CC BY
31ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТИВОЯЗВЕННОЙ АКТИВНОСТИ СУХОГО ЭКСТРАКТА КАПУСТЫ БРОККОЛИ НА МОДЕЛИ ХРОНИЧЕСКОЙ АЦЕТАТНОЙ ЯЗВЫ ЖЕЛУДКА У КРЫС
Щукина Н.Н.
Соискатель медицинских наук, Национальный фармацевтический университет Министерство здравоохранения Украины
Харьков Гладченко О.М. Доктор медицинских наук, профессор, Национальный фармацевтический университет Министерство здравоохранения Украины
Харьков Малоштан Л.Н. Доктор биологических наук, профессор, Национальный фармацевтический университет Министерство здравоохранения Украины
Харьков
RESEARCH OF ANTIULCER ACTIVITY OF A DRY EXTRACT OF THE BROCCOLI IN THE MODEL OF CHRONIC VINEGAR
GASTRIC ULCER IN RATS
Schukina N.N.
PhD applicant of Medical Sciences, National University of Pharmacy, Ministry of Health of Ukraine, Kharkiv Gladchenko О.М. PhD in Medicine, Professor, National University of Pharmacy, Ministry of Health of Ukraine, Kharkiv Maloshtan Ь.М. Doctor of Biological Sciences, Professor, National University of Pharmacy, Ministry of Health of Ukraine, Kharkiv
АНОТАЦИЯ
Сухой экстракт капусты брокколи (СЭКБ) обладает противовоспалительными, анальгезивными, ре-паративными, мембраностабилизирующими, антиоксидантными и антимикробными свойствами. Такой спектр фармакологического действия достаточен, чтобы обеспечить выраженное позитивное лечебное влияние на течение язвенной болезни желудка. В статье описаны исследования фармакологической активности СЭКБ при хронической экспериментальной модели язвы желудка у крыс - модели хронической ацетатной язвы желудка. Приводятся результаты исследования и их обсуждения. ABSTRACT
Dry extract of broccoli (DEB) has anti-inflammatory, analgesic, reparative, membrane-stabilizing, antioxi-dant and antimicrobial properties. This is the sufficient range of pharmacological action to provide pronounced positive therapeutic impact on stomach ulcer. The paper describes the research of the DEB pharmacological activity in chronic experimental model of gastric ulcers in rats - the model of chronic vinegar gastric ulcer. Results of the research and their discussions are reported.
Ключевые слова: экстракт капусты брокколи, плантаглюцид, альтан, язвенная болезнь желудка, противоязвенная активность.
Keywords: extract of broccoli, plantaglucide, altan, stomach ulcer, antiulcer activity.
Вступление.
Язвенная болезнь (ЯБ) - полиэтиологическое хроническое рецидивирующее заболевание с полициклическим течением, которое характеризуется наличием дефектов, нарушением моторной и секреторной функций, в основе которого лежит воспаление слизистой оболочки желудка (СОЖ) и/или двенадцатиперстной кишки [1, 2, 3]. Возрастающие требования к современной терапии язвенной болезни, широкое распространение заболевания, делают поиск и создание новых высокоэффективных а также безопасных противоязвенных препаратов растительного происхождения актуальным [4, 5]. Объектом нашего исследования стал сухой экстракт из надземной части капусты брокколи.
Капуста брокколи (Brassica oleracea L.var. italica Plenck) - это овощная культура, которая достаточно распространена и культивируется на территории Украины [6].
Основными биологически активными веществами, которые обусловливают фармакологические эффекты капусты Брокколи являются большое количество витаминов В1, В2, С, РР, В6, Е, фитонцидов, которые имеют фунгицидные и бактерицидные свойства. Надземная часть капусты содержит органические кислоты (яблочную, глюкуроновую, янтарную и др.), флавоноиды, дубильные вещества, гидроксикоричную кислоту, а также индол, которые повышают эффективность систем детоксика-ции [7, 8, 9].
Цель исследования.
Целью проведенных экспериментов было исследование антиульцерогенного действия сухого экстракта из надземной части капусты брокколи на модели экспериментальной язвы у крыс и определение влияния СЭКБ на течение язвенной болезни у экспериментальных животных.
Материалы и методы.
Исследования противоязвенной активности (ПА) сухого экстракта капусты брокколи изучали на модели уксусной язвы желудка. Хроническую язву воссоздавали по Takagi в модификации А.А. Никулина и С.И. Буданцевой на крысах массой 180-230 г, которым после предварительной ла-паротомии в субсерозный слой желудка вводили 0,05 мл 5% раствора уксусной кислоты. Эта модель выбрана с учетом ее высокой воспроизводимости и соответствия гистоморфологическим характеристикам язвы желудка у человека.
Эксперименты проводили на белых беспородных крысах весом 180-200 г. Животных держали на голодной диете 24 часа. Потом под барбитуровым наркозом проводили лапаротомию и вводили 0,05 мл 30% раствора уксусной кислоты под серозный слой стенки желудка.
В качестве препаратов сравнения были выбраны отечественные противоязвенные препараты
растительного происхождения альтан (НВЦ "Бор-щаговский ХФЗ, г. Киев") и плантаглюцид (ООО "Фармацевтическая компания "Здоровье", г. Харьков), которые по химическому составу сходны с СЭКБ. Плантаглюцид и альтан обладают спазмолитическими, противовоспалительными и ранозажив-ляющими действиями, следовательно, являются в определенной мере аналогами для СЭКБ по фармакологической активности. СЭКБ изучали в дозе 25 мг/кг, препараты сравнения плантаглюцид -500 мг/кг, альтан - 1 мг/кг, которые вводили крысам интрагастрально в профилактически-лечебном режиме.
Препараты вводили в течение 10 суток, начиная со второго дня опыта. При выборе длительности курса лечения исходили из того, что эффективность противоязвенного действия в клинике оценивается через 10-12 дней лечения. Лечение считается эффективным, если размеры язвенного дефекта за этот срок уменьшаются в 2 раза. Состояние животных оценивали по интегральному показателю - динамике массы тела в подопытных и контрольных группах. Через 10 суток животных декапитировали и изучали состояние слизистой оболочки желудка, считали количество язв, процент животных с язвами и язвенный индекс. Мы использовали такую систему оценки: 0 - отсутствие видимых повреждений; 1 - наличие отека или кровоизлияний, 1-3 небольших язв; 2 - несколько (больше 3) небольших язв или 1 язва значительных размеров; 3 - язва значительных размеров (диаметр до 4 мм); 4 - несколько больших язв; 5 - прободная язва. Потом в каждой группе подсчитывали сумму баллов, из которой выводили среднюю арифметическую величину, которая характеризует среднюю степень язвы (СЯ) в группе. Кроме того, в группе рассчитывали язвенный индекс (ЯИ). Противоязвенную активность определяли по способности уменьшать площадь язв у подопытных животных в сравнении с животными контрольной патологии.
Результаты и их обсуждение.
По результатам исследования установлено, что введение животным уксусной кислоты приводило к ухудшению общего состояния животных и развитию поражения СОЖ. В контрольной группе животных наблюдались потеря массы тела, уменьшение гиперемии и язвы слизистой желудка. В группе животных, которые получали СЭКБ, улучшалось общее состояние животных (достоверно уменьшалась потеря массы тела). При осмотре желудков в группе контрольной патологии у 100% животных наблюдались вздутие желудка, отек и гиперемия, нарушение складчатости, многочисленные мелкие геморрагии, язвенные дефекты СОЖ: средняя площадь язв составляла 26,10 мм2, значение ЯИ выросло до 26,1. Результаты эксперимента приведены в табл. 1.
Таблица 1
Влияние СЭКБ и референс-препаратов на течение хронической ацетатной язвы желудка у крыс _(п=8)_
Условия исследования Количество животных с язвами в группе, % Средняя площадь язв, мм2 Язвенный индекс (ЯИ), у.е
Контроль 100 26,10+2,1 26,1
СЭКБ, 25 мг/кг 70 9,71+0,48* 6,80
Альтан, 1 мг/кг 74 11,62+0,38* 8,60
Плантаглюцид, 500 мг/кг 80 13,35+0,33* 10,68
Примечание. * - отклонение показателя достоверно относительно контрольной патологии, р<0,001.
Введение субстанции СЭКБ и препаратов сравнения привело к значительному улучшению состояния животных. При макроскопическом исследовании желудков крыс этих групп наблюдали отсутствие вздутия, складчатость и цвет слизистой оболочки желудка почти не отличались от таких же характеристик в группе интактных животных. Под воздействием СЭКБ количество животных с язвами в группе снизилось до 70%, а под действием противоязвенных препаратов альтана и плантаглюцида -до 74 и 80% соответственно. В сравнении с группой контрольной патологии наблюдали достоверное снижение средней площади язв и ЯИ под воздействием СЭКБ в 2,7 и 3,8 раз соответственно, а под воздействием альтана - в 2,2 и 3,0 раз соответ-
ственно. Плантаглюцид также способствовал снижению средней площади язв и ЯИ в 2 и 2,4 раза соответственно.
Также установлено, что на этой модели язвенного поражения СОЖ, СЭКБ проявил ПА, равную 74% (рис. 1), которая незначительно превышала ПА препарата сравнения альтан - 67% и ПА плантаглюцида на 15%. Это свидетельствует о выраженных противоязвенных свойствах СЭКБ, за счет которых он способен восстанавливать поврежденные ткани слизистых оболочек ЖКТ. По противоязвенной активности исследуемый СЭКБ и альтан почти равны, а действие плантаглюцида превышает на 15%, но доза СЭКБ значительно меньше дозы план-таглюцида, что позволяет говорить о преимуществе
фармакологической активности СЭКБ.
80
о4 70 >а
§ 60
Я
са
Н 50
74
40
К
<я я я
£ 30
к о
¡а 20
S н о
3 10 С
0
67
59
СЭКБ, 25 мг/кг
Альтан,1 мг/кг Плантаглюцид, 500 мг/кг
Рис. 1
Противоязвенная активность СЭКБ и референс-препаратов на модели хронической уксусной язвы
В ходе эксперимента также отмечались изменения показателей периферической крови в опыте. Так, у животных группы контрольной патологии, отмечалось достоверное увеличение количества лейкоцитов в 2,1 раза и ускорение скорости оседания эритроцитов (СОЭ) в 4,6 раза по сравнению с интактной группой. Также отмечалось достоверное уменьшение количества эритроцитов в 1,7 раза и уровня гемоглобина в 1,24 раза, то есть наблюдались признаки воспаления и развития интоксикации. У крыс, которых лечили СЭКБ, наблюдалось значительное улучшение показателей крови по
сравнению с группой контрольной патологии. Полностью достоверно нормализовались показатели крови: СОЭ - 4,2±0,3 мм/ч, количество лейкоцитов - 9,8±0,5-109/л, эритроцитов - 5,5±0,7-1012/л и гемоглобина - 144,3±8,3 г/л. При лечебно-профилактическом применении СЭКБ показатели СОЭ и лейкоцитов уменьшились на 76,9 и 51,7% соответственно, тем временем как содержание эритроцитов увеличилось в 1,66 раза, а гемоглобина - на 18% относительно контроля.
Референс-препараты также обладают терапевтическим действием (улучшение показателей
крови), но оно выражено несколько меньше, чем у СЭКБ. Так, под воздействием альтана, показатели СОЭ и лейкоцитов уменьшились на 71 и 52% соответственно, а содержание эритроцитов увеличилось в 1,66 раза, показатель гемоглобина возрос лишь на 18% относительно контроля. Плантаглю-цид также положительно влиял на нормализацию гематологических показателей у экспериментальных животных, но уступал исследуемому экстракту.
Данные клинического анализа крови свидетельствует о том, что экспериментальная язва, вызываемая уксусной кислотой, в период активизации репаративных процессов в контрольной группе характеризуется существенными сдвигами со стороны гематологических показателей. Рост лейкоцитов и соотношение лейкоцитарной формулы в контрольной группе по сравнению с интактными животными подтверждает наличие воспалительного процесса. Однако эти изменения можно объяснить компенсаторными механизмами гомеостаза животных. Вместе с тем, показатели крови у животных, которых лечили СЭКБ, альтаном и плантаглю-цидом по значениям ближе к интактной группе, что в определенной степени подтверждает лечебный эффект препаратов.
Выводы.
Исходя из вышеизложенного, можно сделать вывод, что при исследовании противоязвенной активности СЭКБ на модели ацетатной язвы СЭКБ проявил ПА на уровне 74%, незначительно превышая ПА референс-препаратов. Следовательно, на этой модели язвы СЭКБ проявляет ПА на уровне препаратов сравнения, а по влиянию на скорость нормализации гемодинамических показателей (СОЭ, количество лейкоцитов, эритроцитов и гемоглобина), несколько превышает их.
Литература
1. Калинин А.В. Язвенная болезнь Гастроэнтерология и гепатология. Диагностика и лечение. - М.: Миклош, 2007. С. 70-94.
2. Вахрушев Я.М. Язвенная болезнь: особенности течения на современном этапе и прогноз на ближайшие годы // Тер. архив. №8, 2008, С. 26-29.
3. Вавилов A.M. Рецидивирующие га-стродуоденальные язвы у пациентов разного возраста. - Томск: Печатная мануфактура, 2006. -198 с.
4. Калинин А.В. Симптоматические га-стродуоденальные язвы и гастродуоденальные язвы при язвенной болезни // Рос. журнал гастроэнтерологи, гепатологии, колопроктологии. Т. 14, № 3, 2004, С. 22-32.
5. Защитные свойства слизистой оболочки желудка в острый и хронический периоды язвооб-разования // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. №1, 2002, С. 173.
6. Владимiрова 1.М., Ю^ченко В.С. Ви-вчення амшокислотного та елементного складу ка-пусти брокколi та li використання в медичнш прак-тищ // Актуальш питання фармацевтично! та меди-чно! науки та практики. Збiрник наукових статей. -Запорiжжя: вид-во ЗДМУ. Вип. 15, Т. 1, 2006. С. 186-191.
7. Владимiрова 1.М., Ю^ченко В.С., Демьо-хiн В.Б., Махотiна О.О. Фiтохiмiчне вивчення листя капусти брокколi // Створення, виробництво, стан-дартизащя, фармакоекономiчнi дослiдження лжар-ських засобiв та бiологiчно активних добавок. Ма-терiали 2-! Мiжнародноl науково-практично! кон-ференцп (12-13 жовтня 2006 р.). - Х.: вид-во НФаУ. 2006, С. 42-43.
8. Amieva, M.R. Host-bacterial interactions in Helicobacter pylori infection // Gastroenterology. 2008, Vol.34, N1, P.306-323.
9. Bardhan K.D. Time, change and peptic ulcer disease in Rotherham, UK // Digestive and Liver Disease. 2008, Vol.40, N7, P.540-546.
