CC BY
0Южно-Российский онкологический журнал. 2024. Т. 5, № 2. С. 43-52
4.0
https://doi.org/10.37748/2686-9039-2024-5-2-5
https://elibrary.ru/nusqxr
Южно-Российский
онкологический журнал
3.1.6. Онкология, лучевая терапия
South Russian Journal
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
of Cancer
Tом 5
№ 2, 2024
Динамика уровней цитокинов слюны при проведении
интраоперационной фотодинамической терапии у больных
местно-распространенным раком полости рта
Е. Ю. Комарова1, Е. Ю. Златник1, Е. Ф. Комарова1,2, И. А. Новикова1, Е. А. Дженкова1, М. А. Енгибарян1, А. Б. Сагакянц1, В. В. Позднякова1, Л. Я. Розенко1
1ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
2ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
lil_liza777@mail.ru
РЕЗЮМЕ
Цель исследования. Оценка уровня некоторых цитокинов в слюне больных первичным местно- распространенным
раком слизистой оболочки полости рта при дополнении хирургического лечения интраоперационной ФДТ (ИФДТ).
Пациенты и методы. Пациенты первичным местно- распространенным раком слизистой оболочки полости рта
T3-4аN0-2M0 были распределены в 2 группы: основная группа (30 больных) – проведено радикальное удаление
опухоли, дополненное ИФДТ и контрольная группа (30 пациентов) – без дополнения. ИФДТ проводили с помощью
«Латус- Т» (фара) и фотосенсибизатором хлорин Е6. Уровни цитокинов определяли в нестимулированной цельной
слюне за сутки до, на 3-и и на 7-е сутки после проведения операции методом ИФА мультиплекс- анализа.
Результаты. Показана сходная динамика цитокинового профиля больных обеих групп: на 3-и сутки после операции
уровни G-CSF, IL-6, MIP-1β повышались, а GМ-CSF и IFN-γ снижались по сравнению с исходными показателями. На 7-е
сутки характер динамики G-CSF, GМ-CSF, IL-6 сохранялся, а IL-8, IL-10, IL-12 менялся на противоположный.
Межгрупповые различия выявлены по уровню IL-1β – на 3-и сутки повышение в основной и снижение в контрольной
группе. Уровень IL-7 на 7-е сутки резко снижался в контрольной группе и статистически значимо повышался у больных, получавших ИФДТ. В основной группе показано 4,8-кратное повышение IL-8 на 3-и сутки и его 3,6-кратное падение на
7-е с противоположной динамикой в контрольной. Уровень TNF-α возрастал только в основной группе на 7-е сутки, а в контрольной отмечено его снижение на 3-и и восстановление на 7-е сутки. На 3-и сутки уровень MCP-1 возрастал
в основной и снижался в контрольной группе. Уровень IL-17 в основной группе нарастал на 3-и сутки с дальнейшим
снижением ниже исходного, а в контрольной группе снижался на 3-и сутки с последующим восстановлением на 7-е.
Нарастание уровней IL-5 и IL-13 на 3-и сутки отмечены только в контрольной группе, однако уровень IL-5 в оба срока
исследования в основной группе был ниже, чем в контрольной.
Заключение. ИФДТ у больных первичным местно- распространенным раком полости рта вызывает изменения цитокинового состава слюны в течение первой недели после операции, часть из которых можно связать с удлинением
безрецидивного периода у таких пациентов.
Ключевые слова: интраоперационная фотодинамическая терапия, цитокины, слюна, первичный
местно-распространенный рак полости рта
Для цитирования: Комарова Е. Ю., Златник Е. Ю., Комарова Е. Ф., Новикова И. А., Дженкова Е. А., Енгибарян М. А., Сагакянц А. Б., Позднякова В. В., Розенко Л. Я. Динамика уровней цитокинов слюны при проведении интраоперационной фотодинамической терапии у больных местнораспространенным раком полости рта. Южно- Российский онкологический журнал. 2024; 5(2):43-52.
https://doi.org/10.37748/2686-9039-2024-5-2-5, https://elibrary.ru/nusqxr Для корреспонденции: Комарова Елизавета Юрьевна – аспирант, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии»
Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на- Дону, Российская Федерация
Адрес: 344037, Российская Федерация, г. Ростов-на- Дону, ул. 14-я линия, д. 63
E-mail: lil_liza777@mail.ru
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-1252-8094
SPIN: 9372-1954, AuthorID: 1198314
Scopus Author ID: 57217081452
Соблюдение этических стандартов: в работе соблюдались этические принципы, предъявляемые Хельсинкской декларацией Всемирной
медицинской ассоциации (World Medical Association Declaration of Helsinki, 1964, ред. 2013). Исследование одобрено этическим комитетом
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации (выписка из
протокола заседания № 15 от 12.10.2021 г.). Информированное согласие получено от всех участников исследования
Финансирование: финансирование данной работы не проводилось
Конфликт интересов: Златник Е. Ю., Дженкова Е. А., Енгибарян М. А. являются членами редакционной коллегии журнала «Южно- Российский
онкологический журнал» с 2019 г., но не имеют никакого отношения к решению опубликовать эту статью. Статья прошла принятую в журнале
процедуру рецензирования. Об иных конфликтах интересов авторы не заявляли
Статья поступила в редакцию 16.11.2023; одобрена после рецензирования 08.02.2024; принята к публикации 09.05.2024
© Комарова Е. Ю., Златник Е. Ю., Комарова Е. Ф., Новикова И. А., Дженкова Е. А., Енгибарян М. А., Сагакянц А. Б., Позднякова В. В., Розенко Л. Я., 2024
43
South Russian Journal of Cancer. 2024. Vol. 5, No. 2. P. 43-52
https://doi.org/10.37748/2686-9039-2024-5-2-5
https://elibrary.ru/nusqxr
ORIGINAL ARTICLE
Dynamics of saliva cytokine levels during intraoperative photodynamic therapy in patients with locally advanced oral cancer
E. Yu. Komarova1, E. Yu. Zlatnik1, E. F. Komarova1,2, I. A. Novikova1, E. A. Dzhenkova1, M. A. Engibaryan1, A. B. Sagakyants1, V. V. Pozdnyakova1, L. Ya. Rozenko1
1National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation 2Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Russian Federation lil_liza777@mail.ru
ABSTRACT
Purpose of the study. Assessment of the level of certain cytokines in the saliva of patients with primary locally advanced cancer of the oral mucosa in addition to surgical treatment with intraoperative PDT (IPDT).
Patients and methods. Patients with primary locally advanced cancer of the oral mucosa T3-4aN0-2M0 were divided into 2 groups: the main group (30 patients) underwent radical tumor removal supplemented with IPDT and the control group (30 patients) without addition. IPDT was performed using Latus- T (farah) and a chlorin E6 photosensitizer. Cytokine levels were determined in unstimulated whole saliva the day before, on the 3rd and on the 7th day after the operation by the ELISA multiplex analysis method.
Results. A similar dynamic of the cytokine profile of patients of both groups was shown: on the 3rd day after surgery, the levels of G-CSF, IL-6, MIP-1β increased, and GM-CSF and IFN-γ decreased compared with baseline values. On the 7th day, the dynamics of G-CSF, GM-CSF, IL-6 persisted, while IL-8, IL-10, IL-12 changed to the opposite.
Intergroup differences were revealed in the level of IL-1β – on day 3, an increase in the main group and a decrease in the control group. The level of IL-7 on day 7 decreased sharply in the control group and increased statistically significantly in patients receiving IPDT. The main group showed a 4.8-fold increase in IL-8 on day 3 and its 3.6-fold drop on day 7 with the opposite dynamics in the control group. The TNF-α level increased only in the main group on day 7, and in the control group it decreased by 3 and recovered on day 7. On day 3, the MCP-1 level increased in the main group and decreased in the control group. The level of IL-17 in the main group increased on the 3rd day with a further decrease below the baseline, and in the control group it decreased on the 3rd day, followed by a recovery on the 7th. An increase in IL-5 and IL-13 levels on day 3 was noted only in the control group, however, the level of IL-5 in both study periods in the main group was lower than in the control group.
Conclusion. IPDT in patients with primary locally advanced oral cancer causes changes in the cytokine composition of saliva during the first week after surgery, some of which can be associated with an elongation of the relapse-free period in such patients.
Keywords: intraoperative photodynamic therapy, cytokines, saliva, primary locally advanced oral cancer For citation: Komarova E. Yu., Zlatnik E. Yu., Komarova E. F., Novikova I. A., Dzhenkova E. A., Engibaryan M. A., Sagakyants A. B., Pozdnyakova V. V., Rozenko L. Ya. Dynamics of saliva cytokine levels during intraoperative photodynamic therapy in patients with locally advanced oral cancer. South Russian Journal of Cancer. 2024; 5(2):43-52. (In Russ.). https://doi.org/10.37748/2686-9039-2024-5-2-5, https://elibrary.ru/nusqxr For correspondence: Elizaveta Yu. Komarova – PhD student National Medical Research Centre for Oncology, Rostov-on-Don, Russian Federation Address: 63 14 line str., Rostov-on-Don 344037, Russian Federation E-mail: lil_liza777@mail.ru
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-1252-8094
SPIN: 9372-1954, AuthorID: 1198314
Scopus Author ID: 57217081452
Compliance with ethical standards: the work followed the ethical principles set forth by the World Medical Association Declaration of Helsinki, 1964, ed.
2013. The study was approved by the Ethics Committee of the National Medical Research Center of Oncology (extract from the protocol of the meeting No. 15
dated 10/12/2021). Informed consent was received from all participants of the study Funding: this work was not funded
Conflict of interest: Zlatnik E. Yu., Dzhenkova E. A., Engibaryan M. A. have been the member of the editorial board of the South Russian Journal of Cancer since 2019, however he has no relation to the decision made upon publishing this article. The article has passed the review procedure accepted in the journal.
The authors did not declare any other conflicts of interest The article was submitted 16.11.2023; approved after reviewing 08.02.2024; accepted for publication 09.05.2024
44
Южно-Российский онкологический журнал 2024. Т. 5, № 2. С. 43-52
Комарова Е. Ю., Златник Е. Ю., Комарова Е. Ф., Новикова И. А., Дженкова Е. А., Енгибарян М. А., Сагакянц А. Б., Позднякова В. В., Розенко Л. Я. Динамика
уровней цитокинов слюны при проведении интраоперационной фотодинамической терапии у больных местно- распространенным раком полости рта
АКТУАЛЬНОСТЬ
Цель исследования: оценка уровня некоторых
цитокинов в слюне больных первичным местно-
В настоящее время признано, что под влиянием
распространенным раком слизистой оболочки по-
воспаления неопластические и стромальные клет-
лости рта при дополнении хирургического лечения
ки взаимодействуют и контролируют эволюцию
интраоперационной ФДТ (ИФДТ).
опухоли, продуцируя цитокины, которые модули-
руют противоопухолевый иммунный ответ [1–3].
ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ
Продемонстрировано сходство цитокинового пат-
терна для опухолей различной локализации и гис-
В группу исследования были включены 60 паци-
тогенеза [4], однако нет единого мнения, играют
ентов первичным местно- распространенным раком
ли цитокины решающую проонкогенную или анти-
слизистой оболочки полости рта, находившихся
онкогенную роль [5]. Как ту, так и другую можно
на лечении отделения опухолей головы и шеи
предположить исходя из известных биологических
ФГБУ «Национальный медицинский исследователь-
свой ств цитокинов как стимуляторов, с одной сто-
ский центр онкологии» Министерства здравоохра-
роны, пролиферации и неоангиогенеза, а с другой
нения Российской Федерации. Средний возраст
стороны – иммунного ответа.
пациентов составил 63,1 ± 14,3 года. Распределение
В последние десятилетия показано участие раз-
пациентов по полу составило: мужского – 48 че-
личных про- или противовоспалительных цитокинов
ловек, женского – 12 человек. У всех пациентов
опухолевого микроокружения плоскоклеточного
диагноз был морфологически верифицирован
рака полости рта в онкогенезе опухоли данной лока-
и соответствовал III–IV стадиям (T3-4аN0-2M0) он-
лизации [6–8]. Большинство исследований описыва-
кологического заболевания. По морфологической
ют повышенные уровни IL-1β, 6, 8, 10, TNF-α у боль-
структуре опухоли были представлены плоскокле-
ных раком полости рта по сравнению со здоровыми
точным раком, из них умеренно дифференцирован-
как на локальном, так и на системном уровне [9, 10].
ный – 79 %, высокодифференцированный – 16 %
Более того, было продемонстрировано большее
и низкодифференцированный – 5 %.
содержание IL-1β и IL-6 в опухоли слизистой обо-
Пациенты были рандомизированы в 2 группы:
лочки полости рта, чем в участках неизмененной
основная группа (30 больных) – пациенты, кото-
слизистой [11]. Данные литературы показывают, что
рым проведено радикальное удаление опухоли,
гиперпродукция цитокинов клетками опухоли и ее
дополненное ИФДТ, и контрольная группа (30 паци-
микроокружения у больных раком полости рта явля-
ентов) – без дополнения. Пациенты в группах были
ется одной из причин распространения опухоли.
сопоставимы по возрасту, полу и по локализации
Таким образом, при разработке подходов к ле-
первичного очага. Всем пациентам производилось
чению рака полости рта представляется важным
хирургическое вмешательство в объеме радикаль-
анализ локального и системного цитокинового
ного удаления опухоли языка и слизистой оболочки
статуса таких пациентов, а также индукция про-
полости рта с шейной лимфаденэктомией в объеме,
тивоопухолевого иммунного ответа. Последнее
адекватном распространенности опухолевого про-
возможно осуществить посредством использова-
цесса, на стороне поражения или двухсторонняя
ния фотодинамической терапии (ФДТ), одним из
(при поражении передних отделов полости рта).
механизмов противоопухолевой эффективности
Проведение исследования было одобрено эти-
которой является иммуногенная гибель клеток [12].
ческим комитетом ФГБУ «Национальный медицин-
ФДТ индуцирует ее через высвобождение молеку-
ский исследовательский центр онкологии» Мини-
лярных паттернов, ассоциированных с поврежде-
стерства здравоохранения Российской Федерации
ниями (DAMPs) [13]. Индуцированные ФДТ острое
протокол № 15 от 12.10.2021 г., всеми больными
воспаление и иммуногенная гибель клеток счита-
было подписано добровольное информированное
ются начальным шагом реализации ее иммуности-
согласие.
мулирующего действия [14], которое проявляется
ИФДТ проводили в соответствии с разрабо-
в опухолеспецифическом иммунном ответе [15].
танным и запатентованным способом (Патент
Роль и место иммунных механизмов в реализа-
РФ № 2797433) [15]. На первом этапе больным
ции противоопухолевого эффекта ФДТ обобщены
местно- распространенным раком слизистой обо-
в недавнем обзоре [14].
лочки полости рта и языка проводили хирурги-
45
South Russian Journal of Cancer 2024. Vol. 5, No. 2. P. 43-52
Komarova E. Yu., Zlatnik E. Yu., Komarova E. F., Novikova I. A., Dzhenkova E. A., Engibaryan M. A., Sagakyants A. B., Pozdnyakova V. V., Rozenko L. Ya. Dynamics of saliva cytokine levels during intraoperative photodynamic therapy in patients with locally advanced oral cancer ческое лечение, а затем, после гемостаза после-РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
операционной раны полости рта, проводили ФДТ,
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
предварительно закрыв здоровые окружающие
ткани вокруг операционного поля стерильными
Результаты исследования представлены на
восьмислойными марлевыми салфетками. Для
рис. 1А-1Г, 2А-2Г.
сеанса использовали «Латус- Т» (фару), с параме-
На 3-и сутки после операции у больных обеих
трами: длина волны 662 нм, плотность мощности
групп уровни G-CSF, IL-6, MIP-1β повышались
45 мВт, световая энергия 200–300 Дж/см2. Лампу
(рис. 1А), а GМ-CSF и IFN-γ снижались (рис. 1Б) по
размещали таким образом, что площадь излучения
сравнению с исходными показателями; содержание
лазерного света охватывала как ложе удаленной
остальных цитокинов было разнонаправленным
опухоли, так и края операционной раны. Продолжи-
в сравниваемых группах больных. Часть показа-
тельность воздействия рассчитывалась в зависи-
телей менялась статистически значимо только
мости от размера ложа удаленной опухоли полости
в одной из групп, что, по-видимому, связано с дей-
рта по формуле: T = T0 × nw/kp, где T0 – табличное
ствием ИФДТ (рис. 1В, 1Г).
значение времени облучения, nw – коэффициент,
На 7-е сутки характер динамики G-CSF, GМ-CSF,
показывающий во сколько раз плотность энергии
IL-6, сохранялся, IL-8, IL-10, IL-12 менялся на про-
WS (Дж/см2), которую необходимо набрать поверх-
тивоположный, уровни остальных цитокинов меня-
ности, отличается от табличной WS/0 = 100 Дж/см2:
лись в основной и контрольной группах различным
nw = WS/100, kp – коэффициент, показывающий
образом (рис. 2А-Г).
во сколько раз мощность лазера отличается от
Выявлены различия между основной и контроль-
табличной P0 = 100 мВт: kp = P/100. После заверше-
ной группами по уровням колониестимулирующих
ния этапа фотодинамической терапии, выполняли
факторов: возрастание G-CSF и снижение GМ-CSF
пластику послеоперационного дефекта. В качестве
как на 3-и, так и на 7-е сутки после операции по
фотосенсибилизатора использовали хлорин Е6,
сравнению с исходными показателями, причем
который вводили внутривенно капельно в разовой
в основной группе изменения G-CSF менее выраже-
дозе 2 мг на 1 кг веса пациента за 3–3,5 часа до
ны, чем в контрольной, и в оба срока исследования
предполагаемого времени окончания удаления
находились на более низких значениях (рис. 1А, 2А).
опухоли. Проводили оценку ближайших результа-
Так, в контрольной группе уровень G-CSF возрастал
тов комплексного лечения, дополненного ИФДТ
на 3-и сутки после операции в 22,8 раза, а в основ-
у больных местно- распространенным раком сли-
ной – в 13 раз, а на 7-е сутки он был выше исходного
зистой полости рта.
в 22,2 и в 4,8 раза соответственно, т. е. снижение
Уровни цитокинов (G-CSF, GМ-CSF, IFN-γ, IL-1β, IL-2,
на 7-е сутки после первоначального возрастания
IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17, MCP-1, на 3-и происходило только после действия ФДТ.
MIP-1β, TNF-α) определяли в слюне методом ИФА
Уровни IL-1β на 3-и сутки повышались в основ-
мультиплекс- анализа (Bio- Plex Pro Human Cytokine
ной группе с 410,1 [321,9; 522,6] до 550,8 [528,7; 590,6]
Assays 17-Plex Panel, Bio- Rad, USA). Забор нести-
пг/мл и снижались в контрольной до 102,1 [22,1;
мулированной цельной слюны для исследования
159] пг/мл, а на 7-е – наблюдалась обратная кар-
проводили с 8 до 9 утра за сутки до операции, на
тина (рис. 1Б, 2Б).
3-и и на 7-е сутки после ее проведения. Результаты
Отмечено 3,3-кратное по сравнению с исход-
выражали в пг/мл.
ным повышение IL-6 в слюне больных обеих
Статистический анализ результатов исследова-
групп на 3-и сутки, которое продолжалась и на
ния проводили с помощью программы Statistica
7-е с более высокими показателями в основной
12.0 (StatSoft Inc., США), MedCalc (версия 9.3.5.0).
группе (1856,2 [1753,1; 1975] против 1356,9 [1261,3;
Поскольку распределение не было нормальным,
1450,7] пг/мл, p < 0,05), (рис. 1А, 2А).
для сравнения межгрупповых показателей исполь-
Динамика IL-7 заключалась в повышении на
зовали критерий Манна- Уитни, а для сравнения
3-и сутки после операции уровня этого цитокина
показателей в динамике – критерий Уилкоксона;
в слюне больных обеих групп, статистически значи-
различия считали статистически значимыми при
мым только в контрольной группе (на 53 %) и раз-
р < 0,05. Данные приведены в виде медианы с верх-нонаправленности на 7-е сутки – резком падении
ним и нижним квартилями (Ме [LQ, UQ]).
(до 0) в контрольной группе и продолжающемся
46
Южно-Российский онкологический журнал 2024. Т. 5, № 2. С. 43-52
Комарова Е. Ю., Златник Е. Ю., Комарова Е. Ф., Новикова И. А., Дженкова Е. А., Енгибарян М. А., Сагакянц А. Б., Позднякова В. В., Розенко Л. Я. Динамика
уровней цитокинов слюны при проведении интраоперационной фотодинамической терапии у больных местно- распространенным раком полости рта
нарастании, достигшем статистической значимости
2Б). Уровень TNF-α возрастал только в основной
(15,3 [13,6; 17,2] против 10,2 [6,8; 13,5] до лечения;
группе на 7-е сутки, а в контрольной отмечено его
p < 0,05) у больных, получавших ИФДТ.
снижение на 3-и и восстановление на 7-е сутки
В основной группе показано выраженное
(рис. 1Г, 2Г). На 3-и сутки отмечена разнонаправлен-
(4,8-кратное) транзиторное повышение содер-
ная динамика уровней MCP-1: возрастание в основ-
жания IL-8 на 3-и сутки и его 3,6-кратное паде-
ной группе и снижение в контрольной (рис. 1Г), а на
ние на 7-е; в контрольной группе оно, напротив,
7-е в обеих группах показатели становятся в 3,5
снижалось на 3-и сутки и возрастало на 7-е, пре-
и 4,6 раз соответственно ниже исходного (рис. 2Г).
вышая в последний срок показатель основной
Содержание MIP-1β имеет сходную динамику в обе-
группы (Ме 2883,1 [2621,8; 3338,2] и 2006,4 [1934,3;
их группах, повышаясь на 3-и и возвращаясь к ис-
2310,4] пг/мл соответственно, p < 0,05), (рис. 1А, ходным на 7-е сутки после операции (рис. 1А, 2Г).
2500
40
2000
20
о операции
о операции
1500
0
1000
- 20
т значений д
т значений д
500
- 40
тличия о
0
тличия о
- 60
% о
% о
-500
- 80
G-CSE
IL-6
IL-8
IL-13
MIP-1β
GM-CSF
IFN-γ
IL-1β
IL-4
Основная, 3 с
Основная, 3 с
А
Б
Контрольная, 3 с
Контрольная, 3 с
30
60
20
10
50
о операции
о операции
0
40
-10
-20
30
-30
т значений д
т значений д
20
-40
-50
тличия о
10
тличия о
-60
% о
% о
0
-70
IL-5
IL-7
IL-10
IL-12
IL-2
IL-17
MCP-1
TNF-α
Основная, 3 с
Основная, 3 с
В
Г
Контрольная, 3 с
Контрольная, 3 с
Рис. 1. Концентрация цитокинов в слюне больных на 3 сутки после операции.
Примечание: * – статистически значимые отличия по сравнению с уровнем до операции, р < 0,05; ** – статистически
значимые отличия по сравнению с уровнем контрольной группы, р < 0,05
47
South Russian Journal of Cancer 2024. Vol. 5, No. 2. P. 43-52
Komarova E. Yu., Zlatnik E. Yu., Komarova E. F., Novikova I. A., Dzhenkova E. A., Engibaryan M. A., Sagakyants A. B., Pozdnyakova V. V., Rozenko L. Ya. Dynamics of saliva cytokine levels during intraoperative photodynamic therapy in patients with locally advanced oral cancer Наблюдалось снижение IFN-γ и IL-4, в основной
IL-2 в виде повышения выявлена только в кон-
группе выраженное только на 7-е сутки с показа-
трольной группе на 7-е сутки (Ме 29,6 [26,9; 30,7]
телями в этот срок ниже контрольных (рис. 2Б).
против 21,4 [17,4; 25,5] пг/мл до лечения, p < 0,05), Медиана уровня IFN-γ в основной группе на 7-е
(рис. 2В).
сутки составляла 4,7 [4,2; 5,2] пг/мл, а в контроль-
Снижение уровня IL-12 происходит в обеих
ной 6,8 [6,3; 7,4] пг/мл против 10,6 [8,4; 12,4] пг/
группах на 7-е сутки (рис. 2В), причем оно менее
мл до лечения; для IL-4 показатели были 4,1 [3,2;
выражено в основной, чем в контрольной группе
4,7] и 8,6 [7,2; 8,9] против 10,9 [8,7; 14,2] пг/мл соот-
(Ме 11,7 [10,6; 12,8] и 7,9 [7,2; 9,3] соответственно
ветственно; для обоих цитокинов различия между
против 14,7 [13,5; 16,7] пг/мл до лечения; p < 0,05) показателями основной и контрольной групп ста-только для контрольной группы), что можно рас-
тистически значимы ( p < 0,05). Динамика уровней
ценить положительно, учитывая роль этого цитокина
100
2500
80
60
о операции 2000
о операции
40
20
1500
0
-20
т значений д 1000
т значений д
-20
-40
тличия о
500
тличия о
-60
% о
% о
-80
0
-100
G-CSF
IL-6
IFN-γ
IL-1β
IL-4
IL-7
IL-8
IL-10
Основная, 7 с
A
Основная, 7 с
Б
Контрольная, 7 с
Контрольная, 7 с
40
30
30
20
10
20
о операции
о операции
0
10
-10
0
-20
-10
-30
т значений д
т значений д
-20
-40
-50
-30
тличия о
тличия о
-60
% о
-40
% о
-70
-50
-80
GM-CSF
IL-2
IL-5
IL-12
IL-13
IL-17
MCP-1
MIP-1β
TNF-α
Основная, 7 с
В
Основная, 7 с
Г
Контрольная, 7 с
Контрольная, 7 с
Рис. 2. Концентрация цитокинов в слюне больных на 7 сутки после операции.
Примечание: * – статистически значимые отличия по сравнению с уровнем до операции, р < 0,05; ** – статистически
значимые отличия по сравнению с уровнем контрольной группы, р < 0,05
48
Южно-Российский онкологический журнал 2024. Т. 5, № 2. С. 43-52
Комарова Е. Ю., Златник Е. Ю., Комарова Е. Ф., Новикова И. А., Дженкова Е. А., Енгибарян М. А., Сагакянц А. Б., Позднякова В. В., Розенко Л. Я. Динамика
уровней цитокинов слюны при проведении интраоперационной фотодинамической терапии у больных местно- распространенным раком полости рта
в поляризации Т-хелперов в Th1, обеспечивающих
зультаты отчасти подтверждают это. Окислитель-
клеточный иммунитет.
ный стресс, вызванный ФДТ, стимулирует выброс
Уровни IL-17 демонстрируют различную фаз-
провоспалительных цитокинов в микроокруже-
ность изменений: в основной группе транзиторное
ние опухоли, что отражается и на их содержании
нарастание на 3-и сутки с дальнейшим снижением
в слюне. В начале ФДТ-индуцированного воспа-
ниже исходного, а в контрольной группе – сниже-
ления сосуды опухоли становятся проницаемыми
ние на 3-и сутки с последующим восстановлением
для белков адгезии (IСAM 1, VCAM 1, селектинов),
на 7-е (рис. 1Г, 2Г). Нарастание уровней цитоки-
таким образом способствуя массивной инфильтра-
нов, поляризующих CD4+ в Th2, IL-5 и IL-13 на 3-и
ции опухоли иммунными клетками- продуцентами
сутки, отмеченные только в контрольной группе,
широкого спектра цитокинов, из которых в лите-
также является транзиторным. Однако уровень
ратуре подчеркивается значение TNF-α, IL-6, IL-1β,
IL-5 в оба срока исследования в основной группе
а также белков теплового шока, метаболитов ара-
был ниже, чем в контрольной (рис. 1В, 2в): на 3-и
хидоновой кислоты [17]. В связи с этим цитокины,
сутки 136,3 [130,2; 144,4] против 173,6 [168,7; 176,8]
обладающие провоспалительным действием,
пг/мл, на 7-е сутки 117,4 [106,6; 125,2] против
в частности, способностью повышать проницае-
138,5 [131,7; 147,2] пг/ мл соответственно, в оба
мость сосудов, и обычно считающиеся проонкоген-
срока p < 0,05), что, с учетом описанных в лите-ными вследствие своего стимулирующего влияния
ратуре данных о его связи с рецидивированием
на неоангиогенез, при ФДТ имеют положительное
некоторых опухолей [16], возможно, является од-
значение для реализации ее эффекта. Полученная
ним из положительных моментов действия ИФДТ.
нами сравнительная динамика цитокинов слюны
Известно значение хронического воспаления
больных основной и контрольной группы позво-
и сопровождающей его продукции цитокинов при
ляет говорить о более ранних пиках концентраций
опухолевом росте. Многократно описана проонко-
IL-1β и IL-8, наступающих на 3-и сутки после интра-
генная роль большинства известных цитокинов
операционной ФДТ и высоких локальных уровнях
при неоплазиях, реализующаяся через активацию
TNF-α и IL-6, сохраняющихся на протяжении срока
различных транскрипционных факторов и сигналь-
наблюдения. Напротив, противовоспалительные
ных путей, стимуляцию пролиферации, неоангио-
цитокины, например, IL-10 и TGF-β подавляют
генеза, эпителиально- мезенхимального перехода,
эффекты ФДТ [18]. О значимости IL-7 при воспа-
и других процессов [4]. Однако представляется
лении известно, что его локальное содержание
сложным разграничение значимости цитокинов
повышается за счет продукции макрофагами,
для злокачественного роста и для иммунного от-
дендритными клетками, фибробластами, а его
вета, неотъемлемым компонентом которого они
мишенью являются Т-лимфоциты, экспрессирую-
являются, вследствие чего и осуществляется их
щие рецептор к нему. IL-7 стимулирует преимуще-
противоопухолевая активность. Вероятно, многое
ственно Th1 и Th17 лимфоциты, опосредующие
зависит от их количества, соотношения, экспрес-
клеточный иммунитет [19]. В недавнем обзоре,
сии рецепторов к ним и пр. В отличие от хрониче-
посвященном роли IL-7 при опухолях, указано, что
ского, острое воспаление, тем более, не микробное,
он ингибирует рост меланомы, усиливает действие
а индуцированное физическим фактором, таким
IFN-γ, восстанавливает активность CD8+ T-лимфо-
как ФДТ, по-видимому, проявляет ингибирующее
цитов путем снижения экспрессии ими PD-1 [20].
действие на рост опухоли как прямое путем раз-
Исходя из этого, можно предположить, что наблю-
рушения ее клеток, так и опосредованное через
даемое нами снижение уровня данного цитокина
иммунную систему [15]. В связи с этим, ФДТ-инду-
после транзиторного возрастания в слюне боль-
цированная гиперпродукция цитокинов в очаге,
ных контрольной группы является прогностически
тем более, после удаления опухоли, не только спо-
неблагоприятным для состояния локального кле-
собствует его санации, ускоряя очищение и зажив-
точного иммунитета, и, напротив, его стабильное
ление раны, но и может иметь положительные от-
повышение в слюне больных, получавших ИФДТ,
даленные последствия, связанные с увеличением
отражает стимуляцию Т-клеточного звена.
безрецидивного периода вследствие разрушения
Роль гранулоцитов и связанных с ними цито-
резидуальных опухолевых клеток и индукции им-
кинов в организме опухоленосителя является
мунного ответа на DAPMs. Полученные нами ре-
двой ственной. Известны многочисленные данные
49
South Russian Journal of Cancer 2024. Vol. 5, No. 2. P. 43-52
Komarova E. Yu., Zlatnik E. Yu., Komarova E. F., Novikova I. A., Dzhenkova E. A., Engibaryan M. A., Sagakyants A. B., Pozdnyakova V. V., Rozenko L. Ya. Dynamics of saliva cytokine levels during intraoperative photodynamic therapy in patients with locally advanced oral cancer литературы о проонкогенном действии нейтро-ЗАКЛЮЧЕНИЕ
филов [21], а также хемокинов, привлекающих их
в очаг. Нейтрофильные «ловушки» способствуют
Интраоперационное применение ФДТ у больных
выживанию циркулирующих опухолевых клеток
местно- распространенным раком полости рта вы-
в крови и метастазированию опухоли [22, 23]. Тем
зывает изменения цитокинового состава слюны,
не менее, нейтрофилам как участникам генера-
развивающиеся в течение первой недели после
ции АФК придается важное значение в действии
операции, часть из которых можно связать с полу-
ФДТ [24]. Однако, поскольку G-СSF способствует
ченным клиническим эффектом, состоящим в удли-
выходу из костного мозга в периферическую кровь
нении безрецидивного периода у таких пациентов
и ткани незрелых гранулоцитов, обладающих имму-
(Патент РФ № 2797433). Однако для выяснения
носупрессивным действием (MDSC), более низкий
роли цитокинов в противоопухолевой эффектив-
уровень его у наших больных, получавших ИФДТ,
ности примененного фотодинамического воздей-
по сравнению с контрольной группой мы рассма-
ствия у больных местнораспространенным раком
триваем как положительный момент.
полости рта требуются дальнейшие исследования.
Список источников
1. Златник Е. Ю., Сагакянц А. Б., Шульгина О. Г., Шевченко А. Н., Филатова Е. В., Белякова Л. И. и др. Уровни местных
цитокинов как прогностический фактор раннего рецидива немышечно-инвазивной карциномы мочевого пузы-ря. Медицинская иммунология. 2023;25(5):1135–1140. https://doi.org/10.15789/1563-0625-LCL-2723, EDN: JEPHWY
2. Рыбкина В. Л., Адамова Г. В., Ослина Д. С. Роль цитокинов в патогенезе злокачественных новообразований. Си-бирский научный медицинский журнал. 2023;43(2):15–28. https://doi.org/10.18699/SSMJ20230202, EDN: MRRKJB
3. Kartikasari AER, Huertas CS, Mitchell A, Plebanski M. Tumor-Induced Inflammatory Cytokines and the Emerging Diagnos-tic Devices for Cancer Detection and Prognosis. Front Oncol. 2021;11:692142. https://doi.org/10.3389/fonc.2021.692142
4. Lan T, Chen L, Wei X. Inflammatory Cytokines in Cancer: Comprehensive Understanding and Clinical Progress in Gene Therapy. Cells. 2021 Jan 8;10(1):100. https://doi.org/10.3390/cells10010100
5. Агаев Т., Титерина Е. К., Хорева М. В., Ганковская Л. В. Роль цитокинов при гепатоцеллюлярной карциноме. Медицинская иммунология. 2022;24(5):889–902. https://doi.org/10.15789/1563-0625-ROC-2512, EDN: FXTNRU
6. Ralli M, Grasso M, Gilardi A, Ceccanti M, Messina MP, Tirassa P, et al. The role of cytokines in head and neck squamous cell carcinoma: A review. Clin Ter. 2020;171(3):e268–e274. https://doi.org/10.7417/CT.2020.2225
7. Caruntu A, Scheau C, Codrici E, Popescu ID, Calenic B, Caruntu C, et al. The Assessment of Serum Cytokines in Oral Squamous Cell Carcinoma Patients: An Observational Prospective Controlled Study. J Clin Med. 2022 Sep 14;11(18):5398.
https://doi.org/10.3390/jcm11185398
8. Chadwick JW, Macdonald R, Ali AA, Glogauer M, Magalhaes MA. TNFα Signaling Is Increased in Progressing Oral Potentially Malignant Disorders and Regulates Malignant Transformation in an Oral Carcinogenesis Model. Front Oncol.
2021;11:741013. https://doi.org/10.3389/fonc.2021.741013
9. Dikova V, Jantus-Lewintre E, Bagan J. Potential Non-Invasive Biomarkers for Early Diagnosis of Oral Squamous Cell Carcinoma. J Clin Med. 2021 Apr 13;10(8):1658. https://doi.org/10.3390/jcm10081658
10. Val M, Sidoti Pinto GA, Manini L, Gandolfo S, Pentenero M. Variations of salivary concentration of cytokines and chemo-kines in presence of oral squamous cell carcinoma. A case-crossover longitudinal prospective study. Cytokine. 2019
Aug;120:62–65. https://doi.org/10.1016/j.cyto.2019.04.009
11. Златник Е. Ю., Светицкий П. В., Новикова И. А., Нистратов Г. П., Аединова И. В., Волкова В. Л. и др. Факторы локального иммунитета у больных раком слизистой оболочки полости рта и языка с отсутствием и наличием
регионарных метастазов и рецидивов. Фундаментальные исследования. 2015:1-5;953–957. EDN: TWTPFJ
12. Falk-Mahapatra R, Gollnick SO. Photodynamic Therapy and Immunity: An Update. Photochem Photobiol. 2020
May;96(3):550–559. https://doi.org/10.1111/php.13253
13. Donohoe C, Senge MO, Arnaut LG, Gomes-da-Silva LC. Cell death in photodynamic therapy: From oxidative stress to anti-tumor immunity. Biochim Biophys Acta Rev Cancer. 2019 Dec;1872(2):188308. https://doi.org/10.1016/j.bbcan.2019.07.003
14. Huis In ’t Veld RV, Heuts J, Ma S, Cruz LJ, Ossendorp FA, Jager MJ. Current Challenges and Opportunities of Photodynamic Therapy against Cancer. Pharmaceutics. 2023 Jan 18;15(2):330. https://doi.org/10.3390/pharmaceutics15020330
50
Южно-Российский онкологический журнал 2024. Т. 5, № 2. С. 43-52
Комарова Е. Ю., Златник Е. Ю., Комарова Е. Ф., Новикова И. А., Дженкова Е. А., Енгибарян М. А., Сагакянц А. Б., Позднякова В. В., Розенко Л. Я. Динамика
уровней цитокинов слюны при проведении интраоперационной фотодинамической терапии у больных местно- распространенным раком полости рта
15. Патент РФ № 2797433 Российская Федерация, МПК А61В 18/20 (2006.1), А61N5/067 (2006.01), A61K 6/00 (2006.01), A61P 35/00 (2006.01) Способ интраоперационной фотодинамической терапии в комбинированном лечениипервич-ного местнораспространенного рака языка: N 2022118036: заявл. 01.07.2022: опубликовано 05.06.2023. Кит О. И., Комарова Е. Ю., Енгибарян М. А., Волкова В. Л., Чертова Н. А., Комарова Е. Ф. и др; заявитель ФГБУ «Национальный
медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации. 10 с.
16. Kumar P, Ranmale S, Mehta S, Tongaonkar H, Patel V, Singh AK, et al. Immune profile of primary and recurrent epithelial ovarian cancer cases indicates immune suppression, a major cause of progression and relapse of ovarian cancer. J Ovarian Res. 2023 Jun 15;16(1):114. https://doi.org/10.1186/s13048-023-01192-4
17. Maeding N, Verwanger T, Krammer B. Boosting Tumor-Specific Immunity Using PDT. Cancers (Basel). 2016 Oct 6;8(10):91.
https://doi.org/10.3390/cancers8100091
18. Reginato E, Wolf P, Hamblin MR. Immune response after photodynamic therapy increases anti-cancer and anti-bacterial effects. World J Immunol. 2014 Mar 27;4(1):1–11. https://doi.org/10.5411/wji.v4.i1.1
19. Bikker A, Hack CE, Lafeber FPJG, van Roon JAG. Interleukin-7: a key mediator in T cell-driven autoimmunity, inflammation, and tissue destruction. Curr Pharm Des. 2012;18(16):2347–2356. https://doi.org/10.2174/138161212800165979
20. Wang C, Kong L, Kim S, Lee S, Oh S, Jo S, et al. The Role of IL-7 and IL-7R in Cancer Pathophysiology and Immunotherapy.
Int J Mol Sci. 2022 Sep 8;23(18):10412. https://doi.org/10.3390/ijms231810412
21. Szczerba BM, Castro-Giner F, Vetter M, Krol I, Gkountela S, Landin J, et al. Neutrophils escort circulating tumour cells to enable cell cycle progression. Nature. 2019 Feb;566(7745):553–557. https://doi.org/10.1038/s41586-019-0915-y 22. Vorobjeva NV, Chernyak BV. NETosis: Molecular Mechanisms, Role in Physiology and Pathology. Biochemistry (Mosc).
2020 Oct;85(10):1178–1190. https://doi.org/10.1134/S0006297920100065
23. Azzouz D, Khan MA, Palaniyar N. ROS induces NETosis by oxidizing DNA and initiating DNA repair. Cell Death Discov. 2021
May 18;7(1):113. https://doi.org/10.1038/s41420-021-00491-3
24. Brackett CM, Muhitch JB, Evans SS, Gollnick SO. IL-17 promotes neutrophil entry into tumor-draining lymph nodes following induction of sterile inflammation. J Immunol. 2013 Oct 15;191(8):4348–4357. https://doi.org/10.4049/jimmunol.1103621
Информация об авторах:
Комарова Елизавета Юрьевна – аспирант, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства
здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-1252-8094, SPIN: 9372-1954, AuthorID: 1198314, Scopus Author ID: 57217081452
Златник Елена Юрьевна – д.м.н., профессор, главный научный сотрудник лаборатории иммунофенотипирования опухолей, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-1410-122X, SPIN: 4137-7410, AuthorID: 327457, ResearcherID: AAI-1311-2020, Scopus Author ID: 6603160432
Комарова Екатерина Федоровна – д.б.н., профессор РАН, ведущий научный сотрудник, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация; декан
факультета клинической психологии, заведующий кафедрой биомедицины (и психофизиологии), ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-7553-6550, SPIN: 1094-3139, AuthorID: 348709, ResearcherID: T-4520-2019, Scopus Author ID: 55890096600
Новикова Инна Арнольдовна – д.м.н., заместитель генерального директора по науке, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-6496-9641, SPIN: 4810-2424, AuthorID: 726229, ResearcherID: E-7710-2018, Scopus Author ID: 7005153343
Дженкова Елена Алексеевна – д.б.н., профессор, ученый секретарь, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-3561-098X, SPIN: 6206-6222, AuthorID: 697354, ResearcherID: K-9622-2014, Scopus Author ID: 6507889745
Енгибарян Марина Александровна – д.м.н., заведующая отделением опухолей головы и шеи, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID: https://orcid.org/0000-0001-7293-2358, SPIN: 1764-0276, AuthorID: 318503, Scopus Author ID: 57046075800
Сагакянц Александр Борисович – к.б.н., доцент, заведующий лабораторией иммунофенотипирования опухолей, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID: https://orcid.org/0000-0003-0874-5261, SPIN: 7272-1408, AuthorID: 426904, ResearcherID: M-8378-2019, Scopus Author ID: 24329773900
51
South Russian Journal of Cancer 2024. Vol. 5, No. 2. P. 43-52
Komarova E. Yu., Zlatnik E. Yu., Komarova E. F., Novikova I. A., Dzhenkova E. A., Engibaryan M. A., Sagakyants A. B., Pozdnyakova V. V., Rozenko L. Ya. Dynamics of saliva cytokine levels during intraoperative photodynamic therapy in patients with locally advanced oral cancer Позднякова Виктория Вадимовна – д.м.н., профессор, врач-онколог отделения реконструктивно-пластической хирургии и онкологии, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-3782-6899, SPIN: 7306-2034, AuthorID: 700139, ResearcherID: ATT-67-07-2020, Scopus Author ID: 54380529400
Розенко Людмила Яковлевна – д.м.н., профессор, врач-радиотерапевт отделения радиотерапии № 2, ФГБУ «Национальный медицинский
исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
ORCID: https://orcid.org/0000-0001-7032-8595, SPIN: 8879-2251, AuthorID: 421802, Scopus Author ID: 5397560100
Вклад авторов:
Комарова Е. Ю. – написание исходного текста;
Златник Е. Ю. – развитие методологии, итоговые выводы;
Комарова Е. Ф. – концепция исследования;
Новикова И. А. – научное руководство, итоговые выводы;
Дженкова Е. А. – участие в разработке дизайна исследования; научное руководство; Енгибарян М. А. – научное руководство;
Сагакянц А. Б. – развитие методологии, доработка текста;
Позднякова В. В. – написание исходного текста;
Розенко Л. Я. – доработка текста, итоговые выводы.
52
