CC BY
61
УДК 616.12-008.331.1: 577.156.6 Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
«корчей» на 21,9% и 22,9% соответственно. Анальгин уменьшал этот показатель на 65,1% по сравнению с группой контрольных животных. При термическом раздражении (модель «горячей пластинки») настой и ВРПС в исследуемых дозах через 30 минут после введения достоверно снижают уровень болевой чувствительности у мышей, увеличивая время спокойного пребывания животных на нагретой пластинке, по сравнению с контролем на 23,4% и 11,0% соответственно. Препарат сравнения - анальгин увеличивал этот показатель на 41,4% по сравнению с контролем.
Полученные результаты свидетельствуют о наличии у настоя и ВРПС травы короставника полевого анальгезирующего эффекта. Таким образом, использование настоя и ВРПС в качестве самостоятельного болеутоляющего средства или как компонента при комплексной терапии позволит расширить ассортимент болеутоляющих средств растительного происхождения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа. МЗ СССР. - М.: Медицина, 1987. - 11-е изд. - 336 с.
2. Дикорастущие полезные растения России / Отв. ред. А. Л. Бу-данцев, Е. Е. Лесиовская. - СПб: изд-во СПХФА, 2001. - 663 с.
3. Кочетков Н. К. Химия биологически активных природных соединений. - М.: Химия, 1970. - 378 с.
4. Маевский П. Ф. Флора средней полосы Европейской части России. - М.: Товарищество научных изданий КМК, 2006. - 600 с.
5. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 23 августа 2010 г. № 708н «Об утверждении правил лабораторной практики».
6. Прудников Н. А., Полуянов А. В. Сосудистые растения Курской области. - Курск: КГУ, 2005. - 80 с.
7. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: Медицина, 2000. - 398 с.
8. Сернов Л. М., Гацура В. В. Элементы экспериментальной фармакологии. - М., 2000. - 352 с.
9. Флора средней полосы России: Атлас-определитель / К. В. Киселева, С. Р. Майоров, В. С. Новиков. - М.: ЗАО «Фитон+», 2010. - 544 с.
Поступила 17.03.2011
Т. А. ГЛИНСКИХ, 3. И. МИКАШИНОВИЧ, Е. С. БЕЛОУСОВА
ДИНАМИКА АКТИВНОСТИ АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ У ПАЦИЕНТОВ С АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИЕЙ ДО И ПОСЛЕ ГИПОТЕНЗИВНОЙ ТЕРАПИИ
Кафедра общей и клинической биохимии № 1 ГОУ ВПО «Ростовский государственный медицинский университет Минздравсоиразвития РФ», Россия, 344022, г. Ростов-на-Дону, пер. Нахичеванский, 29, тел. (863) 201-44-17. E-mail: [email protected]
Цель исследования - анализ функционального состояния ферментативной антиоксидантной защиты у пациентов с артериальной гипертензией (АГ) до и после купирования гипертонического криза. Установлено, что развитие гипертонических кризов сопровождается разобщением работы основных ферментов антиоксидантной защиты (АОЗ) эритроцитов. После купирования ГК нифедипи-ном и каптоприлом сохраняется разобщение механизмов АОЗ, что способствует превалированию прооксидантных процессов.
Ключевые слова: артериальная гипертензия, эритроциты, антиоксиданты, нифедипин, каптоприл.
T. A. GLINSKIH, Z. I. MIKASHINOWICH, E. S. BELOUSOVA
ANTIOXIDANT ENZYMS' ACTIVITY AT HYPERTONIC PATIENTS BEFORE AND AFTER HYPOTENSIVE THERAPY
Department of common and clinical biochemistry № 1 State eductational enterprise of highest professional education Rostov on Don state medical university Federal agency of health protection and social development,
Russia, 344022, Rostov on Don, Nachichevansky, 29, tel. (863) 201-44-17. E-mail: [email protected]
Aim of the study - estimation of antioxidant enzymes activity at hypertonic patients before and after hypotensive therapy. The treatment by niphedipin and captopril does not prevent this imbalance in spite of hypertensive effect.
Key words: arterial hypertension, erythrocytes, antioxidants, niphedipin, captopril.
Введение
Наиболее частой причиной смертности населения развитых стран являются заболевания сердечно-сосудистой системы. Согласно статистическим данным, ведущее место в структуре инвалидизации и смертности
занимают ишемическая болезнь сердца и артериальная гипертензия [1, 2].
В последнее время роль кислородных свободных радикалов в развитии сердечно-сосудистой патологии связывают с нарушением регуляции сосудистого
тонуса. Доказано, что супероксидный анион-радикал и пероксид водорода являются индукторами фактора роста сосудистых гладкомышечных клеток [10] и вызывают сокращение сосудов [6]. Активные кислородные метаболиты (АКМ) способствуют ускоренной мобилизации Са2+ из саркоплазматического и митохондриального депо [7], активации №+\Н+ обмена и защелачиванию внутриклеточной среды, что стимулирует сократимость сосудистой гладкой мышцы [6].
Имеются данные о том, что повышенная продукция АКМ способствует увеличению проницаемости эндотелия, экстракции белков плазмы, привлечению противовоспалительных белков и клеток, что усиливает повреждение сосудов [9].
В связи с вышеизложенным целью исследования является анализ функционального состояния ферментативной антиоксидантной защиты у пациентов с артериальной гипертензией (АГ) до и после купирования гипертонического криза (ГК).
Материалы и методы
Было обследовано 120 человек в возрасте от 40 до 75 лет. Первую группу составили 30 пациентов, страдающих АГ, без клиники криза. Вторую клиническую группу составили 60 пациентов с частыми гипертоническими кризами. Пациенты этой группы были разделены на 2 подгруппы. Первая подгруппа представлена пациентами, у которых подъем АД купировался приемом антагониста кальция нифедипина, у пациентов второй подгруппы - приемом иАПФ каптоприла. Контрольную группу составили 30 человек, практически здоровых. Все больные страдали эссенциальной артериальной гипертензией.
Степень тяжести АГ оценивалась согласно рекомендациям Всероссийского научного общества кардиологов (ВНОК) 2010 г.
Кроме проводившегося больным общеклинического обследования, включавшего сбор и анализ медицинского анамнеза, данных физического обследования и повторного измерения АД, проводились ЭКГ-обследо-вание, исследование общего анализа крови, общего анализа мочи, определение содержания в крови глюкозы натощак, общего холестерина, калия, креатинина, ЭхоКС.
Выбор гипотензивной терапии осуществлялся с учётом клинического течения заболевания. При фиксации частоты сердечных сокращений (ЧСС) свыше 80 в мин предпочтение отдавалось иАПФ каптоприлу в дозе 25 мг, при более низких значениях ЧСС назначали нифедипин в дозе 10 мг, относящийся к антагонистам кальция. Эффективность проводимой антигипертен-зивной терапии оценивалась по следующим параметрам: 1 - снижение АД на 25% от исходного показателя; 2 - изменение показателей, указывающих на наличие гипоксии.
Активность ферментов антиоксидантной защиты определяли в эритроцитах венозной крови. Активность глутатионпероксидазы (ГПО) определяли по методу, описанному А. И. Карпищенко и др. (1999). Активность глутатионредуктазы (ГР) определяли по скорости окисления НАДФН+Н методом Л. Б. Юсуповой (1989). Определение активности супероксиддисмутазы (СОД) проводили по методу Н. Р. М1Бга и и РпСоуюИ (1972) в модификации О. Г. Саркисяна (2000). Активность ката-лазы определяли методом, предложенным Королюк и др. (1988). Определение концентрации восстановлен-
ного глутатиона (ОЭН) проводили методом О. 1_. Е11тап (1959).
Статистическую обработку экспериментальных данных проводили согласно общепринятым методам с определением средней арифметической, ошибки средней с использованием программы «ЭТАНЭТЮА», версия 6.0. О достоверности отличий учитываемых показателей сравниваемых групп судили по величине ^критерия Стьюдента после проверки распределения на нормальность. Статистически достоверными считали отличия, соответствующие оценке ошибки вероятности р < 0,05.
Результаты и обсуждение
Результаты исследования представлены в таблице. Установлено, что у больных, страдающих артериальной гипертензией, не сопровождающейся кризовым течением, активность СОД и каталазы соответствует показателям контрольной группы. При этом в эритроцитах пациентов с кризовым течением АГ выявлено достоверное снижение активности СОД на 18,47% (р<0,05) относительно контрольной группы.
Снижение активности СОД в условиях гипоксии может иметь решающее значение в формировании дальнейшего повреждения эритроцитов, что объясняется рядом положений. Во-первых, СОД, выступая мощным ингибитором окислительных процессов в них, предотвращает гемолиз, способствует поддержанию стабильности мембран и формы эритроцитов [3]. Во-вторых, в процессе метаболического превращения «гемоглобин/метгемоглобин» могут образовываться промежуточные продукты, способные к генерации реактивных оксигенных радикалов, что также объясняет необходимость сохранения высокой активности СОД и каталазы в эритроцитах [5].
При определении активности ферментов глутати-онзависимого звена антиоксидантной защиты (АОЗ) у пациентов с АГ, не отягощенной развитием криза, выявлено снижение концентрации ОЭН на 41,47% (р<0,05), тогда как активность ферментов обмена глу-татиона - ГПО и ГР достоверно не изменилась по сравнению с контрольной группой. Развитие гипертонического криза сопровождается выраженным дисбалансом в глутатионовом звене АОЗ: активность ГПО увеличена на 52,88% (р<0,001), активность ГР снижена на 43,85% (р<0,001), концентрация ОЭН не отличалась по сравнению с контрольной группой.
После купирования ГК в эритроцитах пациентов, принимавших нифедипин, выявлено резкое увеличение активности СОД - на 130,98% (р<0,001) - относительно пациентов с кризовым течением АГ до лечения. Относительно контрольной группы активность СОД была увеличена на 88,33% (р<0,001), активность ка-талазы достоверно не отличалась. Такая ситуация не может считаться благоприятной, так как в условиях неравнозначной активности СОД и каталазы возможно накопление пероксида водорода, обладающего цито-токсическим действием и способностью увеличивать сосудистую вазоконстрикцию.
В то же время у пациентов этой группы выявлено достоверное снижение концентрации ОЭН - на 17,49% (р<0,05) и активности ГПО - на 25,35% (р<0,001), тогда как активность АГ достоверно не изменилась по сравнению с показателями больных до лечения. Относительно контрольной группы активность ГПО была
Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
Кубанский научный медицинский вестник № 3 (126) 2011
Активность основных ферментов антиоксидантной защиты в эритроцитах
до и после купирования ГК
Показатель группы СОД (ед. акт ./г Hb) Каталаза (мКат/г Hb) ГПО (мкмоль/г Hb) ГР (мкмоль/г Hb) GSH (мкмоль/г Hb)
Контрольная группа 574,7±5,73 2,53±0,052 2,13±0,055 12,70±0,074 5,82±0,042
Пациенты с АГ без ГК 575,8±6,13 2,66±0,059 p2<0,1 2,09±0,060 р2<0,1 12,74±0,072 р2<0,1 3,41±0,082 р2<0,05
Пациенты с АГ и ГК 468,0±7,09 р2<0,05 2,23±0,057 р2<0,1 3,87±0,168 р2<0,001 7,13±0,082 р2<0,001 6,22±0,179 р2<0,1
Пациенты с АГ и ГК, принимавшие нифедипин 1081,0±17,40 р1<0,001 р2<0,001 2,39±0,053 р1<0,1 р2 <0,1 1,59±0,081 p1<0,001 р2<0,001 7,19±0,072 p1<0,1 р2<0,001 5,13±0,071 p1<0,05 f>2<0,1
Пациенты с АГ и ГК, принимавшие каптоприл 437,0±6,575 р1<0,1 р2<0,001 2,04±0,030 р1< 0,1 р2<0,001 3,14±0,112 p1<0,1 р2<0,001 8,04±0,030 p1<0,05 р2<0,001 5,77±0,071 p1<0,1 р2<0,1
Примечание: р1 - достоверно относительно группы больных до лечения (р<0,05); р2 - достоверно относительно контрольной группы (р<0,05).
снижена на 52,82% (р<0,001), ГР - на 90,63% (р<0,001), концентрация ОЭН достоверно не отличалась.
Снижение активности ферментов глутатионзави-симого звена может быть связано с ингибирующим влиянием СОД. В экспериментальных исследованиях показано, что избыток СОД может путём обратной регуляции ингибировать синтез антиоксидантных ферментов, что делает клетки более уязвимыми к окислительной атаке [8]. По-видимому, в данной ситуации основная защитная роль принадлежит каталазе, которая обладает меньшим сродством к пероксиду водорода и эффективно удаляет избыток последнего при повышенной продукции [4].
В эритроцитах больных, принимавших каптоприл, выявлена тенденция к дальнейшему снижению активности СОД и каталазы по сравнению с пациентами до лечения. Относительно контрольной группы активность обоих ферментов была снижена: СОД - на 23,87% (р<0,001) и каталазы - на 19,37% (р<0,001), что может способствовать дальнейшему повреждению эритроцитов.
Динамика активности ферментов обмена глутатио-на у пациентов данной группы характеризовалась увеличением активности ГК на 12,76% (р<0,05), тогда как активность ГПО и концентрация ОЭН достоверно не изменились по сравнению с показателями до лечения. По сравнению с контрольной группой концентрация ОЭН достоверно не отличалась, активность ГПО оставалась увеличенной на 47,42% (р<0,001), активность ГР, напротив, снижена на 36,69% (р<0,001).
Устойчивость организма к окислительному повреждению определяется организованной, взаимодополняющей работой всех механизмов защиты от агрессивных кислородных метаболитов. Можно сказать, что после применения препарата данной группы, судя по полученным результатам, сохраняется разобщённость действия ферментов антиоксидантной защиты.
В заключение можно сделать следующие выводы:
1. Формирование гипертонических кризов сопровождается нарушением работы ферментативной антиоксидантной защиты и характеризуется разнонаправлен-
ными изменениями активности основных ферментов АОЗ эритроцитов - СОД, каталазы и ГПО.
2. Динамика активности основных антиоксидантных ферментов после купирования ГК нифедипином и кап-топрилом указывает на сохраняющееся разобщение важнейших звеньев АОЗ, что способствует превалированию прооксидантных процессов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Адаменко А. Н., Прохорович Е. А., Ткачук О. Н. и др. Артериальная гипертония у женщин репродуктивного возраста // Русский медицинский журнал. - 2007. - Т. 15. № 2. - С. 1440-1443.
2. Бурцев В. И. Актуальные вопросы артериальной гипертонии в клинической практике // Клиническая медицина. - 2005. -№ 8. - С. 25-32.
3. Гуськова Р. А., Виленчик М. М., Кольтовер В. Н. Роль свободных супероксидных радикалов в старении биологических объектов // Биофизика. - 1980. - Т. 25. № 1. - С. 102-105.
4. Зенков Н. К., Ланкин В. З., Меньщикова Е. Б. Окислительный стресс. Биохимические и патофизиологические аспекты. - М.: «МАИК Наука/Интерпериодика», 2001. - 343 с.
5. Capel I. D. Antioxidant defence in hypoxic region of tumor // Med. biol. - 1981. - Vol. 62. № 2. - P. 119-120.
6. Cosentino F., SillJ. C., KatusicZ. C. Role of superoxide anions in the mediation of endothelium-dependent contractions // Hypertension. -1994. - Vol. 23. - P. 229-235.
7. Hu Q., Corda S., Zweier I. L. et al. Hydrogen peroxide induces intracellular calcium oscillation in human aorta endothelial cells // Circulation. - 1998. - Vol. 97. - P. 268-275.
8. Meneghini R., Benfato M. S., Bertoncini C. R. et al. Iron homeostasis and oxidative DNA damage // Cancer j. - 1995. -Vol. 8. - P. 109-113.
9. Somers M. I., Harrison D. G. Reactive oxygen species and the control of vasomotor tone // Curr. hypertens. rep. - 1999. - Vol. 1. -P. 102-108.
10. Zafari A. M., Ushio-Fukai M. et al. Role of NADH/NADPH oxidase-derived H2O2 in angiotensin Il-induced vascular hypertrophy // Hypertension. - 1998. - Vol. 32. - P. 488-495.
Поступила 28.02.2011
