CC BY
16Ветеринарный врач. 2022 №3 С. 41-45 The veterinarian. 2022; (3):41-45.
Научная статья
УДК 619:616.36-002:619:615.4
DOI 10.33632/1998-698Х.2021_41_45
Эффективность комплекса лекарственных препаратов при экспериментальной жировой дистрофии печени белых крыс
Владислав Олегович Домбровский
Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности, отделение
токсикологии, лаборатория микотоксинов, Казань, Россия, vlad_tavria34@mail.ru
Автор, ответственный за переписку: Владислав Олегович Домбровский, vlad_tavria34@mail.ru
Аннотация. Печень - центральный орган метаболизма в организме, выполняющий множество функций, важнейшей из которых является антитоксическая. Для оценки терапевтической эффективности новых гепатопротекторных лекарственных препаратов используется экспериментальная модель жировой дистрофии печени у лабораторных животных. Исследование по изучению гематологических показателей крови белых крыс, а также активности биохимических ферментов печени при моделировании экспериментальной жировой дистрофии проводилось на базе отделения токсикологии ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Подопытных животных разделили на четыре группы по шесть особей. Белым крысам для индукции жировой дистрофии печени вводили этиловый спирт перорально на протяжении десяти суток. Лечение подопытных животных осуществляли посредством введения комплексной биодобавки, а также препаратом «Карсил». Контроль лечебного эффекта оценивали по данным гематологических и биохимических исследований крови. Результаты исследования показали, что по большинству показателей комбинированная биодобавка не только не уступает препарату «Карсил», но и превосходит. Данного эффекта удалось добиться благодаря поликомпонентному составу средства из-за чего эффекты на метаболизм клеток печени более многогранны.
Ключевые слова: этиловый спирт, жировой гепатоз, биодобавка, гепатопротектор, печень
The effectiveness of diagnostic studies in experimental fatty degeneration of the liver of white rats
Vladislav O. Dombrovskiy
Federal Center for Toxicologicae, Radiation and Biological Safety, department of the toxicology, laboratory of mycotoxins, Kazan, Russia, vlad_tavria34@mail.ru
Corresponding author: Vladislav Olegovich Dombrovsky vlad_tavria34@mail.ru
Abstract. The liver is the central organ of metabolism in the body, performing many functions, the most important of which is antitoxic. To assess the therapeutic efficacy of new hepatoprotective drugs, an experimental model of fatty liver disease in laboratory animals is used. The research on the study of hematological parameters of the blood of white rats, as well as the activity of biochemical liver enzymes when modeling experimental fatty degeneration was carried out on the basis department of the toxicology of the Federal State Budgetary Scientific Institution. The experimental animals were divided into four groups of 6 individuals in each one. White rats, for the induction of fatty degeneration of the liver, were injected with ethyl alcohol orally for 10 days. The treatment of experimental animals was carried out by introducing a complex dietary supplement, as well as the drug "Karsil". The control of the therapeutic effect was assessed according to the data of hematological and biochemical blood tests. The results of the study showed that the combined dietary supplement is superior to the «Karsil» in most indicators. This effect was achieved due to the multicomponent composition of the agent, due to which the effects on the metabolism of liver cells are more multifaceted.
Keywords: ethyl alcohol, fatty hepatosis, dietary supplement, hepatoprotector, liver
Введение. Наиболее часто патологическому воздействию экзогенных и эндогенных раздражителей подвергается печень -центральный орган метаболизма. Жировая дистрофия или гепатоз - болезнь, характеризующаяся кумуляцией триглицеридов в гепато-цитах и нарушением основных функций печени. Классифицируется на острый и хронический жировой гепатоз. Причины данной патологии разнообразны. Жировой гепатоз регистрируют чаще как вторичное сопутствующее заболевание. Поскольку гепатозы широко распространены среди животных, то их лечение и профилактика являются актуальными [6]. Жировой гепатоз и дистрофия являя-ется распространённой патологией в ветеринарной медицине [10]. Одним из методов моделирования жировой дистрофии печени является использование этилового спирта [5]. Метаболизм этанола в печени происходит при образовании ацетальдегида и уксусной кисло -ты, обладающих прямым цитотоксическим действием на гепатоциты, и приводит к изменениям в ферментативных системах этого органа [3, 14]. Это проявляется увеличением содержания в сыворотке крови билирубина, а также повышением активности трансаминаз [4]. Проводя анализ научной литературы, можно сделать заключение, что введение больших доз этанола вызывает образование активных форм кислорода, что является одним из механизмов развития гепатаргии и острой церебральной недостаточности [14].
Для оценки терапевтической эффективности новых гепатопротекторных лекарственных препаратов используется экспериментальная модель жировой дистрофии печени у лабораторных животных [11, 13]. Для терапии заболеваний желудочно-кишечного тракта и печени применяют различные лекарственные средства, такие как сорбенты, антиоксиданты, антибиотики [2, 9, 12, 15]. Однако одним из основных способов лечения заболеваний печени являются препараты, относящиеся к группе гепатопротекторов, которые активизируют ее обезвреживающую функцию, повышают устойчивость печени к патологическим воздействиям [6]. Ассортимент лекарственных средств на современном фармакологическом рынке, позиционируемых как гепатопро-текторы для животных, крайне малочисленный, а большинство из них являются зарубежными препаратами. Поиск новых эффективных соединений с гепатопротективным действием остается актуальным направлением
отечественной ветеринарной фармакологии [16].
Материалы и методы. Исследования были выполнены на базе отделения токсикологии ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» (г. Казань). Для индукции жирового гепатоза печени использовали этиловый спирт. Для проведения опытов отобрали 24 белых крысы, разделенных по принципу аналогов на четыре группы. Подопытные животные первой группы использовались как биологический контроль. Белые крысы второй, третьей и четвертой групп получали внутрижелудочно этиловый спирт 40 % в дозе 10 мл/кг один раз в сутки на протяжении десяти суток. Крысам третьей и четвертой групп на фоне затравки задавали препараты. Животные третьей группы получали силимарин (100 мг/кг внутрижелудочно один раз в сутки). Четвертая группа получала биодобавку на основе шрота расторопши, янтарной кислоты, бентонита, пробиотического штамма B. subtilis, витаминов А и Е. Лечение препаратами продолжалось в течение 14 суток.
Биохимические исследования проводились на анализаторе «Stat Fax» (США). Для гематологических исследований использовался анализатор марки «IDEXX LaserCyte Dx» (США).
Статистическая обработка экспериментальных данных проводилась в соответствии с требованиями, приведенными в нормативных документах [1].
Результаты исследований. Эффективность действия биодобавки оценивали по результатам морфо-биохимических показателей крови белых крыс. Результаты гематологических исследований представлены в таблице 1.
Исходя из данных гематологических исследований, отмечалось повышение уровня показателей красной крови у всех групп по сравнению с контролем, на более чем 50 % (P<0,001). Кроме того, во второй группе отмечается повышение уровня лейкоцитов на 45,0 % (P<0,001), что на 11,0 % больше чем в третьей группе, и на 49,0 % (P<0,001) больше чем в четвертой группе. Кроме того, во второй группе отмечался сдвиг лейкограммы вправо.
Результаты биохимических исследований указаны в таблице 2.
Во второй группе отмечается стойкое повышение ферментов печени в случае щелочной фосфатазы более чем на 300,0 % (P<0,001). В третьей и четвертых группах щелочная фосфатаза не была статистически зна-
чимо изменена. Аланинаминотрансфераза в четвертой группе была повышена на 9,0 %, в третьей - на 35,0 % (Р<0,001), в группе без ле-
чения отмечалось повышение на 68,0 % (P<0,001) по сравнению с контролем.
Таблица 1 - Морфологические показатели крови белых крыс на фоне экспериментальной жировой дистрофии печени
_(п=6)
Показатель Группа 1 Группа 2 Группа 3 Группа 4
Гематокрит, % 29,0±2,5 50,0±3,0*** 45,0±1,5*** 43,0±2,0***
Гемоглобин, г/л 125,0±7,8 190,0±8,2*** 180,0±10,5*** 175,0±9,5***
Эритроциты, 109/л 6,5±1,1 9,5±0,9*** 9,0±1,2*** 9,0±0,8***
Тромбоциты,109/л 422,0±23,5 475,0±17,4 423,0±22,0 450,0±20,2
Лейкоциты, 109/л 6,5±0,7 11,8±1,1* 10,5±0,9*** 5,8±1,0
Базофилы, % 0 0 0 0
Эозинофилы, % 0 0 1,0±1,0 0
Палочкоядерные 1 1 1 1
нейтрофилы, %
Сегментоядерные 32,0±1,0 12,0±1,0* 35,0±1,0 30,0±1,0
нейтрофилы, %
Лимфоциты, % 65,0±5,0 84,0±6,0* 59,0±5,0 65,0±6,0
Моноциты, % 2,0±1,0 3,0±1,0 4,0±1,0 4,0±1,0
Метарубрициты, % 0 0 0 0
Ретикулоциты, % 0 0 0 0
* Различия с контролем достоверны с точностью P<0,05.
*** Различия с контролем достоверны с точностью Р<0,001, в сравнении с контрольной группой.
Таблица 2 - Биохимические показатели крови белых крыс на фоне экспериментальной жировой дистрофии печени
_(п=6)
Показатель Группа 1 Группа 2 Группа 3 Группа 4
Активность аспартатрансферазы, Ед/л 180,8±18,0 353,0±38,4*** 256,0±17,9*** 207,0±19,5*
Активность аланинтрансферазы, Ед/л 132,0±15,8 222,0±10,8*** 178,0±17,0*** 144,0±9,9
Щелочная фосфатаза, Ед/л 323,0±43,7 988,0±146,5*** 357,0±52,0 356,0±34,8
* Различия с контролем достоверны с точностью Р<0,05, в сравнении с контрольной группой. *** Различия с контролем достоверны с точностью Р<0,001, в сравнении с контрольной группой.
Показатель аспартатаминотрансферазы во второй группе был выше контрольного на 96,0 % (P<0,001), в группе с лечением биодобавкой показатель аспартатаминотрансферазы был выше на 15,0 % (P<0,05), в то время как в группе лечения «Карсилом» наблюдалось повышение на 42,0 % (P<0,001).
Заключение. Проведенная работа позволила сделать следующие выводы.
Введение 40 % этилового спирта белым крысам в дозе 10 мл на кг перорально вызывает системную реакцию организма в виде значительного повышения уровня лейкоцитов. Все печеночные ферменты были увеличены по сравнению с группой контроля. Также во всех группах, получающих затравку, была отмечена
гемоконцетрация, что говорит о дегидратации организма.
В группе животных без лечения, наблюдалось стойкое повышение уровня печеночных ферментов сыворотки крови. Печеночные ферменты в группе, получавшей комплексную биодобавку, были несколько ниже, чем в группе, получавшей препарат «Карсил». Эти данные свидетельствуют о менее выраженном патологическом процессе у животных, получающих многокомпонентный препарат.
Гематологические исследования показали, что уровень лейкоцитов в группе с биодобавкой был значительно ниже, чем в остальных группах. Это признак менее выраженного воспалительного процесса.
Исходя из полученных данных, можно сделать следующее заключение - многокомпонентная добавка статистически значимо эффективнее препарата «Карсил». Данного эффекта удалось добиться благодаря поликомпонентному составу средства, из-за чего эффекты на метаболизм гепатоцитов более многогранны. Ведь действующие вещества био-
добавки способны оказывать антиоксидантный и мембранстабилизирующий эффекты на гепа-тоциты, а также улучшать обменные вещества в клетках печени. Кроме того, особый состав препарата позволяет снизить количество токсинов, поступающих из желудочно-кишечного тракта и нормализовать просветную микрофлору кишечника.
Список источников
1. ГОСТ 34100.1 -2017/ISO/IEC Guide 98-1:2009. Неопределенность измерения. Введение в руководства по выражению неопределенности измерения. - М. : Стандартинформ, 2018. - 28 с.
2. Баскова, Е. Ю. Применение энтеросорбентов на основе нанотехнологий для борьбы с микотоксикозами животных / Е. Ю. Баскова // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана. - 2008. - Т. 192. - С. 234.
3. Бочкарева, А. В. Изменение активности алкогольдегидрогеназы клеток печени крыс при действии этанола и гепарина / А. В Бочкарева, Ю. В. Зимин // Вестник Нижегородского университета им. Н. И. Лобачевского. - 2010. - № 2 - С. 490-493.
4. Василевская, А. С. Гепатопротекторы в устранении алкогольных повреждений печени / А. С. Василевская, М. А. Бутов, Д. Г. Узбекова, М. В. Мнихович, А. А. Никифоров // Экспериментальная гастроэнтерология. - 2013. - № 12. - С. 22-28.
5. Гребенюк, А. Н. Эффективность гепатопротектора с пептидным компонентом моликсана при острой крайне тяжелой интоксикации этанолом / А. Н. Гребенюк, В. Л. Рейнюк, А. Е. Халютин, А. М. Маркосян, А. А. Ховпачев // Токсикологический вестник. - 2014. - № 4 - С. 18- 24.
6. Куевда, Е. Н. Этиология, диагностика и лечение гепатоза собак / Е. Н. Куевда, Н. Н. Куевда // Известия сельскохозяйственной науки Тавриды. - 2015. - С. 93-101.
7. Кузьминова, Е. В. Гепатопротекторы на основе фосфолипидов и их применение в ветеринарии / Е. В. Кузьминова, М. П. Семененко, В. А. Соболев // Сборник «Эколого-биологические проблемы использование природных ресурсов в сельском хозяйстве». Екатеринбург: Уральское издательство, 2017. - С. 243-246.
8. Мишина, Н. Н. Профилактическая эффективность лигнин- и полисахаридсодержащих энтеросорбентов при сочетанном Т-2 токсикозе : автореф. дис. ... канд. биол. наук: 16.00.04 // Наиля Наримановна Мишина. - Казань, 2009. - 24 с.
9. Папуниди, К. Х. Применение энтеросорбентов в животноводстве / К. Х. Папуниди, М. Я. Тремасов, А. А. Иванов // Ветеринарный врач. - 2010. - № 5. - С. 20-22.
10. Полянских, Л. С. Экспериментальная модель острого жирового гепатоза на беременных крысах / Л. С. Полянских, Н. Н. Балашова // Журнал акушерства и женских болезней. - 2016. - № 3. -
C. 83-84.
11. Танасева, С. А. Афлатоксикоз свиней: эффективная схема лечения с применением гепатопротектора, энтеросорбента и пробиотика / С. А. Танасева, Л. Е. Матросова, Э. И. Семенов, М. Я. Тремасова // Свиноводство. - 2016. - № 4. - С. 51-53.
12. Тарасова, Е. Ю. Изучение сорбционной активности потенциальных средств профилактики микотоксикозов в отношении афлатоксинов / Е. Ю. Тарасова, Э. И. Семенов, Л. Е. Матросова, Н. Н. Мишина, А. З. Мухарлямова // Ветеринарный врач. - 2020. - № 2. - С. 51-58.
13. Тяпкина, Е. В. Рациональное использование лекарственных препаратов в ветеринарии / Л. А. Хахов, М. П. Семененко. - Краснодар : Краснодарский НИВИ, 2014. - 57 с.
14. Халютин Д. А. Влияние пептидных препаратов на биохимические показатели сыворотки крови, головного мозга и печени крыс при остром тяжелом отравлении этиловым спиртом / Д. А. Халютин, Р. А. Тарумов, А. А. Ховпачев, В. Л. Рйнюк, А. Е. Антушевич, А. Н. Гребенюк // Токсикологический вестник. - 2016. - № 4. - С. 28-35.
15. Matrosova, L. Zeolite, hepatoprotector and probiotic for aflatoxicosis in pigs international / L. Matrosova, S. Tanaseva, E. Tarasova, N. Mishina, O. Ermolaeva, A. Valiev, R. Potemkina, Z. Sagdeeva,
D. Sagdeev, A. Tremasova, M. Erohondina, E. Semenov // International Jornal of Mechanikal and Production Engineering Research and Development. - 2020. - Vol. 10. - P. 7053-7060.
16. Warner, E. Rodent models of alcoholic liver disease: Of mice and men / E. Warner, L. Schrum, C. Schmidt, I. McKillop // Alcohol. - 2012. - Vol. 46 (8). - P. 715-725.
References
1. GOST 34100.1-2017/IS0/IEC Guide 98-1:2009. Measurement uncertainty. An introduction to guides on the expression of measurement uncertainty. - M. : Standartinform, 2018. - 28 p.
2. Baskova, E. Yu. The use of enterosorbents based on nanotechnologies to combat animal mycotoxicoses / E. Yu. Baskova // Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine. N.E. Bauman. - 2008. -Vol. 192. - P. 234.
3. Bochkareva, A. V. Changes in the activity of alcohol dehydrogenase in rat liver cells under the influence of ethanol and heparin / A. V. Bochkareva, Yu. V. Zimin // Bulletin of the Nizhny Novgorod University. N. I. Lobachevsky. - 2010. - No. 2 - P. 490-493.
4. Vasilevskaya, A. S. Hepatoprotectors in the elimination of alcoholic liver damage / A. S. Vasilevskaya, M. A. Butov, D. G. Uzbekova, M. V. Mnikhovich, A. A. Nikiforov // Experimental gastroenterology. - 2013. - No. 12. - P. 22-28.
5. Grebenyuk, A. N. Efficiency of a hepatoprotector with a peptide component of molixan in acute extremely severe ethanol intoxication / A. N. Grebenyuk, V. L. Reinyuk, A. E. Khalyutin, A. M. Markosyan, A. A. Khovpachev // Toxicological Bulletin. - 2014. - No. 4 - P. 18-24.
6. Kuevda, E. N. Etiology, diagnosis and treatment of dog hepatosis / E. N. Kuevda, N. N. Kuevda // News of agricultural science of Taurida. - 2015. - P. 93-101.
7. Kuzminova E. V. Hepatoprotectors based on phospholipids and their use in veterinary medicine / E. V. Kuzminova, M. P. Semenenko, V. A. Sobolev // Collection "Ecological and biological problems of the use of natural resources in agriculture". - 2017. - P. 243-246.
8. Mishina, N. N. Preventive efficacy of lignin- and polysaccharide-containing enterosorbents in combined T-2 toxicosis / Abstract of the thesis. dis. cand. biol. Sciences: 16.00.04 / Nailya Narimanovna Mishina.
- Kazan, 2009. - 24 p.
9. Papunidi, K. Kh. The use of enterosorbents in animal husbandry / K. Kh. Papunidi, M. Ya. Tremasov, A. A. Ivanov // The Veterinarian. - 2010. - No. 5. - P. 20-22.
10. Polyanskikh L. S. Experimental model of acute fatty hepatosis in pregnant rats / L. S. Polyanskikh, N. N. Balashova // Journal of Obstetrics and Women's Diseases. - 2016. - P. 83-84.
11. Tanaseva, S. A. Swine aflatoxicosis: an effective treatment regimen using a hepatoprotector, enterosorbent and probiotic / S. A. Tanaseva, L. E. Matrosova, E. I. Semenov, M. Ya. Tremasova // Pig breeding. - 2016. - No. 4. - P. 51-53.
12. Tarasova, E. Yu. Study of the sorption activity of potential means of preventing mycotoxicoses in relation to aflatoxins / E. Yu. Tarasova, E. I. Semenov, L. E. Matrosova, N. N. Mishina, A. Z. Mukharlyamova // Veterinary doctor. - 2020. - No. 2. - P. 51-58.
13. Tyapkina, E. V. Rational use of drugs in veterinary medicine / L. A. Khakhov, M. P. Semenenko. -Krasnodar, Krasnodar NIVI, 2014. - 57 р.
14. Khalyutin, D. A. Influence of peptide preparations on biochemical parameters of blood serum, brain and liver of rats in acute severe poisoning with ethyl alcohol / D. A. Khalyutin, R. A. Tarumov, A. A. Khovpachev, V. L. Reynuk, A. E. Antushevich, A. N. Grebenyuk // Toxicological Bulletin. - 2016. - No. 4.
- Р. 28-35.
15. Matrosova, L. Zeolite, hepatoprotector and probiotic for aflatoxicosis in pigs international / L. Matrosova, S. Tanaseva, E. Tarasova, N. Mishina, O. Ermolaeva, A. Valiev, R. Potemkina, Z. Sagdeeva, D Sagdeev, A. Tremasova, M. Erohondina, E. Semenov // International Journal of Mechanikal and Production Engineering Research and Development. - 2020. - Vol. 10. - P. 7053-7060.
16. Warner, E. Rodent models of alcoholic liver disease: Of mice and men / E. Warner, L. Schrum, C. Schmidt, I. McKillop // Alcohol. - 2012. - Vol. 46(8). - P. 715-725.
Вклад авторов:
Домбровский В О. - написание исходного текста; разработка научных программ и их реализация; итоговые выводы. Contribution of the authors:
Vladislav O. Dombrovsky - writing the original text; development of scientific programs and their implementation; final conclusions.
Статья поступила в редакцию 17.05.2022 г.; одобрена после рецензирования 21.04.2022 г.; принята к публикации 8.06.2022 г.
The article was submitted 17.05.2022 г.; approved after reviewing 21.04.2022 г.; accepted for publication 8.06.2022 г. .
© Домбровский В. О. 2022
