CC BY
26
УДК: 616-006:616-002.3:616-084
ББК: 55.6
П-58
Попова Наталья Николаевна, заведующая отделением анестезиологии и реанимации Адыгейского Республиканского клинического онкологического диспансера, г. Майкоп, тел. раб. 88772540659, тел. сот. 89284703975, e-mail:winsdof@list.ru.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИНТЕРЛЕЙКИНА-2 ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ПРОФИЛАКТИКИ РАННИХ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ В ОНКОЛОГИЧЕСКОЙ КОЛОПРОКТОЛОГИИ
(рецензирована)
В данной работе исследованы иммунологические параметры, цитокиновый профиль, данные ПОЛ и антиоксидантной защиты у онкологических колопроктологических больных. Целью исследования явилось изучение эффективности интерлейкина-2 при проведении профилактики гнойно-воспалительных осложнений у больных, прооперированных по поводу опухолевого поражения толстого кишечника. Разработанный вариант профилактики и лечения позволил восстановить иммунный статус, ликвидировать дисбаланс в системе свободно-радикального окисления липидов и антиоксидантного статуса. Это позволило снизить количество послеоперационных осложнений в 2,08 раза, а летальность - в 2,24 раза по сравнению с группой, где лечение проводили традиционным методом.
Ключевые слова: Ронколейкин, гнойно-воспалительные осложнения, иммунитет, цитокины.
Popova Natalia Nicholaevna, head of the department of anesthesiology and resuscitation of the Adygeyan National Clinical Oncology Center, Maikop, tel. office. 88772540659, Tel. com. 89284703975, e-mail: winsdof@list.ru.
EFFICACY OF INTERLEUKIN-2 IN THE EARLY PREVENTION OF PURULENT-INFLAMMATORY COMPLICATIONS IN ONCOLOGICAL COLOPROCTOLOGY
In this paper immunological parameters, cytokine profile, LPO and antioxidant defense in cancer colorectal patients have been investigated. Aim of the research has been to study the effectiveness of interleukin-2 during prevention of purulent-inflammatory complications in patients operated for colon tumor. The developed version of the prevention and treatment would restore the immune status, eliminate the imbalance in the system of free-radical oxidation of lipids and antioxidant status. This has reduced the number of postoperative complications in 2.08 times, while the fatality rate - at 2.24 times compared with the group where treatment was carried out traditionally.
Keywords: Roncoleukin, purulent-inflammatory complications, immunity, cytokines.
В 2009 году исполняется 13 лет широкого клинического применения отечественного биотехнологического иммунокорректора Ронколейкинак -рекомбинатного интерлейкина-2 человека. За эти годы был накоплен богатый практический и научный опыт применения Ронколейкина в нашей стране и за рубежом[1]. Ронколейкинк осуществляет регуляцию и взаимодействие механизмов врожденного и приобретенного иммунитета, влияя как на клеточное, так и на гуморальные звено; обладает противоопухолевым и противоинфекционным действием, активирует процессы репарации и регенерации тканей [2].
В настоящее время изучены различные схемы введения препарата и дозовые режимы: возможно внутривенное капельное длительное введение, подкожное,
ингаляционное, пероральное, внутриполостное, местное и эндолимфатическое введение. Решение о применении тех или иных способов введения принимается в каждом отдельном случае. В литературе имеются упоминание о внутривенном введении Ронколейкина , инкубированного на аутокрови [3]. В нашей работе впервые был применен метод внутривенного введения Ронколейкина^ инкубированного на аутоплазме.
Цель и задачи исследования
Изучить клиническую эффективность применения экстракорпоральной иммунопрофилактики Ронколейкиномк в предупреждении гнойно-септических осложнений у онкоколопроктологических больных, изучив состояние иммунного статуса и цитокинового профиля у данного контингента пациентов, а также частоту развития гнойно-септических осложнений в раннем послеоперационном периоде.
Материал и методы исследования В проспективное контролируемое исследование включены 128 больных колоректальным раком, находящихся на лечении в Адыгейском республиканском клиническом онкологическом диспансере в период с 2005 по 2009 годы.
В исследование включены пациенты в возрасте от 25 лет до 85 лет (средний возраст 65,93±0,699), прооперированные по поводу злокачественных новообразований с гистологически верифицированным диагнозом аденокарциномы толстого кишечника. Оперативные вмешательства были выполнены в объеме: брюшно-промежностная
экстирпация прямой кишки - 17, резекция сигмовидной кишки - 12, право- и левосторонняя гемиколэктомия - 20, обструктивная резекция типа Гартмана - 16, резекция прямой кишки с низведением сигмовидной кишки - 8, восстановление непрерывности толстого кишечника - 18, сигмо- колостомия -21, другие - 16.
В работе обобщены и представлены результаты периоперационных исследований больных, получивших иммунопрофилактику Ронколейкином , включающих данные, полученные до оперативных вмешательств и в раннем послеоперационном периоде на седьмые сутки: Т- (CD3, CD4, CD8), В- лимфоциты (CD 72), и Ig A, IgM, IgG; цитокиновый профиль: провоспалительные IL-1 , IL-4, IL-6, IL-1P, TNF-a и противовоспалительные IL-8, IL-1ra цитокины сыворотки крови. Забор крови осуществляли в утренние часы, натощак.
В исследовании использованы современные иммунологические и биохимические методы: сендвич-ИФА (ELISA) с использованием коммерческих тест-систем фирмы «R D Diagnostics» (США), иммунофенотипирования популяции и субпопуляции лимфоцитов с помощью моноклональных антител Dynabcabs CD3, Dynabcabs CD4, Dynabcabs CD8, радиальной иммунодиффузии по Манчини (РИД), калориметрические методы.
Результаты и их обсуждение.
По принципу подхода к профилактике гнойно-воспалительных осложнений и их лечению все обследованные больные были разделены на две группы:
I контрольную группу - составили 58 больных, из них 32 мужчины и 26 женщин. У лиц данной группы профилактика гнойно-воспалительных осложнений проводилась в соответствии с общепринятыми стандартами, предусматривающими проведение антибиотикопрофилактики в периоперационном периоде.
II исследуемую группу составили 62 больных, 32 мужчины и 30 женщин. У лиц данной группы в качестве профилактики гнойно-воспалительных осложнений использовали экстракорпорально инкубированный на аутоплазме рекомбинантный интерлейкин-2 человека (Ронколейкинк), введенный накануне оперативного вмешательства, однократно.
Осложненное течение раннего послеоперационного периода отмечено у 31 больного (I группе) и в 15 случаях (II группа). Среди осложнений чаще всего встречались: глубокие и поверхностные раневые инфекции - 8 (4 во II группе), пневмонии - 3 (1), перитонит - 10 (6), инфекции мочевых путей - 7 (3), аноректальные воспалительные процессы - 3 (1). Умерло в I группе пятеро, во II группе - двое.
Анализ динамики содержания сывороточных про- и противовоспалительных цитокинов ГЬ-4, ГЬ-8, TNF-a, уровня CD4, концентрации Ig G, Ig M не позволил выявить существенных различий в зависимости от примененного вида профилактики гнойновоспалительных осложнений. Вместе с тем, в предоперационном периоде у онкопроктологических больных отмечалось повышение CD8, TNF-a, ЦИК. При поступлении у больных колоректальным раком отмечалось снижение, относительно показателей здоровых доноров, абсолютного количества В-лимфоцитов (CD72), ИРИ, фагоцитоза, ^ M, ГЬ-1р, ЮТ-у, уровня рецепторного антагониста П-1 га, что во многом предопределяет изначально предрасположенность онкологических больных к развитию гнойно-воспалительных осложнений [4].
Проведен анализ иммунограмм, данных цитокинового профиля у онкопроктологических больных, полученных в ходе лечения при проведении иммунопрофилактики интерлейкином-2 (Ронколейкином^ экстракорпорально
инкубированным на аутоплазме. Обнаружено, что у больных в процессе лечения прогрессивно повышается уровень субпопуляции ^хелперов CD3 и к 7-ым суткам на 38±6,2 ф<0,05), уровень субпопуляции Т-супрессоров СD8 снижается достоверно к 7-ым суткам (416,78±20,01). При применении Ронколейкинак~ отмечается раннее значительное снижение (к 7-м суткам) (р^0,05) уровня ЦИК (табл.1). При анализе полученных данных обращает на себя внимание, что во второй группе имеется достоверное повышение уровня лимфоцитов ф<0,05) к 7-ым суткам. Уровень ГЬ-1 га, маркера острого воспалительного ответа, ниже во второй группе на 30±2,28 усл.ед. (р<0,05), следовательно, при применении Ронколейкина снижается активность противовоспалительных процессов.
Для II группы характерны следующие изменения ПОЛ и антиоксидантной защиты: снижение уровня маркера эндогенной интоксикации МДА на 2,32±0,435; повышение уровня СОД (на 23±2,36) и уровня ГПД ф>0,1); уровень ОАА плазмы крови достоверно повышается на 9% к 7 дню и составляет 1,27±0,188 ммоль/л (табл.3). При сравнении показателей ПОЛ и ОАА в процессе лечения выявлено, что уровень МДА достоверно ниже при применении Ронколейкина^ а показатели ГПД достоверно выше (р<0,05) по сравнению с показателями в первой группе. Общая антиоксидантная активность (ОАА) плазмы крови, прогрессивно снижается в процессе лечения, но остается достоверно более низкой в контрольной группе.
Выводы
1. Разработанный вариант профилактики гнойно-воспалительных осложнений у больных колоректальным раком позволил восстановить иммунный статус, а также ликвидировать дисбаланс в системе свободно-радикального окисления липидов и антиоксидантного статуса, что позволило снизить летальность во второй группе с 8,6% до 3,22%, т.е. в 2,67 раза по сравнению с группой, где лечение проводили традиционным методом. Количество послеоперационных осложнений при применении Ронколейкина сократилось в 2,21 раза (с 53,4% до 24,1%).
2. Выбор объема комплексной интенсивной терапии при оперативном лечении колоректального рака должен сочетать традиционное лечение с проведением иммунокоррекции Ронколейкином^ обеспечивающим нормализацию клеточноопосредованного и гуморального иммунитета, цитокинового профиля, показателей ПОЛ и антиоксидантной защиты.
3. Традиционный метод проведения интенсивной терапии не позволяет у больных избежать значительного количества послеоперационных инфекционно-воспалительных осложнений - 53.4%, что приводит к высокой послеоперационной летальности - 8,6%.
Таблица 1.
Показатели иммунитета у больных колоректальным раком до и после введения ___________________________Ронколейкинак~ (М±т)__________________________________
Показатель До лечения N После лечения
Лимфоциты, клеток в 1 мл 4,6±0,81 п=26 4,5±0,296 p<0,05
Моноциты, клеток в 1 мл 4,5±0,2504 п II 0 4,58±0,305 p>0,05
CD3, клеток в 1 мкл 1229±24,30 п=28 1250±38,41 p>0,05
CD4, клеток в 1 мкл 440,32±10,34 п=28 426,3±9,21 p>0,05
CD8, клеток в 1 мкл 391,97±12,59* п=28 416,78±20,01 p>0,05
В-лимфоциты (CD 72+),в 1мкл 158,75±5,334* п=30 144,89±1,369 p<0,05
ИРИ CD4/CD8 1,23±0,046* 6 II й 1,14±0,034 P<0,05
IgA, мг% 115,12±42,117 п=14 109,70±27,38 p>0,05
^ ^ мг% 1252,55±23,27 п=28 1260,12±0,89 p>0,05
Ig M, мг% 84,45+2,08* п=30 79,9±0,574* p>0,05
Фагоцитоз, % 48,76±0,759* п=28 56,94±3,383** p<0,05
ЦИК, % 114,32±1,5* п=30 103,97±15,45** p<0,05
P - достоверность различий между показателями уровня цитокинов до и после лечения
Таблица 2.
Показатели цитокинового профиля у больных колоректальным раком до и после введения _________________________________Ронколейкинак~ (М±т)__________________________________
Показатель До лечения N После лечения
IL-4, пг/мл 2,56±0,361 п=26 2,22±0,114 р<0,05
ГЬ-6, пг/мл 26,27±5,123 п=30 26,47±1,948 р>0,05
IL-8, пг/мл 25,95±0,25 п=28 26,47±2,498 р>0,05
а-ФНО, пг/мл 3,66±0,8716 п=28 3,27±1,073 р<0,05
ГЬ-1р, пг/мл 13,63±0,3179 п=28 13,29±2,49 р<0,05
IL-1 РА, пг/мл 135,7±5,216 п II 0 167,65±5,88 р<0,05
а- ГОТ, пг/мл 3,72±0,4422 п=46 3,96±0,93 р>0,05
y-INF, пг/мл 22,6±0,1303 п=14 23,45±2,90 р>0,05
антитела к а-Г№, нг/мл 12,74±0,2285 п=28 13,2±0,1 р>0,05
P - достоверность различий между показателями уровня цитокинов до и после лечения
Таблица 3.
Показатели ПОЛ и антиоксидантной защиты при применении Ронколейкинак~ у больных _____________________________колоректальным раком (М±т)________________________________
Показатель До лечения N После лечения
МДА (мкмоль/мл) 2,86±0,406 п=26 2,249±0,469 р<0,05
СОД (ЕД/г НЬ) 1057,82 ±10,06 п II 0 1084,3±28,98 р<0,05
ГПД (ЕД/г НЬ) 29,78±2,63 п=28 32,69±4,686 р>0,05
ОААКП (ммоль/л) 1,175±0,22 п=28 1,27±0,188 р>0,05
P - достоверность различий между показателями уровня цитокинов до и после лечения.
Литература:
1.Останин А.А., Черных Е.Р. Цитокинотерапия ронколейкином в комплексном лечении и профилактике хирургических инфекций // Пособие для врачей. СПб.: Альтер Эго, 2009. С. 25-27.
2. Nitsche D. Vermendung von interleukin-2 bei ausgebehnten bacteriellen Infection // Patent № 3910011.1, Germany, 1989.
3. Евфорицкий С.Ю. Комплексная интенсивная терапия в патогенетическом лечении больных с острой непроходимостью кишечника: автореф. дис. ... канд. мед. наук. Ростов н/Д, 2004. С. 6-10.
4. Тугуз А.Р. Иммунопатогенез ранних послеоперационных осложнений у онкологических больных: автореф. дис. ... д-ра биол. наук. М., 2002. С. 6-12.
