CC BY
18
УДК: 619:614.48:616.98:579.873.2
KynpieHKO Л.С., acnipaHT, (kuprienko_1981@mail.ru), © Сумсъкий нацюналъний аграрнийутеерсите, npoeidrnü лжар еетмедицини -мжробюлог, Сумсъкарегюналъна державна лаборатор1я
ветеринарног медицины Зон Г.А., к.вет.н., професор, завщувач кафедри в1русологи, патанатомп i хвороб птищ, Сумсъкий нацюналъний аграрнийутеерситет Стеценко Н.В., завщувач вщдшом ВСЕ, Сумсъкарегюналъна державна лаборатор1я ветеринарногмедицини
Безвершенко О.С., лкар ветмедицини, Сумсъкарегюналъна державналаборатор1я ветеринарногмедицини
ЕФЕКТИВШСТЬ ЗАСТОСУВАННЯ ЕЛЕКТРОХ1М1ЧНОАКТИВНИХ РОЗЧИН1В НАТР1Ю ХЛОРИДУ ЗА УМОВ КОНТАМ1НАЦН М'ЯСА ПТИЦ1 CLOSTRIDIUM PERFRINGENS
У cmammi наведет резулътати дослгдженъ щодо ефективност1 знезараження продуктгв птах1вництва eid Clostridium perfringens на ocnoei застосування електрох1м1чно активних розчитв гтохлориту натрт (ЕХА ГХН) та анолту. Визначено бактерицидт концентрацИ розчину ЕХА ГХН та анолту щодо С. perfringens. Встановлено, що при обробщ продукцп розчини ЕХА ГХН з концентращею активного хлору 150 мг/л при pH 5,0, а також розчин анолту з вмютом активного хлору - 175 мг/л прирН 7,0 ipH 2,5 чинятъ бактерицидну дт на Clostridium perfringens та виявилися найбыъш ефективними, еколог1чно безпечними та економгчно дощлъними методами знезараженням'яса пищ.
Ключов1 слова: анолт, електрох1м1чноактивний розчин гтохлориту натрт, Clostridium perfringens.
Вступ. Застосування ефективних i еколопчно безпечних дезшфектант1в в птах1вництв1 та на пщприемствах переробки птах1вничо! продукци е запорукою отримання яккного та безпечного продукту. Результата мошторингових дослщжень та анал1з л1тературних джерел свщчить про те, що на даний час на птахопщприемствах Украши гостро сто!ть питания пошуку метод1в та препарат1в для дезшфекци, що вщповщали б необхщним вимогам щодо якост1 та безпечност1, простои, зручност1 та економ1чнш доцшьност1 у використанш. Тому пошук нових методик та засоб1в дезшфекци в птах1внищта е актуальною проблемою сьогодення [4, 5]
В останш роки науковщ повернулися до поглибленого вивчення властивостей ЕХА ГХН та анолту, як еколопчно безпечних препарата з вираженими дезшф1куючими властивостями. 1снують науков1 публжаци щодо бактерицидно! дп розчишв ЕХА ГХН та анол1ту на кишкову паличку,
© KynpieHKO Л.С., Зон Г.А., Стеценко Н.В., Безвершенко О.С., 2013
98
стафшококи, сальмонели. Але достаменно не вивчено вплив даних препараив на rnmi види умовно патогенно! мжрофлори, наприклад, на С. perfringens, яка може спричинити токсикошфекцш у людей при споживанш продукцп птах1вництва [3].
Метою дослщжень було дослщження ефективност! застосування електрох1м1чно активних розчишв натрш хлориду (ЕХА ГХН та анол1ту) за умов контамшаци м'яса птиц! С. perfringens.
Матер1али i методи. У дослвд використовували розчини ЕХА ГХН, виготовлених на anapaTi для непрямо! електрох1м1чно! детоксикацп оргашзму модел! ЭДО - 3М та розчини анол1ту , виготовленого на установщ СТЕЛ-МЕДИКОМ 10Н-120-01; тест-культури С. perfringens, зразки м'яса птищ. Було використано загальноприйнят! методи вирощування тест-культур зг1дно Настанови №1514/3, затв.11.01.2003р [5], м!кроб1олог1чних досл1джень харчових продукт!в за ГОСТом 10444.9-88 [1], ГОСТом 7702.2.6-93 [2], ГОСТом 29185-97 [3].
Бактерюстатичш властивост1 розчин1в ЕХА ГХН та анол1ту р1зно! концентраци та кислотност1 визначали in vitro методом сершних розведень у рщкому поживному середовищ1 (МППБ). Як тест-культури використовували польов1 та музейн1 штами С. perfringens, а бактер1альну суспензш розводили ф!з1олог1чним розчином до отримання концентрац1! 9*108 кл1тин/мл. Концентрац1ю бактер1альних кл1тин визначали за Мак-Фарлендом за допомогою денситометра DEN - 1. Шсля внесения тест-культур у поживш середовища сер1йних розведень досл1джуваних розчишв ЕХА ГХН i анол1ту у сшввщношенш 1:9 проводили ¿нкубування в термостат! за температури 37,0 ± 10С протягом 24 год в анаеробних умовах. Результати досл!джень реестрували за фактом в!дсутност! росту м!крооргашзм!в у проб!рках.
За допомогою люмшесцентно! MiKpocKoni! бактер!альних кл!тин п!дтверджували ефектившсть бактерицидного впливу ЕХА ГХН та анол!ту на С. perfringens. Для цього суспенз!! С. perfringens у концентраци 9*108 кл!тин/мл вносили у розчини ЕХА ГХН та анол!ту. Стввщношення бактер!ально! суспенз!! до ЕХА ГХН, анол!ту доводили до 1:9. Експозицш проводили протягом 15 хв. Оброблен! електрох!м!чними розчинами натр!ю хлориду бактер!альш суспенз!! фарбували флюорохромом - 0,1% розчином акридинового оранжевого, готували препарата «роздавлена крапля». Бактерицидну дш ЕХА ГХН та анол!ту оцшювали, враховуючи те, що п!д час люмшесцентно! мжроскопи мертв! кл!тини набували червоного св!чення, а жив! - зеленого.
Дослщження дезшфжуючо! д!! розчишв ЕХА ГХН та анол!ту проводили на зразках м'яса птиц!, штучно контамшованих тест-культурами польових та музейних штам!в С. perfringens. Контрольн! поави на вм!ст С. perfringens проводили на середовище В!льсон-Блера i середовище KiTT-Тароцци. Контам!нован! зразки занурювали у розчини ЕХА ГХН з вмктом активного хлору (37-300) мг/л з рН 9,0 i 5,0 та анол!ту з вм!стом активного хлору (43-350) мг/л з рН 7,0 i 2,5 на 5 та 15 хв з подальшим промиванням !х водопров!дною
99
водою. Пот!м зразки дослщжували на забруднешсть С. perfringens шляхом nocißy на середовище Вшьсон-Блера i KiTT-Тароцци з шкубащею в термостат! при 37,0 ± 10С протягом 24 год в анаеробних умовах. Результати дослщжень реестрували за фактом вщсутност1 росту мшрооргашзм1в на середовищах.
Результати дослщження. Пщ час дослщження бактерюстатично! дп розчишв ЕХА ГХН та анол1ту на С. perfringens було встановлено, що розчини ЕХА ГХН залежно вщ вмюту активного хлору та pH проявляли pi3Hi властивост1 по вщношенню до росту сульф1тредукуючих клостридш (на приклад! С. perfringens).
Так було виявлено, що на поживних середовищах i3 сершними розведеннями розчишв ЕХА ГХН з концентращею активного хлору 300 мг/л при pH 9,0 та 5,0 picT С. perfringens повшстю припинявся. При зниженш концентраци активного хлору до 150 мг/л розчин ЕХА ГХН проявляв бактерюстатичну актившсть лише при pH 5,0, тод1 як при pH 9,0 вже спостер1гався picT сульф1тредукуючих клостридш. Розчини з концентращею активного хлору 75 мг/л не залежно вщ кислотност1 середовища зовс1м не проявляли бактер1остатично1 дп (табл. 1).
Було також дослщжено вплив розчин1в анол1ту на picT клострид1й. Встановлено, що анол1т з концентрац1ею активного хлору 350 та 175 мг/л при pH середовища 7,0 та 2,5 проявляв бактерюстатичний ефект на С. perfringens. У розведеннях анол1ту з концентрац1ею 87 та 43 мг/л при pH 7.0 та 2,5 на середовищах спостер1гався виражений picT колон1й мжрооргашзм1в, характерних для клострид1й ( табл. 2).
Пщ час люм1несцентно1 MiKpocKoniï бактер1альних суспенз1й, оброблених розведеннями ЕХА ГХН та анол1ту, що проявляли бактерюстатичш властивост1, спостер1гали червоне св1чення мертвих кл1тин С. perfringens, що свщчить про бактерицидн1 властивост1 даних розчин1в.
Наступним етапом досл1джень було визначення дез1нф1куючо1 fliï ЕХА ГХН та анол1ту р1зних концентрац1й та кислотносп при обробц1 м'яса птищ, контам1нованого сульф1тредукуючими клострид1ями. Так виявилося, що п1сля експозиц^ протягом 5 та 15 хв зразюв м'яса птищ в розчинах ЕХА ГХН з BMicTOM активного хлору 300 мг/л при pH 9,0 та 5,0 picT клострид1й на поживних середовищах не спостер1гався, тобто обробка розчинами ЕХА ГХН таких концентрацш та pH повн1стю зв1льняла проби продукцй' в1д С. perfringens Розчини з BMicTOM активного хлору 150 мг/л проявляли бактерюстатичну дш лише з pH 5,0 при експозицп в1д 5 до 15 хв, тод1 як при pH 9,0 нав1ть при подовжен1й витримц1 у розчиш до 15 хв - такого ефекту не спостер1галось. Концентращя активного хлору в розчинах 75 мг/л при pH 9,0 та 5,0 незалежно в1д часу дп не впливала на picT С. perfringens (табл. 3).
При обробщ зразюв м'яса птищ розчином ЕХА ГХН pH 9,0 з bmîctom активного хлору 150мг/л протягом 15хв спостер1гали зменшення КУО С. perfringens у поавах на чашках i3 середовищем В1льсон-Блера з 120 до 24, що свщчить про зниження р1вня контам1нацй' на 80%.
100
Пщ час вивчення деконтамшуючих властивостей анол1ту було встановлено, що розчини i3 концентращею активного хлору 175 та 350 мг/л при pH 7,0 та 2,5 з часом експозици зразюв вщ 5 до 15 хв проявили бактерюстатичний ефект до С. perfringens. Нижч1 концентраци розчишв при анолопчих показниках pH та часом витримки не впливали на picT колонш С. perfringens (табл 4).
Таблиця 1
Бактершстатична актившсть розчишв ЕХА ГХН вщносно С. perfringens в
Bmîct активного хлору, мг/л pH 9,0 pH 5,0
300 - -
150 + -
75 + +
37 + +
Примгтка: «+»- picm культур; «-»- eidcymnicmbpocmy культур
Таблиця 2
Бактершстатична актившсть розчишв анолггу вщносно С. perfringens в
Bmîct активного хлору, мг/л pH 7,0 pH 2,5
350 - -
175 - -
87 + +
43 + +
Прим1тка: «+»- picm культур; «-»- eidcymnicmbpocmy культур.
Таблиця 3
Ефектившсть деконтамшуючо'1 дн розчишв ЕХА ГХН вщносно _С. perfringens залежно вщ вмкту активного хлору та pH_
Bmîct активного хлору, мг/л pH 9,0 pH 5,0
5хв 15хв 5хв 15хв
300 - - - -
150 + + - -
75 + + + +
Примгтка: «+»-picm культур; «-»- eidcymnicmbpocmy культур
Таблиця 4
Ефектившсть деконтамшуючоУ дн розчишв анол1ту вщносно С. perfringens
Bmîct активного хлору, мг/л pH 7,0 pH 2,5
5хв 15хв 5хв 15хв
350 - - - -
175 - - - -
87 + + + +
43 + + + +
Прим1тка: «+»- picm культур; «-»- eidcymnicmbpocmyKynbmyp
Пщ час дослщження люмшесцентною мжроскошею змив1в з поверхонь м'яса птищ, оброблених розчинами ЕХА ГХН i анол1ту виявили, що Bei
101
розчини, яю чинили бактерюстатичну дш, проявляли i бактерицидну д1ю щодо С. perfringens, як представника сульф1тредукуючих клостридш. Бактерицидна д1я проявлялася червоним св1ченням мертвих бактер1альних кл1тин.
Висновки. 1. Розчин ЕХА ГХН, виготовлений на anapaTi для непрямо! електрох1м1чно1 детоксикаци оргашзму модел1 ЭДО -3М та анол1т, виготовлений на установщ СТЕЛ-МЕДИКОМ 10Н-120-01 доцшьно використовувати для деконтамшаци продукт1в птах1вництва вщ С. perfringens.
2. Розчини ЕХА ГХН i3 вмктом активного хлору 300 мг/л при pH 5,0 та 9,0, а також 150 мг/л при pH 5,0; розчини анол1ту з концентращею активного хлору 175-350 мг/л при pH 2,5 та 7,0 володшть вираженою бактерюстатичними та бактерицидними властивостями щодо С. perfringens.
3. Для дезшфекци м'яса птищ доцшьно застосовувати розчини ЕХА ГХН (з концентращею 300 мг/л при pH 5,0 та 9,0 та 150 мг/л при pH 5,0) з часом експозици 5-15 хв, а також розчини анол1ту (175 -350 мг/л при pH 2,5 та 7,0 ) протягом 5-15 хвилин, яю виявилися ефективними та еколопчно безпечними методами деконтамшаци зразюв м'яса птищ вщ С. perfringens.
Л1тература
1. ГОСТ 10444.9-88. Продукты пищевые. Метод определения Clostridium perfringens.
2. ГОСТ 7702.2.6-93. Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты птичьи. Метод выявления и определения количества сульфитредуцирующих клостридий.
3. ГОСТ 29185-91. Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества сульфитредуцирующих клостридий.
4. Методика визначення бактерюстатично1 та бактерицидно! концентраци антибактер1альних препарат1в методом сершних розведень / Державний науково-контрольний шститут ветеринарних препарат1в та кормовихдобавок; редкол.: М.В. Косенко [та1н.]. - Khïb, 2003.- 8с.
5. Настанови по застосуванню набору тест-культур для бактер1олог1чного контролю якосп живильних середовищ» №1514/3, затв.11.01.2003р
6. Вербицький П.1. Сп1льн1 зусилля на сторож! якост1 й безпеки продукцй' ( прес-конференц^) / П.1. Вербицький // Ветеринарна медицина Украши - 2009. - № 3.- С. 8.
7. Коцюмбас 1.Я. Перспективи застосування г1похлорит1в у ветеринарн1й медицин!/ 1.Я. Коцюмбас, О.Б. Вел1ченко - Льв1в, -2009.-310с.
8. Семенюк B.I. М1кроб1олог1чн1 досл1дження об'ект1в довкшля, харчових продукт1в тваринного походження, корм1в / I.B. Семенюк, О.Я. 3axapiß. - Льв1в, - 2004.-54 с.
9. Сорокова В.В. Вивчення патогенних властивостей культур C. perfringens, ¡зольованих в1д курей / В.В. Сорокова, Г.А. Зон // Bîchhk Сумського НАУ. Науково-методичний журнал. Сер1я „Ветеринарна медицина".- 2002. - Вид. 7. - С. 88-90.
102
Summary
L.S. Kupriyenko, H. A. Zon, N.V. Stecenko, O.S. Bezvershenko EFFICIENCY OF USING ELECTROCHEMICALLY ACTIVE SOLUTION OF SODIUM CHLORIDE IN CONDITIONS OF CONTAMINATION OF POULTRY MEAT BY CLOSTRIDIUM PERFRINGENS
The paper presents results of research on the effectiveness of disinfection of poultry products from Clostridium perfringens on the basis of electrochemically active sodium hypochlorite (ECHA SHCL) and anolyte. It was defined bactericidal concentrations of the ECHA HHN and anolyte on C. perfringens and was found that processing solutions of ECHA SHCL with concentration of active chlorine 150 mg/ L at pH 5.0 and anolyte solution containing active chlorine - 175 mg/ L at pH 7.0 and pH 2.5 had bactericidal effect on Cl. perfringens and were the most effective, environmentally safe and remunerative methods of decontamination of poultry meat.
Рецензент - д.вет.н., професор Коцюмбас Г.1.
103
