CC BY
49
УДК 616-053.2-07-078:614.87(571.51) С.С. Бакшеева
ДИАГНОСТИКА ДОНОЗОЛОГИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ У ДЕТЕЙ В УСЛОВИЯХ ТЕХНОГЕННОГО ПРЕССИНГА
Изучены эндоэкологический статус и состояние системы местного иммунитета слизистых оболочек верхних дыхательных путей и ротовой полости у детей, проживающих в экологически неравнозначных районах города Красноярска. Предложена диагностика нарушений.
Ключевые слова: бактерионосительство, донозологические нарушения, окружающая среда, биохимия.
S.S. Baksheeva DIAGNOSTICS OF CHILDREN UNDERNOSOLOGICAL DESEASES
Endoecological status and local immunity system condition of upper airways mucous membranes and mouth cavity of children, who live in ecologically inequivalent Krasnoyarsk city areas is researched in the article. Diagnostics infringements is offered.
Key words: bacteria vection, undernosological deseases, environment, biochemistry.
Ежегодно в результате деятельности человека в атмосферу выбрасываются миллионы тонн загрязняющих веществ, при этом мощность антропогенного воздействия увеличивается с каждым годом [7]. Прежде всего, качество окружающей среды оказывает выраженное влияние на формирование показателей детского организма. Большое число антропогенных факторов окружающей среды, действуя на низких уровнях и не являясь прямой причиной тех или иных заболеваний, может изменить сопротивляемость организма. Неспецифический характер влияния факторов окружающей среды на организм проявляется снижением естественной сопротивляемости организма, а также ранними неблагоприятными функциональными изменениями в различных физиологических системах [9-10].
Как известно, факторы окружающей среды, воздействующие на организм человека, могут приводить к изменениям эндоэкологического статуса, включая состав и активность микрофлоры [6-8; 12]. Слизистые оболочки человека играют важную барьерную роль в защите организма от воздействия неблагоприятных факторов окружающей среды. Дыхательный тракт и полость рта являются «входными воротами» для загрязнителей окружающей среды и от состояния иммунной защиты со стороны слизистых оболочек зависит степень контакта, мера вхождения неблагоприятного фактора, вдыхаемого человеком.
Показатели функции иммунной системы слизистых оболочек (активность лизоцима, секреторного в!дА и некоторых других) являются весьма информативными в оценке уровня защиты слизистых от вредных факторов окружающей среды.
Цель работы - диагностика донозологических нарушений у детей в условиях техногенного прессинга крупного промышленного города.
Материалы и методы исследований. Для решения поставленных задач проведено обследование 358 детей, проживающих в районах с различной антропогенной нагрузкой г. Красноярска. Обследованные дети были разделены на две группы. В первую группу вошли дети, проживающие в экологически благополучном районе - 1-й район (п=202), а во вторую в экологически неблагополучном - 2-й район (п=183). Главным критерием данного разделения явились коэффициенты суммарного загрязнения воздуха, по которым зоны наблюдения различались (Доклад о санитарно-эпидемиологической обстановке в Красноярском крае в 2007 г.). Обследуемые дети в возрасте 7-11 лет относились к 1-й и 2-й группе здоровья и проживали в исследуемых районах города с момента рождения.
В каждой группе оценивали биохимические показатели слюны, концентрацию лизоцима и содержание секреторного иммуноглобулина (sIgA) в смывах со слизистой полости носа, а также проводили бактериологическое исследование на предмет носительства золотистого стафилококка.
Забор нестимулированной смешанной слюны проводили через 1,5-2 ч после еды (после предварительного прополаскивания полости рта кипяченной водопроводной водой) в стерильную пробирку в количестве 2-3 мл. Материал доставляли в лабораторию в течение 3-х часов с момента сбора анализа. Образцы слюны перед исследованием центрифугировали в течение 20 минут при 3000 об/мин. Исследование проводили в день сбора материала.
В смешанной слюне определяли концентрацию общего белка, лизоцима, активность а-амилазы и общей щелочной фосфатазы. Концентрацию общего белка определяли унифицированным биуретовым методом по конечной точке реактивами фирмы «Vital Diagnostics» (Россия, кат. № В06.01) на полуавтоматическом биохимическом анализаторе «Photometer 5010» (Германия, Берингер Манхейм). Измерение активности а-амилазы проводили на полуавтоматическом биохимическом анализаторе «Photometer 5010» (Германия, Берингер Манхейм) унифицированным амилокластическим методом по Каравею реактивами фирмы «Vital Diagnostics» (Россия, кат. № В11.01). Активность щелочной фосфатазы кинетическим методом на биохимическом анализаторе "Hitachi-912” (фирмы Hoffman-La Rosh) с встроенным набором программ качества лабораторных исследований по унифицированным методикам реактивами фирмы "Rosh” (Швейцария). Концентрацию лизоцима определяли по стандартной методике.
Состояние местного иммунитета слизистых оболочек верхних дыхательных путей изучали посредством определения концентрации секреторного иммуноглобулина (sIgA) в смывах со слизистой передних отделов полости носа. Количественное определение sIgA проводили с помощью набора «IgA секреторный-ИФА-БЕСТ» ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск) на комплекте оборудования для ИФА (Bio-Rad, США - Франция).
Выделение и идентификацию стафилококков проводили общепринятыми методами [11]. При определении видовой принадлежности штаммов использовали микротесты фирмы «Lachema» (Чехия»).
При обследовании детей на стафилококковый биоценоз исследуемый материал (клетки эпителия слизистой носа) засевали на чашки с желточно-солевым агаром. После инкубировали при 37оС в течение 24-48 часов производили количественную и качественную оценку выросших колоний, расчет показателя микробной обсемененности (ПМО).
Число микробных клеток 103 и более на тампон является показателем высокой обсемененности и свидетельствует о бактерионосительстве, представляющем эпидемическую опасность.
Тип стафилококкового бактерионосительства определяли по антилизоцимной активности (АЛА) штамма. При наличии у золотистых стафилококков АЛА-признака бактерионосителей относили к резидентным [1].
Результаты исследований подвергнуты общепринятой статистической обработке.
Результаты исследований и их обсуждение. При обследовании детей, проживающих в районах г. Красноярска, с различной антропогенной нагрузкой установлено, что уровень активности а-амилазы и активности общей щелочной фосфатазы в слюне детей из района с неблагоприятными экологическими условиями был достоверно ниже, чем у детей, проживающих в районе с меньшей антропогенной нагрузкой (табл. 1).
Таблица 1
Содержание а-амилазы, щелочной фосфатазы и общего белка в слюне детей, проживающих в районах с разной антропогенной нагрузкой
Район Район 1, экологически благополучный Район 2, экологически неблагополучный Достоверность
n=202 n=183
Амилаза, мг/(ч*мл 189,2±0,2 158,4±1,3 1.2 P<0,001 1.3 P<0,001
Щелочная фосфатаза, u/l 10,5±0,6 15,8±0,2 1,2 P<0,001
Общий белок, г/л 0,41±0,10 2,34±0,20 1,2 P<0,001
Это может быть связано с влиянием неблагоприятных факторов внешней среды на деятельность слюнных желез и снижением их функции.
В то же время содержание общего белка в слюне детей из районов с неблагоприятными экологическими условиями было статистически выше, чем в слюне детей из экологически благополучного района (табл.1). В норме в слюне содержатся белки, синтезируемые как в слюнных железах, так и вне их, часть белков слюны имеет сывороточное происхождение. Повышение концентрации белка в слюне у детей из экологически неблагополучного района может быть связано с началом развития воспаления слизистых оболочек ротовой полости у этих детей, при местном повышении сосудистой проницаемости, и увеличении концентрации в слюне белков плазмы крови.
Защитные факторы слюны зависят от концентрации лизоцима. Лизоцим лизирует оболочку некоторых микроорганизмов, в первую очередь, грамположительных. Кроме того, он стимулирует фагоцитарную активность лейкоцитов, участвует в регенерации биологических тканей. В нашем исследовании обнаружено снижение активности лизоцима у детей, проживающих в экологически неблагополучном районе, по сравнению с детьми из экологически благополучного района (табл. 2)
Таблица 2
Концентрация лизоцима в слюне детей и sIgA, проживающих в районах с разной антропогенной нагрузкой
Район Район 1, экологически благополучный Район 2, экологически неблагополучный Достоверность
п=202 п=183
Лизоцим, % 6,02±0,03 4,80±0,02 1.2 P<0,001 1.3 P<0,001
sIgA, г/л 3,01±0,02 1,60±0,02 1,2 P<0,001
Один из важных механизмов антибактериальной защиты полости носа состоит в предотвращении с помощью sIgA адгезии бактерий к поверхности клеток слизистых оболочек. Исследование концентрации sIgA в смывах из носовой полости выявило достоверное снижение его уровня у детей из экологически неблагополучного района (табл. 2), что возможно связано с местной иммуносупрессией за счет воздействия неблагоприятных факторов окружающей среды.
Снижение уровня sIgA и лизоцима приводит к снижению местного иммунитета слизистых оболочек и способствует колонизации патогенными микроорганизмами данных биотопов - развитию носительства золотистого стафилококка (рис.).
Влияние уровня лизоцима на бактерионосительство стафилококка у детей, проживающих в районах с разной антропогенной нагрузкой
Рассматривая влияние носительства стафилококка на организм ребенка, следует отметить, что ряд исследователей считают его одним из ведущих факторов риска заболеваний носителя различными инфекциями [4]. Стафилококки обладают способностью к деградации иммуноглобулинов различных классов, истощают систему комплемента, приводят к нарушениям функционирования и кооперации иммунного ответа, в частности, основных регуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов, подавляют активность факторов неспецифической резистентности - лизоцима, способствуют развитию гиперчувствительности замедленного типа, нарушают процессы фагоцитоза и др. [2-3; 8].
Проведенный корреляционный анализ показал обратную среднюю связь между sIg «А» и транзи-торным и резидентным носительством золотистого стафилококка.
Таким образом, важным фактором, деформирующим здоровье детского населения, проживающего в крупном промышленном городе, продолжает оставаться загрязнение атмосферного воздуха.
Диагностика эндоэкологического статуса на основе определения бактериального носительства стафилококка и состояние системы местного иммунитета слизистых оболочек имеют первостепенное значение в донозологической диагностике.
Литература
1. Метод определения антилизоцимной активности микроорганизмов / О.В. Бухарин, Б.Я. Усвяцов, А.П. Малышкин [и др.]// ЖМЭИ. - 1984. - №2. - С.27-29.
2. Бухарин, О.В. Бактерионосительство / О.В. Бухарин, Б.Я. Усвяцов. - Екатеринбург: УроРАН, 1996.
3. Вершигора, А.Е. Общая иммунология / А.Е. Вершигора. - Киев: Высш. шк., 1989.
4. Дерябин, А.Г. Стафилококки: экология и патогенность / А.Г. Дерябин. - Екатеринбург: УроРАН, 2000.
5. Даутов, Ф.Ф. Гигиена и санитария / Ф.Ф. Даутов. - 1990. - №3. - С.12-15.
6. Захарченко, М.П. Социально-гигиенический мониторинг: методология, региональные особенности, управленческие решения / М.П. Захарченко. - М., 2003. - С.130-133.
7. Гигиена и санитария / М.П. Захарченко, В.Б. Гриневич, В.М. Добрынин. - 2003. - № 6. - С.74-76.
8. Г игиена и санитария / М.П. Захарченко, В.М. Добрынин [и др.]. - 2004. - № 6. - С.50-53.
9. Г игиена и санитария / Е.Н. Кутепов. - 1993. - №1. - С.6-9.
10. Гигиена и санитария / Г.И. Сидоренко, Е.Е. Кутепов. - 1994. - №1. - С.13-16.
11. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / под ред. М.О. Биргера. - М., 1982.
12. Envirnment and Human Health / M.P. Zakharhenko, V.B. Grinevich, V.M. Dobrynin. - 2003. - P.848.
