ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОМПЛЕКСНОГО СРЕДСТВА "KN-73" ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЯЗВЕ ЖЕЛУДКА Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

Ежеквартальный

научно-практический

журнал

естншкАПК

1 Ставрополья

УДК 619:615.243:616.33-002.44 EMXRUI

DOI: 10.31279/2222-9345-2023-12-49-8-12 Дата поступления статьи в редакцию: 25.01.2023

И. А. Конакова, Ф. А. Медетханов, К. А. Пигузова

Konakova I. A., Medetkhanov F. A., Piguzova K. A.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОМПЛЕКСНОГО СРЕДСТВА «KN-73» ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЯЗВЕ ЖЕЛУДКА

EFFECTIVENESS OF THE COMPLEX REMEDY «KN-73» IN EXPERIMENTAL GASTRIC ULCER

На сегодняшний день современные условия ведения животноводства невозможно представить без применения технологических процессов, что, с одной стороны, облегчает труд человека, а с другой - оказывает негативное влияние на организм животных, выступая в роли стресс-фактора. Совокупность этих факторов отражается на продуктивности, плодовитости, сохранности поголовья, а также на системах организма, например органах пищеварения. Известно, что именно пищеварительная система «остро» реагирует на внешние раздражители, что сопровождается нарушениями процессов пищеварения и, как следствие, приводит к возникновению различных патологий, в основе которых зачастую лежат воспалительные явления. Несмотря на богатый арсенал уже имеющихся лекарственных препаратов, в настоящее время интерес представляют растительные средства из доступного природного сырья. Учитывая это, нами была проведена серия опытов по изучению возможной противоязвенной активности комплексного растительного средства под лабораторным шифром <^N-73». Для более точной оценки влияния средства на репаративные процессы и сроки выздоровления животных было смоделировано два типа экспериментальных язв желудка, вызванных внутрижелудочным введением раствора диклофенака натрия и ацетилсалициловой кислоты. Установлено положительное влияние средства на общее состояние животных, обменные процессы, регенерацию и сроки выздоровления, что находит подтверждение в картине крови, количестве язв и рубцов на слизистой желудка.

Ключевые слова: противоязвенная активность, комплексное растительное средство, ульцероген, лабораторные животные, гематологический профиль, диклофенак натрия, ацетилсалициловая кислота.

To date, modern conditions of animal husbandry cannot be imagined without the use of technological processes, which, on the one hand, facilitates human labor, and, on the other, has a negative impact on the animal body, acting as a stress factor. The combination of these factors affects productivity, fertility, livestock safety, as well as body systems, for example, digestive organs. It is known that it is the digestive system that reacts «acutely» to external stimuli, which is accompanied by disorders of the digestive processes and, as a consequence, the emergence of various pathologies, which are often based on inflammatory phenomena. Despite the rich arsenal of already available medicines, herbal remedies from available natural raw materials are currently of interest. Taking this into account, we conducted a series of experiments to study the possible anti-ulcer activity of a complex herbal remedy under the laboratory cipher «KN-73». For a more accurate evaluation of the agent influence on the reparative processes and recovery time of animals, we created two types of experimental gastric ulcers, caused by intragastric injection of a solution of diclofenac sodium and acetylsalicylic acid. Our study established a positive effect of the drug on the general condition of animals, metabolic processes, regeneration and recovery time, what is confirmed through indicators of body weight, blood composition, the number of ulcers and scars on the gastric mucosa.

Key words: anti-ulcer activity, complex herbal remedy, ul-cerogen, laboratory animals, hematological profile, diclofenac sodium, acetylsalicylic acid.

Конакова Ирина Александровна -

кандидат ветеринарных наук, ассистент кафедры биологии, генетики и разведения животных ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана» г. Казань

РИНЦ SPIN-код: 8199-2367 Тел.: 8-919-693-75-48 E-mail: [email protected]

Медетханов Фазил Акберович -

доктор биологических наук, доцент, заведующий кафедрой фармакологии, токсикологии и радиобиологии ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана» г. Казань

РИНЦ SPIN-код: 2295-8834 Тел.: 8-927-417-83-51 E-mail: [email protected]

Пигузова Кристина Андреевна -

аспирант кафедры фармакологии, токсикологии и радиобиологии

ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана» г. Казань

РИНЦ SPIN-код: 8654-5078 Тел.: 8-904-719-44-42 E-mail: [email protected]

Konakova Irina Aleksandrovna -

Candidate of Veterinary Sciences, Assistant

of the Department of Biology, Genetics and Animal Breeding

FSBEI HE «Kazan State Academy of Veterinary Medicine

named after N. E. Bauman»

Kazan

RSCI SPIN-code: 8199-2367 Tel.: 8-919-693-75-48 E-mail: [email protected]

Medetkhanov Fazil Akberovich -

Doctor of Biological Sciences, Associate Professor, Head of the Department of Pharmacology, Toxicology and Radiobiology FSBEI HE «Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N. E. Bauman» Kazan

RSCI SPIN-code: 2295-8834 Tel.: 8-927-417-83-51 E-mail: [email protected]

Piguzova Kristina Andreevna -

postgraduate student of the Department

of Pharmacology, Toxicology and Radiobiology

FSBEI HE «Kazan State Academy of Veterinary Medicine

named after N. E. Bauman»

Kazan

RSCI SPIN-code: 8654-5078 Tel.: 8-904-719-44-42 E-mail: [email protected]

в

естник АПК

Ставрополья

№ 1(49), 2023

Ветеринария

9

В настоящее время болезни органов пищеварения, такие как гастриты и язвенные поражения слизистой оболочки, занимают одно из лидирующих мест по распространенности и частоте возникновения среди населения. Традиционная фармакотерапия данных патологий предусматривает воздействие на основные звенья патогенеза и зачастую не гарантирует абсолютной эффективности лечения, что объясняется полиэтиологичностью и сложностью механизмов развития заболеваний. Известно, что язвенная болезнь является не местным поражением слизистой, а заболеванием организма в целом, связанным, прежде всего, с нарушением нервных и гуморальных механизмов. Нарушение процессов расщепления и всасывания питательных веществ приводит к деструктивным изменениям в других органах и системах, что сказывается на работе всего организма [1]. Учитывая данный аспект, при терапии этой патологии необходимо воздействовать не только на причину болезни, но и коррегировать нарушение метаболизма и репаративные процессы. В связи с этим актуальной проблемой является поиск новых и совершенствование уже имеющихся схем лечения, позволяющих снизить риск рецидивов и воздействовать на организм комплексно.

Особого внимания в данном направлении заслуживает фитотерапия, которая с древних времен используется человеком для лечения многих патологий и с успехом применяется в настоящее время практикующими врачами как альтернатива или дополнение к синтетическим препаратам. Интерес к лекарственным растениям прежде всего связан с их комплексным и более мягким воздействием на организм, низкой токсичностью, а также возможностью длительного применения.

Целью настоящих исследований явилось изучение противоязвенной активности комплексного растительного средства под лабораторным шифром «KN-73» на моделях язвенных поражений слизистых желудка, вызванных различными ульцерогенами.

Для экспериментального исследования возможной противоязвенной активности разработанного средства моделировали два типа язв. Первую модель «диклофенаковой язвы» воспроизводили путем однократного внутрижелу-дочного введения нестероидного противовоспалительного препарата диклофенака натрия в виде 2,5 % раствора в дозе 62,5 мг/кг массы тела. Вторую - «ацетилсалициловая язва» -воспроизводили путем введения per os ацетилсалициловой кислоты в дозе 150 мг/кг один раз в сутки в течение 3 дней [2, 3]. Исследование противоязвенной активности проводили на 50 аутбредных нелинейных самцах лабораторных крыс массой тела 180,0-200,0 граммов, разделенных по принципу пар аналогов на 5 групп, по

десять животных в каждой. Первая группа - ин-тактная, служила «фоном» для оценки состояния слизистой желудка и гематологического профиля. Вторая и третья - опытные, четвертая и пятая - контрольные группы крыс. У животных второй опытной и четвертой контрольной групп индуцировали «диклофенаковую язву», а третьей опытной и пятой контрольной - «ацетилсалициловую язву». Крыс опытных групп лечили спустя 5 часов после введения ульцерогена. Для этого использовали средство «KN-73», внутримышечно трехкратно с интервалом 48 часов в дозе 0,3 мл. Контрольные животные лечению не подвергались.

Для проведения манипуляций использовали зонд с оливой на конце для внутриже-лудочного введения, для внутримышечных инъекций - инсулиновые шприцы. В течение опытного периода, длительность которого составила 14 суток, проводили осмотр животных, при этом обращали внимание на состояние видимых слизистых оболочек, шерстного покрова, двигательную активность и пищевую возбудимость. Исследование слизистой проводили путем макроскопической оценки, предварительно проведя эвтаназию животных эфиром диэтиловым с последующим вскрытием пяти животных на 7-е и 14-е сутки эксперимента. Желудки при этом извлекали из брюшной полости, промывали, вскрывали по малой кривизне и очищали от содержимого, обращая внимание на цвет, отечность и складчатость слизистых. При этом регистрировали наличие крупных язв (d > 3,0 мм), средних (d = 1-3 мм) и мелких язв (d < 1,0 мм).

Для более детальной оценки антиульцеро-генных свойств разработанного средства нами был изучен гематологический профиль животных с подсчетом основных показателей. Забор крови осуществляли из яремной вены путем декапитации. Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью программы Statistica Advanced 10.0, аналитического пакета программ Excel. Достоверность различий выборок оценивали методами параметрического анализа по критериям t Стьюден-та. Уровень статистической значимости различий принимали равным 5 % (р=0,05).

В ходе исследований установлено, что изучаемые параметры у животных интактной группы находились в пределах физиологической нормы. В частности, крысы были активными, аппетит сохранен, шерстный покров гладкий, блестящий, а видимые слизистые оболочки имели бледно-розовый цвет. Однако у животных контрольных и опытных групп наблюдались небольшие отклонения по сравнению со своими сверстниками. Так, крысы в момент введения ульцерогена и инъекции средства вели себя беспокойно и агрессивно, отмечены кратковременная тахикардия и тахипноэ в течение 2-3 минут, а также непроизвольные акты мочеиспускания и дефекации. Крысы сбивались в кучу и забивались в угол

10

Ежеквартопьный «еСТНИКАПК

научно-практический ИС Ставрополья

журнал ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ -—-

клетки. Данные явления проходили в течение 30-40 минут и связаны, на наш взгляд, с болевой реакцией. В последующие сроки самцы крыс опытных групп были более активны, осуществляли груминг, охотно принимали корм и воду. В то же время, наблюдая за контрольными группами, мы выявили снижение аппетита и двигательной активности. Животные сбивались в кучу, не реагировали на внешние раздражители, наблюдалась анемия видимых слизистых оболочек. Стоит отметить, что данные отклонения в контрольных группах регистрировались до 7-х суток эксперимента.

Общеизвестно, что любой патологический процесс в той или иной степени отражается на особенностях состава циркулирующей крови, ввиду чего нами была дана оценка гематологическому профилю подопытных животных на разных сроках исследований при моделировании двух типов язвенных поражений [4]. В таблице 1 представлены данные об изменении гематологических показателей у крыс, по-

Таблица 1

лучавших в качестве ульцерогена раствор ди-клофенака натрия. Установлено отсутствие достоверной разницы в начале эксперимента, при этом все изучаемые показатели находились в пределах физиологической нормы для данного вида животного. На 7-е сутки исследований нами отмечено достоверное снижение количества эритроцитов, уровня гемоглобина и гематокрита на 46; 31,4 и 25,3 % в контроле и на 34,6; 21,5 и 19,5 % в опыте, что, на наш взгляд, связано с явлениями анемии. Уровень лейкоцитов, имеющих высокий уровень реактивности в ответ на действие альтерирующего фактора, наоборот, достоверно превышает значения интактной группы почти вдвое в обеих группах. Скорость оседания эритроцитов, как косвенный показатель наличия патологического процесса в организме, также достоверно превышает значения интактной группы, однако в опытной группе разница составляет 74,6 %, тогда как в контроле превышает почти в четыре раза.

- Влияние <^N-73» на гематологические показатели при диклофенак индуцированной

язве желудка

Показатель Группа

Интактная Контрольная Опытная

7-е сутки

Эритроциты, х 1012 7,8±0,32 4,18±0,24** 5,1±0,44*

Гемоглобин, г/л 106,2±2,4 72,8±3,12** 83,4±2,45**

Гематокрит, % 45,2±1,12 33,8±2,24* 36,4±2,66*

Лейкоциты,х 109 8,8±0,66 16,2±2,44*** 13,6±2,18*

СОЭ, мм/ч 1,42±0,11 4,66±1,6** 2,48±0,64*

14-е сутки

Эритроциты, х 1012 8,1±1,11 4,92±1,48* 6,01±1,86

Гемоглобин, г/л 114,4±4,12 84,8±2,62** 96,6±3,77

Гематокрит, % 44,8±2,44 36,4±1,82* 38,8±2,28

Лейкоциты,х 109 9,16±0,94 14,4±1,22* 10,8±1,38

СОЭ, мм/ч 1,13±0,22 3,24±0,42** 1,68±0,27

Примечание: *, **, *** - уровни достоверности различия, соответственно р<0,05; <0,01 и <0,001.

Анализируя полученные данные на заключительном этапе исследований, можно сделать вывод, что крысы опытной группы, получавшие изучаемое средство, не достигли значений интактной группы, однако разница была недостоверной, что свидетельствует о выздоровлении животных. В то же время в контроле регистрировались явления анемии, что подтверждается более низким уровнем эритроцитов, гемоглобина и гематокрита на 39,3; 25,8 и 18,8 % соответственно при р<0,05 и <0,01. Одновременно с этим отмечен и лейкоцитоз с достоверным повышением уровня лейкоцитов на 57,2 % по сравнению с интактными аналогами, а также показатель СОЭ, превышающий таковой у здоровых сверстников в три раза.

Однонаправленный характер изменений в картине крови нами отмечен и в группах животных, в которых в качестве альтерирующего фактора использовали ацетилсалициловую кисло-

ту. В частности, на 7-е сутки исследований у крыс контрольной и опытной групп также наблюдались признаки малокровия с достоверным снижением уровней эритроцитов, гемоглобина и гематокрита, а также лейкоцитоз и повышение уровней СОЭ, свидетельствующие о наличии воспаления в организме (табл. 2). Аналогичная картина изменений в гематологическом профиле наблюдалась в контрольной группе и на заключительном этапе исследований, о чем свидетельствуют табличные данные. В частности, количество эритроцитов, уровень гемоглобина и величина гематокрита были достоверно ниже интактных аналогов на 38; 21,3 и 18,7 % соответственно, а наличие воспалительной реакции подтверждается высоким уровнем лейкоцитов и СОЭ. В то же время показатели крови крыс опытной группы не имели достоверных различий по сравнению со здоровыми животными.

Вестник АПК

Ставрополья Ветеринария __— - № 1(49), 2023 ■ ' —

Таблица 2 - Влияние «КЫ-73» на гематологические показатели при «ацетилсалициловой»

язве желудка

Показатель Группа

Интактная Контрольная Опытная

7-е сутки

Эритроциты, х 1012 7,8±0,32 4,24±0,3* 5,4±0,24*

Гемоглобин, г/л 106,2±2,4 76,6±4,18** 88,2±3,15**

Гематокрит, % 45,2±1,12 35,2±2,21* 38,7±2,28

Лейкоциты,х 109 8,8±0,66 15,8±2,18** 13,2±2,32*

СОЭ, мм/ч 1,42±0,11 4,24±1,4** 2,36±0,14*

14-е сутки

Эритроциты, х 1012 8,1±1,11 5,11±1,34* 6,38±2,08

Гемоглобин, г/л 114,4±4,12 88,8±2,46** 99,4±3,44

Гематокрит, % 44,8±2,44 36,6±1,82* 40,2±2,77

Лейкоциты,х 109 9,16±0,94 13,6±1,67* 10,02±1,68

СОЭ, мм/ч 1,13±0,22 2,96±0,2** 1,62±0,14

Примечание: *, **, *** - уровни достоверности различия, соответственно р<0,05; <0,01 и <0,001.

Для подтверждения данных, полученных при исследовании крови, нами был осуществлен подсчет количества дефектов слизистых при моделировании разных типов язв. В таблице 3 представлены данные о влиянии изучаемого средства на репаративные процессы при диклофенако-вой язве. Вскрытием на 7-е сутки установлено, что количество крупных язв у крыс опытной группы достоверно ниже на 50 % по сравнению с контролем. Количество средних и мелких язв также меньше на 33,3 и 77,9 %, однако разница недостоверная. На 14-е сутки зарегистрировано отсутствие язв у животных опытной группы, однако отмечены единичные рубцы, что согласуется с

картиной крови. В то же время у контрольных аналогов выявлено небольшое количество язв всех типов. Эти данные согласуются с исследованиями, проведенными рядом авторов [5, 6].

Анализируя табличные данные, полученные при введении ацетилсалициловой кислоты, установили однонаправленный характер изменений на 7-е сутки эксперимента (табл. 4). В частности, количество крупных язв было достоверно ниже на 76,9 %, а уровень средних и мелких не достигал такового в контроле. На заключительном этапе исследований в опытной группе отмечены мелкие язвы, однако их количество меньше, чем в контроле, в 4 раза.

Таблица 3 - Количество язв при «диклофенаковой» язве желудка

Группа 7-е сутки 14-е сутки

Крупные Средние Мелкие Крупные Средние Мелкие

Интактная - - - - - -

Контрольная 1,8±0,14 2,1±0,18 2,9±0,12 0,6±0,11 0,9±0,28 0,3±0,1

Опытная 0,9±0,11* 1,4±0,22 0,64±0,24 рубцы рубцы -

* Уровни достоверности различия, соответственно р<0,05.

Таблица 4 - Количество язв при «ацетилсалициловой» язве желудка

Группа 7-е сутки 14-е сутки

Крупные Средние Мелкие Крупные Средние Мелкие

Интактная - - - - - -

Контрольная 2,6±0,32 2,8±0,65 3,1±0,24 1,1±0,18 1,6±0,32 0,8±0,19

Опытная 0,6±0,27* 1,2±0,42 0,88±0,12 - рубцы 0,2±0,02

Литература

1. Беляева Ю. Н. Болезни органов пищеварения как медико-социальная проблема // Бюллетень медицинских интернет-конференций. 2013. Т. 3. С. 566-567.

2. Миронов А. Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. М. : Гриф и К, 2012. 944 с.

3. Хабриев Р. У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению

References

1. Belyaeva Yu. N. Diseases of the digestive organs as a medical and social problem // Bulletin of medical Internet conferences. 2013. Vol. 3. P. 566-567.

2. Mironov A. N. Guidelines for conducting preclinical studies of medicines. M. : Grif and K, 2012. 944 p.

3. Khabriev R. U. Guidelines for experimental (preclinical) study of new pharmacological

*>естеик АПК

,,„ „„„„, Jj Ставрополья

научно-практическии журнал

новых фармакологических веществ. М. : ОАО «Издательство «Медицина», 2005. 832 с.

4. Ажикова А. К., Журавлева Г. Ф. Исследование гематологических показателей крыс в норме и в условиях термического воздействия // Современные проблемы науки и образования. 2016. № 2. С. 21-30.

5. Конакова И. А. Использование средства Иралкон при экспериментальной язве желудка // Ученые записки КГАВМ. 2020. Т. 243 (III). С. 127-131.

6. Медетханов Ф. А. Фармако-токсикологи-ческие свойства растительного средства Нормотрофин и его применение в ветеринарии : автореф. дис. ... д-ра биол. наук. Казань, 2015. 47 с.

substances. M. : JSC «Publishing «Medicine», 2005. 832 p.

4. Azhikova A. K., Zhuravleva G. F. Study of hematological parameters of rats in normal and under thermal exposure // Modern problems of science and education. 2016. № 2. P. 21-30.

5. Konakova I. A. The use of Iralcon in experimental gastric ulcer // Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N. E. Bauman. 2020. Vol. 243 (III). P. 127-131.

6. Medetkhanov F. A. Pharmaco-toxicological properties of the herbal remedy Normotro-phin and its application in veterinary medicine : abstract. dis. ... doctor of biological Sciences. Kazan, 2015. 47 p.