CC BY
167
УДК 616.003.93:616.08.031.84 И.В. Гилевич*, Т.В. Федоренко, Е.А. Коломийцева, С.Б. Богданов, А.А. Семенченко, Ю.В. Иващук
достижения клеточной терапии В коМБУСТиологии
ГБУЗ «Научно-исследовательский институт - Краевая клиническая больница №1 им. проф. С.В. Очаповского» Министерства здравоохранения Краснодарского края, Краснодар, Россия ЕЗ И.В. Гилевич, ГБУЗ НИИ - ККБ №1, 350086, г. Краснодар, ул. 1 Мая, 167, e-mail: giliv@list.ru
Тяжелые ожоги, несмотря на значительный прогресс в их лечении, остаются опасным для жизни местным и общим воспалительным заболеванием, сопровождающимся серьезными осложнениями. Золотым стандартом лечебной тактики является хирургическое иссечение некротизированных участков кожи с последующей аутопластикой перфорированным трансплантатом. Но при больших и глубоких ожогах возникает дефицит кожных ресурсов, и тогда клеточные технологии могут оказаться востребованными. В настоящей работе представлено развитие клеточных технологий, приведены исторические справки и освещены современные тенденции в лечении ожогов с помощью клеточной терапии. В Научно-исследовательском институте - Краевая клиническая больница №1 им. проф. С.В. Очаповского проводится клиническое исследование по протоколу применения аутологичных фибробластов в лечении ожоговой раны, описаны результаты применения клеточной терапии двум пациентам в комплексе с разными методами аутопластики. Ключевые слова: ожог, клеточная терапия, фибробласты, кератиноциты.
I.V. Gilevich, T.V. Fedorenko, E.A. Kolomytseva, S.B. Bogdanov, A.A. Senenchenko, Y.V. Ivaschuk
cell therapy advances in combustiology
State budget institution of public health «Scientific research institution - Ochapovsky Regional clinic hospital #1», Ministry
of Public Health, Krasnodar Region
El I.V. Gilevich, SBIPH SRI-RCH #1, 350086, Krasnodar, 1st May str., 167, e-mail: giliv@list.ru
Severe burns are life-threatening condition both local and general inflammatory disease, frequently with serious complications, despite significant progress in healing.
The golden standard is a surgical incision of necrotising skin areas with further autoplasty with perforated graft. But in cases with large and deep burns we observe deficit of skin resources and cell techniques are demanded.
In the present article we discuss development of cell technologies modern tendencies in cell therapy treatment for burns. In Scientific Research Institution - Ochapovsky Regional Clinic #1 a clinical study on autologous fibroblasts application for burn wounds is being performed. We described results of cell therapy treatment with complex of various autoplasty methods performed in two patients.
Key words: Cell therapy, fibroblasts, burn, keratinocytes.
Несмотря на совершенствование хирургических подходов в лечении пострадавших от ожогов, проблема восстановления кожного покрова после глубоких и обширных ожогов остается актуальной и на сегодняшний день [1]. В качестве временного покрытия раневых поверхностей после проведения некрэктомии используют трупный аллотрансплантат, ксенотрансплан-тат, синтетические материалы, представленные широким спектром в арсенале комбустиолога [2, 3]. Однако указанные методики не могут быть использованы для восстановления целостности кожных покровов и не исключают выполнения традиционного метода закрытия ран с помощью аутопластики расщепленным
свободным кожным лоскутом. При глубоких и обширных ожогах может возникнуть дефицит ресурсов ауто-кожи. В таких случаях становится возможным и оправданным применение клеточной терапии [4, 5, 6].
Клеточная терапия - терапевтическое введение живых клеток в организм, направленное на регенерацию тканей, поддержку или восстановление функции (например, заживление ран), или модуляцию патофизиологических процессов (например, воспалительная и иммунная реакция) [4]. С 2017 г. в нашей стране введено понятие биомедицинского клеточного продукта, предназначенного для проведения клеточной терапии [7].
Развитие клеточных технологий началось еще в середине прошлого столетия. После того как в 1907 -1910 гг. Росс Гренвилл Гаррисон - американский биолог, врач, эмбриолог описал метод культивирования живых клеток в лабораторных условиях, эти методы получили значительное развитие в 40 - 50-х годах 20-го века. До середины 70-х годов прошлого века фи-бробласты были единственными клетками, которые активно культивировали и использовали в медицине, так как они сохраняют диплоидный кариотип в процессе роста in vitro, частично теряют поверхностные антигены гистосовместимости [8], их можно культивировать продолжительное время [9].
На сегодняшний день накоплен опыт по получению и использованию разных типов клеток для закрытия кожных дефектов, таких как кератиноциты, фибробласты, мезенхимальные стромальные клетки разного происхождения [3]. Однако до сих пор получение полноценной тканеинженерной кожи, которая бы заменила аутопластику перфорированным кожным лоскутом, остается нерешенной задачей в отечественной комбустиологии.
Одним из наиболее перспективных направлений клеточной терапии повреждений кожи является использование культивированных фибробластов [9]. В отличие от клеток эпителия - кератиноцитов, культивирование дермальных фибробластов не требует специальных условий и имеет относительно небольшую себестоимость. Использование культивированных in vitro фибробластов получило широкое распространение и признание как безопасный и эффективный метод, и представлено во многих обзорах [1, 4, 9, 10, 11]. Известно, что культивированные фибробласты посредством синтеза компонентов экстрацеллюлярного матрикса не только стимулируют адгезию, пролиферацию и дифференциров-ку кератиноцитов, но и оказывают непосредственное влияние на заживление ран, стимулируют рост сохранившихся очагов эпителия, а также способствуют лучшему приживлению аутодермального трансплантата [12].
Впервые в России использование дермаль-ных фибробластов было предложено Д.С. Сарки-совым и сотрудниками Института хирургии им. А.В.Вишневского РАМН, которые в 1993 году представили оригинальный и эффективный способ лечения ожоговых ран на основе применения культивированных фибробластов [13].
Результаты отечественных ученых предопределили развитие клеточных технологий для лечения ожоговой раны [14, 15]. Фибробласты получают из био-птата кожи путем механической дезагрегации или ферментативной обработки образцов кожи. Наибольшее распространение получил ферментативный способ получения фибробластов растворами колла-
геназы в сочетании с трипсином или без него. Культивирование клеток проводят в стандартных условиях до получения монослоя, после пассирования клеточной культуры их наращивают до необходимого количества.
Наиболее перспективным направлением для коррекции дефектов кожи представляется использование фибробластов в составе дермального эквивалента, когда клетки используются совместно с носителем [16].
Необходимость наличия носителя для культивированных клеток при трансплантации рассматривается и обсуждается на протяжении многих лет. Еще в 1980-м году Сиопо С. и его коллеги сообщили, что для хорошего приживления культивированных аутологич-ных кератиноцитов необходимо наличие подложки в виде аллогенной дермы [17, 18]. Для того чтобы метод Сиопо был эффективным требуется двухэтапная процедура. На первом этапе используется кожный алло-графт для временного закрытия раневого ложа. В течение двух-трех недель культивируют аутологичные эпителиальные клетки из небольшого биоптата кожи. После этого аутологичные кератиноциты в комплексе с аллогенной дермой используют для окончательного закрытия раневой поверхности. Этот двухступенчатый, составной метод (аллотрансплантат / культивированные клетки) трансплантации получил распространение и успешно применялся во многих центрах в конце 1990-х г. К основным недостаткам предложенного метода относят следующее: во-первых, ал-лотрансплантаты кожи не могут быть легкодоступными; во-вторых, если трупная кожа отторгнется раньше времени получения культуры аутологичных кератино-цитов, то невозможно будет их использовать вместе с аллогенной дермой (на основе метода Сиопо) для последующей трансплантации [19].
Дальнейшее развитие науки в области биологии и инженерии привело к созданию множества кожных эквивалентов на различных носителях, некоторые из них стали доступны на коммерческом рынке. Многие из этих продуктов находятся на стадии доклинических и клинических исследований [20, 21].
Условно представленные эквиваленты кожи можно разделить на дермальные, эпидермальные и смешанного типа, в зависимости от типа клеток, которые в этих продуктах используются [22].
В эпидермальных эквивалентах в качества клеточного компонента тканеинженерной конструкции используются кератиноциты. Дермальные эквиваленты содержат, как правило, аллогенные фибробла-сты, полные кожные эквиваленты представлены всеми типами клеток как кератиноцитами, так и фибро-бластами.
Все коммерческие кожные эквиваленты можно разделить на ацеллюлярные и клеточные продукты.
Ацеллюлярные эквиваленты кожи не содержат клетки, а состоят из различных полимерных соединений [11]. В определенной степени они имитируют основные свойства экстрацеллюлярного матрикса в коже человека путем предоставления некоторой формы целостности и упругости. Однако эти продукты в большинстве случаев не имеют эпителиального слоя и их использование необходимо сочетать с трансплантацией кожного аутотрансплантата, как правило, в два этапа [11].
Наиболее востребованы ацеллюлярные графты из искусственных биологических материалов, например, такие как Integra и MatriDerm. Графты, изготовленные из естественных биологических материалов (таких как AlloDerm и Permacol), как правило, представляют собой децеллюляризированную кожу человека или животных (свиньи). Такие графты имеют преимущества, так как обладают естественной кожной проницаемостью для регенерации и васкуляриза-ции, а также поддерживают адгезию, рост и функции многих типов клеток [23, 24].
Поэтому вполне закономерными стали попытки использования комбинации носителей и культур клеток. Первое такое совместное применение было еще показано в 1984 году, когда Gallico G. с соавторами описали применение аллографтов с последующим нанесением культуры эпителиальных кератино-цитов одному пациенту с ожогами 97% поверхности тела [25]. Однако выявилась проблема приживления кератиноцитов в ране в отсутствии фибробластов и высокая стоимость этих продуктов, что лимитировало их использование [26, 27].
В настоящее время наиболее актуальным является разработка дермо-эпидермальных эквивалентов, содержащих клетки как эпидермиса, так и дермы [22]. Из коммерческих продуктов представлены кожные эквиваленты, содержащие Apligraf (в состав входят кератиноциты и фибробласты), Dermagraft (фибро-бласты), OrCel (фибробласты, кератиноциты) и др. Все они имеют высокую стоимость и недоступны на нашем рынке.
Следует отметить перспективность разработки ау-тологичных композитных эквивалентов, состоящих из коллагена и гликозаминогликановой подложки, которые содержат аутокератиноциты и фибробласты [28, 29]. Совсем недавно группа немецких ученых сообщила о создании тканеинженерного аутографта на основе MatriDerm, засеянного аутологичными фибро-бластами и кератиноцитами, который, по сути, соответствует собственной коже человека [30, 31]. Однако проблема использования аутологичных технологий состоит в том, что требуется время на культивирование клеток и получение готового графта для имплантации, которого может не быть у пациентов с обширными ожогами [11].
Несмотря на известность и давность использования клеточных технологий в лечении кожных ран, на сегодняшний день применение клеточных продуктов на основе фибробластов и/или кератиноцитов не является рутинным и имеет весьма важные ограничения. Причин тому несколько, одна из которых связана с длительным отсутствием регламентирующих документов в Российской Федерации. Помимо этого, эффективность клеточной терапии в большинстве работ подтверждена только косвенным путем, а полученные данные на лабораторных животных полностью экстраполировать на человека невозможно, что, вероятно, также способствует ограничению использования клеточных технологий [32]. Настороженность клиницистов, ограниченность публичной информации способствует формированию у практикующих врачей либо негативного отношения, либо чрезмерно активного. В любом случае, научные достижения в области клеточных технологий продолжают развиваться, а поиск способов их применения представляет значительный интерес и повысит качество оказания медицинской помощи пострадавшим от ожогов.
В Научно-исследовательском институте - Краевая клиническая больница №1 им. проф. С.В. Очаповско-го проводится клиническое исследование по протоколу применения аутологичных фибробластов в лечении ожоговой раны. Представлены два клинических случая применения клеточной терапии в комплексе с разными методами аутопластики. У обоих пациентов получены информированные добровольные согласия.
Клинические примеры
Пациент О., 50 лет, поступил в реанимационное отделение ожогового центра с диагнозом: Термический ожог (пламенем) лица, туловища, конечностей II-III степени - 31%. Тяжелая термоингаляционная травма. Ожоговая болезнь в стадии острой токсемии. Заболевание осложнилось тяжелым волнообразным ожоговым сепсисом, двусторонней полисегментарной пневмонией.
Из анамнеза заболевания известно, что ожог был получен пламенем. Пациент переведен из центральной районной больницы в ожоговый центр в виду тяжести состояния и для проведения специализированного лечения. Больному были проведены операции, включающие поэтапные некрэктомии, ампутации правой верхней конечности на уровне средней трети правого плеча, левой кисти на уровне пястных костей (рис. 1).
Ввиду того, что у больного имелся ожог тяжелой степени с поражением верхних конечностей и туловища, ожоговая болезнь, тяжелое состояние, потребовавшее подключение его к аппарату искусственной вентиляции легких через трахеостому, пациент был включен в протокол клинического исследования.
Рис. 1. Пациент до проведения лечения. А - вид раны спереди, Б - вид раны сбоку.
Рис. 2. Подготовка конечности к забору трансплантата.
Для получения культуры аутологичных фибробла-стов в первый операционный день был выполнен забор кожного аутотрансплантата электродерматомом ДЭ-60 на правом бедре, толщиной 0,3 мм, площадью 20 см2. Процедура забора проводилась в стерильных условиях под общим наркозом. На донорское место после забора была наложена асептическая повязка. Кожный трансплантат транспортировали в стерильной пробирке с транспортной средой в лабораторию для последующего выделения и культивирования клеток.
Через 26 дней культивирования получена культура аутологичных фибробластов, засеянная на полимерный носитель. Были проведены исследования, подтверждающие качество культуры: определение количества клеток, морфологический анализ, бактериологический контроль, кариотипирование, иммунофено-типирование. В день операции культура аутофибро-бластов на подложке была подготовлена и транспортирована в операционную для проведения аутопластики.
Под наркозом электродерматомом ДЭ-60 на обоих бедрах был выполнен забор кожных аутотран-
Рис. 3. Забор кожи дерматомом.
сплантатов толщиной 0,3 мм, площадью 1200 см2 (рис 2, 3).
На ранах были удалены фибринозно-некротичес-кий налет и гипергрануляции с культи правого плеча. После гемостаза кожные трансплантаты пропер-форированы 1:4, раскроены по контуру ран культи
Рис. 4. Перфорирование кожи.
Рис. 5. Подготовка раны.
Рис. 7. Наложение фибробластов на носителе на рану.
Рис. 9. Вид раны через 4 дня.
правого плеча (2% п.т.) и туловища (13% п.т.), и уложены на раневые поверхности на площади 15% п.т. В ячейки кожных трансплантатов произведена трансплантация культивированных аутофибробластов на подложке. Сверху были наложены повязка Брано-линд и раны прикрыты асептическими повязками (рис. 5 - 8).
Рис. 6. Аутопластика перфорированным трансплантатом.
Рис. 8. Конечный вид раны.
Рис. 10. Адаптация трансплантата и ячеечная эпители-зация на 6-й день после операции.
Через 4 дня при проведении плановой смены повязок было выявлено формирование эпителиальной ткани в месте проведения аутопластики. Далее проводились аутопластики других участков. Состояние пациента улучшалось, и на четвертый месяц стационарного лечения он был выписан по месту жительства (рис. 9, 10).
Пациент, Б., 66лет, был госпитализирован в ожоговое отделение с диагнозом: Термический ожог (пламенем) туловища, наружных половых органов, нижних конечностей II-III степени - 12%. Ожоговая болезнь в стадии острой токсемии.
Из анамнеза было известно, что пациент получил ожоги пламенем от загоревшейся синтетической одежды, от искры работающей циркулярной пилы. За медицинской помощью обратился спустя сутки после получения ожога в связи с усилением болевого синдрома.
При поступлении из районной больницы на второй день после травмы имелся глубокий ожог с формированием струпа. В этот день в условиях операционной электродерматомом ДЭ-60 с передней поверхности правого плеча был взят свободный кожный расщеплённый аутотрансплантат и отправлен в лабораторию для получения культуры дермальных фибро-бластов.
Больному проводилось интенсивное общее и местное лечение, включающее некрэктомию и подготов-
ку ран к аутопластике. Через 27 дней после травмы при формировании грануляционной ткани на бёдрах больной взят в операционную. Полученная культура аутологичных фибробластов была подготовлена и ре-суспендирована в физиологическом растворе.
Под общим наркозом после стандартной обработки операционного поля электродерматомом с задней поверхности левого бедра взят расщеплённый аутотрансплантат. Трансплантат проперфорирован по МЕЕК технологии с коэффицентом 1:3 (рис. 11).
Аутотрансплантат был нанесен и распределен на пробковый носитель в виде квадрата 5х5 см, затем рассечен на перфораторе кожи с пневматическим приводом. На аутодермотрансплантат наносили фи-броклей в виде спрея, после чего его перемещали с пробковых носителей на ткань входящую в комплект, удаляли пробковый носитель и заканчивали растяжением ткани. Затем ткань со стороны перфорационных кусочков, сами кусочки с дермальной стороны и рану орошали суспензией аутофибробластов (рис. 12, 13), после чего производили аутопластику (рис. 14).
Рис. 11. Перфорированный трансплантат.
еь*
Рис. 12. орошение трансплантата суспензией клеток.
Рис. 13. орошение раны суспензией клеток.
Рис. 14. Аутопластика.
Рис. 15. Вид раны через 7 суток. Полная эпителизация.
Заканчивали операцию наложением асептической повязки. Через 3 дня после операции наблюдалось начало эпителизации, на 7-й день была отмечена полная эпителизация (рис. 15).
Представленные клинические случаи показали эффективность использования аутологичных фибробла-стов в лечении ожоговой раны.
Способы лечения, включающие комбинацию ау-тодермопластики с аутологичными фибробластами, позволили создать условия быстрого приживления и эпителизацию перфорированных аутотрансплан-татов.
Заключение
С учетом данных современной литературы считаем совершенно оправданным возобновишийся интерес к применению культивированных клеток в сочетании с перфорированной кожей. Полученные нами результаты, в целом, имеют много положительных эффектов: 1) хорошая адгезия клеток, даже на сложном раневом ложе; 2) сокращение времени эпителиза-ции; 3) отсутствие риска передачи гемотрансмиссив-ных инфекций; 4) хорошие функциональные и эстетические результаты.
Популяция культивированных фибробластов создает то неуловимое микроокружение, которое обеспечивает необходимые молекулярные и клеточные сигналы для иммуномодулирующего эффекта и регенерации ткани [9].
Подводя итог, пришли к выводу, что не существует единого метода лечения ожоговых ран, который можно рекомендовать всем пациентам и клиникам. Но, безусловно, необходим особый подход в лечении тяжелых ожогов, что делает все эти технологии персонализированными. Если критерием качества жизни пациентов рассматривать уменьшение рубцов и контрактур, то применение культивированных клеток является основной частью дермальных эквивалентов.
Для того, чтобы технология могла обеспечить необходимый объем производства функционального дермального эквивалента по разумной цене, необходимо создание банков аллофибробластов как местных, так и региональных. Это позволит полностью удовлетворять потребности медицинского центра, который занимается лечением тяжелых ожогов, что особенно неоценимо в случаях массовых поражений [11].
Литература
1. Винник Ю.С., Салмина А.Б., Дробушевская А.И. и др. Клеточные технологии и тканевая инженерия в лечении длительно не заживающих ран // Вестник экспериментальной и клинической хирургии -2011. - Том IV. - №2. - 392 - 397.
2. Brusselaers N. Pirayesh, A., Hoeksema, H. et al. Skin replacement in burn wounds //Journal of Trauma and Acute Care Surgery. - 2010. - Vol. 68. - №. 2. -P. 490 - 501.
3. Groeber F. et al. Skin tissue engineering—in vivo and in vitro applications //Advanced drug delivery reviews. - 2011. - Vol. 63. - №. 4. - P. 352 - 366.
4. Leclerc T., Thepenier, C., Jault, et al. Cell therapy of burns //Cell proliferation. - 2011. - Vol. 44. - №. s1. -P. 48 - 54.
5. Dimitropoulos G., Jafari, P., de Buys Roessingh, A. et al. Burn patient care lost in good manufacturing practices? //Annals of burns and fire disasters. - 2016. -Т. 29. - №. 2. - P. 111 - 115.
6. Панов А.В. Шаповалов С.Г., Плешков А.С. и др. Первый опыт применения целлюлярно-матричного комплекса // Сборник научных трудов «IV съезд ком-бустиологов» - 2013 - С.110 - 111.
7. Федеральный закон от 23 июня 2016 г. N 180-ФЗ «О биомедицинских клеточных продуктах»
8. Nanchahal J., Dover R., Otto W. et al. Cultured composite skin grafts: biological skin equivalents permitting massive expansion //The Lancet. - 1989. -Vol. 334. - №. 8656. - P. 191 - 193.
9. Зорин В. Л., Зорина, А. И., Петракова и др. Дер-мальные фибробласты для лечения дефектов кожи // Гены и клетки. - 2009. - Т. 4. - №. 4. - 26 - 40.
10. Туманов В. П. Современные клеточные технологии // Новости клинической цитологии России. - 2007. - Т.1. - С. 34 - 38.
11. Chua A. W. C., Khoo Y. C., Tan B. K., et al. Skin tissue engineering advances in severe burns: review and therapeutic applications //Burns & trauma. - 2016. - Vol. 4. - №. 1. - P. 3.
12. Алексеев А. А., Салахиддинов К. З., Гаврилюк Б. К. И др. Комплексное лечение глубоких ожогов на основе применения хирургической некрэктомии и современных биотехнологических методов //Анналы хирургии. - 2012. - №. 6. - С. 41 - 45.
13. Саркисов Д.С, Туманов В.П., Глущенко Е.В. и др. Использование культивированных фибробластов при лечении обожженных. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1990. - № 3. - С. 400 - 402.
14. Колокольцова Т. Д., Юрченко Н. Д., Колосов Н.Г. и др. Перспективы использования фетальных фи-бробластов человека при лечении ран различной этиологии // Вестник РАМН. - 1998. - № 3. - С. 32 - 35.
15. Саркисов Д.С, Алексеев А.А. и др. Теоретические и практические аспекты использования культивированных фибробластов при восстановлении целостности кожного покрова // Вестн. РАМН. - 1994. № 7. - С. 6 - 11.
16. Cuono C., Langdon R., McGuire J. Use of cultured epidermal autografts and dermal allografts as skin replacement after burn injury // Lancet. - 1986. Vol.327 - №8490. - P. 1123 - 1124.
17. Cuono C.B., Langdon R., Birchall N. et al. Composite autologous-allogeneic skin replacement: development and clinical application // Plastic and Reconstructive Surgery. - 1987. Vol.80. - №4. -P. 626 -637.
18. Hansbrough J.F., Franco E.S. Skin replacements // Clin Plast Surg. - 1998. - Vol.25. - N3. - P.407-423.
19. Shahrokhi S., Arno A., Jeschke M.G. The use of dermal substitutes in burn surgery: acute phase // Wound Repair Regen. - 2014. - Vol.22. - N1. - P. 14 - 22.
20. Зорина, А. И., Бозо, И. Я., Зорин, В. Л. и др. Фибробласты дермы: особенности цитогенеза, ци-тофизиологии и возможности клинического применения //Гены и клетки. - 2011. - Т. 6. - №. 2. -С. 15 - 26.
21. Philandrianos C, Andrac-Meyer L, Mordon S, Feuerstein JM, Sabatier F, Veran J, et al. Comparison of five dermal substitutes in full-thickness skin wound healing in a porcine model // Burns. - 2012. - Vol.38. -N.6. - P.820 - 829.
22. Алейник Д.Я., Зорин В.Л., Еремин И.И. и др. Использование клеточных технологий для восстановления повреждений кожи при ожоговой травме // Современные проблемы науки и образования. - 2015. -№4. - С331.
23. Conconi M.T., De Coppi P., Di Liddo R. et al. Tracheal matrices, obtained by a detergent-enzymatic method, support in vitro the adhesion of chondrocytes and tracheal epithelial cells // Transplant international. -2005. - Vol. 18. - №. 6. - P. 727 - 734.
24. Burra P., Tomat S., Conconi M.T. et al. Acellular liver matrix improves the survival and functions of isolated rat hepatocytes cultured in vitro // International journal of molecular medicine. - 2004. - Vol. 14. - N.4-P. 511 - 516.
25. Gallico III G.G., O'Connor N.E., Compton C.C. et al. Permanent coverage of large burn wounds with
autologous cultured human epithelium //New England Journal of Medicine. - 1984. - Vol. 311. - №. 7. -P. 448 - 451.
26. van der Veen VC, van der Wal MB, van Leeuwen MC, Ulrich MM, Middelkoop E. Biological background of dermal substitutes. Burns. 2010;36(3):305-21 Climov M. et al. Bioengineered self-assembled skin as an alternative to skin grafts //Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. - 2016. - Т. 4. - №. 6.
27. Climov M. et al. Bioengineered self-assembled skin as an alternative to skin grafts //Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. - 2016. -Т. 4. - №. 6.
28. MacNeil S. Progress and opportunities for tissue-engineered skin // Nature. - 2007. - Vol. 445. -N7130. - P.874 - 880.
29. Boyce S.T., Kagan R.J., Greenhalgh D.G. et al. Cultured skin substitutes reduce requirements for harvesting of skin autograft for closure of excised, full-thickness burns // J Trauma. - 2006. - Vol.60. - N4. -P. 821 - 829.
30. Golinski P., Menke H., Hofmann M. et al. Development and characterization of an engraftable tissue-cultured skin autograft: alternative treatment for severe electrical injuries // Cells Tissues Organs. - 2014. - Vol.200. - N3-4. - P.227 - 239.
31. Zoller N., Valesky E., Butting M. et al. Clinical application of a tissue-cultured skin autograft: an alternative for the treatment of non-healing or slowly healing wounds? // Dermatology. - 2014. - Vol.229. -N 3. - P. 190 - 198.
32. Ткачук В.А. Аутологичные стволовые клетки: экспериментальное исследование и перпективы клинического применения // под ред. Ткачук В.А. Руководство для врачей. - Изд. «Литтерра» - М.; 2009. -С. 222- - 235.
Сведения об авторах
Гилевич И. В., заведующая лабораторией разработки и изучения новых технологий лечения заболеваний, ГБУЗ НИИ - ККБ №1 им. проф. С.В.Очаповского (Краснодар, Россия). E-mail: giliv@list.ru.
Федоренко т. в., биолог, лаборатория разработки и изучения новых технологий лечения заболеваний, ГБУЗ НИИ - ККБ №1 им. проф. С.В.Очаповского (Краснодар, Россия). E-mail: fedorenko.tv@mail.ru.
Коломийцева Е. А., биолог, лаборатория разработки и изучения новых технологий лечения заболеваний, ГБУЗ НИИ - ККБ №1 им. проф. С.В.Очаповского (Краснодар, Россия). E-mail: kmc78@mail.ru.
Богданов С. Б., к.м.н., заведующий ожоговым центром, ГБУЗ НИИ - ККБ №1 им. проф. С.В.Очаповского (Краснодар, Россия). E-mail: bogdanovsb@mail.ru.
Семенченко А А., врач-хирург, ожоговое отделение, ГБУЗ НИИ - ККБ №1 им. проф. С.В.Очаповского
(Краснодар, Россия). (Краснодар, Россия). E-mail: bogdanovsb@mail.ru.
иващук Ю. в., заведующий отделением анестезиологии и реанимации №4, ГБУЗ НИИ - ККБ №1 им. проф. С.В.Очаповского (Краснодар, Россия). (Краснодар, Россия). E-mail: bogdanovsb@mail.ru.
Конфликт интересов отсутствует.
Статья поступила 23.06.2017 г.
Author credentials
Gilevich I.V., head of laboratory for development and study of new technologies for disease treatment, SBIPH Scientific Research Institution - Ochapovsky Regional Clinic Hospital №1 (Krasnodar, Russia). E-mail: giliv@ list.ru.
Fedorenko T.V., biologist, laboratory for development and study of new technologies for disease treatment, SBIPH Scientific Research Institution -Ochapovsky Regional Clinic Hospital №1 (Krasnodar, Russia). E-mail: fedorenko.tv@mail.ru.
Kolomytseva E.A., biologist, laboratory for development and study of new technologies for disease treatment, SBIPH Scientific Research Institution -Ochapovsky Regional Clinic Hospital №1 (Krasnodar, Russia). E-mail:kmc78@mail.ru.
Bogdanov S. B., CMS, head of combustion department, SBIPH Scientific Research Institution -Ochapovsky Regional Clinic Hospital №1 (Krasnodar, Russia). E-mail: bogdanovsb@mail.ru.
Semenchenko A.A., surgeon, Combustion department, SBIPH Scientific Research Institution -Ochapovsky Regional Clinic Hospital №1 (Krasnodar, Russia). E-mail: bogdanovsb@mail.ru.
Ivaschuk Y.V., head of anaesthesiology and resuscitation department №4, SBIPH Scientific Research Institution - Ochapovsky Regional Clinic Hospital №1 (Krasnodar, Russia). E-mail: bogdanovsb@ mail.ru.
Conflict of interest: none declared.
Accepted 23.06.2017 e.
