CC BY
61
УДК 581.151:631.811
ДИНАМИКА МЕТАЛЛОУСТОЙЧИВОСТИ КУЛЬТУРНЫХ РАСТЕНИЙ ПРИ ДЕЙСТВИИ ЦИТОКИНИНОВЫХ СИНТЕТИЧЕСКИХ РЕГУЛЯТОРОВ РОСТА
Д. И. Башмаков, Т. А. Морозова
В статье приводятся экспериментальные данные о влиянии ионов Cu2+, Zn2+, Ni2+ и синтетических регуляторов роста (цитодефа, кинетина и тидиазурона) на металлоустойчивость молодых растений Dahlia х culturum, Hordeum vulgare L. и Triticum aestivum L.
Ключевые слова: Dahlia х culturum, Hordeum vulgare L., Triticum aestivum L., ци-тодеф, кинетин, тидиазурон, металлоустойчивость.
METAL-TOLERANCE DYNAMICS OFCULTIVATED PLANTS AFFECTED BY CYTOLEININ SYNTHETIC GROWTH REGULATORS
D. I. Bashmakov, T. A. Morozova
The research investigates the influence of Cu2 + , Zn2 +, Ni2 + ions and synthetic growth regulators — citodeph, kinetin and thidiazuron on metal-tolerance in young plants of Dahlia х culturum, Hordeum vulgare L and Triticum aestivum L.
Keywords: Dahlia х culturum, Hordeum vulgare L., Triticum aestivum L., citodeph, kinetin, thidiazuron, metal-tolerance.
Различные элементы среды неодинаково воспринимаются растениями и имеют для них разное значение [1; 3]. В процессе эволюции растения в зависимости от эколого-климатической зоны приобрели устойчивость к определенным неблагоприятным факторам среды. Однако многие факторы среды, к которым растения эво-люционно не приспособлены, могут оказывать стрессовое воздействие, приводящее к различным биохимическим аномалиям в клетках растений, повреждению их структур и метаболических функций, снижению или полному подавлению образования органического вещества [7; 8].
Одним из мощнейших экологических факторов, к которому растения эволюци-онно не приспособлены, является загряз-
нение окружающей среды тяжелыми металлами (ТМ) [3; 5]. Проникая в избытке в растительный организм, ТМ нарушают ход метаболических процессов, ингибиру-ют развитие, снижают продуктивность [7]. Кроме этого, накопление ТМ в приповерхностном слое почвы приводит к снижению ее плодородия и ухудшению качества растениеводческой продукции [1]. Современное сельское хозяйство широко применяет различные способы нейтрализации вредного для растений воздействия ТМ. В последнее время все больший интерес представляют биологически активные вещества - регуляторы роста (РР), которые применяются в качестве защиты и для повышения устойчивости растений к биотическим и абиотическим факторам [1; 4; 9]. Биологически
© Башмаков Д. И., Морозова Т. А., 2013
активные вещества могут изменять реакцию растений на стрессовое воздействие. Имеются данные о возможности снижения повреждающего действия ТМ при использовании синтетических аналогов фитогормонов. Так, применение цитокинин-подобных препаратов (10 нМ тидиазурона, 100 нМ цитодефа, 1 мкМ кинетина) способствовало снижению токсичности ионов никеля, что проявилось в усилении роста растений кукурузы и снижении проницаемости мембран. Наиболее эффективно стрессовое действие ионов никеля снижал тидиазурон [2]. С повышением концентрации кадмия в среде культивирования с 1 мкМ до 1 мМ снижалось образование сухого вещества как в корнях, так и в побегах сои. Добавление гиббереллина вызывало частичную элиминацию эффекта кадмия на корни и побеги у растений сои и увеличивало площадь листьев и длину стеблей [6].
В связи с этим изучение совместного действия на растения ТМ и синтетических РР является важной задачей при решении проблемы устойчивости растений к загрязнению окружающей среды ТМ и повышения качества продукции растениеводства.
Изменения металлоустойчивости культурных растений под влиянием синтетических регуляторов роста цитокининового типа действия изучали на георгинах (Dahlia х culturum), ячмене (Hordeum vulgare L.) сорта Отра и пшенице (Triticum aes-tivum L.) сорта Мироновская. Перед посевом семена обрабатывали 3-5%-ным KMnO4 в течение 5 мин. После удаления дезинфицирующего раствора семена проращивали в чашках Петри (по 20 штук на чашку) в факторостатных условиях (освещенность около 80 мкМ фотонов/м2 с, фотопериод 16 ч, t 20-23 °С) на растворах, содержащих 0 (контроль), 10, 100 и 1000 мкМ ионов Cu2+, Zn2+ или Ni2+ (концентрации подбирали в предварительных экспериментах и были близки к физиологической, сублетальной и летальной соответственно) и регуляторов роста (10 нМ тидиазурона, 100 нМ цитодефа, 1 мкМ кинетина). Использовались соли CuSO, х 5HO, ZnSO, х 7H,O
4 2 4 2
и NiSO4 х 7H2O квалификации чда. Контролем служили растения, выращенные на дистиллированной воде без внесения регуля-
торов роста. На 7, 10 и 14-е сутки опыта у 10 растений из каждой повторности измеряли длину корней. Для определения ме-лаллоустойчивости растений рассчитывали индекс толерантности (ИТ) Уилкинса: It = lme / lc х 100 %, где lme - прирост корней на растворе с исследуемым металлом, lc -прирост корней в контроле [10].
Все опыты проводили в трех повторно-стях. Результаты обрабатывали статистически по общепринятым биометрическим формулам с использованием пакетов прикладных программ «Microsoft Excel». Существенность различий между вариантами оценивалась по критерию Стьюдента для независимых выборок при уровне значимости 95 %.
В ходе проведенных экспериментов было определено влияние ТМ (Cu, Zn, Ni) и синтетических РР (цитодефа, кинетина и тидиазурона) на рост корней георгинов, ячменя и пшеницы. Для определения ме-таллоустойчивости растений на основании полученных данных рассчитывали ИТ. Об уровне металлоустойчивости растений свидетельствует величина ИТ, о степени аккли-мации растений к хроническому действию металла - динамика ИТ (табл. 1-3).
Наибольшие значения ИТ среди исследуемых растений отмечены у георгина. Так, на фоне всех изученных металлов ИТ находились либо на уровне водного контроля, либо существенно превышали его (10 мкМ всех изученных ТМ и 0,1 мМ ионов Zn2+).
У растений ячменя на 7-е сутки значения ИТ во всех вариантах (за исключением 0,1 мМ ионов Zn2+) также были на уровне контроля. Однако на 10-е и 14-е сутки во многих вариантах отмечалось существенное снижение ИТ относительно водного контроля. На 14-е сутки опыта ИТ оставались на уровне контроля лишь в вариантах с 10 мкМ Cu2+ и Zn2+, а также с 0,1 мМ Zn2+ и Ni2+. Выявленное снижение ИТ может свидетельствовать о нараставшем отравлении растений в результате хронического действия ТМ.
В экспериментах с пшеницей ИТ растений практически всегда оставались существенно ниже контроля, и лишь в варианте с 10 мкМ Cu2+ ИТ на 14-е сутки опыта поднялся до уровня контроля.
Эффекты, обнаруженные разными видами растений в присутствие РР (без ТМ), также различались. Так, георгины положительно реагировали на присутствие всех изученных РР в среде выращивания: значения ИТ в вариантах «РР без ТМ» всегда оставались на уровне контроля. Подобный эф-
фект отмечали у ячменя в вариантах «тиди-азурон без ТМ». Однако, на фоне цитодефа значения ИТ всегда были ниже контроля, а на фоне кинетина уже на 10-е сутки опыта значения ИТ существенно снижались относительно воды. ИТ растений пшеницы на фоне всех изученных РР были ниже контроля.
Таблица 1
Динамика ИТ молодых растений Dahlia х culturum при действии синтетических регуляторов роста на фоне ионов тяжелых металлов, %
Препарат Сутки опыта Концентрация металла
1 мМ 0,1 мМ 10 мкМ 0 (вода)
Cu
Цитодеф 7 92 ± 15 86 ± 15 76 ± 14 80 ± 13
10 115 ± 22 145 ± 26 80 ± 17 90 ± 17
14 121 ± 13 155 ± 14* 77 ± 11 116 ± 16
Кинетин 7 112 ± 20 97 ± 18 76 ± 16 71 ± 12
10 115 ± 22 100 ± 19 85 ± 17 83 ± 16
14 111 ± 12 106 ± 12 87 ± 10 98 ± 21
Тидиазурон 7 86 ± 16 66 ± 14 137 ± 24 86 ± 14
10 90 ± 17 100 ± 20 165 ± 30 93 ± 17
14 92 ± 11 106 ± 11 184 ± 18* 108 ± 14
Без регулятора 7 97 ± 16 107 ± 20 122 ± 20 100 ± 23
10 105 ± 21 120 ± 22 150 ± 28 100 ± 25
14 121 ± 14 126 ± 14 150 ± 13* 100 ± 11
Zn
Цитодеф 7 86 ± 16 92 ± 17 61 ± 15 80 ± 13
10 85 ± 15 95 ± 19 75 ± 16 90 ± 17
14 87 ± 10 116 ± 12 77 ± 12 116 ± 16
Кинетин 7 61 ± 12 71 ± 14 61 ± 12 71 ± 12
10 70 ± 15 80 ± 16 60 ± 11 83 ± 16
14 82 ± 16 155 ± 14* 58 ± 9* 98 ± 21
Тидиазурон 7 137 ± 23 163 ± 27 132 ± 22 86 ± 14
10 145 ± 26 170 ± 31 145 ± 26 93 ± 17
14 174 ± 18* 174 ± 17* 155 ± 15* 108 ± 14
Без регулятора 7 137 ± 23 163 ± 28 158 ± 27 100 ± 23
10 135 ± 24 170 ± 30 165 ± 33 100 ± 25
14 135 ± 15 174 ± 15* 165 ± 15* 100 ± 11
Ni
Цитодеф 7 97 ± 18 61 ± 14 142 ± 25 80 ± 13
10 115 ± 22 70 ± 15 160 ± 30 90 ± 17
14 165 ± 15* 77 ± 11 155 ± 15* 116 ± 16
* Значения опытных вариантов, существенно отличающихся от контроля при Р = 0,05.
1 2 3 4 5 6
Кинетин 7 86 ± 17 97 ± 19 86 ± 16 71 ± 12
10 115 ± 22 110 ± 21 90 ± 18 83 ± 16
14 135 ± 14 131 ± 18 102 ± 11 98 ± 21
Тидиазурон 7 107 ± 20 137 ± 25 92 ± 20 86 ± 14
10 125 ± 24 165 ± 31 95 ± 19 93 ± 17
14 121 ± 13 179 ± 17* 92 ± 11 108 ± 14
Без регулятора 7 102 ± 18 102 ± 18 127 ± 21 100 ± 23
10 100 ± 19 115 ± 21 135 ± 26 100 ± 25
14 106 ± 13 111 ± 11 150 ± 14* 100 ± 11
Таблица 2
Динамика ИТ молодых растений Hordeum vulgare L. при действии синтетических регуляторов роста на фоне ионов тяжелых металлов, %
Препарат Сутки опыта Концентрация металла
1 мМ 0,1 мМ 10 мкМ 0 (вода)
Cu
Цитодеф 7 56 ± 6* 50 ± 6* 76 ± 7 46 ± 6*
10 58 ± 4* 55 ± 5* 93 ± 5 49 ± 6*
14 56 ± 4* 59 ± 8* 88 ± 4* 49 ± 7*
Кинетин 7 79 ± 7 85 ± 8 74 ± 10 70 ± 12
10 84 ± 5* 93 ± 4 87 ± 5* 72 ± 9*
14 77 ± 5* 88 ± 4* 85 ± 4* 80 ± 5*
Тидиазурон 7 56 ± 6* 50 ± 6* 94 ± 9 101 ± 13
10 55 ± 4* 52 ± 5* 96 ± 5 109 ± 16
14 77 ± 5* 51 ± 4* 96 ± 4 107 ± 3
Без регулятора 7 91 ± 7 85 ± 7 88 ± 9 100 ± 10
10 93 ± 3* 90 ± 6 87 ± 3* 100 ± 1
14 88 ± 5 88 ± 3* 83 ± 8 100 ± 2
Zn
Цитодеф 7 129 ± 13 59 ± 8* 65 ± 7* 46 ± 6*
10 168 ± 5* 70 ± 5* 78 ± 7* 49 ± 6*
14 155 ± 5* 75 ± 7* 101 ± 5 49 ± 7*
Кинетин 7 50 ± 6* 53 ± 9* 94 ± 9 70 ± 12
10 55 ± 5* 61 ± 7* 145 ± 4* 72 ± 9*
14 51 ± 5* 69 ± 5* 139 ± 7* 80 ± 5*
Тидиазурон 7 56 ± 6* 62 ± 7* 59 ± 6* 101 ± 13
10 55 ± 7* 75 ± 5* 67 ± 4* 109 ± 16
14 75 ± 4* 77 ± 5* 69 ± 4* 107 ± 3
Без регулятора 7 88 ± 9 71 ± 6* 74 ± 8 100 ± 10
10 87 ± 6 90 ± 9 75 ± 3* 100 ± 1
14 88 ± 3* 99 ± 4 93 ± 4 100 ± 2
* Значения опытных вариантов, существенно отличающихся от контроля при P = 0,05.
1 2 3 4 5 6
N1
Цитодеф 7 124 ± 11 118 ± 10 168 ± 13* 46 ± 6*
10 139 ± 6* 122 ± 6* 165 ± 5* 49 ± 6*
14 131 ± 5* 120 ± 6* 155 ± 4* 49 ± 7*
Кинетин 7 68 ± 6* 59 ± 7* 138 ± 12* 70 ± 12
10 154 ± 7* 75 ± 5* 139 ± 7* 72 ± 9*
14 144 ± 5* 85 ± 5* 139 ± 5* 80 ± 5*
Тидиазурон 7 168 ± 13* 94 ± 8 56 ± 6* 101 ± 13
10 174 ± 5* 110 ± 6 61 ± 6* 109 ± 16
14 181 ± 7* 104 ± 5 72 ± 4* 107 ± 3
Без регулятора 7 74 ± 8 88 ± 9 88 ± 11 100 ± 10
10 78 ± 6* 93 ± 6 87 ± 3* 100 ± 1
14 72 ± 5* 96 ± 5 85 ± 5* 100 ± 2
Таблица 3
Динамика ИТ молодых растений ТтШсиш аезЫюиш Ь. при действии синтетических регуляторов
роста на фоне ионов тяжелых металлов, %
Препарат Сутки опыта Концентрация металла
1 мМ 0,1 мМ 10 мкМ 0 (вода)
Си
Цитодеф 7 43 ± 4* 39 ± 4* 45 ± 4* 61 ± 4*
10 47 ± 4* 45 ± 3* 59 ±4* 77 ± 5*
14 62 ± 5* 60 ± 4* 62 ± 6* 82 ± 6*
Кинетин 7 39 ± 7* 45 ± 3* 41 ± 5* 57 ± 5*
10 43 ± 3* 59 ± 4* 41 ± 5* 62 ± 5*
14 46 ± 4* 71 ± 5* 42 ± 4* 68 ± 5*
Тидиазурон 7 66 ± 5* 39 ± 4* 70 ± 5* 67 ± 6*
10 70 ± 4* 45 ± 4* 86 ± 7 71 ± 7*
14 79 ± 6* 77 ± 6* 106 ± 6 76 ± 6*
Без регулятора 7 73 ± 4* 75 ± 4* 73 ± 4* 100 ± 5
10 74 ± 3* 74 ± 4* 72 ± 3* 100 ± 4
14 79 ± 5* 75 ± 6* 88 ± 6 100 ± 7
гп
Цитодеф 7 73 ± 5* 73 ± 5* 59 ± 4* 61 ± 4*
10 77 ± 6* 86 ± 7 65 ± 4* 77 ± 5*
14 82 ± 5* 93 ± 7 68 ± 5* 82 ± 6*
Кинетин 7 64 ± 4* 59 ± 5* 77 ± 5* 57 ± 5*
10 63 ± 5* 77 ± 4* 86 ± 5* 62 ± 5*
14 82 ± 5* 82 ± 5* 93 ± 5 68 ± 5*
* Значения опытных вариантов, существенно отличающихся от контроля при Р = 0,05.
1 2 3 4 5 6
Тидиазурон 7 73 ± 4* 82 ± 6* 73 ± 6* 67 ± 6*
10 88 ± 4 83 ± 6* 86 ± 5* 71 ± 7*
14 93 ± 9 86 ± 6 93 ± 6 76 ± 6*
Без регулятора 7 57 ± 7* 68 ± 4* 68 ± 5* 100 ± 5
10 68 ± 3* 72 ± 7* 72 ± 5* 100 ± 4
14 66 ± 4* 77 ± 4* 77 ± 6* 100 ± 7
N1
Цитодеф 7 61 ± 4* 75 ± 5* 39 ± 4* 61 ± 4*
10 65 ± 4* 83 ± 4* 43 ± 6* 77 ± 5*
14 71 ± 5* 93 ± 5 42 ± 3* 82 ± 6*
Кинетин 7 61 ± 4* 89 ± 6 66 ± 6* 57 ± 5*
10 65 ± 3* 95 ± 4 70 ± 4* 62 ± 5*
14 64 ± 4* 106 ± 6 73 ± 6* 68 ± 5*
Тидиазурон 7 64 ± 6* 61 ± 5* 68 ± 5* 67 ± 6*
10 65 ± 4* 72 ± 5* 72 ± 5* 71 ± 7*
14 82 ± 5* 84 ± 5 126 ± 6* 76 ± 6*
Без регулятора 7 66 ± 4* 55 ± 5* 68 ± 4* 100 ± 5
10 70 ± 3* 59 ± 5* 74 ± 4* 100 ± 4
14 73 ± 6* 60 ± 4* 77 ± 4* 100 ± 7
Величины ИТ у необработанных и обработанных регуляторами растений георгина на фоне изученных ТМ с течением времени менялись несущественно или даже увеличивались (см. табл. 1). Подобные эффекты могут свидетельствовать об отсутствии признаков хронического отравления молодых растений георгина ТМ или РР. Лишь в одном варианте (кинетин + 10 мкМ 7п2+) на 14-е сутки опыта значения ИТ опускались ниже контроля.
У растений ячменя существенные превышения значений ИТ относительно контроля отмечены в вариантах с цитодефом на фоне ионов №2+ (все концентрации) и 1 мМ 7п2+; в вариантах с кинетином - на фоне 10 мкМ 7п2+ и №2+ и 1 мМ №2+; а в вариантах с тиди-азуроном - лишь на фоне 1 мМ №2+. Кроме этого, неотмечено существенных различий с водным контролем в вариантах с тидиазуро-ном на фоне 10 мкМ Си2+ и 0,1 мМ №2+ и на 14 сутки опыта - в варианте «цитодеф + 10 мкМ 7п2+» (см. табл. 2).
В опытах с пшеницей ни в одном из вариантов не отмечалось значительного превышения ИТ над водным контролем (см. табл. 3). На 7-е сутки опыта положительный эффект отмечен лишь в варианте «кинетин + 10 мкМ №2+». На 10-е или 14-е сутки значения ИТ в вариантах с ти-диазуроном и цитодефом на фоне 0,1 мМ 7п2+ и №2+, с тидиазуроном и кинетином на фоне 10 мкМ 7п2+ и с тидиазуроном на фоне 10 мкМ Си2+ и 1 мМ 7п2+ также поднимались до уровня контроля. В целом, по сравнению с другими изученными видами, пшеница отличалась более медленным и слабым откликом на присутствие РР в среде выращивания. Однако ни в одном из вариантов не отмечалось существенного снижения ИТ с течением времени, как это было показано для растений ячменя. Обобщение экспериментальных данных представлено в табл. 4.
В ряде вариантов у растений не отмечалось положительных откликов на ка-
кой-либо из исследованных РР. Так, у пшеницы в присутствии всех РР значения ИТ оставались ниже контрольных на фоне 1 мМ ионов №2+ и Си2+; 0,1 мМ Си2+ и 10 мкМ №2+; у растений ячменя - на фоне 1 мМ ионов Си2+и 0,1 мМ ионов гп2+, а у
* _
0
+
++
Таким образом, металлоустойчивость изученных растений уменьшалась в ряду георгин > ячмень > пшеница. Под влиянием регуляторов роста на фоне металлов металлоу-стойчивость культурных растений изменялась в зависимости от вида растения, использованного регулятора или металла, длительности экспозиции и концентрации ионов металла.
При 1 мМ изученных ТМ (за исключением ионов Си2+) наиболее эффективными регуляторами были тидиазурон и цитодеф, при 0,1 мМ ТМ - цитодеф и кинетин, при
георгина - на фоне 10 мкМ ионов Zn2+. Однако, в последних двух случаях какого-либо регулятора не требовалось, поскольку ИТ растений на фоне изученных концентраций ТМ без РР существенно не отличались от контроля, либо были выше него.
10,0 мкМ Си2+ - тидиазурон, Zn2+ - кинетин, М2+ - цитодеф. Наиболее сильно повышал металлоустойчивость растений пшеницы ти-диазурон, георгина - тидиазурон и цитодеф, ячменя - цитодеф и кинетин. На фоне ионов Си2+ и гп2+ наиболее эффективным был тидиазурон, на фоне ионов М2+ - цитодеф и ти-диазурон.
В целом, по сравнению с другими изученными видами, пшеница отличалась более медленным и слабым откликом на присутствие РР в среде выращивания.
Таблица 4
Отклики растений георгина, ячменя и пшеницы на синтетические регуляторы роста цитокининового типа действия на фоне ионов тяжелых металлов*
Регулятор Си гп N1 Вода
1 мМ 0,1 мМ 10 мкМ 1 мМ 0,1 мМ 10 мкМ 1 мМ 0,1 мМ 10 мкМ
Dahlia х culturum
Цитодеф + ++ + + + + ++ + ++ +
Кинетин + + + + ++ _ + + + +
Тидиазурон + + ++ ++ ++ ++ + ++ + +
Без регулятора + + ++ + ++ ++ + + ++ 0
Hordeum vulgare L.
Цитодеф - - _ ++ - + ++ ++ ++ -
Кинетин _ + _ - - ++ ++ - ++ _
Тидиазурон - - + - - - ++ + - +
Без регулятора - _ + _ + + _ + _ 0
Triticum aestivum L.
Цитодеф - - - - + - - + - -
Кинетин - - - - - + - + - -
Тидиазурон - - + + + + - + - -
Без регулятора - - + - - - - - - 0
- ИТ снижалось к 14 суткам
- ИТ существенно ниже водного контроля
- контроль
- ИТ на уровне контроля
- ИТ существенно выше водного контроля
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Лукаткин А. С. Холодовое повреждение теплолюбивых растений и окислительный стресс / А. С. Лукаткин. — Саранск : Изд-во Мордов. ун-та, 2002. — 208 с.
2. Цитокинин-подобные препараты ослабляют повреждения растений ионами цинка и никеля / А. С. Лукаткин [и др.] // Физиология растений. - 2007. - Т. 54, № 3. - С. 432-439.
3. Прасад М. Н. Микроэлементы в окружающей среде: биогеохимия, биотехнология и биоремедиа-ция /М. Н. Прасад, К. С. Саджван, Р. Найди. - М. : ФИЗМАТЛИТ, 2009. - 816 с.
4. Серегин И. И. Возможность применения регуляторов роста для снижения негативного действия кадмия на рост, развитие и продуктивность яровой пшеницы / И. И. Серегин // Агрохимия. - 2004. - № 1. - С. 71-74.
5. callender Е. Heavy Metals in the Environment - Historical Trends / E. Callender // Treatise on Geochemistry. - Elsevier, 2003. - Vol. 9 - P. 67-105.
6. Ghorbani M. Effect of cadmium and gibberellins on growth and photosynthesis of Glycine max / M. Ghorbani, S. H. Kareh, M. F. Serehr // Photosynthetica. - 1999. - Vol. 37, № 2. - P. 627-631.
7. Heavy Metal Stress in Plants : from Biomolecules to Ecosystems // M. N. V. Prasad [at al.]. -Heidelberg : Springer-Verlag, 2004. - 462 p.
8. Küpper H. Heavy Metals and Plants - a complicated relationship [Электронный ресурс] / H. Küpper. - Режим доступа: http://www.unikonstanz.de/FuF/Bio/kuepper/Homepage/Heavy_Met-al_detoxification_PortoAlegre2009.pdf. - Дата обращения 23.04.2010.
9. Interactive effects of gibberellin A3 and ascorbic acid on lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities in Glycine max seedlings under nickel stress / S. Saeidi-Sar [at al.]. // Russ. J. Plant Physiol. - 2007. - Vol. 54. - P. 74-79.
10. wilkins D. s. The measurement of tolerance to edaphic factors by means of root growth / D. S. Wilkins // New Phytol. - 1978. - Vol. 80. - P. 623-633.
Поступила 07.06.2013 г.
