CC BY
33
© Maonaê Г. С., Maшeйкo I. В., "llama H. С., *Kaплaн П. Ю., Бpaзaлyк О. З.
УДK 577. 112. 85:616. 155. 3:502. 175:616. 155. 392-036. 1-08:615. 277
Macëaê Г. С., Marneéêo I. В., *Ïarna H. С., *KanëaH П. Ю., Àpaçaëyê О. З.
ДИHAMIKA ЗMIH PIBHß ПЛAЗMOBOГO TA ACO^ÉOBAHOTO !З
ПOBEPXHEЮ KЛITИH KPOBI ГOCTPOФAЗOBOГO aльфa-1-киcлoгo
ГЛIKOПPOTEÏHУ ЗA KOMÂIHOBAHOÏ XIMIOTEPAmÏ XPOHIЧHOГO
ЛIMФOÏДHOГO ЛEЙKOЗУ
ДЗ «Днiпpoпeтpoвcькa мeдичнa aкaдeмiя» (м. Днiпpoпeтpoвcьк) * KS «Днiпpoпeтpoвcькa мicькa бaгaтoпpoфiльнa клiнiчнa лiкapня №4» ДOP
(м. Днiпpoпeтpoвcьк)
Дocлiджeння викoнaнi y paмкax нayкoвo-дo-cлiднoÏ poбoти кaфeдpи бioлoгiчнoÏ, мeдичнoÏ тa фapмaцeвтичнoÏ xiмiÏ Дepжaвнoгo зaклaдy «Днiпpo-пeтpoвcькa дepжaвнa мeдичнa aкaдeмiя» зa тeмoю «Eкcпpeciя mira^^iora^ тa Ïx пocттpaнcляцiйнa мoдифiкaцiя зa yмoв oнкoтpaнcфopмaцiÏ», № дep-жaвнoÏ peecтpaцiÏ 0111U002788, 2011-2013 pp.
Bcтyп. Xpoнiчний лiмфoлeйкoз (XЛЛ) - злoякicнa мoнoклoнaльнa пpoлiфepaцiя зpiлиx B-лiмфoцитiв з iмyнoфeнoтипoм CD5+, CD23+, CD19+, для якoÏ xapaктepнo пepвиннe ypaжeння кicткoвoгo мoзкy й пepифepичнoÏ кpoвi [11]. XЛЛ зycтpiчaeтьcя iз чac-тотою 3-10 випaдкiв нa 100 тиа нaceлeння i е нaй-пoшиpeнiшим типoм лeйкoзy cepeд дopocлoгo нa-ceлeння y cвiтi (близькo 30 % cepeд лeйкoзiв) [2]. Xoчa XЛЛ тpaдицiйнo вiднocять дo пaтoлoгiÏ CTap-rnoÏ вiкoвoÏ гpyпи, випaдки зaxвopювaння в людeй cepeдньoгo вку нe piдкi (близькo 11 % мoлoдшe зa 55 poкiв). Meдiaнa вiкy пaцieнтiв зa дaними peeCTpy SEER (США) - 72 po™ [20].
Ha eтaпi клiнiчнoÏ мaнiфecтaцiÏ xpoнiчний лiм-фoлeйкoз е cиcтeмним зaxвopювaнням, тoмy пpo-вeдeння ттьки мicцeвoгo лiкyвaння (oпepaцiя, пpo-мeнeвa тepaпiя), е нeдocтaтнiм i йoгo нeoбxiднo дoпoвнювaти cиcтeмнoю тepaпieю [14]. В цьoмy плaнi нaйбiльш пepcпeктивним е зacтocyвaння гам-бiнoвaнoÏ пoлixiмioтepaпiÏ (KПXT). У вiдмiннocтi вiд мoнoxiмioтepaпiÏ пpизнaчeння двox i бiльшe пpe-пapaтiв, ùo мaють piзний мexaнiзм дiÏ, дoзвoляe збтьшити вiдcoтoк пoвниx peмiciй дo 15-60 % [5], в зaлeжнocтi вщ cтaдiÏ xвopoби, зa мeншoÏ тoкcичнoc-тi [10]. Öe пoв'язaнe з piзнoю чyтливicтю пyxлинниx кJliтин дo зacтocoвyвaниx цитocтaтикiв [15]. В УкpaÏнi нaйбiльш пoшиpeнi кoмбiнoвaнi лiкyвaльнi cxeми, ùo вкJlючaють пoeднaння цикJloфocфaмiдy з в^фи^ тинoм тa пpeднизoлoнoм (COP), цикëoфocфaмiдy, дoкcopyбiцинy, вiнкpиcтинy (CHOP) тa пpeднiзoлoнy (CNOP), флyдapaбiнy з циклoфocфaмiдoм (FC) якi
мaють piзнy eфeктивнicть, зaлeжнo вiд cтaдiÏ xвopoби [21, 26].
В cyчacнiй oнкoгeмaтoлoгiÏ ocнoвним мeтoдoм для oцiнки вiдпoвiдi нa xiмioтepaпiю е дaнi пpo нop-мaлiзaцiю кJliтиннoгo cкJlaдy пepифepичнoÏ кpoвi й кicткoвoмy мoзкy (нopмoкJliтиннicть, юлькють лiм-фoцитiв <30 % вiднocнo зaгaльнoÏ кiлькocтi кJliтин кpoвi з ядpaми, вiдcyтнicть нoдyляpнoÏ пpoлiфepa-ци), oцiнювaнi мeтoдaми пpoтoчнoÏ цитoмeтpiÏ [25]. Дaний мeтoд нaдae мoжливicть oб'eктивнo oцiнити cпiввiднoшeння клiтинниx пoпyляцiй y пepифepичнiй кpoвi [9] тa пopiвняти piзнi лiнiÏ кoмбiнoвaнoÏ пoлixi-мioтepaпiÏ зa тoкcичнicтю тa eфeктивнicтю впливу нa пyxлиннi клoни [16]. ^м тoгo, мeтoди пpoтoчнoÏ цитoмeтpiÏ дoзвoляють oтpимaти iнфopмaцiю пpo мoлeкyляpнo-бioлoгiчнi тa iмyнoлoгiчнi пpoцecи зa yчacтю гocтpoфaзoвиx бiлкiв, ùo вiдбyвaютьcя пiд чac лiкyвaння.
Meтoю дaнoгo дocлiджeння cтaлa oцiнкa динa-мiки змiни кoнцeнтpaцiÏ aльфa-1 - киcлoгo глiкoпpo-тeÏнy (АГП) y плaзмi тa iнтeнcивнocтi флyopecцeнцi,i AГП-пoзитивниx клiтин кpoвi xвopиx нa XЛЛ дo лку-вaння тa нa piзниx eтaпax пicля цитocтaтичнoÏ тepaпiÏ зa cxeмoю кoмбiнaцiÏ цикJloфocфaмiдy з вЫфисти-нoм тa пpeднiзoлoнoм (ЦOП-тepaпiя).
Oб'eкт i мeтoди дocлiджeння. Maтepiaлoм дo-cлiджeння cлyгyвaлa плaзмa кpoвi xвopиx нa XЛЛ y вМ 58-66 poкiв в II-III cтaдiÏ, згiднo iз кJlacифiкaцieю K. R. Rai [24]. ^щенти дo лiкyвaння cклaли гpyпy I (n=25), дaлi пpизнaчaли кypc кoмплeкcнoÏ пoлixiмi-oтepaпiÏ зa пpoгpaмoю COP (ЦOП, пoeднaння ци-кJloфocфaмiдy з вiнкpиcтинoм тa пpeднизoлoнoм), якa е «зoлoтим cтaндapтoм» cepeд пpoтoкoлiв пep-виннoÏ тepaпiÏ xpoнiчниx лiмфoлeйкoзiв (Haкaз MO3 УкpaÏни №647 вiд 30. 07. 2010p <^po зaтвepджeн-ня кJliнiчниx пpoтoкoлiв нaдaння мeдичнoÏ дoпoмo-ги xвopим зi cпeцiaльнocтi «Гeмaтoлoгiя» iз дoпo-внeннями згiднo з Haкaзoм MO3 УкpaÏни №72 вiд 30.01.2013p») i umpo^ зacтocoвyeтьcя y пpoфiльниx
Таблиця
Концентращя а1-кислого гл1копроте'Гну (г/л) плазми Kpoei гематолопчно здорових дoнopiв та хворих на ХЛЛ
Група n Рiвень АГП, г/л
Контрольна 20 0,713±0,042
Група хворих на ХЛЛ (до л\кування) 25 1,026±0,067*
Група хворих на ХЛЛ (перша доба з початку проведення курсу стандартно! пол\х\м\отерап\! за схемою ЦОП) 25 0,426±0,041 **
Група хворих на ХЛЛ (через два м\сяц\ п\сля проведення першого курсу стандартноУ х\м\отерап\У за схемою ЦОП) 25 0,572±0,054*
Пpимiтка: *-р<0,05; **-р<0,01 - достов1рна р1зниця у пор1внянш з показниками контрольно!групи.
I група II група III група
■ л1мфоцити Имоноцити ■ гранулоцити
Рис. Змша штенсивност флуоресценцГГ (у %) АГП-позитивних кл1тин KpoBi за умов хрошчного л1мфолейкозу (флуоресцентна м1тка - фшое-
ритрин).
Пpимiтка: норма - штрихована лш1я; дослщжуваш групи: I - до л1кування; II - перша доба з початку проведення курсу стандартно! пол1х1мютерапи за схемою ЦОП; III - через два мюящ п1сля проведення першого курсу стандартно! х1мютерапи за схемою ЦОП; *-р<0,05; **-р<0,01 - достов1рна р1зниця у пор1внянш з показниками контрольно! групи.
онкогематолопчних вщдшеннях [1, 3]. Наступний в1дб1р кров1 проводили тсля першоУ доби вщ початку лкування та через два мюящ тсля проведення першого курсу стандартно! х1мютерапп за схемою ЦОП - II та III група, вщповщно. Групу контролю склали гематолопчно здоров1 волонтери (n=20) у вщ вщ 55 до 65 роюв. Вс пащенти проходили лкування у спец1ал1зовано-му вщдшенш онкогематолопчного центру КЗ мюькоУ багатопрофшьноУ кшшчноУ лкарш №4 ДОР м. Дшпро-петровська (2011-2013рр.). Д1агноз онколопчних захворювань кров1 у хворих дослщжуваноУ групи був верифкованим згщно з загально-прийнятими кшшчними та морфо-лопчними критер1ями, що закр1-плеш Наказом МОЗ УкраУни №554 в1д 17.09.2007р «Про затвердження протокол1в надання медичноУ допо-моги за спец1альн1стю «онколог1я» ¡з доповненнями зг1дно з Наказом МОЗ УкраУни №645 вiд 30.07.2010р. Biдбiр бiологiчного матерiалу вико-нувався згщно принципiв бiоетики та медичноУ деонтологп. Bсi обсте-жуванi в письмовому виглядi давали згоду на участь у дослщженш.
Концентрацiю АГП у плазмi ви-значали методом ¡мунодот з вико-ристанням полiклональних кролячих антитш до АГП. Отриманi результа-ти обчислювали за допомогою про-грами GelProAnalyser 0.32.
Змiну штенсивност флуоресценцiУ АГП-пози-тивних клiтин встановлювали методом проточноУ цитометрiУ з використанням пол^ональних анти-тiл до АГП (Life Span Biosciences, USA) та вторин-них антитш кролика, мiчених фкоеритрином (Santa Cruz, USA). Кшьюсть загиблих клiтин контролювали за Ух зв'язуванням ¡з пропiдiй йодидом. Реестра^ю даних проводили на проточному цитометрi Beckman Coulter EPICS. Обробку результат робили за допомогою програми FC Express.
Статистична обробка даних виконана за допомогою пакета програм Statistics6. 0. Достовiрнiсть вщ-мiнностей в дослiджуваних групах встановлювали за t-критерieм Стьюдента.
Результати дослщжень та Ух обговорення. Концентрацiя АГП плазми кровi у групi хворих на ХЛЛ до лкування достовiрно (р<0,05) вище за норму (табл.). У попередшх дослiдженнях нами було вста-новлено, що при еритремп цей показник в плазмi кровi знижуеться на 32,3±0,6 % [7], а при гострих лейкозах зростае майже вдвiчi [6], що свщчить про
залежн1сть концентрац1У АГП у плазм1 кров1 в1д типу патолопчного процесу.
Пор1вняння концентрац1У АГП у кров1 хворих на ХЛЛ пщ час л1кування показало, що з першоУ доби в1д початку проведення курсу стандартноУ пол1х1м1о-терап1У за схемою ЦОП вщбуваеться р1зке зниження вмюту АГП (б1льше н1ж у 2 рази) (табл.). Цей ефект можна пояснити тим, що алкшуюча тератя досить агресивна до прол1феруючих кл1тин. Внасл1док вве-дення токсичних препарат1в моб1л1зуються захисн1 механ1зми оргашзму. АГП у даному випадку виконуе дез1нтоксикац1йну функц1ю, зв'язуючи та ел1мшуючи ксеноб1отики. 1нша частина АГП переходить з вшьноУ фракц1У \ зв'язуеться з поверхнею ¡мунокомпетент-них кл\тин, забезпечуючи Ух захист.
Однак, через два м\сяц\ п\сля проведення першого курсу х\м\отерап\У р\вень АГП залишаеться значно нижчим за норму (табл.). 3 одного боку це е насл\дком загибел\ швидкопрол\феруючих попу-ляц\й кл\тин, що здатн\ синтезувати АГП. 3 \ншого - це результат токсичного впливу протипухлинних
пpeпapaтiв нa гeпaтoцити [4], щo пpизвoдить дo знижeння Ïx дeзiнтoкcикaцiйнoÏ фyнкцiÏ тa cинтeтич-нoÏ aктивнocтi.
Для бтьш дeтaльнoгo aнaлiзy змiни пepepoзпoдi-лу вiльнoÏ тa зв'язaнoÏ фpaкцiй A^ плaзми кpoвi ми пpoвeли aнaлiз oтpимaниx зpaзкiв мeтoдoм пpoтoч-нoÏ цитoмeтpiÏ. B xoдi дocлiджeння нaми бyлo пoкa-зaнo динaмiкy змш iнтeнcивнocтi eкcпoнyвaння AГП нa пoвepxнi клiтин кpoвi. У гpyпi xвopиx нa xpoнiчний лiмфoлeйкoз дo лiкyвaння iнтeнcивнicть eкcпoнyвaн-ня AГП нa пoвepxнi лiмфoцитiв, мoнoцитiв тa гpaнy-лoцитiв бyлa дocтoвipнo нижчe y пopiвняннi iз нop-мoю: нa 31,1±2,0 o/o (p<0,05), нa 41,0±1,8 o/o (p<0,05) i нa 62,8±2,1 % (p<0,01), вiдпoвiднo (рис.). Слщ вщ-знaчити мaйжe oднaкoвy тeндeнцiю дo зpocтaння кiлькocтi AГП-пoзитивниx кгмтин пiд чac лiкyвaння цитocтaтикaми. Bœe нa пepшiй дoбi вiд пoчaткy кypcy xiмioтepaпiÏ зa cxeмoю ЦOП cпocтepiгaлocь пщви-щeння iнтeнcивнocтi флyopecцeнцiÏ AГП-пoзитивниx клiтин в пopiвняннi iз гpyпoю I. Taк, цe знaчeння дo-cягaлo мeж нopми для лiмфoцитiв тa мoнoцитiв тa дocтoвipнo пiдвищyвaлocь нa 50 % (p<0,05) в пopiв-няннi з кoнтpoльнoю гpyпoю y випaдкy гpaнyлoцитiв. Aнaлoгiчнi дocлiджeння пoпyляцiй клiтин кpoвi y xвo-pиx чepeз 2 мюяц пicля пpoвeдeння пepшoгo кypcy ЦOП-тepaпiÏ виявили, щo iнтeнcивнicть eкcпoнyвaн-ня A^ зpocтaлa як в пopiвняннi з гpyпoю II тaк i з фу-пoю кoнтpoлю. Ta^ дocтoвipнe (p<0,05) пiдвищeння iнтeнcивнocтi eкcпoнyвaння AГП нa 50,1±5,0 % y лiм-фoцитiв, нa 46,3±5,3 % y мoнoцитiв тa нa 32,1±3,0 % y гpaнyлoцитiв в пopiвняннi з нopмoю (pиc.) ^oCTe-piгaлocь y III гpyпi.
Oтpимaнi дaнi пoкaзyють, щo пiд чac лiкyвaння oнкoгeмaтoлoгiчниx xвopиx вiдбyвaeтьcя знижeння плaзмoвoгo piвню AГП тa пiдвищeння йoгo eкcпoнy-вaння нa вcix клiтинax кpoвi. Ocoбливo cлiд вiдзнa-чити, щo пepшими нa цитocтaтичнy тepaпiю вiдпoвi-дaють гpaнyлoцити, кiлькicть A^ нa якиx зpocтae в пepшy дoбy лiкyвaння xвopиx нa XЛЛ. З лiтepaтypниx джepeл вiдoмo, щo AГП мicтитьcя y втopинниx Tpa-нyлax нeйтpoфiлiв, cинтeз виcoкoглiкoзильoвaнoÏ фopми якoгo пiдвищyeтьcя пiд чac зaпaльниx пpo-цeciв [27], з minoro бoкy цeй глiкoпpoтeÏн пoтeнцiюe пpoдyкyвaння aктивниx фopм киcню y пeптид-aкти-вoвaниx нeйтpoфiлiв xeмoтaкcиcy тa пpигнiчye цeй пpoцec пicля фaгoцитoзy [18]. Moжливo, щo зaвдя-ки aктивaцiÏ пpoцeciв фaгoцитoзy пiд впливoм пpo-типyxлиннoÏ тepaпiÏ, пepшим пiдвищyeтьcя piвeнь eкcпoнyвaння AГП нa циx клiтинax. He мeнш пoкaз-нoю бyлa динaмiкa змiни кiлькocтi AГП-пoзитивниx кгмтин cepeд пoпyляцiÏ лiмфoцитiв - y пepший œe дeнь, пicля пpизнaчeння кypcy xiмioтepaпiÏ цeй пo-газник нopмaлiзyвaвcя. A чepeз двa мюяц кть-кicть AГП-пoзитивниx лiмфoцитiв cтaбiлiзyвaлacь нa piвнi 150,1±5,0 % (p<0,05). Лiмфoцити - eдинi клiтини кpoвi, здaтнi дo мoдифiкyвaня влacнoгo пpoлiфepaтивнoгo cтaтycy [13]. I, як пpoлiфepyючa пoпyляцiя клiтин кpoвi, вiдпoвiдaють нa дiю пpoти-пyxлинниx пpeпapaтiв пiдвищeнням кiлькocтi pибo-coмниx гeнiв [12]. Щoдo poлi AГП y зaxиcтi лiмфo-цитiв вiд дiÏ тoкcинiв тa мexaнiзмax мoдифiкyвaння
Ïx пpoлiфepaтивнoгo cтaтycy питaння зaлишaeтьcя вiдкpитим i вимaгae пoдaльшиx дocлiджeнь.
Âиcíîâêи.
1. Bcтанoвлeнo пiдвищeння кoнцeнтpaцiÏ AГП плaзми кpoвi y гpyпi xвopиx нa XЛЛ тa знaчнe зни-жeння (мaйжe в 2,5 paзи) ^oro пoкaзникy в пepшy дoбy тa чepeз двa мicяцi вiд пoчaткy пpoвeдeння i^p-cy ЦOП-тepaпiÏ.
2. У xвopиx нa XЛЛ, в пopiвняннi iз кoнтpoльнoю гpyпoю, пoкaзaнo знижeння iнтeнcивнocтi eкcпoнy-вaння aльфa-1 - киcлoгo глiкoпpoтeÏнy нa пoвepxнi лiмфoцитiв ^a 31,1±2,0 %, p<0,05), мoнoцитiв ^a 41,0±1,8 %%, p<0,05) тa гpaнyлoцитiв (нa 62,8±2,1o/o, p<0,01).
3. Пiд чac лiкyвaння xвopиx нa XЛЛ зa пpoтoкo-лoм ЦOП-тepaпiÏ вiдмiчeнo зaгaльнy тeндeнцiю дo пiдвищeння eкcпoнyвaння A^ нa вcix клiтинax кpoвi.
Пepcпeêтиâи пîдальшиx âîCëiâœeib. Aльфa-1-киcлий глiкoпpoтeÏн пpиcyтнiй нa пoвepxнi мaйжe ycix кттин iмyннoÏ cиcтeми: лiмфoцитiв, тpoмбoци-тiв, нeйтpoфiлiв тa мoнoнyклeapниx клггин. Biн мae piзнocпpямoвaний вплив нa цi клiтини, який зaлeжiть нe тiльки вiд кoнцeнтpaцiÏ, aлe й вщ cтaнy йoгo вуг-лeвoднoгo кoмпoнeнтy [19]. Taк, зa пoпepeднiми дa-ними, oтpимaними в нaшiй лaбopaтopiÏ, зa yмoв XЛЛ змiнюeтьcя cпiввiднoшeння плaзмoвиx глiкoфopм AГП зa poзгaлyжeннocтю глiкaнiв, a caмe ^oCTepi-гaeтьcя знижeння вмicтy бiaнтeнниx вyглeвoдниx гiлoк в йoгo cклaдi. ^й пoкaзник нopмaлiзyeтьcя пicля пpизнaчeння цитocтaтикiв [8]. Biдoмo, щo тaкi глiкoфopми е cпeцифiчними iнгiбiтopaми aнти-CD3-cтимyльoвaнoÏ пpoлiфepaцiÏ лiмфoцитiв, з iншoгo 6o^ - низькi кoнцeнтpaцiÏ AГП-A мoжyть стимулю-вaти пpoлiфepaцiю мoнoнyклeapниx клггин, a caмe мoнoцитiв, T- тa B-лiмфoцитiв [23]. Icнye дyмкa, щo caмe нecпeцифiчнa iмyнocyпpecивнa aктивнicть плaзмoвoÏ фopми AГП е ocнoвнoю пpoблeмoю y oнкoxвopиx, ocкiльки ocлaблeний iмyнний зaxиcт cпpияe бiльшiй вpaзливocтi дo дiÏ iнфeкцiйниx фaк-тopiв [19]. Taким чинoм, пiдвищeння piвню A^ зi знижeним вмicтoм бiaнтeнниx N-глiкaнiв тa iмyнo-cyпpecивнoю aктивнicтю е пoгaним пpoгнocтичним кpитepieм зa yмoв XЛЛ.
Cлiд зayвaжити, щo A^ нe тiльки бeзпocepeд-ньo взaeмoдie iз лiкaми [19], aлe й пpиймae oпoce-peдкoвaнy yчacть y вiдпoвiдi opгaнiзмy нa ввeдeння Tkap^^x зacoбiв. Haпpиклaд, в eкcпepимeнтax in vivo iтaлiйcькими дocлiдникaми пoкaзaнo йoгo знaчнy poль в peзиcтeнтнocтi пyxлиннoÏ лiнiÏ клiтин BCR-ABL+ дo ввeдeння лiкiв, щo e iнгiбiтopaми пpo-цeciв дифepeнцiювaння тa пpoлiфepaцiÏ лeйкeмiчниx клiтин [17]. Дocлiджeння взaeмoзв'язкy впливу ци-тocтaтичниx пpeпapaтiв тa piвню AГП пpoвoдилиcь y xвopиx нa peвмaтoÏдний apтpит. Taк, знижeння кoнцeнтpaцiÏ плaзмoвoÏ фopми цьoгo бiлкy rape-лювaлo iз пoзитивним пpoгнoзoм лiкyвaння тaкиx xвopиx [19]. Щoдo лiкyвaння лeйкoзiв цитocтaтикa-ми тa poлi AГП в циx пpoцecax, дoбpe вивчeними e взaeмoзв'язoк мiж фyнкцioнaльнoю aктивнicтю iмa-нитибу тa piвнeм AГП. Taк, пiдвищeння piвню A^ y xвopиx нa xpoнiчний мieлoлeйкoз acoцiювaлocя iз
зниженням ефективност цього препарату [22]. Ми передбачаемо, що саме так закономмрност мають мюце у випадку хворих на ХЛЛ, що тдлягали пол1-х1мютерапп за схемою ЦОП. Перспективою подаль-ших дослщжень е поглиблене вивчення мехаызммв дЛ компонент протипухлинно! терапи з урахуван-ням шдивщуальних особливостей хворих: в1ку, ваги,
стану оргаызму, а саме систем виведення та зне-шкодження лкарських засоб1в одночасно з ¡ншими бтками, що е активними учасниками ¡мунно! вщпо-вд на введення цитостатикiв. Отриманi результати допоможуть бiльш детально описати вплив цього виду л^вання на оргаызм хворого за умов хроыч-ного лiмфолейкозу.
Л1тература
1. Бiловол О. М. Сучасна тактика лiкування хрошчних лейкозiв / О. М. Бтовол, I. I. Князькова // Внутршня медицина. -2008. - № 3. - С. 37-44.
2. Жевак Т. Н. Хронический лимфолейкоз: современные концепции этиологии, патогенеза и особенностей клинического течения (обзор) / Т. Н. Жевак, Н. П. Чеснокова, Т. В. Шелехова // Саратовский научно-медицинский журнал. - 2011. -Т. 7, № 2. - С. 377-385.
3. Крячок И. А. Современные подходы к терапии первой линии и последние мировые тенденции в лечении диффузной В-крупноклеточной лимфомы / И. А. Крячок, А. В. Мартынчик, Е. С. Филоненко [и др.] // Клиническая онкология. -2011. - № 3 (3). - С. 76-80.
4. Курмуков И. А. Лекарственное поражение печени при лечении онкогематологических заболеваний / И. А. Курмуков // Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. - 2010. - Т. 3, № 1. -С. 60-67.
5. Маслак Г. С. Вплив протипухлинних препарата на вмют глкопротеУшв плазми у хворих на хрошчний лiмфоiдний лейкоз / Г. С. Маслак, Н. С. Паша, О. В. Костюк, О. 3. Бразалук, П. Ю. Каплан // Одеський медичний журнал. - 2013. - № 5 (139). - С. 51-54.
6. Маслак Г. С. Експонування фiбронектину та альфа-1 кислого глкопротешу на поверхш лейкоцита кровi у хворих на гострий лейкоз / Г. С. Маслак, О. В. Костюк, А. О. Кул^ч [та ¡н.] // Медична хiмiя. - 2011. - Т. 13; № 4(49). - С. 42-44.
7. Маслак Г. С. Перерозподт популяцм лейкоцита за експреаею фiбронектину та альфа-1-кислого глкопротешу при еритремп / Г. С. Маслак, I. В. Машейко, А. О. Кул^ч [та ¡н.] // Одеський медичний журнал. - 2010. - Т. XXI; № 6. - С. 4-5.
8. Маслак А. С. Степень разветвленности N-гликанов белков плазмы у больных хроническим лимфолейкозом / А. С. Маслак // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. - 2013. - № 4 (44). - С. 97-100.
9. Новицкий А. В. Проточная цитометрия в дифференциальной диагностике хронических В-клеточных лимфопролифе-ративных заболеваний / А. В. Новицкий, В. Ю. Никитин, И. А. Сухина, В. В. Тыренко, А. М. Иванов // Вестник СевероЗападного государственного медицинского университета им. И. И. Мечникова. - 2011. - Т. 3. - № 2. - С. 149-165.
10. Семочкин С. В. Бендамустин: новый взгляд на терпию хронического лимфолейкоза и индолентных лимфом / С. В. Семочкин // Онкогематология. - 2011. - № Спец. вып. - С. 92-98.
11. Стадник Е. А. Хронический лимфолейкоз. Рекомендации по диагностике и лечению / Е. А. Стадник, В. В. Стругов, Ю. В. Вирц, А. Ю. Зарицкий // Бюллетень Федерального Центра сердца, крови и эндокринологии им. В. А. Алмазова. - 2012. - № 6 (17). - С. 5-15.
12. Трубникова Е. В. Влияние химиотерапии на показатели транскрипционной активности рибосомных генов у больных со злокачественными лимфомами / Е. В. Трубникова, В. П. Иванов, Н. В. Стабровская [и др.] // Архивъ внутренней медицины. - 2012. - № (3). - С. 68-72.
13. Трубникова Е. В. Функциональная активность рибосомных генов у жителей Курской области и вклад полиморфизмов генов факторов их транскрипции и генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков в её формирование: авто-реф. дис. на соискание ученой степени доктора биол. наук: 03. 07. 02 / ТрубниковаЕ. В; Российский университет дружбы народов. - Москва, 2012. - 44 с.
14. Фиясь А. Т. Хронический лимфолейкоз диагностика и лечение / А. Т. Фиясь, Б. И. Френкель // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. - 2011. - № 4(36). - С. 93-97.
15. Eichhorst B. Treatment of elderly patients with chronic lymphocytic leukemia / B. Eichhorst, V. Goede, M. Hallek [et al.] // Leuk Lymphoma. - 2009. - Vol. 50, № 2. - P. 171-178.
16. Flinn I. W. Phase III trial of fludarabine plus cyclophosphamide compared with fludarabine for patients with previously untreated chronic lymphocytic leukemia: US intergroup trial E2997 / I. W. Flinn, D. S., Neuberg M. R. Grever [et al.] // Journal of Clinical Oncology. - 2007. - Vol. 25, № 7 . - Р. 793-798.
17. Gambacorti-Passerini C. Role of a1 Acid Glycoprotein in the In Vivo Resistance of Human BCR-ABL+ Leukemic Cells to the Abl Inhibitor STI571 / C. Gambacorti-Passerini, R. Barni, P. Coutre [et al.] // JNCI J. Natl. Cancer Inst. - 2000. - Vol. 92, № 20. -P. 1641-1650.
18. Gunnarsson P. Sialic acid residues play a pivotal role in alpha(1)-acid glycoprotein (AGP)-induced generation of reactive oxygen species in chemotactic peptide pre-activated neutrophil granulocytes / P. Gunnarsson, L. Fornander, P. Pеhlsson [et al.] // Inflamm. Res. - 2010. - Vol. 59, № 2. - P. 89-95.
19. Hochepied T. Alpha(1)-acid glycoprotein: an acute phase protein with inflammatory and immunomodulating properties / T. Hochepied, F. G. Berger, H. Baumann [et al.] // Cytokine Growth Factor Rev. - 2003. - Vol. 14, № 1. - P. 25-34.
20. Howlader N. SEER Cancer Statistics Review / N. Howlader, A. M. Noone, M. Krapcho [et al.] // National Cancer Institute. -Bethesda, 2009. - 246 р.
21. Keating M. J. Early results of a chemoimmunotherapy regimen of fludarabine, cyclophosphamide, and rituximab as initial therapy for chronic lymphocytic leukemia / M. J. Keating, S. O'Brien [et al.] // J. Clin. Oncol. - 2005. - Vol. 23, № 18. -P. 4079-4088.
22. Le Coutre P. Determination of a1-acid glycoprotein in patients with Ph+ chronic myeloid leukemia during the first 13 weeks of therapy with STI571 / P. le Coutre, K. A. Kreuzer [et al.] // Blood Cells Mol Dis. - 2002. - № 28. - P. 75-85.
23. Pos O. Con A-nonreactive human alpha-1-acid glycoprotein (AGP) is more effective in modulation of lymphocyte proliferation than Con A-reactive AGP serum variants / O. Pos, R. A. Oostendorp, M. E. van der Stelt [et al.] // Inflammation. - 1990. - Vol. 14, № 2. - P. 133-141.
24. Rai K. R. A critical analysis of staging in CLL. Chronic Lymphocytic Leukemia: recent progress and future directions / K. R. Rai, R. P. Gale [et al.] // Alan R. Liss Inc., NewYork, 1987. - P. 253-264.
25. Rawstron A. C. International standardized approach for flow cytometric residual disease monitoring in chronic lymphocytic leukaemia / A. C. Rawstron, N. Villamor, M. Ritgen [et al.] // Leukemia. - 2007. - Vol. 21, № 5. - P. 956-964.
26. Ruta Rao The combination of fludarabine, cyclophosphamide, and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor in the treatment of patients with relapsed chronic lymphocytic leukemia and low-grade Non-Hodgkin's lymphoma/ Rao Ruta, M. Jamile, Sari Shammo [et al.] // Clinical Lymphoma. - 2005. - Vol. 6, № 1. - P. 26-30.
27. Theilgaard-Munch K. Highly glycosylated a1-acid glycoprotein is synthesized in myelocytes, stored in secondary granules, and released by activated neutrophils / K. Theilgaard-Munch, L. S. Jacobsen, T. Rasmussen [et al.] // J. Leukoc. Biol. - 2005. - Vol. 78, № 2. - P. 462-470.
УДК 577. 112. 85:616. 155. 3:502. 175:616. 155. 392-036. 1-08:615. 277
ДИНАМ1КА 3MIH Р1ВНЯ ПЛАЗМОВОГО ТА АСОЦ1ЙОВАНОГО 13 ПОВЕРХНЕЮ КЛ1ТИН КРОВ1 ГО-СТРОФАЗОВОГО альфа-1-кислого ГЛ1КОПРОТЕШУ ЗА КОМБ1НОВАНО1 Х1МЮТЕРАПП ХРОН1ЧНОГО Л1МФО1ДНОГО ЛЕЙКОЗУ
Маслак Г. С., Машейко I. В., Паша Н. С., Каплан П. Ю., Бразалук О. 3.
Резюме. В po6oTi вперше дослщжено та проанал1зовано динам1ку змш р1вня альфа-1-кислого глкопро-тешу (АГП) плазми та Ытенсивност флуоресценци АГП-позитивних кгмтин кpoвi у хворих на хроычний лiмфo-лейкоз (ХЛЛ), що отримували лкування за схемою кoмбiнацiI циклофосфамщу з вiнкpистинoм та предызо-лоном (ЦОП-тератя). Визначено пiдвищення кoнцентpацiI АГП плазми кpoвi у гpупi хворих на ХЛЛ та значне зниження (майже в 2,5 рази) цього показнику в першу добу та через два мюяц вщ початку проведення курсу ЦОП-терапи. За допомогою проточно! цитометри показано зниження штенсивност експонування альфа-1-кислого глкопротешу на поверхн лiмфoцитiв, мoнoцитiв та гранулоци^в за умов хpoнiчнoгo лiмфoлейкoзу в пopiвняннi iз контрольною групою на: 31,1±2,0 % (р<0,05), на 41,0±1,8 % (р<0,05) i на 62,8±2,1 % (р<0,01), вiдпoвiднo. Зростання пoпуляцiI АГП-позитивних кгмтин кpoвi було встановлено пщ час лiкування цитостати-ками. Отриман данi можуть бути корисними для розумЫня бioхiмiчних пpoцесiв пiд час проведення л^ван-ня цитостатиками за участю АГП та оцшки ефективност цieI теpапiI у хворих на ХЛЛ.
Kлючoвi слова: хpoнiчний лiмфoIдний лейкоз, альфа-1 -кислий глiкoпpoтеIн, проточна цитoметpiя, ЦОП-теpапiя.
УДК 577. 112. 85:616. 155. 3:502. 175:616. 155. 392-036. 1-08:615. 277
ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЙ УРОВНЯ ПЛАЗМЕННОГО И АССОЦИИРОВАННОГО С ПОВЕРХНОСТЬЮ КЛЕТОК КРОВИ ОСТРОФАЗОВОГО альфа-1-кислого ГЛИКОПРОТЕИНА ПОД ДЕЙСТВИЕМ КОМБИНИРОВАННОЙ ХИМИОТЕРАПИИ ХРОНИЧЕСКОГО ЛИМФОИДНОГО ЛЕЙКОЗА
Маслак А. С., Машейко И. В., Паша Н. С., Каплан П. Ю., Бразалук А. З.
Резюме. В работе впервые проведено исследование и анализ динамики изменений уровня альфа-1-кислого гликопротеина (АГП) плазмы и интенсивности флуоресценции АГП-положительных клеток крови у больных хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ), получавших лечение по схеме комбинации циклофосфамида с винкристином и преднизолоном (ЦОП-терапия). Показано повышение концентрации АГП плазмы крови в группе больных ХЛЛ и значительное снижение (почти в 2,5 раза) этого показателя в первые сутки и через два месяца после начала проведения курса ЦОП-терапии. С помощью проточной цитометрии показано снижение интенсивности экспонирования альфа-1 - кислого гликопротеина на поверхности лимфоцитов, моноцитов и гранулоцитов в условиях хронического лимфолейкоза по сравнению с контрольной группой на: 31,1 ± 2,0 % (р <0,05), на 41 0 ± 1,8 % (р <0,05) и на 62,8 ± 2,1 % (р <0,01), соответственно. Рост популяции АГП-позитивных клеток крови под действием лечения цитостатиками был установлен в ходе эксперимента. Полученные данные могут быть полезны для понимания биохимических процессов во время проведения лечения цитостатиками с участием АГП и оценки эффективности этой терапии у больных ХЛЛ.
Ключевые слова: хронический лимфоидный лейкоз, альфа-1-кислый гликопротеин, проточная цито-метрия, ЦОП-терапия.
UDC 577. 112. 85:616. 155. 3:502. 175:616. 155. 392-036. 1-08:615. 277
Dynamics of Level Changes of Plasma and Blood Cells Acute Phase Alpha-1-Acid Glycoprotein under the Influence of Polychemotherapy in Patients with Chronic Lymphocytic Leukemia
Maslak G. S., Masheyko I. V., Pasha N. S., Kaplan P. Y., Brazaluk O. Z.
Abstract. Introduction. Chronic lymphocytic leukemia (CLL), is the most common type of leukemia in adults. Treatment options for CLL vary greatly, depending on the person's age, the disease risk group, and the reason for treating (like the symptoms the leukemia is causing). Commonly used treatments for patients with high-risk CLL (stages II and III) include COP-therapy: cyclophosphamide, oncovin (vincristine), and prednisone. It is the most
effective and toxic type of treatment. Efficiency gains treatment is determined by the change in the number of abnormal cells. There is very little information about the effects of this type of treatment for acute phase proteins in the literature. While these proteins such as alpha-1-acid glycoprotein plays an important role in processes related to immune system reactions to the treatment.
Objective. To investigate and analyze of changes in the level of alpha-1-acid glycoprotein (AGP) and the fluorescence intensity of AGP-positive blood cells in patients with chronic lymphocytic leukemia patients treated with the combination of cyclophosphamide scheme with vincristine and prednisolone (COP-therapy).
Methods. Blood and plasma of hematological healthy volunteers (n=20) in age 55-65 years was used as control. Patients with CLL in stages II or III, accordingly K. R. Rai classification,(n=25, age 58-66) before treatment - group I. Group II and III composed CLL patients in the first day of the beginning of a course of standard COP-chemotherapy and in two months after the first course of COP-chemotherapy, respectively. AGP plasma level was determined by dot-analyses with AGP antibodies and analyzed by GelProAnalyserO. 32. AGP exponation on lymphocytes, monocytes and granulocytes was investigated by flow cytometer Beckman Coulter EPICS with primary AGP-anybodies (Life Span Biosciences, USA) and secondary phicoeritrin-labeled antibodies (Santa Cruz, USA). The number of dead cells was monitored by binding them with propidiumiodide. Result analyzed with FC Express. Statistical analysis was performed using the software package Statistics6. 0. Statistical significance of differences in study groups was established by the Student t-test.
Results. It was shown an increase of plasma AGP concentration in patients with CLL and a significant decreased (about 2. 5 times) of this parameter on the first day and two months after the start of the course COP-therapy. Flow cytometry was revealed a decreased of alpha-1-acid glycoprotein exponation on the surface of lymphocytes, monocytes and granulocytes in chronic lymphocytic leukemia in comparison with the control group by: 31.1±2.0 % (p<0. 05) at 41. 0±1. 8 % (p<0. 05) and 62. 8±2. 1% (p<0. 01), respectively. An increasing of AGP-positive blood cells by the action of cytostatic treatment in the experiment was shown.
Conclusions. Obtained data could be useful for the understanding of the biochemical processes during cytostatic treatment with participation of AGP and estimation of efficiency of this therapyin patients with CLL.
Key words: chronic lymphocytic leukemia, alpha-1-acid glycoprotein, flow cytometry, COP-therapy.
Рецензент - проф. Скрипник I. M.
Стаття надшшла 25. 03. 2014 р.
