CC BY
11
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2020; ТОМ 65; №1 |
и -2016 существенно не отличалась между двумя группами: ПР была достигнута у 77 и 87% (р=0,273), клиренс МРБ был сопоставим. 5-ОВ у больных с мутациями составила 60%, без — 52% (р = 0,483), БРВ 54,6% vs 44,3% (р = 0,810), ВРР — 38,1% vs 35,3%, (р=0,379) соответственно.
Заключение. Активирующие мутации в генах каскада RAS/ ERK/MAPK достоверно чаще детектируются у больных Ph- vs Ph+ ОЛЛ. Мутации JAK/STAT пути редкое событие при Ph- ОЛЛ. Сочетание мутаций генов RAS/ERK/MAPK пути с гиперэкспрессией CRLF2 обусловливают неблагоприятное течение заболевания.
Звонков Е. Е., Чанг Л. Д., Габеева Н. Г., Смольянинова А. К., Татарникова С. А., Королева Д. А., Савенко Т. А., Савченко В. Г. СЛУЧАЙ УСПЕШНОЙ CAR-T ТЕРАПИИ РЕЦИДИВА ПЕРВИЧНОЙ МЕДИАСТИНАЛЬНОЙ ЛИМФОМЫ С ПОРАЖЕНИЕМ ЦНС
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, Институт медицинской генетики и иммунологии, Шэньчжэнь, Китай
Введение. Рецидив с поражением ЦНС встречается примерно у 5% больных ПМЛ после проведения стандартной терапии (R-CHOP, R-DA-EPOCH) и характеризуется крайне неблагоприятным прогнозом. Медиана ОВ не превышает 5—10 месяцев даже после интенсивной ПХТ второй линии. Поиск эффективной терапии продолжается. Возможности альтернативного применения CAR-T (ауто-Т-клетки с химерным антигенным рецептором) терапии у больных ПМЛ с рецидивом в ЦНС в доступной литературе не описаны.
Цель работы. Продемонстрировать успешный опыт применения CAR-T терапии у больной ПМЛ с изолированным рецидивом в ЦНС.
Материалы и методы. В феврале 2018 года больная Ш. 32 лет, госпитализирована в нашу клинику с диагнозом: первичная ме-диастинальная лимфома, беременность 19 недель. Жалобы при поступлении: нарастающая одышка, кашель, боли в эпигастрии и субфебрилитет. При обследовании выявлено опухолевое образование переднего средостения размерами 120x94 мм с обтурацией бронхов и сдавлением верхней полой вены; участок инфильтрации левого легкого 23x18 мм, плеврит, субтотальное инфильтративно-язвенное поражение желудка. Диагноз подтвержден результатами ИГХ. Признаков вовлечения ЦНС по данным МРТ выявлено не было. С марта по июнь больная получила 5 курсов ПХТ DA-EPOCH. На 36-й неделе беременности было выполнено кесарево сечение, родился здоровый мальчик, вес — 2380 г, рост — 44 см, по шкале Апгар — 7—8 баллов. По данным ПЭТ/КТ достигнута ПР. Через 2 месяца появились интенсивные головные боли. По данным повторной МРТ и ПЭТ/КТ диагностирован локальный рецидив в ЦНС с поражением левой лобной доли размерами 32x26x31 мм.
Результаты и обсуждение. С сентября по декабрь 2018 г. в Институте медицинской генетики и иммунологии (Китай) больная получила CAR-T терапию 4-го поколения. После лимфодеплеции по программе FC (циклофосфан 500 мг/м2 1—3 день + флударабин 50 мг/м2 3 день) про -ведена трансфузия ауто-CAR-T клеток: CD19 (2,2x108)+CD30 (2,7x108) в 0 день, CD19 (1,0x108)+CD22 (8,6x107) на 42-й день. Тяжелых осложнений не отмечено. На 69-й день дополнительно введено 1,4x108 CD19
ауто-САR клеток. На 28-й день от начала лечения опухоль ЦНС редуцировалось на 80%, по окончании терапии констатирована ПР (рис. 1). Дальнейшая цитостатическая терапия не проводилась. В настоящее время на сроке наблюдения +12 месяцев сохраняется ПР заболевания. В крови определяется персистенция CAR-T (4,3% CD19-153z).
Заключение. Представленный уникальный опыт успешного применения CAR-T терапии у больной ПМЛ с изолированным рецидивом в ЦНС дает возможность ответить на ряд вопросов. Прежде всего становится понятным, что модифицированные Т-клетки способны не только преодолевать гематоэнцефалический барьер, но и сохранять противоопухолевую активность в лимфатической опухоли ЦНС. Скорее всего, возможно полное выздоровление больных ПМЛ с рецидивным поражением ЦНС без последующей цитостатической терапии. Полученный эффект теоретически можно связать с ранней интеграцией CAR-T терапии 4-го поколения в первом рецидиве, а также применением поли-CAR-T терапии, в отличие от «традиционного» монотаргетного использования модифицированных Т-клеток.
Исинова Г. А., Бидерман Б. В., Гаврилина О. А., Зарубина К. И., Давыдова Ю. О., Гальцева И. В., Степанова Е. А., Никулина Е. Е.,
Судариков А. Б., Паровичникова Е. Н., Савченко В. Г.
ДОЛГОСРОЧНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ТЕРАПИИ И КЛИРЕНС МОБ У БОЛЬНЫХ Ph"-" В-ОЛЛ С ДЕЛЕЦИЯМИ ГЕНА 1ШВ1 ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ПРОТОКОЛОВ РОССИЙСКОЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ ГРУППЫ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. В ряде исследований при В-клеточном остром лим-фобластном лейкозе (В-ОЛЛ) обнаружение делеций (del) гена IKZF1 и персистенция минимальной остаточной болезни (МОБ) являются ключевыми факторами неблагоприятного прогноза.
Цель работы. Оценить результаты лечения и клиренс МОБ у взрослых больных В-ОЛЛ в зависимости от наличия del IKZF1 при использовании неинтенсивного, но постоянного цитостатическо-го воздействия.
Материалы и методы. В исследование включено 86 взрослых больных Ph-негативным (Ph-) В-ОЛЛ. Больным проводили лечение по протоколам ОЛЛ-2009 и ОЛЛ-2016 с августа 2009 по октябрь 2019 г., медиана наблюдения — 18,9 мес (0,5—117,3 мес), медиана возраста — 31 год (17—59), соотношение мужчины:женщины (42:44). Молекулярный анализ del IKZF1 проводили методом ПЦР. Исследование МОБ выполнено методом 6-цветной проточной цитометрии (чувствительность 0,01%) с использованием антител против: CD19 APC, CD10 PE, CD34 PE-Cy7, CD38 FITC, CD45 PerCP, CD20 APC-H7 и CD58 FITC.
Минимальная чувствительность составляла 0,01%. В контрольные точки для исследования МОБ на 70-й день исследование выполнено 46 больным, на 133-й день — 45 больным, на 190-й день — 35 больным.
Результаты и обсуждение. Частота обнаружения del IKZF1 Ph-В-ОЛЛ составила 17% (у 15 больных из 86). При анализе спектра различных вариантов делеций было обнаружено, что частота выявления del 4—7 была самой высокой и составила 60%, del 4—8 была выявлена у 13% больных, а каждый из вариантов del 2—7 и del 2—8 был представлен у 6% больных с делециями. У одного больного (6%) было обнаружено одномоментно две делеции IKZF1 — del 4—8 и del 4—8; также у одного больного (6%) было выявлено все 4 варианта делеций (del 4—7, del 4—8, del 2—7, del 2—8). Выявлены различия в эффективности терапии: у больных с наличием del IKZF1 полная ремиссия была достигнута в 66% случаев (у 10 больных из 15), в то время как у больных с диким типом (WT) гена IKZF1 — в 87% (у 61 больного из 70) (p=0,053). МОБ на +70 день терапии была обнаружена у 89% больных с del IKZF1 и у 43% без них (р=0,014),
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
на +133-Й день терапии — у 63 и 27% (p=0,054), на +190-Й день терапии — у 100% и 3% (p<0,001) соответственно. При анализе долгосрочных результатов терапии (рис. 1) 5-летняя общая выживаемость (ОВ) у больных с del IKZF1 составила 56% (n=14), у больных с WT IKZF1 — 64% (n=71), p>0,05; безрецидивная выживаемость (БРВ) — 50,8% (n=10) и 65% (n=60), p>0,05 соответственно. Вероятность 5-летней бессобытийной выживаемости (БСВ) у больных с del IKZF1 была значительно ниже, чем у больных с WT гена, и составила 23,4% (n=14) против 49,9% (n=71) соответственно.
Заключение. Внутригенные делеции гена IKZF1 ассоциированы с первично-рефрактерным течением, персистенцией МОБ у больных Ph- В-ОЛЛ при использовании неинтенсивного, но постоянного цитостатического воздействия, применяемого в протоколах Российской исследовательской группы по изучению ОЛЛ. При исследовании долгосрочных результатов терапии del IKZF1 являются факторами неблагоприятного прогноза, однако различия в группах больных с и без делеций статистически незначимы.
Карпенко Д. В., Дорофеева А. И., Петинати Н. А., Шипунова И. Н., Дризе Н. И., Бигильдеев А. Е.
ЭПИГЕНЕТИЧЕСКАЯ РЕГУЛЯЦИЯ ИНТЕРЛЕЙКИНА-1|3 В РАЗЛИЧНЫХ ТКАНЯХ МЫШЕЙ ПОСЛЕ ОБЛУЧЕНИЯ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Недавние исследования показали, что интерлейкин-1(3 (ИЛ-1р) способен регулировать стволовые кроветворные клетки и стимулировать рост и дифференцировку мезенхимных клеток-предшественниц костного мозга. Следовательно, важно понимать, какие факторы влияют на его уровень в периферической крови, особенно учитывая его ключевую роль в индукции воспаления. Эксперименты показали, что концентрация ИЛ-1р повышается в крови и других тканях после облучения мышей в высоких дозах ионизирующего излучения. Повышенный уровень ИЛ-1(3 поддерживается в течение нескольких месяцев после облучения. Одной из вероятных причин может быть деметилирование CpG в промоторе, который для мыши детально не охарактеризован.
Цель работы. В данной работе определили возможные элементы промотора ШЬ мыши и исследовали в них профиль метилирования CpG в ряде тканей на протяжении двух лет после облучения мышей в дозе 6 Гр. В работе также провели сравнение профиля метилирования с уровнем экспрессии ШЬ в необлученных животных.
Материалы и методы. Мышей-самок гибридов линии (СВА х С57В16) F1 (п = 6) подвергали воздействию ^-излучения 60Со. Через 1, 7, 60, 270, 600 дней после облучения выделяли ДНК из костей, мышц, тимуса, печени, селезенки, лимфатических узлов и костного мозга. Проводили бисульфитную конверсию ДНК с последующей ПЦР фрагментов, содержащих CpG предполагаемой области промотора ШЬ. Секвенировали продукты ПЦР и устанавливали профиль метилирования CpG в тканях контрольных необ-лученных мышей и в аналогичных тканях облученных животных. В исследованных участках предполагаемого промотора проводили поиск сайтов связывания факторов транскрипции. С помощью
ОТ-ПЦР в режиме реального времени анализировали уровень экспрессии ШЬ в тканях контрольных мышей и соотносили с уровнем метилирования выбранных CpG.
Результаты и обсуждение. Установлено, что регион между —2543 и —2206 п.н. от старта транскрипции содержит сайты связывания факторов СЕВРВ и 8Р11, которые определяют тканеспецифичность экспрессии ШЬ. Один из исследованных CpG находится непосредственно в сайте связывания SPI1. Степень метилирования CpG, расположенных в указанном регионе, различается между тканями. В совокупности эти данные указывают на то, что регион —2543...—2206 п.н. входит в состав промотора/энхансера ШЬ мыши и определяет его базовый уровень экспрессии в различных тканях. Полученные результаты также указывают на то, что регуляция ШЬ в тканях организма зависит как минимум от сочетания двух факторов: степени метилирования CpG в регионе —2543 и —2206 п.н. от старта транскрипции и экспрессии SPI1. Это подтверждается отсутствием прямой связи между уровнем экспрессии ШЬ в тканях и уровнем метилирования CpG. Показано, что облучение не приводит к изменению профиля метилирования CpG предполагаемого промотора ШЬ в исследован ны х тканя х.
Заключение. Результаты работы указывают на то, что регион -2543.-2206 п.н. входит в состав промотора/энхансера ШЬ мыши и определяет его базовый уровень экспрессии в различных тканях. Стабильно повышенный уровень ИЛ-1(3 после облучения не обусловлен изменением метилирования исследованных CpG в основной клеточной популяции каждой из исследованных тканей. Работа поддержана грантом президента для молодых ученых (номер проекта
МК-6016.2018.4).
Кислицына М. А., Гребенюк Л. А., Алимова Г. А., Шишигина Л. А., Абрамова Т. В., Новикова Т. Ю., Борисова А. Ю., Горячева С. Р.,
Моисеева Т. Н., Никитин Е. А., Обухова Т. Н.
НЕСБАЛАНСИРОВАННЫЕ СТРУКТУРНЫЕ ХРОМОСОМНЫЕ НАРУШЕНИЯ В КАРИОТИПЕ БОЛЬНЫХ
ХРОНИЧЕСКИМ ЛИМФОЛЕЙКОЗОМ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Хромосомные нарушения являются факторами прогноза при хроническом лимфолейкозе (ХЛЛ). Комплексный кариотип (КК) — >3 хромосомных нарушений — определяет неблагоприятный прогноз. Для больных ХЛЛ показано, что наличие >5 аберраций
в кариотипе является предиктором самого плохого ответа на терапию, в том числе таргетными препаратами (ибрутиниб, венетоклакс). При стандартном цитогенетическом исследовании (СЦИ) с олигону-клеотидом DSP30 и Ш2 аберрантный кариотип выявляется примерно
