CC BY
21
Динамика показателей мукозального иммунитета, цитобактериологического и морфофункционального состояния слизистой ротоглотки у часто болеющих школьников под влиянием галотерапии
(Окончание)
М.А. Хан, Н.А. Микитченко
ФГУ Российский научный центр восстановительной медицины и курортологии, г. Москва
А.В. Червинская
Клинический научно-исследовательский респираторный центр, г. Москва
The effect of halotherapy on mucosal immunity, cytobacteriological and morphofunctional state of oropharyngeal mucous membrane in children with acute respiratory disease
M.A. Khan, A.V. Chervinskaya, N.A. Mikitchenko
The aim of this study was to assess the influence of halotherapy on mucosal immunity, cytobacteriological and morphofunctional state of oropharyngeal mucous membrane among children with acute respiratory disease (ARD). The study population comprised children with ARD symptoms received course of halotherapy and children without initially ARD symptoms received phylactic halotreatment. Children in the control group did not receive any halo-spray impact. The study have elicit the favorable effect of halotherapy, characterized by normalization of secretory IgA titers, improvement of morphofunctional state and protective function of oropharyngeal mucous membrane. On a base of the study differentiate models of halotherapy, according to a child initial health status, were constructed.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Данные общего осмотра выявили, что на момент начала исследования у половины обследованных детей (51,9%) отмечались начальные либо остаточные проявления острого респираторного заболевания. Среди них гиперемия и отечность слизистой оболочки носа, затрудненное носовое дыхание наблюдались у 92,3% обследованных школьников, слизистые или слизисто-гнойные выделения из носовых ходов - у 88,5% детей, кашель - у 44,2%. У 48,1% учащихся не было выявлено симптомов ОРВИ.
По данным бактериологического исследования с оценкой браш-биоптатов слизистой ротоглотки у всех детей была выявлена колонизация той или иной условно-патогенной микрофлоры как одного вида микроорганизмов, так и в различных их сочетаниях. У 69,2% учащихся выявлен пневмококк, при этом у большинства детей с пневмококковой флорой (88,2%) этот микроорганизм находился в капсульной форме, обладающей высоковирулентными свойствами. Почти у половины школьников (46,2%) обнаружен золотистый стафилококк, в 30,7% случаев встречалась гемофильная палочка, пиогенный стрептококк наблюдался лишь у 21,2% школьников. Почти у трети детей (32,7%) выявлена вирусная инфекция в сочетании с микробными агентами (вирусомикробные ассоциации), у 17,3% - грибы рода Candida. Вегетирующая флора присутствовала у 94,9% детей.
По результатам исследования у всех школьников выявлено состояние дисбиоза слизистой ротоглотки. Так, 2-я (субкомпенсированная) и 3-я (декомпенсированная) степени дисбиотических нарушений регистрировались у большинства детей - 51,9% и 40,4% соответственно и только у 7,7% учащихся состояние слизистой оболочки ротоглотки определялось как компенсированное (1-я степень).
Цитологическое исследование слизистой оболочки ротоглотки выявило снижение показателей фагоцитарной активности и фагоцитарного индекса.
По данным исследования мукозального иммунитета было отмечено повышение концентрации компонентов SIgAi и SIgA2 относительно возрастной нормы у подавляющего большинства школьников (92,3%). У 5 учащихся (7,7%), не имевших симптомов ОРЗ, показатели концентрации секре-
торных иммуноглобулинов сохранялись в пределах нормальных значений. В целом по группе было выявлено статистически значимое увеличение средних значений и по сравнению
с величинами, полученными у здоровых детей [5]. В большинстве случаев (75,0%) содержание преобладало над 81§А1, что свидетельствовало о присутствии свободного секреторного компонента (таблица 1).
Таблица 1. Содержание секреторного иммуноглобулина А у школьников в сравнении со
здоровыми детьми
Показатели Группа обследованных школьников (п =60) Группа здоровых детей (п= 143)
SIgAi (*10-2 г/л) 40,60 ±2,96*** 16,87 ±0,55^^^Н
SlgA2 (*10-2 г/л) 59,36 ±5,59*** 23,10 ±0,83
SIgAi / SlgA2 1,56 ±0,11 1,42 ±0,04
Примечания. Достоверность различий с группой здоровых детей: * р<0,05; ** р<0,02; ***р<0,001.
У большинства школьников, исходно имевших остаточные симптомы ОРЗ, было выявлено более выраженное повышение содержания секреторного иммуноглобулина А (таблица 2).
Цитобактериологическое обследование слизистой ротоглотки после курса галотерапии показало статистически значимое снижение ИИ и ИА эпителиоцитов патогенной и условно-патогенной микрофлорой. Наблюдалось достоверное снижение количества колоний грибов Candida под действием сухого высокодисперсного хлорида натрия. Полученные данные свидетельствуют об уменьшении колонизационной активности этих микроорганизмов при проведении галотерапии.
После курсового воздействия сухим высокодисперсным аэрозолем хлорида натрия капсульная форма была обнаружена только у 28,8% детей с пневмококковой инфекцией, что достоверно (р<0,01) отличается от исходных данных (88,4%). Известно, что процесс диссоциации и потери капсулы пневмококком сопровождается снижением его вирулентности и гиалуронидазной активности. В экспериментальных исследованиях было установлено, что под действием галоаэрозоля выжившие микроорганизмы изменяют свои тинкториальные и культуральные свойства, теряют капсулу, трансформируясь в R-формы. Данные, полученные в настоящем исследовании, являются клиническим подтверждением бактериостатического действия галоаэрозоля.
В группе детей, прошедших галотерапию, наблюдалось достоверное повышение ИИ и ИА нормальной микрофлоры, что говорит об усилении процессов естественной колонизации слизистой.
Такое сочетание процессов свидетельствует об улучшении биоценоза и повышении колонизационной резистентности слизистой оболочки у школьников под влиянием галотерапии.
В группе сравнения статистически значимых изменений колонизационной активности микрофлоры слизистой ротоглотки не наблюдалось.
Персистенция вирусной инфекции (парагрипп, аденовирусы, герпес) была установлена у 43,7% учащихся, прошедших курс галотерапии. После лечения вирусная персистенция обнаруживалась только у 12,5% детей (р<0,05), причем в половине случаев наблюдалось снижение активности персистенции. В группе сравнения вирусная инфекция выявлялась у 60,0% детей до воздействия и у 50,0% - после (р>0,5).
Таблица 2. Содержание секреторного IgA у школьников в зависимости от наличия
симптомов острого респираторного заболевания
Группы sIgAi (*10"2 г/л) sIgA2 (*10"2 г/л) SlgA2/ sIgAi
Часто болеющие школьники с симптомами ОРЗ 42,00±3,91** 59,77±6,17** 1,47 ±0,13
Часто болеющие школьники без симптомов ОРЗ 39,20±4,51** 58,96±9,44* 1,66±0,18
Здоровые дети 16,87±0,55 23,10±0,83 1,42±0,04
Примечания. Достоверность различий с группой здоровых детей: *р<0,05; **р<0,02; ***р<0,001.
Оценку фагоцитоза проводили: 1) на основании определения общего числа полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЯЛ) и мононуклеаров; 2) по интенсивности поглощения микробов, выраженной в процентах (фагоцитарная активность, ФА - процент фагоцитов из числа сосчи-
танных нейтрофилов); 3) по фагоцитарному индексу (ФИ) - среднему числу микробов, поглощенных одним активным нейтрофилом.
Исходное состояние слизистой ротоглотки школьников характеризовалось низкой фагоцитарной активностью. Курсовое воздействие галоаэрозолем способствовало повышению фагоцитарной активности, что подтверждалось статистически значимым повышением уровня ПМЯЛ и лимфоцитов, увеличением показателей ФА и ФИ. Наблюдалось снижение сенсибилизации слизистой, характеризующееся статистически значимым снижением уровня эозинофилов; улучшение качественного состава клеток эпителия проявлялось достоверным уменьшением числа клеток с деструкцией. В группе сравнения достоверных изменений указанных выше показателей не наблюдалось.
В настоящем исследовании впервые установлено, что галотерапия, проводимая в условиях общеобразовательного учреждения в сочетании с учебным процессом, оказывает положительное оздоровительное действие на слизистую оболочку ротоглотки школьников, о чем свидетельствует улучшение цитологической картины, усиление процессов фагоцитоза.
Индивидуальная оценка состояния защитных свойств слизистой оболочки до и после курса галотерапии давалась на основании комплексного анализа всех изучаемых показателей. При индивидуальном анализе учитывались:
- признаки деструкции эпителиоцитов;
- наличие фагоцитарной реакции, завершенность фагоцитоза,
- колонизационная резистентность слизистой оболочки, определяемая показателями колонизационной активности условно-патогенной и нормальной микрофлоры;
- наличие вирусной персистенции;
- наличие грибов, хламидий.
Полноценная («хорошая») динамика учитывалась в случаях положительных сдвигов по всем анализируемым звеньям состояния резистентности слизистой, «удовлетворительная» - в случаях, когда происходила неполная нормализация биоценоза слизистой. В случаях, когда не происходило существенных сдвигов в состоянии резистентности слизистой, давалась оценка «без динамики».
У подавляющего большинства школьников, получивших курсовое воздействие галоаэрозолем, наблюдалась положительная динамика состояния резистентности эпителия слизистой ротоглотки (93,7%), у 81,3% учащихся динамика расценивалась как «хорошая».
В группе сравнения у подавляющего большинства исследованных динамики не наблюдалось (75,0%), и лишь у 10,0% она оценена в качестве «удовлетворительной». Различия между группами достоверны (р<0,001).
При исследовании динамики показателей мукозального иммунитета под влиянием галотерапии была выявлена тенденция к нормализации показателей секреторного ^А (8^А1 снизился до 30,04±3,56 * 10-2 г/л, р>0,05; 8^2 - до 38,61±4,71 *10-2 г/л, р>0,05). Более выраженная положительная динамика наблюдалась в группе детей, перенесших ОРЗ с сохраняющимися остаточными катаральными симптомами, что проявлялось в статистически значимом снижении и 8^2 до 23,65±1,76 *10-2 г/л (р<0,001) и 32,15±3,15 *10-2 г/л (р<0,001) соответственно.
Средние значения показателя 8^А2/8^А1 отражающего уровень свободного секреторного компонента 8С, вне зависимости от наличия исходных клинических признаков ОРВИ, сохранялись в пределах нормальных величин. Была выявлена тенденция к увеличению данного показателя у детей, исходно имевших катаральные проявления, что свидетельствует о нарастании синтеза молекул 8^А1 в ротоглоточном секрете и более интенсивную продукцию секреторного компонента.
Выявленные изменения свидетельствуют о нормализации основных факторов мукозального иммунитета и указывают на уменьшение явлений инфекционно-воспалительного процесса в слизистой оболочке респираторного тракта.
В группе сравнения у школьников, имевших остаточные симптомы ОРЗ, была выявлена тенденция к нормализации уровней секреторного ^А, однако статистически значимых изменений данных показателей отмечено не было. У детей, не имевших клинических проявлений острого респираторного заболевания, средние значения 8^А1 и 8^А2 в конце курса сохранялись на уровне исходных величин. В отношении показателя 8^А2/8^А1 также не было выявлено статистиче
ски значимых различий с исходными показателями.
В ходе исследования была выявлена прямая корреляционная связь между степенью дисбиоза слизистой ротоглотки и показателями SIgAi (R=0,54, р<0,02) и SIgA2 (R=0,44, р<0,02), что подтверждает данные литературы о том, что повышение уровня секреторного SIgA является защитно-приспособительной реакцией местной иммунной системы на нарушение микробиоценоза слизистой верхних дыхательных путей [5].
Проведенный многофакторный дисперсионный анализ показал статистически значимое влияние фактора галотерапии на динамику показателей мукозального иммунитета: SIgAi (F=9,96, р<0,03) и SIgA2 (F=6,99, р<0,02). Это свидетельствует о том, что выявленные различия уровней секреторного IgA, наблюдаемые в группах, определялись главным образом действием сухого высокодисперсного аэрозоля хлорида натрия.
Исходное клиническое состояние (наличие либо отсутствие симптомов острого респираторного заболевания) не оказывает достоверного влияния на распределение показателей SIgAi и SIgA2 (р>0,05), что, вероятно, объясняется сохраняющимися дисбиотическими нарушениями слизистой верхних дыхательных путей несмотря на регресс клинических проявлений ОРЗ.
Таким образом, на основании проведенных исследований установлено, что под влиянием галотерапии наблюдалось улучшение морфофункционального состояния и защитных свойств слизистой оболочки ротоглотки вследствие ослабления процессов колонизационной активности условно-патогенных микроорганизмов, вирусной активности, улучшения биоценоза, что свидетельствует о выраженном бактериостатическом и саногенетическом действии фактора.
Воздействие сухим высокодисперсным аэрозолем хлорида натрия способствует нормализации показателей мукозального иммунитета, что обусловлено элиминационным действием галоаэрозоля, ослаблением процессов колонизационной активности патогенной и условно-патогенной микрофлоры, улучшением состояния биоценоза слизистой ротоглотки.
Элиминационные свойства сухого высокодисперсного аэрозоля хлорида натрия способствуют предупреждению возникновения острых респираторных заболеваний и обострений хронической ЛОР-патологии, что позволяет рекомендовать галотерапию как эффективный метод оздоровления школьников в условиях общеобразовательного учреждения на фоне учебного процесса.
На основании проведенных исследований разработан патогенетически обоснованный метод оздоровления детей в школах, адаптированный для применения на фоне учебного процесса.
Безопасность и высокая эффективность метода, разработанные дифференцированные схемы применения галотерапии с учетом клинико-функциональных особенностей детей обосновывают возможность применения галотерапии в качестве метода немедикаментозной профилактики ОРЗ и оздоровления детей в школах.
ЛИТЕРАТУРА
1. Самсыгина r.A. Часто болеющие дети: проблемы патогенеза, диагностики и терапии // Педиатрия. - 2005. - № 1.
2. Chervinskaya A.V., Kvetnaya A.S. Therapeutical effects of the dry sodium chloride aerosol on physiological properties of the respiratory mucosa // Pulmonology. Supplement abstract book: 3-rd Congress of European Region International Union against Tuberculosis and Lung Diseases (IUATLD), 2004.
S. Учайкин В.Ф. Руководство по инфекционным болезням у детей. - М. : Гэотар Медицина, 1998. -809 с.
4. Lee S., Lane A.P. Chronic rhinosinusitis as a multifactorial inflammatory disorder. // Curr Infect Dis Rep. 2011 Apr;13(2):159-68.
5. Кветная A.C., Батуро A.n. Метод непрямой флюоресценции в ранней диагностике пневмококковой инфекции у детей: метод. рек. - Л., 1989. -15 с.
6. Уланова МЛ. Состояние местной иммунной системы при острых респираторных и аллергических болезнях у детей: дис. ... канд. мед. наук. - М., 1982.
7. Червинская A.B. Галотерапия в условиях управляемого микроклимата соляных пещер для восстановительной медицины // Физиотерапевт. - 2006. - №3. - С. 29-39.
8. Червинская A.B. Галотерапия в условиях управляемого микроклимата соляных пещер для восстановительной медицины //Нелекарственная медицина. - 2007. - №3 (8). - С. 6-15.
