давление в помещениях и обеспечивало профилактику инфекций, но при этом не оказывало отрицательного действия на экономические показатели и качество продукции, то есть в полной мере обеспечивало биобезопасность хозяйства [7]. Требования к современным дезинфектан-там довольно жесткие и им не соответствуют старые монокомпонентные средства. Современная дезин-фектология - это использование дезинфектантов
многокомпонентных по составу рецептуры, с полифункциональными свойствами. Нередко сфера их применения расширяется почти пропорционально количеству действующих веществ. Наиболее эффективными являются комбинированные дез-средства, при правильном использовании которых, опасность возникновения устойчивости микроорганизмов к ним является практически невозможной, чего нельзя сказать о применении средств, содержащих одно действующее вещество. Наиболее актуальными направлениями при создании новых биоцидных средств является не столько повышение их антимикробной активности (при этом, как правило, возрастает их токсичность), сколько увеличение продолжительности их антимикробного действия после обработки, снижение токсичности, аллергенности и экологическая безопасность [2, 4].
Примером современных комбинированных дез-средств служат хорошо сбалансированные препараты Абалдез® и Экосепт: сочетание изопропи-ла (спирт), четвертичных аммониевых соединений (ЧАС), глутарового альдегида (ГА) и полигексаме-тиленгуанидина (ПГМГ). При инактивации бактерий изопропил способствует удалению жира и органических веществ из стенки клетки. После чего ЧАС легче проникает через бактериальную стенку, открывая путь неканцерогенному глутаровому альдегиду, который, попав в клетку, уничтожает ядро. ЧАС с производным терпентина обеспечивают хорошую смачиваемость, прекрасную пенообразу-ющую способность, адсорбируются анионными
эффективное № 8 ноябрь генеральный ПАРТНЕР ВЫПУСКА || 89
ЖИВОТНОВОДСТВО 2021 ГЕНЕРАЛЬНЫЙ ПАРТНЕР ВЫПУСКА
поверхностями почвы. Механизм действия полигу-анидинов на микроорганизмы можно представить следующим образом:
- гуанидиновые поликатионы адсорбируются на отрицательно заряженной поверхности бактериальной клетки, блокируя тем самым дыхание, питание, транспорт метаболитов через клеточную стенку бактерий; и гибель микробной клетки [8].
Препараты Абалдез® и Экосепт показали выраженную вирулицидную эффективность в отношении возбудителя аЧс. Исследования, проведенные ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадамии, г. Покров, показали, что препараты в концентрации рабочего раствора 1,0% при экспозиции 0,5 ч. и норме расхода 0,3 л/м2, при однократном орошении полностью инактивировали вирус африканской чумы свиней [5]. Исследования, проведенные ФГБНУ ВНИИВСГЭ, показали эффективность препарата Абалдез® для дезинфекции объектов ветеринарного надзора (2,0% концентрации рабочего раствора; 0,3 л/м2) при обработке поверхностей из разных материалов в пустых производственных помещениях, в том числе без проведения предварительной мойки [10]. Многочисленные исследования по контролю качества дезинфекции Абалдез®, проведенные в Белгородской, Владимирской, Московской, Рязанской и Тверской областях, Краснодарском и Ставропольском краях, показали его высокую надежность.
Новые перспективные дезинфектанты для объектов свиноводства как средство профилактики АЧС.
Особую актуальность проблема внедрения новых высокоэффективных дезинфектантов приобрела в последние годы в связи с распространением в РФ
африканской чумы свиней (АЧС), представляющей реальную угрозу свиноводству страны. Средства специфической профилактики АЧС отсутствуют и, как показал эпизоотический анализ вспышек болезни, ведущую роль в их возникновении играет «человеческий фактор». Для предотвращения разноса возбудителя АЧС из очагов инфекции необходима
ВЕНТИЛЯЦИЯ ЖИВОТНОВОДЧЕСКИХ И ПРОМЫШЛЕННЫХ ЗДАНИЙ
ПРОИЗВОДСТВО
световентиляционных фонарей, штор, окон и вентиляционных шахт из современных материалов, устойчивых к агрессивной среде
ООО «ПСК Светстрой»
г. Вологда, ул. Чернышевского, 120П оф. 12 в 8 (8172) 70-23-53 ®+7 (921) 716-23-53 © swet.stroi@yandex.ru © svetstro.ru О Строительная компания «Светстрой»
il
90 ИИ Зоогигиена
_www.agroyug.ru
Таблица 1.
Исследования эффективности режимов влажной дезинфекциипрепаратами «Вироцид» и «Абалдез»тест-объектов, контаминированных E. coli.
Концентрация раствора препарата, % Расход препарата л/м2 Экспозиция, ч Рост микроорганизмов после дезинфекции
Дерево Бетон Железо
Препарат«Абалдез»
Контроль - - + + +
1,0 0,5 6 + + -
1,5 0,5 6 + + -
2,0 0,5 3 + + -
2,0 0,5 6 - - -
Препарат «Вироцид»
Контроль - - + + +
1,0 0,5 3 + + -
1,0 0,5 6 + + -
1,5 0,5 3 + + -
1,5 0,5 6 + - -
2,0 0,5 3 + + -
2,0 0,5 6 - - -
Примечание: (-) - отсутствие роста микроорганизмов; (+) - наличие роста ми-
кроорганизмов. Таблица 2.
Сравнительные испытания эффективности препаратов «Абалдез» и «Вироцид» на тест-объектах с белковой защитой, контаминированных Bac. cereus, шт. 96.
Концентрации препарата, % Расход препарата, л/м2 Экспозиция, ч Рост микробов после дезинфекции
Дерево Бетон Железо
Контроль - - + + +
Препарат «Абалдез»
0,5 0,5 1 + + +
0,5 0,5 3 + + +
0,5 0,5 6 + + +
1,0 0,5 1 + + +
1,0 0,5 3 + + +
1,0 0,5 6 + + +
2,0 0,5 1 + + +
2,0 0,5 3 + + +
2,0 0,5 6 + + +
3,0 0,5 1 + + +
3,0 0,5 3 + + -
3,0 0,5 6 + + -
Препарат «Вироцид»
0,5 0,5 1 + + +
0,5 0,5 3 + + +
0,5 0,5 6 + + +
1,0 0,5 1 + + +
1,0 0,5 3 + + +
1,0 0,5 6 + + +
2,0 0,5 1 + + +
2,0 0,5 3 + + +
2,0 0,5 6 + + +
3,0 0,5 1 + + +
3,0 0,5 3 + + -
3,0 0,5 6 + + -
Примечание: (-) - отсутствие роста микроорганизмов; (+) - наличие роста ми-
кроорганизмов.
надежная дезинфекция, в т.ч. транспортных средств [1]. Однако, для большинства дезинфектантов не изучена вирулицидная активность в отношении данного агента. Поэтому была поставлена задача - определить дезинфицирующую активность средств Абалдез® и Экосепт на имитации объектов животноводческих хозяйств, контаминированных вирусом АЧС.
Материалы и методы
Исследования по изучению эффективности дезинфицирующих препаратов «Абалдез» (производитель - ООО «Партнер», Россия), «Вироцид» (производитель - «Сид Лайн», Бельгия) и Экосептин (производитель - ООО НПО «Экобиовет») проведены в условиях герметизированных камер в лаборатории по изучению аэрозолей ФГБНУ «ВНИИВСГЭ», а также фермерского (разведение перепелов) хозяйства «Сказка», Разанская область.
Исследования по изучению дезинфицирующей активности препаратов в лабораторных условиях проводили согласно Методическим указаниям «О порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики (Утв. ГУВ Гос-агропрома СССР 7.01.1987г.). При проведении исследований использовали 2 млд/мл.взвесь культуры Е.соН, шт. 1257 и 1 млд/мл. взвесь споровой культуры Bac. cereus, шт. 96.
Для проведения исследований были взяты тест-объекты из дерева, бетона и железа. Опыты проводили на тест-объектах без белковой защиты и с белковой защитой. В качестве белковой защиты использовали сыворотку крови лошадей. Для культивирования микроорганизмов использовали среды Эндо (для выращивания E.coli) и среду МПА (для выращивания Bac. cereus). В опытах использовали концентрации препаратов 0,25; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 3,0; 4,0 и 5,0% по препарату в дозах 0,25 и 0,5л/м2 поверхности. Время экспозиции дезинфектантов - 30 мин., 1, 3 и 6 часов. Растворы препаратов наносили на поверхности путем мелкокапельного орошения ручным распылителем типа «Росинка». До экспозиции (контроль) и после экспозиции брали смывы с тест-объектов и производили посев для бактериологических исследований. Посевы выращивали в термостате при температуре 37°С в течение 24-48 часов. Об эффективности режимов дезинфекции судили по наличию или отсутствию роста микроорганизмов в смывах, взятых с тест-объектов после дезинфекции. Всего проведено 7 серий камерных опытов, каждая из которых включала 3-5 опытов [11].
Для санации воздушной среды птичника использовали генератор холодного тумана ИГЕБА и-40
ЭФФЕКТИВНОЕ № 8 ноябРь ГРНРРйЛКИЫМ ПАРтнЕР ВЫПУгкл
ЖИВОТНОВОДСТВО 2021 ГЕНЕрАльныи ПАртнЕр выпУСКА щн 91
Ветеринарный УЗИ аппарат БИЛ 05-800 - уникальное устройство в области диагностики животных. Его мобильная конструкция делает его особенным среди других ультразвуковых машин, не уступая им по качеству. Данный черно-белый портативный узи-сканер можно использовать для проведения исследования крупного скота, овец, лошадей, а также свиней. Показывает стельность начиная с 30 дней, выявление патологий ректальным способом. Идеально подходит для частых выездных работ. Несмотря на миниатюрные габариты, сочетает в себе современные технологии и базовый функционал. В данном устройстве три интерфейса экрана: горизонтальный для правой руки, горизонтальный для левой, а также вертикальный. Обработка изображений осуществляется в режиме 20. Возможно масштабирование в режиме сканирования. Сканер отличается высокой скоростью работы и превосходным качеством снимков.
S
ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:
• Монитор: LCD, 7 дюймов.
• Режимы экрана:
B,B+B,B+M,M,ZOOM в.
• Вес: 0,8 кг.
• Время работы: 240 ± 20 мин,
• Один разъем для датчика.
• Порты: видео-выход, USB, RJ45.
• Угол обзора: левая и правая сторона 65°.
• Время зарядки: 5 ± 0,5 часа
• Экологическая оценка:
IP 54 (основное устройство), IP 67 (головка датчика).
• Встроенный литиевый аккумулятор.
• Карта памяти: 100 Мб.
• Типы датчиков: конвексный, микроконвексный, линейный, ректальный.
• Размеры: 800 х 480 мм.
Можно
укомплектава1
датчиками для
всех видов исследований:
• Конвексный датчик (модель СЗРС)
• Микроконвексный датчик (модель С5РС)
• Ректальный датчик _
(модели 1_7П/С, 1_5П/С)
• Линейный датчик (модель И V
105118, Россия, г. Москва ш. Энтузиастов д. 34 Тел: +7 (495) 532-14-12 e-mail: info@dais-medical.ru www.dais-medical.ru
HD-E и рабочие растворы Экосептина и Вироци-да в концентрациях 0,25% и 0,5% и 1,0% в дозе 10 мл на 1 м3 воздуха. Содержание микроорганизмов в птичнике определяли путем размещения чашек Петри с различными питательными средами в помещения до обработки, сразу после обработки и 7-е сутки после обработки. В качестве контроля использовали данные, по содержанию микроорганизмов в воздухе птичника, не обработанного де-зинфектантом.
Результаты исследования
В соответствии с Инструкцией по применению «Вироцида» для проведения вынужденной дезинфекции ветсанобъектов при заболеваниях бактериальной и вирусной этиологии (включая туберкулез) для гладких и шероховатых поверхностей рекомендуется использование препарата в концентрации 0,5% при норме расхода 0,5л/м2 и экспозиции 1 ч методом мелкокапельного орошения. Указанный режим обеспечивает инактивацию возбудителей инфекционных заболеваний. Однако, как показали наши исследования, указанный режим не обеспечивает инактивацию Е.соН на тест-объектах как без белковой, так и с белковой защитой.
Результаты исследований эффективности режимов дезинфекции препаратами приведены в таблице 1.
Из таблицы видно, что кишечная палочка шт.1257 инактивируется на шероховатых тест-объектах с белковой защитой (дерево, бетон) в 2%-ной концентрации при норме расхода дезсредств 0,5 л/м2 и экспозиции 6 часов препаратами «Абалдез» и «Вироцид». Т.е. дезинфицирующая активность указанных препаратов в отношении к 1 группе
микроорганизмов по устойчивости к химическим дезинфектантам тождественна. Гладкие поверхности (железо и др.) обеззараживаются 1%-ными растворами дезсредств.
Сравнительные испытания эффективности препаратов «Абалдез» и «Вироцид» в отношении споровых бактерий (4-я группа устойчивости к химическим дезсредствам) проведены на спорах Bac. cereus, шт. 96. Споры Bac.cereus наносили на тест-объекты с белковой защитой. Использовали концентрацию препаратов 0,5; 1; 2 и 3%. Расход препаратов 0,5л/м2, экспозиция 1, 3 и 6 ч. Результаты испытаний приведены в таблице 2.
Из таблицы видно, что указанные концентрации препаратов не обеспечивают инактивацию спор Bac. cereus на шероховатых поверхностях (дерево, бетон). Только 3%-ные растворы препаратов «Абалдез» и «Вироцид» при расходе препаратов 0,5 л/м2 и экспозиции 3 ч инактивируют споры на гладких поверхностях (железо и др.).
Исследования эффективности режимов и технологий влажной дезинфекции препаратами «Абалдез» и «Вироцид» проведены на тест-объектах с белковой защитой. Тест-объекты контаминировали спорами Bac. cereus, шт. 96. Использовались концентрации препаратов 3; 4 и 5%, расход препаратов 0,5 л/м2, экспозиция 3 и 6 ч.
Результаты исследований приведены в таблице 3.
Данные исследований показали, что препарат «Абалдез» обеспечивает инактивацию спор Bac. cereus на всех тест-объектах в концентрации 4% по препарату, при норме расхода 0,5 л/м2, экспозиции 6 ч. А препарат «Вироцид» даже в концентрации 5% - не обеспечивает уничтожение спор на шероховатых поверхностях.
92 II Зоогигиена
www.agroyug.ru
Таблица 3.
Исследования эффективности режимов и технологий влажной дезинфекции препаратами «Абалдез» и «Вироцид» на тест-объектах с белковой защитой, контаминированных Bac. cereus, шт. 96.
Концентрация препарата, % Расход препарата, л/м2 Экспозиция, ч Рост микробов после дезинфекции
Дерево Бетон Железо
Контроль - - + + +
Препарат «Абалдез»
3,0 0,5 6 + + -
4,0 0,5 3 + - -
4,0 0,5 6 - - -
5,0 0,5 3 + - -
5,0 0,5 6 - - -
Препарат «Вироцид»
3,0 0,5 3 + + -
3,0 0,5 6 + + -
4,0 0,5 3 + + -
4,0 0,5 6 + + -
5,0 0,5 3 + + -
5,0 0,5 6 + + -
Примечание: (-) - отсутствие роста микроорганизмов; (+) - наличие роста ми-
кроорганизмов.
Таблица 4.
Эффективность препаратов при аэрозольной дезинфекции птичника.
Концентрация рабочего раствора, % Число КОЕ из расчета на 1м3 помещения Снижение обсемененности помещения микроорганизмами, раз
До дезинфекции После дезинфекции
Вироцид
0,25 200240 47676 4,2
0,50 190220 32341 5,9
1,00 137640 16005 8,6
Экосептин
0,25 213240 57632 3,7
0,50 179852 21159 8,5
1,0% 214280 18796 11,4
В данном случае следует считать что препарат «Абалдез» в сравнении с вироцидом проявляет более выраженную спороцидную активность.
Из данных таблицы следует, что в сравнимых концентрациях экосептин эффективнее вироцида.
Выводы.
Дезинфектант «Вироцид» в рекомендуемой концентрации 0,5%, расходе препарата 0,5л/м2 и экспозиции 3 ч и препарат «Абалдез» при указанном режиме не обеспечивают инактивацию Е.соН; шт.1257 (1-я группа устойчивости к химическим дезсредствам).
Инактивация E.coli на тест-объектах с белковой защитой препаратами «Вироцид» и «Абалдез» достигается в концентрации 2% по препарату, при норме расхода 0,5л/м2 и экспозиции 6 часов. Т.е. дезинфицирующая активность препаратов в отношении 1 -й группы микроорганизмов идентична.
Сравнительные исследования эффективности препаратов «Абалдез» и «Вироцид» на тест-объектах, контаминированных спорами Вас. cereus, шт.96 (4-я группа устойчивости к химическим дезсредствам) показали, что в концентрации 3% при расходе препаратов 0,5 л/м2 и экспозиции 3 ч достигается обеззараживание гладких поверхностей. Шероховатые поверхности не обеззараживаются.
Инактивация спор Bac. cereus достигается препаратом «Абалдез» в 4%-ной концентрации при дозе расхода 0,5 л/м2 и экспозиции 6 часов. Препарат «Вироцид» в 5%-ной концентрации при норме расхода 0,5 л/м2 и экспозиции 6 ч обеспечивает обеззараживание тест-объектов с гладкими поверхностями (железо и др.). Шероховатые поверхности не обеззараживаются. Таким образом, более эффективным по споро-цидной активности является препарат «Абалдез».
Экосептин в сравнимых концентрациях эффективнее Вироцида.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бакулов И.А. Эпизоотическая ситуация по особо опасным болезням животных в 2007-2008 гг. / И.А. Бакулов, И.В. Во-логина // Проблемы профилактики и борьбы с особо опасными, экзотическими и малоизученными инфекционными болезнями животных: Матер. Международ. конф. посвящ. 50-летию ВНИИВВ и М - Покров, 2008. - том 1.
2. Волынцева И.И. Полигексаметиленгуанидин гидрохлорид для очистки и обеззараживания воды как альтернатива реагентам - окислителям. Часть 2. // Вода: химия и экология.
- 2011. - №8. - с. 28-35.
3. Галынкин В.А., Заикина Н.А. Промышленная дезинфекция и антисептика. - 2008.
4. Гембицкий П.А. Полимерный биоцидный препарат полигексаметиленгуанидин. / П.А. Гембицкий, И.И. Волынцева. - Запорожье: Полиграф, 1988. - 44 с.
5. М.М. Кулица, К.М. Мирзаева, Ю.О. Селянинов, М.Н. Мир-заев, Т.И. Мельницкая, Р.С. Девришов. Дезинфицирующая активность средств Экосепт и Абалдез в отношении
бактерий, микроскопических грибов и вируса возбудителя африканской чумы свиней. // «Ветеринария, зоотехния, биотехнология» - №7 - 2018 - с.19-24.
6. Пономаренко Г.Н., Подберезкина Л.А. Дезинфекция и стерилизация. - 2010.
7. Фисинин В.И., Трухачёв В.И., Салеева И.П. и др. // Микробиологические риски в промышленном птицеводстве и животноводстве. Сельскохозяйственная биология - №5 -т. 53 - 2018 - с.1120-1130.
8. Юхневич Г.Г., Личик С.И. Сравнение антимикробного действия препаратов на основе полигексаметиленгуанидин гидрохлорида. / УО «Гродненский государственный университет им. Янки Купалы», Беларусь. - 2015.
9. Инструкция по применению средства Абалдез® для дезинфекции объектов ветеринарного надзора. - М.: ООО «Партнёр», ФГБНУ ВНИИВСГЭ, 2016. - 9с.
10. Алгоритм действия государственной ветеринарной службы субъекта Российской Федерации при угрозе возникновения африканской чумы свиней / А.А. Кудряшев, Н.М. Ка-лишин, В.А. Кузьмин и [др.] Методические указания ФГОУ ВПО «СПбГАВМ». - СПб, 2013.