CC BY
27VETERINARY SCIENCES
ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЙ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ
Решетникова Т.И.
кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры «Морфологии, физиологии и ветеринарной патологии», Аграрный институт, Федеральное государственное бюджетное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева» (ФГБОУВО «МГУ им. Н.П. Огарева»), Россия, Республика Мордовия, г. Саранск
THE DYNAMICS OF CHANGES IN BLOOD PARAMETERS WITH THE USE OF CHEMOTHERAPEUTIC DRUGS
Reshetnikova T.
Candidate of Veterinary Sciences Associate Professor at Department of Morphology, Physiology and Veterinary Pathology, Agrarian Institute, Federal state budget institution of higher education «National research Mordovian state University N.P. Ogareva» FGBOU VO «Mordovia Ogarev State University» Republic of Mordovia, Saransk
АННОТАЦИЯ
Сравниваются гематологические, биохимические, гормональные показатели крови лабораторных мышей при применении ингавирина и моксифлоксацина. ABSTRACT
Hematological, biochemical, hormonal blood parameters in laboratory mice are compared after administration of ingaverin and moxifloxacin.
Ключевые слова: лабораторные мыши, противовирусные препараты, ингавирин, моксифлоксацин, гематологические, биохимические, гормональные показатели крови.
Keywords: laboratory mice, antivirals, ingaverin, moxifloxacin, hematological, biochemical, hormonal blood parameters.
Введение.
В последние годы из всех заболеваний молодняка все чаще встречаются заболевания респираторной системы, они занимают второе место после болезней желудочно-кишечного тракта. В ряде хозяйств отмечается 80 - 100 % поражение животных. Внимания заслуживают бронхопневмонии, которые составляют до 60 % от числа всех респираторных заболеваний. Болезни данной группы на 20 - 30 % снижают экономическую эффективность вследствие замедления роста и развития животных, падежа, расходов на лечение. Основным средством этиотропной терапии из химиотерапевтических препаратов служат антибактериальные и противовирусные препараты [1, 3, 6, 8].
В 90-х годах для лечения заболеваний дыхательной системы активно применялись препараты: ампициллин, метициллин, оксациллин, тетрациклин, норсульфазол, этазол, сульфадимезин, сульфа-лен, пенициллин, неомицин, окситетрациклин, ка-намицин, гентамицин, мономицин, морфоциклин, стрептомицин; из противовирусных препаратов -интерферон (человеческий). В настоящее время все больше используют макролиды, цефалоспорины, фторхинолоны [2, 3].
В ветеринарной практике актуальность приобретает вопрос об эффективном и адекватном использовании антибактериальных препаратов. Нерациональное, длительное применение антибиотиков привело к росту резистентности циркулирующих патогенов и снижению эффективности лечения [1, 3].
По данным Россельхознадзора от 4 сентября 2015 года, в подведомственном ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» провели исследования по определению антибиотикорези-стентности изолятов бактериальных возбудителей респираторных болезней свиней, выделенных в хозяйствах Российской Федерации. В период с 2012 по 2014 годы исследовано 149 изолятов возбудителей респираторных заболеваний свиней, из них: Pasteurella multocida - 38, Actinobacillus pleuropneu-moniae - 42, Haemophillus parasuis - 20, Streptococcus suis - 49. В работе использовали 22 антимикробных препарата: пенициллин, ампициллин, амокси-циллин, амоксициллин-клавулановая кислота, цефтриаксон, цепефим, цефотаксим, энрофлокса-цин, ципрофлоксацин, флюмеквин, эритромицин, тилозин, спирамицин, тетрациклин, флортетрацик-лин, окситетрациклин, доксициклин, котримокса-зол, триметоприм, тиамулин, колистин, флорфени-кол [11].
Изоляты Pasteurella multocida проявили высокую чувствительность к цефалоспоринам 3-4 поколения (100 %), флорфениколу (100 %), колистину (92 %), фторхинолонам (90 %), макролидам (87 %). Изоляты Actinobacillus pleuropneumoniae проявили высокую чувствительность к цефалоспоринам 3-4 поколения (100 %), аминопенициллинам (93 %), фторхинолонам (87 %), пенициллину (86 %), макролидам (72 %). Изоляты Haemophilus parasuis проявили высокую чувствительность к пенициллину и аминопенициллинам (95 %), неплохие результаты и по другим группам. Изоляты Streptococcus suis проявили высокую чувствительность к ß-лактамным антибиотикам, тетрациклинам (76 %), макролидам (66 %) [4].
Выявлен высокий уровень резистентности к гентамицину, тетрациклинам, сульфаниламидам, триметоприму (более 30 %), что ограничивает возможности их применения для эффективного лечения респираторных болезней свиней бактериальной этиологии [11].
Данные группы химиотерапевтических препаратов применяют и для лечения телят с острым бронхитом [5, 7].
Данные по антибиотикорезистентности изоля-тов бактериальных возбудителей респираторных болезней свиней, выделенных в хозяйствах Российской Федерации: Pasteurella multocida - 38, Actino-bacillus pleuropneumoniae - 42, Haemophillus parasuis - 20, Streptococcus suis - 49. Всего 149 изолятов.
В ветеринарии активно практикуется применение комбинированных антимикробных препаратов (АМП).
При большом количестве антимикробных компонентов в одном препарате, невозможно адекватно оценить ожидаемый результат от потенциальной опасности негативных эффектов, выработки режима дозирования и кратности применения. Это требует тщательного изучения фармакологических особенностей смесей, анализа последствий, мониторинга развития резистентности микроорганизмов [10, ].
В инструкциях к антимикробным препаратам, различных производителей, содаржащих одно и то же действующее вещество указаны различные сроки каренции (например, период ожидания по молоку при применении амоксициллина от 3 -х до 10 суток, период выведения доксициклина из мяса от 10 до 20 суток у разных производителей.
Дополнительным фактором риска является применение так называемых «кормовых» антибиотиков - антимикробных препаратов, применяемых с целью стимуляции роста и продуктивности животных и птицы. На птицеводческих предприятиях применяют от 2-х до 4-х (9!) курсов антибиотикоте-рапии за цикл выращивания цыпленка-бройлера (40-44 дня) [8, 13].
Все эти факторы приводят к снижению эффективности лечебных мероприятий при возникновении эпизоотической вспышки, а также, к снижению эффективности и, как следствие, и увеличению частоты и кратности применения АМП.
Снижение чувствительности к антибиотику возникает уже после первого его применения. При выведении на российский рынок нового антибактериального препарата чувствительность к нему снижается течение одного года.
При анализе результатов исследований ВНИВИП установлено, что значительно снизилась чувствительность выделяемых микроорганизмов: к фторхинолонам - на 27,0%, к тетрациклинам - от 52,1 до 67,3%, к аминогликозидам - от 11,2% до 41,8% (диапазон данных указан в пределах фармакологической группы) [].
Необходимо отметить, что в разных хозяйствах применяют разные группы антибактериальных препаратов и их эффективность сильно варьирует, поэтому, необходимо определять чувствительность выделенных изолятов возбудителей к антибиотикам в каждом конкретном хозяйстве [11, 12].
Устойчивость к антимикробным препаратам возрастает во всем мире, достигая опасно высоких уровней, и ставит под угрозу нашу способность лечить распространенные инфекционные болезни человека (сепсис, пневмонии, туберкулез).
Эти факторы приводят к появлению остаточных количеств АМП в продуктах питания.
Россельхознадзор, Роспотребнадзор, Роскон-троль выявляют АМП в продуктах питания повсеместно. Так, например, в течение 2017 года неоднократно было выявлено превышение остаточных количеств антибиотиков группы тетрациклина в готовой продукции в 15-17-21 раз. При этом, тетрациклин запрещен к применению беременным и детям до 8 лет, так как вызывает необратимые изменения в костях продольного скелета и долговременное потемнение зубной эмали у детей.
Проварка мяса позволяет снизить количество антибиотиков в продукции на 85 - 90 %, из них разрушается только 15 - 20 % исходного количества, а около 70 % антимикробных препаратов переходит в бульон. При изготовлении вареных колбас из сырья, содержащего антибиотики в количествах, превышающих предельно допустимые, в готовом изделии остается от 89 до 93 % от исходного количества препарата. Промывание мяса приводит к снижению содержания антибиотика на 12 - 25 % в зависимости от способа его введения. Замораживание продукции снижается количество антибиотика лишь на 21 - 23 %.
С 2006 г. в Европейском Союзе запрещено использование антибиотиков для стимулирования роста. Большинство стран уже принимают меры для сокращения применения антимикробных препаратов в продовольственном животноводстве.
Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) рекомендует фермерам и пищевой промышленности прекратить регулярное использование антибиотиков в целях стимулирования роста и профилактики болезней среди здоровых животных.
1. Потребители способствуют расширению спроса на мясо животных, выращенных без регулярного использования антибиотиков, и некоторые
крупные производители пищевой продукции принимают политику обеспечения мясными продуктами, «свободными от антибиотиков».
2. Больных животных рекомендуется тестировать для определения наиболее эффективного и рационального антибиотика для лечения конкретной инфекции.
3. Антибиотики, используемые для животных, необходимо выбирать среди тех, которые, согласно классификации ВОЗ, являются «наименее важными» для здоровья людей и не входят в число «высокоприоритетных критически важных» антибиотиков. Такие антибиотики часто являются препаратами последней линии или входят в число ограниченных препаратов, доступных для лечения тяжелых бактериальных инфекций у людей.
4. Практикуется введение новых схем лечения, которые бы способствовали снижению количество применяемых антибиотиков животным. Применение пробиотиков и пребиотиков (пребиотик «Лак-тулоза», пробиотик «Метофитохит»), препаратов крови (сухой гемоглобин, сухая плазма) для профилактики инфекционных болезней за счет улучшения обмена веществ и повышения резистентности организма, и, за счет этого - снижение использования антибиотиков [9, 10, 14].
Материалы и методы.
При проведении эксперимента были сформированы контрольная и 2 опытные группы по принципу аналогов, по 5 самок и 5 самцов.
Введение препаратов опытным мышам производилось один раз в сутки, в течении 21 дня. Убой осуществлялся на 22 день методом декапитации, производился забор крови на лабораторные исследования.
Группа № 1 являлась контрольной.
Группе № 2 задавался противовирусный препарат «Ингавирин» в дозе 0,12 мг на мышь массой 25 грамм.
Группе № 3 задавался антибактериальный препарат «Моксифлоксацин» в дозе 0,5 мг на мышь массой 25 грамм.
В ходе опыта проводились лабораторные исследования крови. Гематологические исследования производились на автоматическом гематологическом анализаторе BC-2800Vet компании «Mindray» - КНР. Биохимические исследования проводились на автоматическом биохимическом анализаторе LABIO-300 (Китай). Математические - статистическая обработка результатов выполнена с помощью метода вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Расчеты производились на персональном компьютере с использованием программы для статистического анализа «Microsoft Excel 7.0».
Таблица 1
Гематологические показатели крови мышей опытных и контрольной групп
Показатель Группа 1 Группа 2 Группа 3
контроль Ингавирин Моксифлоксацин
Лейкоциты, *109/л 6,58±0,607874 18,65714±4,6** 10,18889±1,1795**
Лимфоциты, % 57,057±2,335047 59,44286±3,708861 69,22222±2,258***
Моноциты, % 5,3±0,3106 6,742857±0,151*** 3,777778±0,2446***
Гранулоциты, % 37,4555±2,00909 33,81429±2,833761 27±3,773*
Эритроциты,*1012/л 9,52±0,03 9,088571±0,1738* 9,441667±0,0013**
Гемоглобин, г/л 134,548±6,9 138,3333±6,936217 131,7143±9,455949
Гематокрит, % 49,5±0,4 44,92857±1,3487** 47,6±0,53**
Тромбоциты, *109 л 752,5±61,2 708,2857±44,11064 732,3333±160,9424
Примечание: * - Р>0,950, ** - Р > 0,990, *** - Р > 0,999
Таблица 2
_Биохимические показатели сыворотки крови мышей опытных и контрольной групп_
Показатель Группа 1 Группа 2 Группа 3
контроль Ингавирин Моксифлоксацин
Холестерин, ммоль/л 3,4±0,05 1,914286±0,4375*** 3,512±0,0051*
Общий белок, г/л 62,52±1,6 58,88571±0,15* 74,46±3,524**
Альбумин, г/л 34,98±0,5 33,8±0,149* 32,14±0,8795**
Глобулины, г/л 27,54±1,833951 25,08571±1,177655 42,32±3,373***
Альбумин-глобулиновый коэффициент 1,3255±0,092444 1,372857±0,095487 0,77±0,05999***
Креатинин, мкмоль/л 20,604±0,836882 29,57143±2,4019*** 34,2±5**
АсАТ, ед/л 71,76±4,114 179,7143±28,69*** 49,02±4,992***
АлАТ, ед/л 30,22±2,5 22,42857±2,6677* 33,82±7,58422
Примечание: * - Р>0,950, ** - Р > 0,990, *** - Р > 0,999
Результаты исследований.
При применении ингавирина по указанной схеме отмечается максимальное увеличение уровня лейкоцитов - на 183,5 % по отношению к показате-
лям в контрольной группе животных. Так же отмечается увеличение уровня моноцитов - на 27,2 %, снижение количества гранулоцитов - на 9,7 %, ге-матокрита - на 9,2 %, тромбоцитов - на 5,8 %.
Экспериментальное введение антибактериального препарата моксифлоксацина для сравнения с антивирусными препаратами показало увеличение таких параметров, как лейкоциты - на 54,8 %, лимфоциты - на 21,3 %, снижение уровня моноцитов -на 28,7 %, гранулоцитов - на 27,9 %.
При исследовании результатов экспериментального приема препарата ингавирина выявлено повышение показателей креатинина - 43,3 %, АсАТ
- 150,4 %, ЩФ - 103,8 %, снижение холестерина -на 43,7 %, общего белка - 5,8 %, АлАТ - 25,8 %.
Использование моксифлоксацина приводило к повышению общего белка на - 119,1 %, глобулинов
- на 153,7 %, креатинина - 165,99 %, мочевины - на 132,3 %, к снижению альбумин-глобулинового коэффициента - на 42 %, АсАТ - 31,69 %.
Заключение.
Анализируя гематологические показатели при приеме ингавирина лейкоциты приближаются к верхней границе нормы. Остальные показатели белой и красной крови при значительных колебаниях не превышают средне допустимые значения.
При приеме ингавирина значительно снижается уровень холестерина, что негативно характеризует обменные процессы в печени. Повышается креатинин и падает мочевина, щелочная фосфотаза стремится к верхней границе средней физиологической нормы.
Прием моксифлоксацина повышает уровень глобулинов, общего белка и креатинина, снижает показатель АсАТ.
Применение антимикробных и противовирусных препаратов наносит значительный удар по основным жизнеобеспечивающим органам, таким как печень, почки, кишечник, лимфатическая система, кроветворные органы, иммунная система, нарушается белковый обмен и т.д.
Литература
1. Алексеев, А.Д. Особенности проявления острых респираторных вирусных инфекций крупного рогатого скота в современных условиях / А.Д. Алексеев, О.Г. Петрова, Л.И. Дроздова // Аграрный вестник Урала. - 2015. -№ 6 - С. 38-40.
2. Гавриков, А.В. Фармакодинамический профиль и противомикробная активность фторхиноло-нов / А.В. Гавриков, В.В. Воронкова // Ветеринария. - 2010. - №9. - С. 51-53.
3. Григорьев, А.В. Совершенствование этио-тропной терапии острого бронхита телят / А.В. Григорьев, С.В. Новикова, В.Е. Абрамов // Ветеринария. - 2015. - №5. - С.17-19.
4. Забровская, А.В. Эпизоотологический анализ распространения антибиотикорезистентных штаммов возбудителей инфекционных болезней сельскохозяйственных животных в Северо-Западном федеральном округе Российской Федерации:
автореферат дис. ... доктора ветеринарных наук: 06.02.02 / Забровская А.В.; [Место защиты: ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», 2019, 41 с.
5. Кальницкая, О.И. Ветеринарно-санитарный контроль остаточных количеств антибиотиков в сырье и продуктах животного происхождения / ав-тореф.дисс.на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук, Москва, 2008. - 45 с.
6. Кисленко, В.Н. Ветеринарная микробиология и иммунология: учебник / В.Н. Кисленко, Н.М. Колычев, Р.Г. Госманов; ред. В.Н. Кисленко. - 4-е изд., перераб. и доп. - Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2012. - 752 с.
7. Мелихов, С.В. Применение комплексных антибактериальных препаратов в птицеводстве и животноводстве / Ветеринария Кубани. - 2012. - № 6. - С. 15 - 18.
8. Новикова, О.Б. Микрофлора, выделяемая в птицехозяйствах технологичесского направления и контроль бактериальных болезней птиц / О.Б. Новикова, М.А. Павлова // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. - 2018. - № 3. - С. 34-36.
9. Решетникова, Т.И. Гематологические, иммунологические и гормональные показатели крови телят при применении «Интерферона бычьего реком-бинантного» и «Тетравитферона-Б» / Т.И. Решетникова. - СПб. Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. - 2018. -№2. - С. 98103.
10. Решетникова, Т.И. Эмбриотоксичность и тератогенный эффект химиотерапевтического противовирусного препарата / Т.И. Решетникова, А.И. Любимов, Т.Г. Крылова. - СПб. Международный вестник ветеринарии. - 2018. -№3. - С. 51-57.
11. Решетникова, Т.И. Этиология респираторной патологии сельскохозяйственных животных в условиях промышленного содержания / Т.И. Решетникова, Т.А. Трошина // Научно обоснованные технологии интенсификации сель. хоз. производства: материалы международной науч.-практич. конф. / Мин. сель. хоз. РФ, ФГБОУ ВО ИжГСХА, Ижевск. - 2017. - С. 47-50.
12. Сафарова, М.Н. Современная терапия телят с острым бронхитом / М.Н. Сафаров, Л.М. Кашков-ская, Т.С. Сердюкова // Животноводство России. -2015. - №6 - С. 23.
13. Щепеткина, С.В. Современные принципы антибиотикотерапии в птицеводстве: коллективная монография / С.В. Щепеткина, О.Б. Новикова, А.В. Забровская, В.П. Терлецкий, Л.И. Тыщенко - СПб. Издательство ФГБОУ ВПО «СПбГАВМ», 2015. -160 с.
14. Maggs, D.S. Antivirial therapy for feline herpesvirus infections / D.S. Мaggs // Vet. Clin. North Amer. SmallAnim. Pract, 2010 - V.40. - P.1055-1062.
