CC BY
27
СОВРЕМЕННЫЕ ФАРМАКО- И БИОПРЕПАРАТЫ
Для цитирования: Потехин, А.В. Чувствительность изолятов возбудителей заболеваний свиней к антибактериальным препаратам/ А.В. Потехин, О.Я. Олей- УДК 619: 616.98: 579: 615
никова // Российский ветеринарный журнал. — 2019. — № 2. — С. 52-55. DOI: 10.32416/article_5cd16d095a8428.91465538
For citation: Potehin A.V., Oleynikova O.Y., Antimicrobial susceptibility of porcine bacterial pathogens, Russian veterinary journal (Rossijskij veterinarnyj zhurnal), 2019, No. 2, pp. 52-55. DOI: 10.32416/article_5cd16d095a8428.91465538
Чувствительность изолятов возбудителей заболеваний свиней к антибактериальным препаратам
А.В. Потехин1, заведующий сектором бактериальных болезней (potehin@arriah.ru),
О.Я. Олейникова2, руководитель терапевтического направления ООО «КРКА ФАРМА» (olga.oleynikova@krka.biz).
1ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных», г. Владимир, мкр. Юрьевец (600901, г. Владимир, мкр. Юрьевец, ул. Институтский городок, д. 33).
2ООО «КРКА ФАРМА» (125212, г. Москва, Головинское шоссе д. 5, корп. 1, этаж 22).
Проведен ретроспективный обзор чувствительности к антимикробным препаратам из группы фторхинолонов и потенцированным сульфаниламидам 120 изолятов наиболее типичных возбудителей бактериальных болезней свиней, выделенных на базе ФГБУ «ВНИИЗЖ» от животных различных возрастных групп в период с 2009 по 2019 годы. Согласно полученным данным, P. multocida, H. parasuis продемонстрировали высокую чувствительность к энрофлоксацину, и его можно использовать для проведения эмпирической терапии пастереллеза и гемофилезного полисерозита. A. pleuropneumoniae и S. suis также продемонстрировали чувствительность к энрофлоксацину, поэтому он может быть рекомендован для лечения актинобациллезной плевропневмонии и стрептококкоза при наличии чувствительности. 50 % изолятов S. suis, выделенных из головного мозга свиней, продемонстрировали чувствительность к потенцированным сульфаниламидам, поэтому комбинированный препарат на основе триметоприма-сульфамонометоксина (Трисульфон®) можно рекомендовать для лечения стрептококкоза после установления чувствительности.
Ключевые слова: инфекционные болезни свиней, антибиотики, энрофлоксацин, триметоприм, сульфаниламид, Streptococcus suis, Actinobacillus pleuropneumoniae, Haemophilus parasuis, P. multocida.
Antimicrobial susceptibility of porcine bacterial pathogens
A.V. Potehin1, head of the sector of bacterial diseases, PhD in Veterinary Medicine (potehin@arriah.ru), O.Y. Oleynikova2, head of therapeutic area «KRKA FARMA» LLC (olga.oleynikova@krka.biz).
1 Federal State Budgetary Institution «Federal Centre for Animal Health» (FGIARRIAH) (33, Institutskiy gorodok str, mr. Yurievets, Vladimir, 600901).
2 KRKA FARMA LLC (fl. 22, housing 1, h. 5, Golovinskoye sh., Moscow, 125212).
A retrospective review of antimicrobial susceptibility to the fluoroquinolones and potentiated sulfonamides of 120 isolates of the most typical porcine bacterial pathogens isolated from animals of different age groups from 2009 to 2019 at FGBI «ARRIAH» was carried out. According to the results, P. multocida, H. parasuis are highly susceptible to enrofloxacin, which can be used for empirical treatment of pasteurellosis and Glasser's disease. A. pleuropneumoniae and S. suis are also susceptible to enrofloxacin, so it can be recommended for the treatment of A. pleuropneumonia and streptococcosis. 50% of isolates of S. suis isolated from the brain tissues are susceptible to the potentiated sulfonamides, so this medication can be recommended for the treatment of streptococcosis only after susceptibility testing.
Keywords: infectious diseases of pigs, antibiotics, enrofloxacin, trimethoprim, sulfanilamide, Streptococcus suis, Actinobacillus pleuropneumoniae, Haemophilus parasuis, P. multocida.
Сокращения: АБП — антибактериальные препараты, ГЭБ — гематоэнцефалический барьер, ДВ — действующее вещество, КОЕ — колониеобразующие единицы, CLSI — Clinical and Laboratory Standards Institute (Институт клинических и лабораторных стандартов)
Введение
Динамичное развитие свиноводства в России ставит перед ветеринарной наукой ряд задач, связанных с совершенствованием средств специфической профилактики и лечения инфекционных болезней. Большое
значение приобретает этиотропная терапия, и в первую очередь использование АБП, позволяющих значительно снизить ущерб, причиняемый заболеваниями бактериальной этиологии.
Цель исследования
Работа представляет собой ретроспективный обзор чувствительности изолятов возбудителей бактериальных болезней свиней, выделенных в Российской Федерации в период с 2014 по 2019 гг. в ФГБУ «ВНИИЗЖ», к следующим АБП:
• энрофлоксацину — ДВ лекарственного препарата для ветеринарного применения под торговой маркой Энроксил®;
• ко-тримоксазолу (потенцированный сульфаниламид) — ДВ лекарственного препарата для ветеринарного применения под торговой маркой Трисуль-фон®.
Данная информация необходима для разработки и применения научно-обоснованных подходов к лечению животных, сдерживанию появления и распространения антибиотикоустойчивых микробов в хозяйствах.
Материалы и методы
Проведен анализ антибиотикочувствительности 120 изолятов/штаммов возбудителей болезней свиней, из них: Pasteurella multocida — 30; Haemophillus parasuis — 30; Actinobacillus pleuropneumoniae — 30 и Streptococcus suis — 30.
Чувствительность к АБП тестировали диско-диффузионным методом по рекомендациям CLSI [1]. В работе использовали диски АБП: энрофлоксацин — 5 мкг и ко-тримоксазол — 25 мкг, производства НИЦФ, Санкт-Петербург.
Чувствительность изолятов/штаммов пастерелл и стрептококков к АБП определяли на питательном агаре Мюллера-Хинтон (Himedia); чувствительность изоля-тов гемофильных бактерий, в том числе возбудителей актинобациллезной плевропневмонии, к АБП — на питательном агаре Мюллера-Хинтон с добавлением сыворотки крови лошади и V-фактора роста (никоти-намид аденин динуклеотид). Бактериальные суспензии изолятов/штаммов готовили на фосфатно-буферном солевом растворе из суточных агаровых культур. Оптическая плотность каждого инокулюма перед использованием составляла 0,5 ед. по шкале МакФарланда, что соответствовало концентрации 1,5* 108 КОЕ/см3. Посевы с дисками АБП инкубировали в течение 24 ч при температуре 37 оС. Диаметр зоны ингибирования роста культур измеряли с помощью штангенциркуля и выражали в миллиметрах. Категории чувствительности (чувствительный или резистентный), указанные в таблице 1, определяли путем сравнения зоны задержки роста каждого изолята с рекомендациями CLSI [1].
1. Интерпретация чувствительности возбудителей бактериальных заболеваний свиней к энрофлоксацину и ко-тримоксазолу диск-диффузионным методом
Interpretation of antimicrobial susceptibility of bacterial pathogens to enrofloxacin and co-trimoxazole by disk diffusion method
Бактерии Диаметр зоны задержки роста, мм
Энрофлоксацин Ко-тримоксазол
чувствительный резистентный
A. pleuropneumoniae >21 <16 >16 <10
Haemophilus parasuis
Pasteurella multocida
Streptococcus suis
Для оценки воспроизводимости и точности процедуры определения чувствительности к АБП параллельно с испытуемыми изолятами в качестве эталонов использовали коллекционные штаммы. Даты исследований и характеристика изолированных от свиней штаммов, а также информация о коллекционных штаммах, представлена в табл. 2...5.
2. Перечень изолятов/штаммов Pasteurella multocida от свиней
List of Pasteurella multocida isolates/strains from pigs
№ n/n Изолят/ штамм Серо-группа Дата выделения (получения) Орган выделения Возраст животного, сутки
1 Изолят А 25.08.2009 Легкие 125
2 » А 13.09.2010 » 65
3 » D (DNT+) 12.03.2011 Носовые ходы 75
4 » А 12.03.2011 Легкие 145
5 » D 04.02.2013 н/у 100
6 » А 05.10.2014 Легкие 95
7 » А 05.02.2015 60
8 » А 11.11.2016 70
9 » А 02.04.2016 120
10 » D 30.04.2016 65...120
11 » А 05.06.2016 140
12 » А 28.06.2016 120
13 » А 03.03.2017 162
14 » А 08.03.2017 90
15 » А 25.03.2017 235
16 » А 15.04.2017 60
17 » А 28.05.2017 45
18 » А 11.06.2107 60.80
19 » А 24.09.2017 57
20 » А 24.09.2017 160
21 » А 16.09.2017 46
22 » А 21.09.207 135.138
23 » А 23.11.2018 н/у
24 » А 21.11.2018 120.150
25 » А 29.11.2018 н/у
26 » А 11.12.2018 50.55
27 » А 17.12.2018 60.130
28 Штамм Д
№1231 А
29 Штамм №9 D - - -
30 Штамм Kobe-6 D - - -
Примечание: н/у — не указан
А.В. Потехин, О.Я. Олейникова
3. Перечень изолятов/штаммов Haemophilus parasuis от свиней List of isolates/strains of Haemophilus parasuis from pigs
№ п/п Изолят/ штамм Серо-тип Дата выделения (получения) Орган выделения Возраст животного, сутки
1 Изолят н/о 13.06.2008 Легкие 35
2 » н/о 18.04.2008 » 48
3 » 5 12.05.2009 » 25...35
4 » н/о 25.08.2009 » 58...65
5 » 5 02.04.2010 » 30.45
6 » 4 09.03.2011 » 68
8 » н/о 12.10.2012 » 40.60
9 » н/о 13.08.2013 » 56
10 » н/о 15.09.2013 » 38.46
11 » 5 02.03.2014 » 65
12 » н/о 23.10.2014 » 50.70
13 » н/о 14.04.2015 » 60.90
14 » н/о 05.06.2015 » 40.55
15 » н/о 02.10.2015 » 65
16 » н/о 08.11.2015 » 48.52
17 » 5 12.03.2016 » 45
18 » н/о 25.06.2016 » 35.45
19 » н/о 03.07.2016 » 60.75
20 » н/о 11.09.2016 » 50
21 » н/о 03.02.2017 » 35.55
22 » н/о 18.04.2017 » 65
23 » н/о 22.12.2017 » 30.45
24 » 5 13.03.2018 Головной мозг 40.80
25 » н/о 06.06.2018 Легкие 35
26 » 5 11.12.2018 » 50.55
27 Штамм Nagasaki 5 18.06.2015 - -
28 Штамм SW-124 4 18.06.2015 -
29 Штамм №19417 4 20.04.2014 - -
30 Штамм «Уральский» 5 - Легкие 45
Примечание: н/о — не определен.
4. Перечень изолятов/штаммов Actinobacillus pleuropneumoniae List of isolates/strains of Actinobacillus pleuropneumoniae
№ п/п Изолят/ штамм Серо-тип Дата выделения Орган выделения Возраст животного, сутки
1 Изолят 9 25.08.2009 Легкие 125
2 » 2 03.10.2009 » 105
3 » 8 22.04.2009 » 80
4 » 10 18.07.2009 » 75
5 » 10 05.10.2009 » 120
6 » 2 03.04.2010 » 85
7 » 7 11.09.2010 » 148
8 » 8 12.05.2011 » 112
9 » 7 16.04.2013 » 125
10 » 6 16.04.2013 » 70.90
11 » 7 05.04.2014 » 105
12 » 6 04.11.2014 » 69
13 » 2 12.02.2015 » 70.80
14 » 9 12.03.2016 Селезенка 35
15 » 5 11.11.2016 Легкие 70
16 » 5 02.04.2016 » 120
17 » 5 15.01.2017 » 140
18 » 2 10.02.2017 » 163
19 » 5 03.03.2017 » 100
20 » 5 25.03.2017 » 80.120
21 » 5 03.03.2017 » 92.127
22 » 2 15.03.2017 » 90.130
23 » 2 07.05.2017 » 100
24 » н/о 24.04.2018 » 72
25 » 8 06.06.2018 » 105
26 » 5 21.08.2018 » 110
27 » н/о 21.11.2018 » 120.150
28 » 10 03.12.2018 » н/у
29 » 2 21.02.2019 » 70.190
30 Штамм «Ш-1» 2 03.06.2011 » 110
31 Штамм №29089 2 18.10.2011 - -
5. Происхождение изолятов/штаммов Streptococcus suis Origin of isolates/strains of Streptococcus suis
№ п/п Изолят/ штамм Дата выделения (получения) Орган выделения Возраст животного, сутки
1 Изолят 12.06.2013 Сустав 60
2 » 13.08.2013 » 50
3 » 15.03.2014 » 75
4 » 03.11.2014 » 40.50
5 » 10.02.2015 Селезенка 45
6 » 03.04.2015 » 150
7 » 20.05.2015 Сустав 50
8 » 21.05.2015 » 110
9 » 27.11.2015 Головной мозг 50
10 » 27.01.2016 Печень, селезенка 1.2
11 » 15.04.2016 Головной мозг 65
12 » 28.05.2016 Селезенка 20
13 » 18.06.2016 Головной мозг 55
14 » 05.08.2016 » 30.35
15 » 23.11.2016 » 63
16 » 18.02.2017 Селезенка 35
17 » 01.03.2017 Головной мозг 60
18 » 15.04.2017 Селезенка 53
19 » 03.05.2017 Сустав 21
20 » 06.05.2107 » 21
21 » 08.05.2107 Селезенка 35
22 » 09.07.2017 Печень, селезенка 42
23 » 02.08.2017 Селезенка 5
24 » 24.04.2017 Сустав 50
25 » 27.04.2017 Головной мозг 50...60
■■ » 05.06.2018 » 10...15
27 » 03.06.2018 » 34.38
» 11.10.2018 » 30.35
29 Штамм «КА-2» 02.03.2015 » 55»
30 Штамм №43765 03.08.2016 - -
Результаты
Результаты приведены в таблицах. Все 27 исследуемых изолятов P. multocida проявили чувствительность к энрофлоксацину (рис. 1). Из 28 изолятов A. pleuropneu-moniae резистентность к энрофлоксацину выявлена у 5 (17,8 %). Из 26 изолятов H. parasuis резистентность к энрофлоксацину обнаружена у 2 (7,69 %).
Из 28 исследуемых изолятов S. suis резистентность к энрофлоксацину проявили 4 (14,28 %) (рис. 2). В то же время к ко-тримоксазолу резистентность обнаружена у 15 (53,7 %) изолятов. Необходимо отметить, что у 3 (10,71 %) изолятов стрептококка выявлена резистентность сразу к обоим АБП.
i Чувствительных
P. multocida A. pleuropneumoniae Н. parasuis
Возбудитель
Рис. 1. Чувствительность изолятов P. multocida, A. pleuropneumoniae и H. parasuis к энрофлоксацину Fig. 1. Susceptibility of P. multocida, A. pleuropneumoniae and H. parasuis isolates to enrofloxacin
■ Чувствительных '
Энрофлоксацин Ко-тримоксазол
Антибактериальный препарат
Рис. 2 Чувствительность изолятов Streptococcus suis к энрофлоксацину и ко-тримоксазолу Fig. 2. Susceptibility of Streptococcus suis isolates to enrofloxacin and co-trimoxazole
■ Чувствительных
Энрофлоксацин Ко-тримоксазол
Антибактериальный препарат
Рис. 3 Чувствительность изолятов Streptococcus suis, выделенных из головного мозга свиней к энрофлоксацину
и ко-тримоксазолу Fig. 3. Susceptibility of Streptococcus suis isolated from swine brain tissues to enrofloxacin and co-trimoxazole
Одним из частых проявлений стрептококковой инфекции поросят служит менингит, и одной из целей ретроспективного анализа была оценка чувствительности изолятов S. suis к энрофлоксацину и комбинации «триметоприм-сульфамонометоксин». Данные АБП были выбраны исходя из их фармакологических характеристик: бактерицидное действие в отношении широкого спектра микроорганизмов, быстрое всасывание в кровь и проникновение через ГЭБ.
В связи с этим отдельно оценивали чувствительность изолятов S. suis, выделенных из головного мозга свиней. Из 10 изолятов S. suis, выделенных из головного мозга свиней, резистентность к энрофлоксацину проявили 2 (20 %), а к ко-тримоксазолу — 5 (50 %) (рис. 3).
Заключение
1. Энрофлоксацин (в частности, препараты под торговой маркой Энроксил®) можно рекомендовать для проведения эмпирической антимикробной терапии пастереллеза и гемофилезного полисерозита свиней.
2. Эффективное использование энрофлоксацина (в частности, препаратов под торговой маркой Энроксил®) для лечения актинобациллезной плевропневмонии и стрептококкоза свиней возможно только после установления чувствительности возбудителя к данному препарату.
3. Эффективное использование сульфаниламидных препаратов (в частности, препаратов под торговой маркой Трисульфон®) для лечения менингитной, суставной и септической форм стрептококкоза свиней,
возбудителем которого является Streptococcus suis, возможно только после установления чувствительности возбудителя к данному препарату.
Конфликт интересов
Компания ООО «КРКА ФАРМА» действует в интересах KRKA d. d. — производителя лекарственных средств под торговой маркой Энроксил® (энрофлоксацин), Трисульфон® (триметоприм/ сульфамонометоксин)
References
1. Performance standards for antimicrobial disc and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animals; approved standard, Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) Waine, PA, Third Ed., M31-A3, 2008, Vol. 22, No. 6.
