CC BY
5
4. Концентрация HF 0,01 мг/м3 не вызывает изменений в деятельности центральной нервной системы подопытных животных.
5. Максимальная разовая и среднесуточная концентрация HF в атмосферном воздухе не должна быть выше 0,01 мг/м3.
ЛИТЕРАТУРА
Миллер С. В. В кн.: Предельно допустимые концентрации атмосферных загрязнений. М., 1955, в. 2, стр. 29.
Поступила 12/Х 1964 г
• '
THE EFFECT OF HYDROGEN FLUORIDE ON THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM
IN EXPERIMENT
M. S. Sadilova, K. P. Selyankina, О. K. Shturkina
On an experimental unit, which dosed the desirable concentrations of hydrogen fluoride, the authors determined the threshold volue of smell and that of the reflex action of the substance on the functional state of the cerebral cortex by means of adaptometry. It was found that both of these threshold values were at the level of 0.03 mg/m3. An all day round poisoning of albino rats for a period of 5 months with HF at a concentration of 0.10 and 0.03 mg/m3 produced statistically significant functional changes in the central nervous system as revealed by the method of conditioned reflexes and chronaxi-metrv. The neurohistological examinations, made at the end of the poisoning period in the area of motor and sensory analyzers, revealed lesions of the interneural connections and nervous cells in the animals, exposed to the action of HF at a concentration of 0.10 mg/m3. HF at a concentration of 0.01 mg/m3 produced no changes judging by both of the tests studied. Taking into account the cumulative properties of fluorine, the authors presume that the maximum single and the average concentration of HF in the atmospheric air should not exceed 0.01 mg/m3.
УДК 613.155.3 : 615.778.3-099-092.259
ДЕЙСТВИЕ ГЕКСАМЕТИЛЕНДИАМИНА В МАЛЫХ КОНЦЕНТРАЦИЯХ НА ОРГАНИЗМ ПОДОПЫТНЫХ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ ХРОНИЧЕСКОЙ ИНГАЛЯЦИОННОЙ ЗАТРАВКИ
А. Е. Кулаков
Институт общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
В предыдущей статье 1 мы осветили результаты изучения рефлекторного действия гексаметилендиамина (ГМД) в малых концентрациях на организм человека, что позволило нам обосновать максимальную разовую ПДК этого вещества в атмосферном воздухе на уровне 0,001 мг/м3. В настоящей работе сообщаются результаты исследования действия малых концентраций ГМД на организм подопытных животных при вдыхании круглосуточно в течение 3 месяцев.
Исследование проведено на 60 белых крысах-самцах, разбитых на 4 группы по 15 животных. 1-ю группу животных подвергали затравке ГМД в концентрации на уровне 1 мг/м3 (предельно допустимая для производственных помещений), 2-ю группу — на уровне 0,04 мг/м3 и 3-ю группу — на уровне 0,001 мг/м3 (максимальная разовая ПДК в атмосферном воздухе). За животными наблюдали в периоде затравки, а также в течение 1 месяца до и после нее изучали динамику веса животных, определяли количество ретикулоцитов, лейкоцитов и эозинофи-лов в кроги, исследовали люминесцентное свечение и фагоцитарную активность лейкоцитов, определяли титр У1-антител после иммунизации брюшнотифозной вакциной, изучали моторную хронаксию мышц-анта-
1 Гигиена и санитария, 1964, № 4, стр. 8—13.
9
15
гонистов, анализировали динамику выделения копропорфирина подопытными животными.
Концентрацию ГМД в затравочных камерах определяли ежедневно; при этом были получены следующие средние величины за период затравки: в 1-й камере— 1,08±0,018 мг/мъ, во 2-й— 0,043±0,0014 мг/м3 и в 3-й — 0,0012±0,00004 мг/м*.
I 250 %
1 200 I
/50
26Л25Л 21 31 771 291 Ш 27Л13Ш 23Ш /А
Рис. 1. Динамика абсолютного количества эозинофилов в крови у крыс при ингаляционном действии ГМД в малых концентрациях.
1 — чистый воздух; 2 — концентрация ГМД 0,001 мг/м3-, 3 — концентрация ГМД 0,04 мг/м3; 4 — концентрация
ГМД 1 мг/м9.
¥ # V
Вес животных исследовали каждые 10 дней. Следует отметить, что вес животных 1-й группы еще до затравки несколько отставал от веса животных других групп. В процессе затравки это отставание возросло и через месяц достигло статистически достоверной величины, которая
сохранилась до 80-го дня затравки. Во 2-й и 3-й группе не наблюдалось отставания от веса животных контрольной группы. При затравке белых крыс в течение 6 месяцев по 4 часа в день ГМД в концентрациях 10 и 1 мг/м3 наблюдалось отчетливое отставание веса подопытных животных (А. П. Мартынова, 1957).
Результаты исследования количества ретикулоцитов показали, что действие ГМД только в концентрации 1 мг/м3 вызвало после 2 недель затравки их статистически достоверное (достоверность 99%) увеличение; через 2 последующие недели количество ретикулоцитов, однако, вернулось
к исходному уровню. Количество лейкоцитов в крови белых крыс, подвергавшихся затравке ГМД, существенно не отличалось от данных контрольной группы. А. П. Мартынова (1957) при хронической затравке крыс ГМД в концентрации 1 мг/м3 отмечала увеличение количества лейкоцитов до 18 000.
Как известно, действие какого-либо неблагоприятного фактора внешней среды вызывает со стороны контролируемой гипоталамусом системы передняя доля гипофиза — кора надпочечников неспецифическую реакцию; одним из признаков ее является уменьшение абсолютного количества эозинофилов в крови. Проведенные в последнее время исследования в области профпатологии свидетельствуют о наличии указанной реакции при действии различных химических веществ в высоких концентрациях (Л. Э. Горн; Е. И. Спыну; Е. И. Люблина и соавторы).
В связи с этим представляло большой интерес выяснение вопроса о наличии неспецифической реакции организма при действии малых концентраций ГМД. Абсолютное количество эозинофилов мы определяли в течение 1-го месяца затравки раз в неделю, а в дальнейшем раз в 2 недели. Сделано 223 анализа крови.
Уменьшение количества эозинофилов в крови во всех группах животных наблюдалось уже через неделю после начала затравки (рис. 1). При этом наиболее выраженная эозинопеническая реакция отмечалась у животных 1-й группы, но все же разница по сравнению с контрольной группой не достигала статистически достоверной величины. В конце 1-го месяца по техническим причинам затравка была прервана на 2 суток. Интересно отметить, что через 14—16 часов после возобновления затравки резко возрастало количество эозинофилов в крови животных 1-й и 2-й группы по сравнению с другими группами.
Особенно наглядны были изменения у крысы № 3 в 1-й группе и у крысы № 4 во 2-й группе. У первого животного количество эозинофилов увеличилось с 474 до 1313, а у второго — с 200 до 837 в 1 мм3 крови. В дальнейшем происходило новое падение количества эозинофилов у животных первых двух групп, которое сохранялось до конца затравки, причем разница по сравнению с контрольной группой оказалась статистически достоверной. В восстановительном периоде количество эозинофилов быстро достигло исходного уровня. Содержание эозинофилов в крови животных 3-й группы было близким к данным контрольной группы; здесь не обнаружено статистически достоверной разницы.
Таким образом, исследования указывают на высокую чувствительность данного теста, что позволяет наблюдать раннюю неспецифическую реакцию организма на неблагоприятное, действие микроконцентраций атмосферных загрязнений.
Из литературных данных известно, что характер люминесцентного свечения лейкоцитов при витальной окраске акридином оранжевым изменяется при заболеваниях крови, воздействии ионизирующей радиации; наблюдающиеся при этом изменения флуоресценции лейкоцитов от зеленого до желтого, оранжевого и красного тона обусловлены физико-химическими изменениями в клетке. При ингаляционном действии на •организм малых концентраций анилина изменение люминесцентного свечения лейкоцитов отмечали А. Д. Семененко и П. Г. Ткачев; амиленов — М. И. Гусев и К. Н. Челиканов.
Нами было проведено 182 исследования крови с целью определения характера люминесцентного свечения лейкоцитов. У крыс 1-й группы количество лейкоцитов с измененным свечением через неделю затравки резко возрастает (у отдельных животных до 21—25%) и возвращается к исходному уровню к началу 2-го месяца затравки. У животных 2-й группы количество лейкоцитов с измененным свечением также возрастает, но в меньшей степени (у отдельных животных до —11%) и возвращается к исходному уровню через 3 недели. Восста-^ч^новление измененного люминесцентного свечения лейкоцитов в процессе затравки крыс малыми концентрациями амиленов наблюдали также М. И. Гусев и К. Н. Челиканов.
Увеличение содержания лейкоцитов с измененным свечением у животных 1-й и 2-й группы по сравнению с контрольной группой, по нашим данным, было статистически достоверным (95 и 99%). При этом преимущественно наблюдались желтые и оранжевые тона свечения лейкоцитов и только в единичных случаях — красные. Что касается животных 3-й группы, то данные, полученные у них, мало отличаются от контрольной группы.
Представлялось интересным изучить ингаляционное действие малых концентраций ГМД на иммунобиологическую реактивность белых крыс в условиях хронического эксперимента. В нашем исследовании в качестве объекта фагоцитоза была взята суточная культура стафилококка в концентрации 500 млн. микробных тел в 1 мл по оптическому -стандарту. Кровь, 2% раствор лимоннокислого натрия и микробную взвесь брали в одинаковых объемах (0,06 мл). Реакция фагоцитоза продолжалась в течение 20 мин. при 37°. После центрифугирования снимали пленку лейкоцитов и из нее делали мазки с окраской по Гим-зе—Романовскому. В препарате подсчитывали 100 нейтрофилов с учетом процента активных лейкоцитов (экстенсивность фагоцитоза), а также среднее содержание микробных клеток в одном фагоцитировавшем нейтрофиле (интенсивность фагоцитоза).
Количество активных лейкоцитов у животных 1-й группы (1 мг/м3) резко падало уже через неделю после затравки ГМД, а через 2 недели оно возрастало и даже несколько превышало показатели контрольной группы (рис. 2). В дальнейшем наступало новое угнетение активности
2 Гигиена и санитария. К» 5 17
Гсоуд- Центр. ?.1©1гкцинская
"ПОТЕКА
Мннастсрсиа Здравовг^амаина-
Ш > . ссср
/00
лейкоцитов, которое сохранялось до конца затравки. После окончания: затравки активность лейкоцитов скоро возвращалась к исходному уровню. Такие же, но менее выраженные изменения отмечались и у животных 2-й группы (0,04 жг/ж3).
Аналогичные изменения претерпевала интенсивность фагоцитарного процесса (рис. 3). В 1-й и 2-й группе эта реакция была статистически достоверной. У животных 3-й группы динамика фагоцитарной активно-
не отличалась от данных контроля.
Подопытных животных мы вакцинировали брюшнотифозной У^дивакциной,. изготовленной в Московском научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии. В литературе нам не удалось найти схемы иммунизации крыс этой вакциной, в связи с чем наше исследование
I
90 -
>§ 80-
ч
4 §
70 -
16Ш 27Л 41 191 т 15Л 291 /6Ш 2Ш //Ж
Рис. 2. Динамика фагоцитарной активности лейкоцитов (по экстенсивности) у крыс при ингаляционном действии ГМД в малых концентрациях.
Обозначения те же, что на рис. 1.
|
| в 1
7
6 -
1 *
4 "
носило поисковый характер Вакцинация была начата после месяца затравки ГМД, когда можно было ожидать изменения реактивности организма. Вакцину вводили подкожно в заднюю правую лапку животного. При первой прививке было введено 200 млн. микробных тел брюшнотифозной палочки и 0,04 мг брюшнотифозного У1-антигена; при второй прививке (через неделю) и последующих вводили по 300 млн. микробных тел и 0,06 мг У1-антигена. Кровь (0,5—0,6 мл) брали из хвоста крыс; после суточного хранения при комнатной температуре отсасыва-76Ш 27Ш 191 /Я /511 291Г/6Ш 2ДГ 7/1Г ли сыворотку, которую затем
хранили при —34°. Уровень титра УЬантител в сыворотке определяли с помощью реакции пассивной гемагглютина-ции (Н. А. Краскина и Н. М. Гуторова).
Уровень нарастания титра Уьантител у животных 1-й группы явно отставал от такового у животных контрольной группы (рис. 4). Отставание наблюдалось и после второй прививки, а уровень падения титра у животных этой группы опережал падение титра у контрольных животных. Такое же явление, хотя и в меньшей степени, наблюдалось и в динамике титров У^антител у животных 2-й группы. Статистически достоверная разница (95%) по сравнению с контрольной группой отмечалась только у животных 1-й группы через неделю после второй прививки. Прививки, проведенные в конце затравки и в восстановительном периоде, не вызывали существенных отклонений титров от
а §
I
3 -2 -
/ ~
Рис. 3. Динамика фагоцитарной активности лейкоцитов (по интенсивности) у крыс при ингаляционном действии ГМД в малых концентрациях.
Обозначения те же, что на рис. 1.
контроля. У животных 3-й группы, получавших Наименьшую концентрацию ГМД (0,001 мг/м3), на всем протяжении затравки титр Уьан-тител почти не отличался от данных контрольной группы.
Мы изучали также динамику выделения подопытными животными копропорфирина с мочой с определением его на спектрофотометре СФ-4. Суточную мочу собирали в специальные приемники через каждые 10 дней от 5 крыс из каждой группы. До затравки и в восстановительном периоде было сделано по 3 исследования, а во время затравки — но 9 исследований мочи в каждой группе. Наблюдавшиеся нами колебания копропорфирина в моче у животных 1-й группы в периоде затравки свидетельствуют о некоторой тенденции к уменьшению его выделения в отдельные дни исследования в первой половине затравки, однако разница не подтверждалась статистически. Во 2-й и 3-й группе существенных отличий от контроля не обнаружено.
Одним из тестов служило также определение соотношения моторной хро-накции мышц-антагонистов у подопытных животных через каждые 10 дней с помощью импульсного стимулятора ИСЭ-01. Результаты исследований показали, что нормальное соотношение моторной хронаксии мышц-антагонистов у животных 1-й и 2-й группы нарушалось после 1-го месяца затравки и оставалось на этом уровне с определенными колебаниями в течение последующих 40 дней затравки;
в дальнейшем нормальное соотношение моторной хронаксии восстанавливалось. Статистически достоверная разница у животных 1-й и 2-й группы по сравнению с контролем отмечена на 50-м дне затравки (достоверность у обеих групп 99%). Динамика соотношения моторной хронаксии мышц-антагонистов у животных 3-й группы (0,001 мг/м3) находилась в пределах физиологических колебаний.
Выводы
1. ГМД в концентрации 1 мг/м3 при ингаляционной круглосуточной затравке в течение 3 месяцев оказывает неблагоприятное действие на организм подопытных животных (небольшое отставание веса, увеличение количества ретикулоцитов, эозинопения, повышение содержания лейкоцитов с измененным люминесцентным свечением, угнетение фагоцитарной активности лейкоцитов и продукции Уьантител после искусственной иммунизации, нарушение нормального соотношения моторной хронаксии мышц-антагонистов).
Такие же, но менее выраженные изменения вызывал ГМД в концентрации 0,04 мг/м3 (за исключением веса животных и количества ретикулоцитов).
2. ГМД в концентрации 0,001 мг/м3 при тех же условиях затравки в течение 3 месяцев не оказал действия на организм подопытных животных.
240 720
200
180 160
^ 140
к 100 80
60 40
20
181 261 И 8Я 15Л 22П 29 Е 7Ш17ДГ11 17 1817
Рис. 4. Динамика титров Уьантител у крыс при ингаляционном действии ГМД в малых концентрациях.
Обозначения те же, что на рис. 1.
• I
2*
19
/
3. Среднесуточная ПДК ГМД в атмосферном воздухе населенных мест может быть установлена на уровне предложенной нами максимальной разовой концентрации — 0,001 мг/м3.
%
I • '
I |
''. ЛИТЕРАТУРА
I » I v v
Горн Л. Э. Гиг. труда, 1963, № 11, стр. 44. — Гусев М. И., Челиканов К. Н. Гиг. и сан., 1963, № 5, стр. 3.—К раскина Н. А., Гуторова Н. М. Труды Московск. научно-исслед. ин-та эпидемиологии и микробиологии, 1962, в. 9, стр. 180.— Люблина Е. И., Минкина Н. А., Олюнин И. В. В кн.: Материалы Конференции по проблемам адаптации, тренировки и другим способам повышения устойчивости организма. Донецк, I960, сгр. 77. — Мартынова А. П. Гиг. труда, 1957, № 4, стр. 23.—Семе ней ко А. Д. Тезисы докл. 1-й Поволжской научной конференции гигиенистов. Куйбышев, 1963, стр. 142. — Спыну Е. И. В кн.: Гигиена и токсикология новых пестицидов и клиника отравлений. М., 1962, стр. 257. — Ткачев П. Г. Гиг. и сан., 1963, № 4, стр. 4.
Поступила 8/VII 1964 г.
THE EFFECT OF SMALL CONCENTRATIONS OF H EXAM ET H YL ENDI AMI N ON EXPERIMENTAL ANIMALS UNDER CONDITIONS OF CHRONIC INHALATION
POISONING
A. E. Kulakov
For a period of 3 months the author carried out 24-hour inhalation poisoning of 60 albino rats with small concentrations of hexamethylendiamin (HMD). HMD at a concentration of 1 mg/m3 produced in animals a retardation of their weight, an increase of the number of reticulocytes at the beginning of poisoning, a fall in the number of eosinophi-les, a rise in the number of leucocytes with a changed fluorescence in the first half of the poisoning period, an inhibition of the phagocytic activity of leucocytes, a rise in the Vi-antibody titer and a disturbance of the chronaxy correlation of the muscle antagonists HMD at a concentration of 0.040 mg/m3 caused similar changes but to a lesser extent. HMD at a concentration of 0.001 mg/m3 proved to be ineffective. On the basis of the investigations performed the author suggests the daily average maximum permissible concentration of HMD in the atmospheric air to be at a level of the single maximum concentration amounting to 0.001 mg/m3.
УДК 614.777 : 628.39] : 1669.791+669 4)
КОМБИНИРОВАННОЕ ДЕЙСТВИЕ РТУТИ И СВИНЦА
ПРИ ИХ ПЕРОРАЛЬНОМ ПОСТУПЛЕНИИ В ОРГАНИЗМ
%
Канд. мед. наук С. А. Фридлянд
Кафедра коммунальной гигиены
I Московского ордена Ленина медицинского института им. И. М. Сеченова
Теоретические основы и методические приемы гигиенического нормирования при совместном загрязнении водоема несколькими вредными веществами, разработанные С. Н. Черкинским (1957), послужили базой для разрешения этой наиболее трудной части проблемы санитарной охраны водоемов. Экспериментальными исследованиями, проведенными в последующие годы, было подтверждено, что комбинированное действие группы веществ, нормируемых по одному и тому же лимитирующему признаку вредности, проявляется в эффекте простого нуммерического сложения (С. Д. Замыслова; С. А. Фридлянд и М. Н. Рублева; В. Г. Лаппо; Я. И. Костовецкий с сотрудниками). В работе БиЖ^ег и \Voodword (США) указано, что при токсикологических исследованиях 20 веществ в более чем 200 комбинациях редко встречались примеры синергического или антагонистического действия. По данным этих авторов, синергически измененный эффект комбиниро-
