CC BY
38
СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ БИОЛОГИЯ, 2012, № 2
Иммунитет и ветеринария
УДК 636.2:619:615.9:591.11
ДИНАМИКА БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ МНОГОКРАТНОЙ ОБРАБОТКЕ БУТОКСОМ
Л.К. ГЕРУНОВА1, Е.Г. БАРДИНА2
При наружной обработке коров черно-пестрой породы бутоксом изучали динамику биохимических показателей крови (активность холинэстеразы, щелочной и кислой фосфатазы, ас-партат- и аланинаминотрансферазы, содержание билирубина, общего белка, альбуминов, глобулинов, холестерина, креатинина). Установлена диагностическая информативность показателей активности холинэстеразы, щелочной и кислой фосфатаз. Доказано, что многократное использование препарата вызывает у животных изменение функционального состояния печени и почек.
Ключевые слова: бутокс, интоксикация, биохимические показатели, крупный рогатый
скот.
Keywords: butox, intoxication, biochemical indices, cattle.
При бесспорной пользе и экономической эффективности пестицидов в защите растений от болезней, вредителей и сорняков, сохранении и увеличении урожаев, а также в защите животных от кровососущих насекомых и эктопаразитов использование этих препаратов может иметь и имеет негативные последствия. Нарушение правил транспортировки, условий хранения и регламентов применения пестицидов создает предпосылки для загрязнения объектов окружающей среды, включая корма для животных и продукты питания людей. Контактирование человека и сельскохозяйственных животных с такими в большинстве своем токсичными препаратами приводит к возрастанию потенциальной опасности возникновения острых и хронических отравлений (1-4). В связи с этим углубленное изучение патогенеза пестицидных интоксикаций, поиск новых способов диагностики патологического процесса остаются актуальными направлениями в клинической токсикологии.
Задачей настоящего исследования было выявление диагностически значимых биохимических показателей крови при хронической интоксикации препаратом бутокс.
Методика. Исследование проводили в одном из хозяйств Омской области на коровах черно-пестрой породы (кормление и содержание животных соответствовало стандартным технологиям). Для обработки использовали бутокс («Intervet», Голландия) — эмульгирующий концентрат, содержащий синтетический пиретроид. Препарат обладает широким спектром инсектоакарицидного действия. Для определения его гематотоксических эффектов были сформированы две группы коров (по 5 гол. в каждой) в возрасте 3 лет. Животные из опытной группы подвергались 4-кратной наружной обработке препаратом один раз в 10 сут (рабочий раствор получали разведением концентрата 1:1000). Объем раствора для однократного опрыскивания животного составлял 2 л. Режим обработки соответствовал требованиям инструкции по применению препарата и установленному периоду эффективного действия (5). Кровь на исследование отбирали 4 раза с периодичностью 10 сут через день после обработки, 5-й раз — через 1 мес после последней обработки.
Биохимические исследования плазмы крови проводили с помощью
наборов реактивов («Hospitex Diagnostics», Италия) на биохимическом анализаторе-автомате АБ-02 (Уральский оптико-механический завод, Россия).
Данные обрабатывали статистически в программе Microsoft Excel с использованием параметрического ^-критерия Стьюдента (6).
Результаты. Уже через 1 сут после первой обработки коров буток-сом активность холинэстеразы в плазме крови увеличилась на 18,3 % по сравнению с контролем (Р < 0,01) (табл.). Тенденция к повышению этого показателя сохранялась на 10-е, 20-е, 30-е и 60-е сут исследования. Можно предполагать, что поступление в организм бутокса приводит к повреждению части молекул холинэстеразы в клетках, на что гепатоциты реагируют усилением биосинтеза этого энзима с его последующим поступлением в кровь. Подобное отмечается при некоторых хронических отравлениях, например дибутилфенилфосфатом (7).
Динамика биохимических показателей плазмы крови у коров черно-пестрой породы при многократной наружной обработке бутоксом (п = 5, М±т, Омская обл.)
Число обработок Через З0 сут
Показатель Группа 1 2 З 4 после 4-й обработки
Холинэстераза, К З05,5±8,5 З04,4±2З,4 З49,З± 10,7 З44,5± 17,0 З43,8± 15,9
МЕ/л О Зб1,З±19,7** З10,б±1З,б З72,1±18,7 418,5±З4,9 З79,5±15,З
Щелочная фосфата- К З4,б±2,З 29,5±2,З З8,7±0,б З9,б±1,б 45,2±0,9
за, МЕ/л О б8,9±20,7 5б,9±14,5* б4,9±1З,5* бЗ,З±7,9 8З,2±10,5*
Кислая фосфатаза, К 0,4±0,2 0,б±0,1 0,7±0,2 0,4±0,9 2,З ±0,1
МЕ/л О 1,5±0,5* 1,2±0,2* 1,5±0,5* 0,5±0,1** 2,4±0,2
Билирубин, К З,7±0,2 б,4±З,1 З,2±0,5 З,9±0,9 8,9±0,б
мкмоль/л О З,б±0,7** 4,9±1,З 4,0±0,9 4,1±1,2 9,З±0,4
Аспартатаминотранс- К 144,б±2,З 209,9±З0,9 110,б±21,7 149,9±10,0 128,0±З,7
фераза, МЕ/л О 150,З±12,З 150,2±8,З 150,З±1З,9 148,З±12,5 121,б±7,0
Аланинаминотранс - К 84,2±15,9 100,0±22,б 80,7±2,2 91,8±9,0 б1,5±4,8
фераза, МЕ/л О б9,9±б,8 94,9±11,б 107,7±14,З 94,б±10,б б2,2±7,0
Общий белок, г/л К 90,З±4,5 88,1±4,4 89,б±4,З 91,б±З,б 87,0±З,7
О 95,1±2,5 92,б±1,9 89,9±1,4 98,1±1,5 91,0±2,9
Альбумины, г/л К 45,1±1,2 48,4±1,б 51,7±0,б 48,4±2,2 З9,4±1,З
О 49,З±1,5 49,5±1,5 49,б±З,2 47 ,З± 1 1 42,З±0,8*
Глобулины, г/л К 45,2±5,5 З9,7±5,7 З7,9±4,8 4З,2±5,1 47,б±4,9
О 4З,7±2,2 4З,1±З,1 40 ,З ±З ,7 50,8±1,З 48,8±2,З
Холестерин, моль/л К 2,2±0,1 З,б±0,б З,2±0,1 4,8±0,9 4,9±0,4
О 2,1±0,1 1,8±0,1 2,8±0,2 З,8±0,З 4,9±0,1
Холестерин ЛПВП, К 1,5 ±0,1 1,8±0,2 1,9±0,2 2,5±0,З 2,1±0,2
моль/л О 1,5 ±0,1 1 ,б±0,1 1,7±0,2 2,З±0,2 2,2±0,1
Креатинин, МЕ/л К 179,б±29,2 251,З±З7,4 25З,7±21,8 287,7±41,б 190,8±10,б
О 15б,2±14,5 297,4±18,9 2б2,5±З0,5 287,8±10,0 224,8±5,9*
П р и м е ч а н и е. К и О — соответственно контрольная и опытная группы; ЛПВП — липопротеиды высокой плотности. * и ** Соответственно Р < 0,05 и Р < 0,01.
С усиленным поступлением бутокса в ткани печени связано повышение активности щелочной фосфатазы в плазме крови коров. К концу 1-х, 10-х, 20-х, 30-х и 60-х сут после начала обработок животных бутоксом она превышала аналогичный показатель у коров, не подвергавшихся обработке, соответственно на 99,1; 92,9; 67,7; 59,8 и 84,1 %. Вероятно, щелочная фосфатаза поступает в кровь преимущественно из эпителия желчевыводящих путей, где она весьма активна. Повышение активности характерно для состояний, сопровождающихся нарушением образования или оттока желчи, и токсического поражения печени (8).
Увеличение активности этого фермента в плазме крови у коров, подвергшихся обработке бутоксом, происходило на фоне повышенной активности кислой фосфатазы. К концу 1-х, 10-х, 20-х и 30-х сут регистрируемый показатель статистически достоверно превышал аналогичный у контрольных животных соответственно на 248,8; 100,0; 114,3 и 25,0 %.
10З
Очевидно, обработка бутоксом приводит к раздражению клеток некоторых структур репродуктивной или кроветворной системы, где активность кислой фосфатазы особенно высока.
Несмотря на рост активности всех трех названных энзимов, поражение печени у коров, обработанных бутоксом, клинически не проявлялось. В частности, содержание билирубина в плазме крови животных не только не увеличивалось, но к концу 1-х сут даже снижалось (на 36,8 %; Р < 0,01). Это может быть связано с дефицитом гемоглобина, развившимся в результате торможения бутоксом его биосинтеза. В свою очередь, уменьшение пула гемоглобина приводит к снижению интенсивности распада этого хромопротеина с последующим торможением образования прямого и непрямого билирубина.
Свидетельством сохранности структуры печени после обработки коров бутоксом также служило отсутствие статистически достоверного различия между активностью аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и аланинами-нотрансферазы (АлАТ) в крови подопытных и контрольных животных.
Гепатоциты — основные продуценты белков плазмы крови (8), поэтому эффективность белковообразовательной функции печени у коров, обработанных бутоксом, также указывала на сохранность клеток этого органа. Содержание белков в плазме крови у животных из опытной группы на протяжении периода наблюдений не только не снижалась, но даже умеренно повышалась. Основная их часть (альбумины, а- и р-глобулины) синтезируется в гепатоцитах. Содержание альбуминов в крови подопытных животных на 60-е сут исследования достоверно возрастало на 7,4 %.
В целом содержание глобулинов в плазме крови коров из опытной группы имело тенденцию к повышению в течение эксперимента. Следовательно, организм реагирует на действие бутокса активацией биосинтеза компонентов крови, ответственных за иммунитет.
В период обработки животных в плазме крови отмечалось снижение концентрации холестерина. Поскольку это вещество синтезируется клетками печени, регистрируемое уменьшение анализируемого показателя свидетельствует об умеренном нарушении их функции. Наиболее четко снижение количества холестерина выражено при диффузном повреждении печеночной паренхимы (8, 9).
В обезвреживании поступающих в организм чужеродных веществ участвуют и клетки почек. Этот процесс сопряжен с продукцией активных форм кислорода, повреждающих мембранные структуры клеток. Поэтому обработка коров бутоксом потенциально могла привести к повреждению почек с последующим снижением их способности экскретировать из организма креатинин (10). Концентрация последнего в крови у коров из опытной группы на 60-е сут исследования возрастала на 17,8 % по сравнению с контролем (Р < 0,051).
Таким образом, динамика биохимических показателей крови указывает на потенциальную опасность многократных обработок животных бутоксом. Наиболее информативным оказалось изменение активности трех ферментов — холинэстеразы, а также щелочной и кислой фосфатаз, которая возрастает у крупного рогатого скота после каждой обработки и остается повышенной через 30 сут после 4-й обработки, что может иметь диагностическое значение при хронической интоксикации бутоксом.
Л И Т Е Р А Т У Р А
1. Г е р у н о в а Л.К., Б о й к о Т.В., Д о в г а н ь Н.Б. Случай отравления крупного
рогатого скота при использовании пестицидов для борьбы с саранчовыми. Мат. Межд. конф. ветеринарных фармакологов и токсикологов, посвященной 125-летию Н.А. Соше-ственского. Казань, 2001: 32-34.
2. Г е р у н о в а Л.К., О к о л е л о в В.И., Б о й к о Т.В. Гематотоксическое действие пестицидов на теплокровных животных. С.-х. биол., 2003, 4: 75-78.
3. И в а н о в А.В., Т р е м а с о в М.Я., П а п у н и д и К.Х. Токсикологическая безопасность — проблемы и пути решения. Мат. II съезда ветеринарных фармакологов и
токсикологов России «Современные проблемы ветеринарной фармакологии и токсикологии». Казань, 2009: 5-10.
4. Р а к и т с к и й В.Н. Токсикология пестицидов. Токсикологический вестник, 2010, 3: 21-23.
5. Е р е м и н а О.Ю., И б р а г и м х а л и л о в а И.В., Л о п а т и н а Ю.В. Сравнительное определение продолжительности остаточного действия инсектицидов из разных
химических групп на имаго блох (Siphonaptera). С.-х. биол., 2010, 6: 108-117.
6. В а д з и н с к и й Р. Статистические вычисления в среде Excel. Библиотека пользователя. СПб, 2008.
7. Ш е ф т е л ь В.О. Полимерные материалы. Токсические свойства. Л., 1982.
8. К а л м ы к о в В.Н., П е т р о в с к и й В.И. Введение в клиническую биохимию.
Петрозаводск, 1988.
9. М а р ш а л л В.Дж. Клиническая биохимия /Пер. с англ. М.-СПб, 2000.
10. P a i n t e r P.C., C o p e J.Y., S m i t h J.L. Reference information for the clinical laboratory. In: Tietz textbook of clinical chemistry /C.A. Burtis, E.R. Ashwood (eds.). Philadelphia, WB Saunders ^mpany, 1999.
1ФГБОУ ВПО Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина,
644008 г. Омск, Институтская пл., 2, e-mail: gerliud@mail.ru;
2ГОУ ВПО Омский государственный технический университет,
644050 г. Омск, просп. Мира, 11, e-mail: bardina_55@mail.ru
DYNAMICS OF BIOCHEMICAL PARAMETERS OF CATTLE BLOOD AT THE MULTIPLE TREATMENTS BY BUTOX
L.K. Gerunova1, E.G. Bardina2 S u m m a r y
At the external treatment of cows of the Black-and-White breed by butox the authors studied the dynamics of blood biochemical parameters (the activities of choline esterase, alkaline and acid phosphatase, aspartate- and alanine aminotransferase, the content of bilirubin, total protein, albumins, globulins, cholesterol and creatinine). The diagnostic informativity of indices of choline esterase, alkaline and acid phosphatase activities was established. It was demonstrated that multiple use of this preparation result in the changes of functional state of animal liver and kidneys.
Поступила в редакцию 3 ноября 2011 года
Новые книги
А н и с и м о в а Е.И., П о л о з С.В., С у б-б о т и н А.М. Гельминты хищных млекопитающих (семейство Canidae, Fischer, 1817) в естественных условиях и на зверофермах.
Минск: изд-во «Беларуская навука», 2011, 236 с.
В монографии представлены результаты многолетних исследований, выполненных авторами в ГНПО «НПЦ НАН Беларуси по биоресурсам», в РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вы-шелесского» и Витебской государственной академии ветеринарной медицины. Она написана главным образом на оригинальных материалах, собранных во время экспедиций, полевых выездов и при проведении экспериментальных работ. Рассматриваются вопросы
формирования гельминтоценозов крупных хищных млекопитающих (волк, лисица, енотовидная собака) в различных условиях обитания. Приводятся данные по структуре гельминтоценозов и разнообразию гельминтов в диких популяциях псовых в различных ландшафтах Беларуси, а также по эпизоотологии гельминтозов песцов и лисиц в звероводческих хозяйствах республики. Особое внимание уделяется факторам воздействия гельминтов на организм и реакции экспериментальных животных на заражение гельминтами. Представляет интерес для паразитологов биологического и ветеринарного профиля, а также для широкого круга специалистов в области рационального природопользования и охотничьего хозяйства.
