CC BY
34
https://dol.org/10.35754/0234-5730-2020-65-3-263-280 | (СО
I ЧАСТОТА СОЧЕТАНИЯ И КИНЕТИКА УРОВНЯ ТРАНСКРИПТА БОЯ-ЛБЫ1 И АЛЛЕЛЬНОЙ НАГРУЗКИ МУТАЦИЙ МК2шт И ОЛЫЯ ТИП-1, -2 У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ МИЕЛОЛЕЙКОЗОМ
Абдуллаев А. О*, Степанова Е. А., Макарик Т. В., Никулина Е. Е., Треглазова С. А., Горячева С. Р., Шухов О. А., Быкова А. Н., Трацевская Ж. В., Меликян А. Л., Ковригина А. М., Туркина А. Г., Судариков А. Б.
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 125167 Москва, Россия
РЕЗЮМЕ
Введение. Патогенез миелопролиферативных новообразований ассоциирован с химерным геном BCR-ABL1 или одной из «драйверных мутаций» генов JAK2, MPL и CALR (Calreticulin). Однако в классификации Всемирной организации здравоохранения не указаны миелоидные новообразования с более чем одной «драйверной» генетической аномалией.
Цель — поиск мутаций в генах JAK2, MPL и CALR у больных BCR-ABL1 -позитивным хроническим миелоидным лейкозом (ХМЛ), а также оценка кинетики уровня найденных мутаций при терапии ингибиторами тирозинкиназ (ИТК). Материалы и методы. В исследование включены препараты мРНК и ДНК клеток крови и костного мозга 567 больных ХМЛ, проходивших периодический мониторинг уровня транскрипта BCR-ABL1 с 2012 по 2019 гг. Уровень транскрипта BCR-ABL1 был определен посредством высокочувствительной количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени. Мутации JAK2V617F и MPLW515L/K были выявлены с использованием количественной аллель-специфической полимеразной цепной реакции в реальном времени. Мутации гена CALR были исследованы фрагментным анализом с последующим секвенированием по Сэнгеру.
Результаты. Сочетание мутаций генов BCR-ABL1, JAK2 и CALR среди больных ХМЛ, получавших препараты ИТК, составила 1,23 % (7/567). Из них в 0,88 % (5/567) случаев было выявлено сочетание BCR-ABL1 с JAK2V617F и в 0,35 % (2/567) случаев — сочетание BCR-ABL1 с мутациями гена CALR. При терапии препаратами ИТК в 5 из 7 случаев уровень BCR-ABL1 достиг глубокого молекулярного ответа (МО). У 4 из этих больных была прекращена терапия, и у них по настоящее время сохраняется молекулярная ремиссия. В оставшихся 2 случаях не удалось достичь большого МО, несмотря на применение препаратов ИТК второго поколения.
Заключение. Сочетание химерного гена BCR-ABL1 с мутациями генов Jak2 или CALR является редким событием и составило 0,88 и 0,35 % случаев, соответственно. Сочетание BCR-ABL1 с Jak2V617F и мутациями гена CALR не всегда препятствует достижению большого МО.
Ключевые слова: хронический миелоидный лейкоз, эссенциальная тромбоцитемия, первичный миелофиброз, BCR-ABL1, мутация JAK2V617F, CALR Конфликт интересов: авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Финансирование: исследование не имело спонсорской поддержки.
Для цитирования: Абдуллаев А.О., Степанова Е.А., Макарик Т.В., Никулина Е.Е., Треглазова С.А., Горячева С.Р., Шухов О.А., Быкова А.Н., Трацевская Ж.В., Меликян А.Л., Ковригина А.М., Туркина А.Г., Судариков А.Б. Частота сочетания и кинетика уровня транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки мутаций JAK2V617F+ и CALR тип-1, -2 у больных хроническим миелолейкозом. Гематология и трансфузиология. 2020; 65(3): 263-280. https:// dol.org/10.35754/0234-5730-2020-65-3-263-280
FREQUENCY OF COEXISTENCE AND KINETICS OF THE BCR-ABL1 TRANSCRIPT LEVEL AND ALLELE BURDEN OF JAK2V617F AND CALR TYPE 1, 2 GENE MUTATIONS IN PATIENTS WITH CHRONIC MYELOID LEUKEMIA
Abdullaev A.O., Stepanova E.A., Makarik T.V., Nikulina E.Y., Treglazova S.A., Goryacheva S.R., Shukhov O.A., Bykova A.V., Tratsevskaya Z.V., Melikyan A.L., Kovrigina A.M., Turkina A.G., Sudarikov A.B.
National Research Center for Hematology, 125167, Moscow, Russian Federation
ABSTRACT
Introduction. The pathogenesis of myeloproliferative neoplasms is associated with the chimeric gene BCR-ABL1 or with one of the driver mutations in the genes JAK2, MPL and CALR (Calreticulin). However, the classification of the World Health Organization lists no myeloid neoplasms with more than one driver genetic abnormality.
Aim. To search for mutations in the genes JAK2, MPL and CALR in patients with BCR-ABL1 -positive chronic myeloid leukemia (CML), as well as to evaluate the kinetics of the discovered mutations during tyrosine kinase inhibitor (TKI) therapy. Materials and methods. mRNA and DNA samples isolated from blood and bone marrow cells of 567 CML patients, who underwent periodic monitoring of the BCR-ABL1 transcript level over the 2012-2019 period were included in the study The BCR-ABL1 transcript level was determined using a highly sensitive quantitative real-time polymerase chain reaction. The mutations JAK2V617F and MPLmi5L/K were detected using real-time quantitative allele-specific polymerase chain reaction. Mutations in the CALR gene were investigated using fragment analysis followed by Sanger sequencing.
Results. The combination of the BCR-ABL1, JAK2and CALR gene mutations among CML patients receiving TKIs was 1.23% (7/567). Out of these, the combination of BCR-ABL1 with JAK2V617F and the combination of BCR-ABL1 with CALR gene mutations were detected in 0.88% (5/567) and 0.35% (2/567) of cases, respectively. During TKI therapy, in 5 out of 7 patients, the level of BCR-ABL1 reached major molecular response (MR). In 4 of these patients, the therapy was discontinued. These patients are currently in molecular remission. In the remaining 2 patients, major MR was not achieved, despite the use of second-generation TKI preparations.
Conclusions. The combination of the BCR-ABL1 chimeric gene with gene mutations Jak2 or CALR was a rare event and amounted to 0.88 and 0.35% of cases, respectively. The combination of BCR-ABL1 with Jak2V6'7F and CALR mutations does not always impede the achievement of major MR.
Keywords: chronic myeloid leukemia, essential thrombocythemia, primary myelofibrosis, BCR-ABL1, JAK2V6I7F mutation, CALR Conflict of interest: the authors declare no conflict of interest. Financial disclosure: the study had no sponsorship.
For citation: Abdullaev A.O., Stepanova E.A., Makarik T.V., Nikulina E.Y, Treglazova S.A., Goryacheva S.R., Shukhov O.A., Bykova A.V., Tratsevskaya Z.V., Melikyan A.L., Kovrigina A.M., Turkina A.G., Sudarikov A.B. Frequency of coexistence and kinetics of the BCR-ABL1 transcript level and allele burden of JAK2V6I7F and CALR Type 1, 2 gene mutations in patients with chronic myeloid leukemia. Russian Journal of Hematology and Transfusiology (Gematologiya i transfuziologiya). 2020; 65(3): 263-280 (in Russian). https://doi.org/10.35754/0234-5730-2020-65-3-263-280
Введение
Согласно классификации ВОЗ опухолей гемопоэ-тической и лимфоидной тканей, химерный ген BCR-ABL1 является молекулярным маркером хронического миелоидного лейкоза (ХМЛ), а мутации генов JAK2, CALR и MPL — молекулярными маркерами, характерными для истинной полицитемии (ИП), эссенциаль-ной тромбоцитемии (ЭТ) и первичного миелофиброза (ПМФ) [1]. В большинстве случаев у больных миело-пролиферативными новообразованиями (МПН) лей-кемический клон несет в себе одну из драйверных мутаций. Тем не менее, по данным литературы, сочетание двух драйверных мутаций при МПН не является редким событием. Химерный ген BCR-ABL1 может вторично выявляться у части больных с JAK2V617F+ ИП [2—7], ЭТ [8—13] и ПМФ [14, 15] или, наоборот, после успешной элиминации BCR-ABL1+ клона у больных ХМЛ может вторично выявляться JAK2V617F+ и CALR+ ИП, ЭТ [16] и ПМФ. Частота сочетания химерного гена BCR-ABL1 и мутации JAK2V617F в различных популяциях больных ХМЛ сильно варьирует. Если J. Jelinek и со-авт. [17] из США при исследовании 99 больных ХМЛ не нашли ни одного случая сочетания транскрипта BCR-ABL1 и JAK2V617F, то другие авторы из США, увеличив объем выборки до 1570 больных ХМЛ, выявили сочетание клонов у 0,4 % (6/1570) больных [18]. Частота сочетания транскрипта BCR-ABL1 и JAK2V617F у больных ХМЛ в исследованиях немецких авторов составила 0,2 % (23/1487) [19], а у польских — 0,7 % [20]. По данным мексиканского исследования, проведенного на небольшой выборке из 142 больных различными видами МПН, частота сочетания двух клонов составила 12,7 % [21]. Наибольшая частота сочетаний транскрипта BCR-ABL1 и JAK2V617F отмечена авторами из Пакистана — 26,7 % [22]. Открытые в 2013 г. мутации 9-го экзона гена CALR выявляются в 70—84 % случаев Jak2 и MPL-негативных ЭТ и ПМФ, в 8 % случаев миелодиспластического синдрома и не выявляются при ХМЛ [23-25]. Тем не менее за 2014—2019 гг. описаны 12 клинических наблюдений сочетания химерного гена BCR-ABL1 и мутации 9-го экзона гена CALR [26—37]. Частота такого сочетания описана в польской популяции больных ХМЛ и составляет 0,17 % [17].
Целью данного исследования явилось определение частоты сочетаний и кинетики уровня транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки мутаций генов JAK2, MPL и CALR у больных ХМЛ при терапии ингибиторами тирозинкиназ (ИТК).
Материалы и методы
В исследование было включено 567 больных ХМЛ, получавших терапию препаратами ИТК, которым проводили мониторинг уровня химерного транскрипта BCR-ABL1 в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России с 2012 по 2019 гг. Выделение
мРНК и ДНК осуществлялось набором реагентов компании «Интерлабсервис» (Россия) согласно инструкции производителя. Количественная оценка уровня транскриптов (Mbcr b3a2 и b2a2) BCR-ABL1 была проведена с использованием ампли-фикатора Rotor-Gene О (OIAGEN, Германия) и набора реагентов «АмплиСенс® Лейкоз Квант M-bcr-FRT» («Интерлабсервис», Россия). Результаты анализов рассчитаны по международной шкале с учетом фактора конверсии. Поиск мутаций JAK2V617F и MPLW515L/K был осуществлен с использованием количественной аллель-специфической (АС) полимеразной цепной реакции в реальном времени. Мутации гена CALR исследованы фрагментным анализом с последующим секвенированием по Сэнгеру. В исследованиях были использованы наборы реагентов компании «Синтол» (Россия).
Результаты
В результате исследования образцов мРНК и ДНК клеток крови 567 больных с BCR-ABL1+ ХМЛ мутация JAK2V617F была выявлена у 5 больных, а мутации 9-го экзона гена CALR — у 2 больных. Сочетание BCR-ABL1 с мутацией MPLW515L/K не было выявлено ни у одного больного ХМЛ (табл. 1).
Клиническое наблюдение 1. Больной Ш. Д.А., 59 лет. У больного в октябре 2012 г. в клиническом анализе крови были выявлены лейкоцитоз (144 х 109/л) и тром-боцитоз (904 х 109/л), в миелограмме — бластные клетки 4 %, расширение гранулоцитарного ростка, базофилы 10,5 %, эозинофилы 8 %. Отмечены гепа-томегалия и спленомегалия (+3 и +15 см из-под края реберной дуги, соответственно). При гистологическом исследовании трепанобиоптата костного мозга обнаружена морфологическая картина ХМЛ и ПМФ (рис. 1 А и В). Молекулярно-генетическое исследование выявило уровень транскрипта BCR-ABL1 — 80 % и аллельную нагрузку мутации JAK2V617F — 73 %. Установлен клинический диагноз «ХМЛ, хроническая фаза, промежуточная группа риска по Sokal», и начата терапия иматинибом в дозе 400 мг/сут. Через 8 месяцев после начала терапии иматинибом уровень транскрипта BCR-ABL1 снизился в 1000 раз (с 80 до 0,08 %), а аллельная нагрузка мутации JAK2V617F снизилась в 3,5 раза (с 73 до 21 %). При повторном исследовании в ноябре 2013 г. уровень транскрипта BCR-ABL1 составил 0,014 %, а мутация JAK2V617F снизилась до 5 %. Учитывая сохраняющиеся тромбоцитоз и спленоме-галию на фоне глубокого молекулярного ответа (МО) по уровню транскрипта BCR-ABL1, а также биклональ-ный характер миелопролиферативного заболевания, с марта 2015 г. к терапии добавлен интерферон альфа в дозе 3 млн МЕ через день. С июня 2018 г. больному прекращена терапия иматинибом и продолжена
о-о-
Таблица 1. Общие сведения о больных XMJ1 с мутациями JAK2vtl F и CALR тип-1, -2 Table 1. General information about CML patients with JAK2Vù,^F and CALR type-1, 2 mutations
Случай Case Пол Sex Возраст (лет) Age (years) Последовательность диагнозов Order of diagnoses Время (мес) Time (months)* Уровень транскрипта Bcr-Abll Bcr-Abll transcript level(IS) Тип мутаций Type of mutation Аллельная нагрузка мутаций Allele burden of mutations ( %) Причины поиска других мутаций Reasons to search for other mutations Препараты ИТК (мг/сут) TKI drugs (mg/day) БМО MMR
В трепанобиоптате
1 M 59 ХМЛ + ПМФ 0 JAK2V6,7F 73 костного мозга картина ХМЛ и ПМФ Иматиниб 400 Да
M CML + PMF OU /О A picture characteristic of CML and PMF in the bone marrow trephine biopsy specimen Imatinib 400 Yes
2 Ж F 61 ип->хмл PV^CML 60 49% JAK2V6,7F 95 Нарастающий лейкоцитоз в крови до 30,5 * 109/л Increasing leukocytosis in the blood up to 30.5 x 10'VL Иматиниб 400 Нилотиниб 800 Imatinib 400 Nilotinib 800 Нет No
Иматиниб 600
3 Ж F 51 ХМЛ--ЭТ CML->ET 158 3,7% JAK2V6,7F 9 Отсутствие ПЦО на 4 разных препарата ИТК No CCyR to 4 different TKI drugs Дазатиниб 140 Нилотиниб 800 Imatinib 600 Dasatinib 140 Nilotinib 800 Нет No
4 Ж F 60 ПМФ->ХМЛ PMF^CML 58 0% JAK2V6'7F 59 Нарастающий лейкоцитоз в крови до 37 * 109/л и спленомегалия (+5 см) Increasing leukocytosis in the blood up to 37 x 10°/L and splenomegaly (+5 cmj Иматиниб 600 Нилотиниб 400 Imatinib 600 Nilotinib 400 Да Yes
5 M M 55 ип->хмл PV-^CML 3 1,8 % JAK2V6,7F 70 Нарастающий лейкоцитоз в крови до 50 * 109/л Increasing leukocytosis in the blood up to 50 x 10°/L Иматиниб 600 Imatinib 600 Да Yes
Нарастающий
6 M M 66 ХМЛ--ПМФ CML+PMF 4 78 % CALR-1 46 тромбоцитоз в крови до 1279* 109/л Иматиниб 400 Imatinib 400 Да Yes
Increasing thrombocytosis in the blood up to 1279 x 10'YL
7 M M 66 ХМЛ--ЭТ CML->ET 204 0% CALR-2 48 Нарастающий тромбоцитоз в крови до 950-1000 * 109/л при БМО Increasing thrombocytosis in the blood up to 950-1000 x W:'/L in MMR Иматиниб 400 Imatinib 400 Да Yes
Примечание. ХМЛ — хронический миелолейкоз, ПМФ — первичный миелофиброз, ЭТ — эссенциальная тромбоцитемия, IS — международная шкала, ПЦО — полный цитогенетический ответ, БМО — большой молекулярный ответ; * — временной интервал (мес) между выявлением двух мутаций.
Note. CMl — chronic myeloid leukemia, PMF — primary myelofibrosis, PV — Polycythemia Vera, Ti-'.i - tyrosine kinase inhibitor; ET — essential thrombocythemia, iS — international scale, CCyR — complete cytogenetic response, MMR — major molecular response; ' — time interval (months) between detection of two mutations.
монотерапия интерфероном альфа в дозе 3 млн МЕ через день. К августу 2019 г. уровень транскрипта БОК-ЛБЫ достиг 0,061 %, т.е. глубокой молекулярной ремиссии, а аллельная нагрузка 1ЛК2У617Т' стабилизировалась в пределах 28—34 % (рис. 1 С).
Клиническое наблюдение 2. Больная Б. Е.Н., 61 год. В 2007 г. ей был установлен диагноз ИП на основании эритроцитоза (7,42 х 1012/л), лейкоцитоза (14,9 х 109/л), спленомегалии и морфологического исследования тре-панобиоптата костного мозга (рис. 2 А и В). При моле-кулярно-генетическом анализе обнаружена мутация JЛK2V6m'. Больной была начата терапия гидроксикар-бамидом в дозе 1 г 2 раза в день. Тем не менее через 5
лет от начала цитостатической терапии, в марте 2012 г., в крови отмечено нарастание лейкоцитоза до 30,5 х 109/л. В трепанобиоптате костного мозга отмечалось расширение гранулоцитарного ростка за счет промежуточных форм, клеток с незрелой морфологией, более характерной для ХМЛ (рис. 2 А и В). При молекулярно-ге-нетическом исследовании обнаружены транскрипт БОК-ЛБЫ1 в количестве 49,53 % и мутация JЛK2V617F с аллельной нагрузкой 95 %. Клинический диагноз ИП был дополнен ХМЛ, и начата терапия иматинибом в дозе 400 мг/сут. Спустя два с половиной месяца терапии из-за токсического эффекта иматиниб был заменен на нилотиниб в дозе 800 мг/сут. К марту 2014 г. уровень
Рисунок 1. А — гиперклеточный костный мозг с трехростковой гиперплазией: эритроидный росток с выраженными признаками омоложения, в виде «рассыпающихся» кластеров эритрокариоцитов, присутствовали мегалобластоидные формы; гранулоцитарный росток — на всех этапах дифференцировки. Мегакариоциты полиморфны по размерам и морфологии, располагались разрозненно и в виде единичных рыхлых кластеров. Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. *200. В —степень ретикулинового фиброза стромы MF-0 с участками MF-1 менее 30 %. Окраска по Гомори. Ув. *200. С — кинетика уровня транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки JA.K2V6'7F Figure 1. A — hypercellular bone marrow with panmyelosis. Loose clusters of erythrokaryocytes with an increased count of erythroid precursors with the presence of megaloblastoid forms. For granulocytic linage, every stage of differentiation is detectable. Megakaryocytes with notable pleomorphism in size and nuclear morphology tending to form occasional loose clusters. Stain: H&E. Magnification: x200. B — stromal reticulin fibrosis grade MF-0, with less than 30 %. Gomori stain. Magnification: x200. C — kinetics of the transcript level BCR-ABL1 and allelic load JAK2V617F
транскрипта БОК-ЛБЫ снизился до 0,29 %, а аллельная нагрузка ¿ЛЕЗ™71' увеличилась до 100 % (рис. 2 С).
Клиническое наблюдение 3. Больная Х. Е.С., 51 год. Диагноз ХМЛ у нее был установлен в июне 2001 г. на основании лейкоцитоза (44 х 109/л) и обнаружения при стандартном цитогенетическом исследовании (СЦИ) транслокации 1:(9;22) ^34^11) в 100 % метафаз-ных ядер клеток крови. Больной была начата терапия интерфероном альфа в дозе 10 млн МЕ/сут в сочетании с малыми дозами цитарабина. С июня 2003 г. назначен иматиниб в дозе 400 мг/сут, затем в связи с отсутствием цитогенетического ответа — 600 мг/сут. В связи с цитогенетической резистентностью через 4 года лече-
ния иматинибом больная была переведена на терапию ИТК 2-го поколения дазатинибом. Однако за 3 года терапии дазатинибом в максимальной дозе 140 мг/сут удалось получить лишь кратковременный цитогене-тический ответ (РЬ+ в 66 % метафазных ядер), в связи с чем вновь произведена смена ИТК, и с марта 2010 г. начата терапия нилотинибом в дозе 800 мг/сут. Однако за 4 года терапии нилотинибом не удалось получить полный гематологический ответ, в крови сохранялся умеренный тромбоцитоз (600 х 109/л) и эритроцитоз (5,4 х 1012/л). Удалось получить только частичный ци-тогенетический ответ (РЬ+ в 23 % метафаз) и снижение уровня транскрипта БОК-ЛБЬ до 3,36 %. Эти обстоя-
Рисунок 2. А — гиперклеточный костный мозг с трехростковой гиперплазией: эритроидный росток расширен, с выраженными признаками омоложения. Гранулоцитарный росток умеренно расширен, на всех этапах дифференцировки. Мегакариоциты полиморфны по размерам и морфологии, располагаются разрозненно и виде единичных рыхлых кластеров межтрабекулярно. Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. *200. В — степень ретикулинового фиброза стромы MF-1. Окраска по Гомори. Ув. *200. С — кинетика уровней транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки JAK2V617F у больной Б. Е.Н.
Figure 2. A — hypercellular bone marrow with panmyelosis. Erythropoiesis is normoblastic with multiple erythroid precursors. Granulopoiesis is moderately expanded, with cells being at various differentiation stages. Numerous megakaryocytes with a significant difference in size and morphology tending to form occasional intertrabecular loose clusters. Stain: H&E. Magnification: x200. B — stromal reticulin fibrosis grade MF-1. Stain: Gomori silver. Magnification: x200. C — kinetics of the BCR-ABL1 transcript level and allele burden of JAK2V617F
тельства послужили причиной поиска других драй-верных мутаций МПН, и в октябре 2014 г. в клетках крови больной была обнаружена мутация JЛK2V617F с аллельной нагрузкой 9,1 %. Ретроспективное исследование аллельной нагрузки мутации JЛK2V617F показало, что впервые мутация JЛK2V617F с уровнем 1 % появилась в январе 2012 г. и имела тенденцию к неуклонному росту аллельной нагрузки. Гистологическое исследование трепанобиоптата костного мозга выявило картину, характерную для ЭТ (рис. 3 А и В). Таким образом, у больной с БОК-ЛБЫ1+ ХМЛ было констатировано наличие второго МПН — ЭТ с мутацией JЛK2V617F. Учитывая плохую переносимость терапии интерфероном в прошлом, было рекомендовано продолжить терапию нилотинибом (800 мг/сут) в сочетании с гидрокси-
карбамидом (0,5—1 г/сут). В результате проводимого лечения достигнута гематологическая ремиссия, однако за 16 лет терапии препаратами ИТК ни разу не удалось достичь большого МО (БМО). К сентябрю 2019 г. уровень транскрипта БОК-ЛБЫ1 составил 3,02 %, а ал-
JV617F
осталась
без
лельная нагрузка мутации JЛK2V нений и составила 20 % (рис. 3 С).
Клиническое наблюдение 4. Больная К. Н.Н., 60 лет. В 2002 г. впервые у больной была выявлена спленоме-галия (+1 см из-под края реберной дуги), повышенная кровоточивость из мелких ран, чувство тяжести и боль в левом подреберье. Показатели гемограммы были удовлетворительными (гемоглобин — 124 г/л, лейкоциты — 2,9 х 109/л, тромбоциты — 170 х 109/л), и поэтому больной было назначено симптоматическое лечение.
Рисунок 3. А — нормоклеточный костный мозг: гранулоцитарный росток в умеренном количестве, с преобладанием зрелых форм. Эритроидный росток в достаточном количестве, в виде мелких скоплений эритрокариоцитов нормобластического ряда. Мегакариоциты — в увеличенном количестве, обычных и крупных размеров, с атипичной морфологией, гиперлобулярными нормохромными ядрами, располагаются разрозненно. Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. *200. В — степень ретикулинового фиброза MF-0 на большем протяжении. Окраска по Гомори. Ув *200. С — кинетика уровней транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки JAK2V6I7F у больного Х. Е.С. Figure 3. A — normocellular bone marrow. The granulocytes count lies within the normal range with the predominance of mature forms. Erythroid lineage is sufficient, erythrokaryocytes form small clusters. The megakaryocytes count is elevated; there are normal to large forms, with atypical morphology, hyperlobular normochromic nuclei. No clusters of megacaryocytes. Stain: H&E. Magnification: x200. B — stromal reticulin fibrosis grade MF-0. Stain: Gomori silver. Magnification: x.200. C — kinetics of the BCR-ABL1 transcript level and allele burden of JAK2V6'7F
Однако в июне 2004 г. отмечено нарастание лейкоцитоза до 70 х 109/л и спленомегалии, а при гистологическом исследовании трепанобиоптата костного мозга обнаружены морфологические признаки, характерные для ПМФ. Последующие 3 года больная с кратковременным терапевтическим эффектом получала цитоста-тическую (гидроксикарбамид 1 г/сут) и иммуномоду-лирующую (интерферон альфа 3 млн МЕ/сут) терапию. Тем не менее в феврале 2007 г. отмечено нарастание лейкоцитоза до 37 х 109/л и спленомегалии (+5 см из-под края реберной дуги), а при цитогенетическом исследовании обнаружена транслокация 1:(9;22) ^34^11). Больной установлен диагноз ХМЛ, и с апреля 2007 г.
начата терапия иматинибом в дозе 600 мг/сут. Спустя 3 месяца из-за аллергической реакции (крапивница) был отменен иматиниб, и с августа 2007 г. начата терапия нилотинибом в дозе 800 мг/сут. Через 6 месяцев был достигнут полный цитогенетический ответ (ПЦО), а через год — БМО. Однако, несмотря на достижение ПЦО и БМО, сохранялись выраженная спленомега-лия, умеренная анемия и тромбоцитопения, единичные миелоциты и нормобласты в крови, постоянный умеренный внутриклеточный гемолиз. По данным повторного гистологического исследования трепанобиоптата костного мозга, выполненного в июне 2012 г., выявлены изменения, характерные для фиброзной стадии ПМФ
Рисунок 4. А — гиперклеточный костный мозг за счет расширения гранулоцитарного и мегакариоцитарного ростков; клеточные элементы расположены в виде «цугов». Гранулоцитарный росток представлен преимущественно зрелыми формами с очаговым увеличением эозинофильных гранулоцитов. Мегакариоциты полиморфны пс размерам, с атипичной морфологией, расположены разрозненно и в виде рыхлых и плотных кластеров. Эритроидный росток — в умеренном количестве, представлен кластерами эритрокариоцитов нормобластического ряда. Остеосклероз grade 2-3. Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. *200. В — степень ретикулинового фиброза стромы MF-3. Окраска по Гомори. Ув. *200. С — кинетика уровней транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки JAK2V6I7Fу больного К. Н.Н.
Figure 4. A — bone marrow is hypercellular due to the expansion of granulo- and megakaryopoesis. Hematopoetic cells are arranged in cords due to dense stomal fibrosis. Granulocytes are predominantly represented by mature forms with a focal increase in eosinophilic granulocytes count. Megakaryocytes vary in size with atypical morphology, noticeably tending to form loose and dense clusters. Erythroid cell count lies within the normal range and the lineage is represented by normoblastic erythrokaryocytes clusters. Osteosclerosis grade 2-3. Stain: H&E. Magnification: x200. B — stromal reticulin fibrosis grade MF-3. Stain: Gomori silver. Magnification: x.200. C — kinetics of the BCR-ABL1 transcript level and allele burden of JAK2V6'7F
(рис. 4 А и В), а молекулярно-генетический анализ показал наличие мутации 1ЛК2У617Т' с аллельной нагрузкой 59 %. С учетом сохраняющегося стабильного глубокого МО в течение 4 лет было решено отменить нило-тиниб и продолжить терапию только гидроксикарба-мидом в дозе 0,5—1 г/сут. Однако в связи нарастанием спленомегалии, портальной гипертензии и явлений гиперспленизма (тромбоцитопения, анемия) в апреле 2013 г. была выполнена спленэктомия. В августе 2019 г. при молекулярно-генетическом анализе транскрипт БОК-ЛБЫ не обнаружен, а аллельная нагрузка мутации ,1ЛК2убт составила 48 % (рис. 4 С).
Клиническое наблюдение 5. Больной Д. Л.А., 55 лет. Диагноз ИП установлен в феврале 2011 г. на основание гепатоспленомегалии (печень и селезенка выступали на 1 см из-под края реберной дуги), плеторического синдрома и изменений в анализе крови (гемоглобин — 201 г/л, эритроциты — 9,53 х 1012/л, лейкоциты — 11,65 х 109/л и тромбоциты — 476 х 109/л, СОЭ — 0,5 мм/ч). Больному были рекомендованы эритроцитаферез и циторедуктивная терапия ги-дроксикарбамидом в дозе 1 г/сут. Однако, несмотря на проводимую терапию, через 3 месяца отмечено нарастание лейкоцитоза с 11,65 х 109 до 50 х 109/л. При СЦИ в 22 % метафазных ядер обнаружена мутация 1:(9;22) ^34^11), а молекулярно-генетический анализ выявил транскрипт БОК-ЛБЫ. На основании результатов вышеуказанных исследований установлен клинический диагноз — ХМЛ, хроническая фаза, и начата терапия иматинибом в дозе 400 мг/сут. Спустя 6 месяцев после начала терапии иматини-бом был достигнут ПЦО, но сохранялись выраженный плеторический синдром: в крови эритроцитоз (7,2 х 1012/л), тромбоцитоз (701 х 109/л) и лейкоцитоз (11,47 х 109/л) без сдвига лейкоцитарной формулы. В сентябре 2012 г. при гистологическом исследовании трепанобиоптата костного мозга обнаружена выраженная картина ИП (рис. 5 А и В), а молекулярно-ге-нетический анализ показал наличие мутации ЖК2убт с аллельной нагрузкой 70,6 %. Было принято решение увеличить дозу иматиниба с 400 до 600 мг/сут. К сентябрю 2013 г. был достигнут БМО, а аллельная нагрузка на мутацию 1ЛК2У617Т' снизилась до 56 %. Однако через 4 года после достижения стабильного БМО в мае 2017 г. из-за развития негематологической токсичности (задержка жидкости, нестабильное АД) иматиниб был заменен на интерферон альфа в дозе 3 млн МЕ через день.
Клиническое наблюдение 6. Больной К. Ю.А., 66 лет. Клинический диагноз ХМЛ, хроническая фаза был установлен ему в августе 2015 г. на основании лейкоцитоза (17,2 х 109/л), гепатоспленомегалии (печень и селезенка на 2 см выступали из-под реберной дуги) и наличия мутации 1:(9;22) (д34;д11) в 55 % метафазных ядрах клеток крови. При моле-
кулярно-генетическом анализе уровень химерного транскрипта БОК-ЛБЫ1 составил 78,15 %. Больному была начата терапия иматинибом в дозе 400 мг/сут. За 4 месяца терапии иматинибом отмечено снижение количества лейкоцитов до 6,8 х 109/л и уровня транскрипта БОК-ЛБЫ до 2,79 %, что сопровождалось нарастанием тромбоцитоза с 334 х 109 до 1279 х 109/л. При гистологическом исследовании трепанобиопта-та костного мозга были выявлены морфологические признаки ПМФ (рис. 6 А и В), а молекулярно-гене-тическое исследование обнаружило мутацию ОЛЬК c.1099_1150del. р. Ь367£8*"46. К терапии с иматинибом в дозе 400 мг/сут добавлен гидроксикарбамид 1 г/сут. По данным молекулярно-генетических исследований, с января 2017 г. сохраняется БМО, а уровень аллельной нагрузки мутации ОЛЬКр■Ь3677'>46 остается в пределах 40—50 % (рис. 6 С).
Клиническое наблюдение 7. Больной В. В.С., 66 лет. Диагноз ХМЛ установлен в октябре 2000 г., и до июня 2004 г. больной получал терапию препаратами интерферона альфа. С июля 2004 г. начато лечение има-тинибом (400 мг/сут), и через год достигнут БМО. Несмотря на стабильно сохраняющийся БМО, в марте 2017 г. отмечен тромбоцитоз (более 1000 х 109/л). Последующий молекулярно-генетический анализ обнаружил мутацию ОЛЬК с.1154_1155т8ТТОТС (р.К385£8*"47) с аллельной нагрузкой 48 %, а гистологическое исследование трепанобиоптата костного мозга выявило морфологическую картину ЭТ. С учетом стабильно сохраняющегося глубокого МО иматиниб был заменен на интерферон альфа в дозе 3 млн МЕ х 3 раза в неделю, после чего количество тромбоцитов снизилось до нормальных значений. С 2006 г. уровень транскрипта БОК-ЛБЫ не детектируется, а аллельная нагрузка мутации ОЛЬК с.1154_11551иэТТОТС (р.К385£8*"47) с момента обнаружения находится в диапазоне 41—48 % (рис. 7).
Обсуждение
По данным литературы, частота сочетания химерного гена БОК-ЛБЫ и мутации .1ЛК2убту больных ХМЛ в различных популяциях широко варьирует: в США — 0,4 % [17, 18], Германии — 0,2 % [19], Польше — 0,7 % [20], Мексике — 12,7 % [21], Пакистане — 26,7 % [22]. Сочетания химерного гена БОК-ЛБЫ и мутаций 9-го экзона ОЛЫК — относительно редкие явления, частота этих событий описана только для польской популяции больных ХМЛ и составляет 0,17 % [17]. В обследованной нами когорте больных ХМЛ частота сочетания химерного гена БОК-ЛБЫ с 1ЛК2Ш7Т' составила 0,88 % (5/567), а с мутациями 9-го экзона гена ОЛЫК — 0,32 % (2/567). Медиана возраста на момент обнаружения сочетаний химерного гена БОК-ЛБЫ1 и мутации 1ЛК2убт в США составила 66 лет (диапазон 48—81 год) [18], в Германии — 72 года (диапазон
46—80 лет) [19]. Медиана возраста обследованных нами больных на момент обнаружения двух мутаций составила 60 лет (диапазон 51—66 лет). Анализ тендерных различий в случаях сочетания транскрипта БОК-ЛБЫ и 1ЛК2у617Т' показал незначительное преобладание больных женского пола: от 52 % [19] до 64 % [18], тогда как в нашем исследовании большинство (4/7) составляли мужчины. При анализе литературных данных не удалось найти сведений о биологических закономерностях и хронологической последовательности приобретения химерного гена БОК-ЛБЫ1 и мутаций генов JЛK2 и ОЛЫК. В представленном исследовании химерный ген БОК-ЛБЫ1 был выявлен ранее
других мутаций в случаях 3, 6, 7; являлся вторым генетическим событием в случаях 2, 4, 5 и одновременно — в случае 1. Частота одномоментного выявления двух генетических аномалий среди больных в США составила 45 % (5/11), а в 55 % (6/11) случаев временной интервал был 87 месяцев (45—129 месяцев) [18]. В каждом случае ПМФ и ЭТ с мутацией JЛK2У617F, а также в 3 случаях ИП с мутацией JЛK2У617F в дальнейшем были выявлены химерный транскрипт БОК-ЛБЫ и развитие ХМЛ [18]. Подобный клинический феномен трансформации JЛK2У617F+ ИП в БОК-ЛБЫ* ХМЛ через 12—18 лет наблюдения описан и другими исследователями [6, 38].
Рисунок 5. А — гиперклеточный костный мозг за счет трехростковой гиперплазии: эритроидный росток был представлен в виде «рассыпающихся» скоплений эритрока-риоцитов нормобластического ряда, с признаками омоложения; гранулоцитарный росток на всех этапах дифференцировки. Мегакариоциты — полиморфны по размерам и морфологии, располагались преимущественно разрозненно. Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. *200. В — степень ретикулинового фиброза стромы MF-0 с участками MF-1 менее 30 %. Окраска по Гомори. Ув. *200. С — кинетика уровня транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки мутации JAK2V617Fу больного Д. Л.А. Figure 5. A. — hypercellular bone marrow with panmyelosis. Erythropoiesis is normoblastic, represented by large loose groups of erythroid cells with the "left shift". Granulocytes at every differentiation stage are detectable. Numerous megakaryocytes vary in size and morphology; they are predominantly loosely scattered. Stain: H&E. Magnification: X-200. B — stromal reticulin fibrosis grade MF-0, with less than 30 % of MF-1 areas. Stain: Gomori silver. Magnification: X-200. C — kinetics of the BCR-ABL1 transcript level and allele burden of JAK2V617F
# BCR-ABL1 • CALR p.L367fs*46
Рисунок 6. А — гиперклеточный костный мозг с гиперплазией гранулоцитарного и мегакариоцитарного ростков. Среди клеток гранулоцитарного ряда преобладают зрелые формы, много клеток эозинофильного ряда. Эритроидный росток в достаточном количестве, часть клеток с омоложением. Отмечается пролиферация мегакариоцитов. Мегакариоциты полиморфны (от крупных клеток со зрелой морфологией, гиперсегментированными ядрами до небольшого размера клеток с гиполобулярными ядрами, нарушенным ядерно-цитоплазматическим соотношением), формируют отдельные рыхлые кластеры. В — при окраске по Гомори степень ретикулинового фиброза MF-2. С — кинетика уровней транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки мутации CALR p L367fs*46
Figure 6. A. — hypercellular bone marrow with the expansion of predominantly two cell lineages of myelopoesis. Granulocytic expansion with predominantly mature forms, focal increase of eosinophilic granulocytes count. Erythroid cell count lies within the normal range and the lineage is represented by normoblastic erythrokaryocytes clusters with the admixture of erythroid precursors. Megakaryocytes are polymorphic (from large mature cells with hypersegmented nuclei to small ones with hypolobulated nuclei and disturbance of the nuclear to cytoplasmic ratio), form distinct loose clusters. Stain: H&E. Magnification: X-200. B — stromal reticulin fibrosis grade MF-2. Stain: Gomori silver. Magnification: x200. C — kinetics of the BCR-ABL1 transcript level and allele burden of CALR p L367fs*46
Имеются данные о развитии JЛK2У617F+ и ОЛЫК+ МПН у больных ХМЛ с цитогенетической и глубокой молекулярной ремиссией [3, 16]. В описанном нами наблюдении № 7 ОЛЫК* ЭТ был выявлен через 17 лет после установления клинического диагноза ХМЛ и при глубоком МО. Нерешенным остается вопрос, является ли химерный ген БОК-ЛБЫ1 и мутации генов JЛK2У617F и ОЛЫК молекулярными событиями одной патогенетической цепи или нет. Результаты некоторых исследований показывают сложность молекулярного патогенеза МПН, зачастую не ограничивающегося
тремя общепризнанными «драйверами». Известно, что в 47 % случаев «драйверным» мутациям предшествуют мутации генов DNMT3A, TET2, ASXL1, IDH2, SRSF2 и EZH2, вероятно, являющиеся предрасполагающими факторами геномной нестабильности гемопоэ-тической стволовой клетки (ГСК) [34, 39, 40]. Методом секвенирования следующего поколения (NGS — next generation sequencing) в образцах 23 больных с соче-танными мутациями BCR-ABL1 и JAK2V617F были обнаружены мутации в генах TET2, ASXL1, RUNX1, CBL, DNMT3A, PHF6, SF3B1 и TP53 с высокой частотой,
Рисунок 7. Кинетика уровней транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки CALR c.1154_1155insTTGTC p.K385fs*47 у больного В. В.С Figure 7. Kinetics of the BCR-ABL1 transcript level and allele burden of CALR c.1154_1155insTTGTC p.K385fs*47
что также может указывать на их роль в качестве предрасполагающих факторов в молекулярном патогенезе
МПН [19].
Анализ литературы показал, что кинетика отдельных клонов, определяемая по изменению уровня транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки JAK2V617F и CALR™"112, имеет свои особенности. В немецком исследовании у 88 % (16/18) больных ХМЛ определялась разновекторная кинетика транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки JAK2V617F, что, по мнению авторов, является результатом сосуществования двух разных клонов [19]. Синхронная кинетика уровня транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки JAK2V617F под действием таргетной терапии препаратами ИТК наблюдается редко. Только у 18 % (2/11) больных ХМЛ в США отмечалось синхронное снижение уровня транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки JAK2V617F до неде-тектируемого уровня [18].
В клиническом наблюдении 5 терапия иматинибом в дозе 400 мг/сут в течение 24 месяцев привела к синхронному снижению уровня транскрипта BCR-ABL1 с 1,77 до 0 %, а аллельной нагрузки мутации JAK2V617F — с 76 до 1 %. Учитывая, что препараты ИТК являются селективными ингибиторами только рецепторных ти-розинкиназ ABL1, KIT и PDGF, но не активны в отношении JAK2, мы предполагаем, что в этом случае обе мутации возникли в одной ГСК, давшей начало всему патогенному клону МПН.
Какова прогностическая важность обнаружения сочетаний транслокации BCR-ABL1 с другими драй-верными мутациями при МПН? Существует мнение,
что мутация JЛK2V617F может быть плохим прогностическим маркером ранней прогрессии ХМЛ [22]. Анализ собственных результатов показал, что лишь в 28 % (2/7) случаев ХМЛ с мутацией .Ш^^1^ не был достигнут БМО при терапии препаратами ИТК. При этом в 72 % (5/7) случаев больные достигли глубокого МО, а у 4 больных с глубоким МО терапия ИТК была прекращена, и больные сохраняют молекулярную ремиссию без таргетного лечения.
По каким признакам можно подозревать наличие второго МПН? Наши данные подтверждают описанные в литературе наблюдения, свидетельствующие о несоответствии выявляемой гепатомегалии и спле-номегалии, нарастающих тромбоцитоза, лейкоцитоза или эритроцитоза с уровнем цитогенетического ответа или МО у больных ХМЛ, что является показанием к поиску других драйверных мутаций МПН [16]. В обследованной популяции больных ХМЛ наиболее частым признаком сопутствующего МПН были нарастающие лейкоцитоз (в случаях 2, 4, 5) и тромбоцитоз (в случаях 6 и 7), часто не соответствующие уровню транскрипта БОК-ЛБЫ.
Не существует единой позиции и в вопросах формирования клинического диагноза и выбора терапии. Например, по мнению американских ученых, совместное появление транскрипта БОК-ЛБЫ и JЛK2V617F чаще всего отражает два различных миелопролифератив-ных новообразования [18]. Клинико-фенотипическое доминировании одной из нозологий объясняется феноменом «пролиферативной конкуренции», согласно которой БОК-ЛБЫ1 является источником более силь-
ной сигнализации, ведущей к более высокой пролиферации, чем мутация JЛK2У617F или ОЛЫКтип 12 [14, 22].
Терапевтический эффект ингибиторов БОК-ЛБЫ1-тирозинкиназ проявляется изолированным снижением уровня транскрипта БОК-ЛБЫ1, но не аллельной нагрузки мутаций генов JЛK2 и ОЛЫК. В исследованной группе больных мы выделили три типа кинетики изменения уровни транскрипта БОК-ЛБЫ1 и аллельной нагрузки мутации ,1ЛК2У617Р (р ис. 8).
Первый тип кинетики (параллельное снижению уровней транскрипта БОК-ЛБЫ1 и аллельной нагрузки мутации наблюдаемый при таргетной терапии препаратами ИТК, характерен когда один клон несет две мутации (патогенез МПН является бимутацион-но-моноклональной) (рис. 8 А). Подобное наблюдение также описано С.И.. Soderquist и соавт. [18]. Второй тип кинетики (вектор кинетики уровня транскрипта БОК-ЛБЫ и мутации JЛK2У617F имеет разнонаправленный характер — снижение уровня БОК-ЛБЫ1 сопровождается ростом аллельной нагрузки JЛK2У6177F) характерен для МПН с двумя клонами, несущими в себе по одной мутации, как в описанном клиническом наблюдении 2 (рис. 8 В). В данном случае элиминация БОК-ЛБЫ+ клона под воздействием ИТК приводит к расширению JЛK2У617F+ клона и фенотипической манифестации сопутствующего МПН [16]. Третий тип кинетики (ал-лельная нагрузка JЛK2У617F сначала синхронно снижается с уровнем БОК-ЛБЫ1, а затем их кинетика становится разнонаправленной) характерен для патогенеза МПН со сложной клональной архитектурой. Вероятно, снижение аллельной нагрузки
JЛK2У617F при терапии препаратом ИТК происходит за счет элиминации JЛK2У617F+/ БОК-ЛБЫ+ клона, как в случаях 1 и 5 (рис. 8 С). К аналогичному выводу приходят также Л. Grisouard и соавт. [12], описывающие случай, когда из трех (БОК-ЛБЫ*,, JЛK2У617F+ и БОК-ЛБЫ+тК2У6171'+) клонов наиболее чувствительным к терапии препаратами ИТК оказался БОК-ЛБЬ1+/JЛK2У617F+ субклон. Вопрос о необходимости описания и классификации миелопролиферативных новообразований с более чем одной генетической аномалией уже поднимался в литературе [16]. Мы уверены, что дальнейшее накопление сведений о патогенетических механизмах сочетаний разных нозологий МПН
необходимо для выработки адекватных клинических диагнозов и разработки эффективных методов комбинированной таргетной терапии с включением препаратов, направленных на сопутствующие драйверные мутации.
Рисунок 8. Клональная архитектура МПН и кинетика уровней транскрипта BCR-ABL1 и аллельной нагрузки мутации JAK2V617F под воздействием терапии препаратами ИТК
Figure 8. Clonal architecture of MPN and kinetics of the BCR-ABL1 transcript level and allele burden of JAK2V617F under TKI therapy
Литература
1. Swerdlow S.H., Campo E., Harris N.L., Jaffe E.S., Pileri S.A., Stein H. et al. (Eds): WHO Classification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues (Revised 4th edition). IARC: Lyon, 2017
2. Mirza I., Frantz C., Clarke G. et al. Transformation of polycythemia vera to chronic myelogenous leukemia. Arch Pathol Lab Med. 2007; 131(11): 1719-24. DOI: 10.1043/1543-2165(2007)131 [1719: T0PVTC]2.0.C0;2.
3. Inami M., Inokuchi K., Okabe M. et al. Polycythemia associated with the JAK2V617F mutation emerged during treatment of chronic myelogenous leukemia. Leukemia. 2007; 21(5): 1103-1104. DOI: 10.1038/sj.leu.2404591.
References
1. Swerdlow S.H., Campo E., Harris N.L., Jaffe E.S., Pileri S.A., Stein H. et al. (Eds): WHO Classification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues (Revised 4th edition). IARC: Lyon, 2017
2. Mirza I., Frantz C., Clarke G. et al. Transformation of polycythemia vera to chronic myelogenous leukemia. Arch Pathol Lab Med. 2007; 131(11): 1719-24. DOI: 10.1043/1543-2165(2007)131 [1719: TOPVTC]2.0.CO;2.
3. Inami M., Inokuchi K., Okabe M. et al. Polycythemia associated with the JAK2V617F mutation emerged during treatment of chronic myelogenous leukemia. Leukemia. 2007; 21(5): 1103-1104. DOI: 10.1038/sj.leu.2404591.
4. Bee P.C., Gan G.G., Nadarajan V.S. et al. A man with concomitant polycythae-mia vera and chronic myeloid leukemia: the dynamics of the two disorders. Int J Hematol. 2010; 91: 136-139. DOI: 10.1007/s12185-009-0471-6.
5. Cambier N., Renneville A., Cazaentre T. et al. JAK2V617F-positive polycythe-mia vera and Philadelphia chromosome-positive chronic myeloid leukemia: one patient with two distinct myeloproliferative disorders. Leukemia. 2008; 22(7): 1454-5. DOI: 10.1038/sj.leu.2405088.
6. Wang X., Tripodi J., Kremyanskaya M. et al. BCR-ABL1 is a secondary event after JAK2V617F in patients with polycythemia vera who develop chronic myeloid leukemia. Blood. 2013; 121(7): 1238-9. DOI: 10.1182/blood-2012-11-467787. 7 Siricilla M., Nader K., Ferber A. A case report of chronic myelogenous leukemia with JAK2- and BCR-ABL-positive mutation. Am J Hematol Oncol. 2017; 13(2).
8. Qin Y.W., Yang Y.N., Li S. et al. Coexistence of JAK2V617F mutation and BCR-ABL translocation in a pregnant woman with essential thrombocythemia. Indian J Hematol Blood Transfus. 2014; 30(suppl 1): 331-4. DOI: 10.1007/s12288-014-0385-1.
9. Wahlin A., Golovleva I. Emergence of Philadelphia positive chronic myeloid leukemia during treatment with hydroxyurea for Philadelphia negative essential thrombocytosis. Eur J Hematol. 2003; 70(4): 240-1. DOI: 10.1034/j.1600-0609.2003.00043.x.
10. Lippert E., Boissinot M., Kralovics R. et al. The JAK2-V617F mutation is frequently present at diagnosis in patients with essential thrombocythemia and polycythemia vera. Blood. 2006; 108(6): 1865-7. DOI: 10.1182/blood-2006-01-013540.
11. Tabassum N., Saboor M., Ghani R. et al. Frequency of JAK2 V617F mutation in patients with Philadelphia positive chronic myeloid leukemia in Pakistan. Pak J Med Sci. 2014; 30(1): 185-8. DOI: 10.12669/pjms.301.3906.
12. Grisouard J., Ojeda-Uribe M., Looser M. et al. Complex subclone structure that responds differentially to therapy in a patient with essential thrombocythemia and chronic myeloid leukemia. Blood. 2013; 122(22): 3694-6. DOI: 10.1182/ blood-2013-07-516385.
13. Hassankrishnamurthy S., Mody M.D., Kota V.K. A Case of Chronic Myelogenous Leukemia Occurring in a Patient Treated for Essential Thrombocythemia. Am J Case Rep. 2019; 20: 10-4. DOI: 10.12659/AJCR.911854.
14. Hussein K., Bock O., Seegers A. et al. Myelofibrosis evolving during imatinib treatment of a chronic myeloproliferative disease with coexisting BCR-ABL translocation and JAK2V617F mutation. Blood. 2007; 109(9): 4106-7 DOI: 10.1182/ blood-2006-12-061135.
15. Bader G., Dreiling B. Concurrent JAK2-Positive Myeloproliferative Disorder and Chronic Myelogenous Leukemia: A Novel Entity? A Case Report with Review of the Literature. J Investig Med High Impact Case Rep. 2019; 7: 1 -5. DOI: 10.1177/2324709619832322.
16. Lee Y.J., Moon J.H., Shin H.C. et al. Two CML patients who subsequently developed features of essential thrombocythemia with JAK2-V617F mutation while in complete cytogenetic remission after treatment with imatinib mesylate. Int J Hematol. 2013; 97(6): 804-7 DOI:10.1007/s12185-013-1326-8.
17. Jelinek J., Oki Y., Gharibyan V. et al. JAK2 Mutation 1849G>T is Rare in Acute Leukemias but Can be Found in CMML, Philadelphia Chromosome negative CML, and Megakaryocytic Leukemia. Blood. 2005; 106(10): 3370-3. DOI: 10.1182/blood-2005-05-1800.
18. Soderquist C.R., Ewalt M.D., Czuchlewski D.R. et al. Myeloproliferative neoplasms with concurrent BCR-ABL1 translocation and JAK2 V617F mutation: a multi-institutional study from the bone marrow pathology group. Mod Pathol. 2018; 31(5): 690-704. DOI: 10.1038/modpathol.201Z182.
4. Bee P.C., Gan G.G., Nadarajan V.S. et al. A man with concomitant polycythae-mia vera and chronic myeloid leukemia: the dynamics of the two disorders. Int J Hematol. 2010; 91: 136-139. DOI: 10.1007/s12185-009-0471-6.
5. Cambier N., Renneville A., Cazaentre T. et al. JAK2V617F-positive polycythe-mia vera and Philadelphia chromosome-positive chronic myeloid leukemia: one patient with two distinct myeloproliferative disorders. Leukemia. 2008; 22(7): 1454-5. DOI: 10.1038/sj.leu.2405088.
6. Wang X., Tripodi J., Kremyanskaya M. et al. BCR-ABL1 is a secondary event after JAK2V617F in patients with polycythemia vera who develop chronic myeloid leukemia. Blood. 2013; 121(7): 1238-9. DOI: 10.1182/blood-2012-11-467787
7. Siricilla M., Nader K., Ferber A. A case report of chronic myelogenous leukemia with JAK2- and BCR-ABL-positive mutation. Am J Hematol Oncol. 2017; 13(2).
8. Qin Y.W., Yang Y.N., Li S. et al. Coexistence of JAK2V617F mutation and BCR-ABL translocation in a pregnant woman with essential thrombocythemia. Indian J Hematol Blood Transfus. 2014; 30(suppl 1): 331-4. DOI: 10.1007/s12288-014-0385-1.
9. Wahlin A., Golovleva I. Emergence of Philadelphia positive chronic myeloid leukemia during treatment with hydroxyurea for Philadelphia negative essential thrombocytosis. Eur J Hematol. 2003; 70(4): 240-1. DOI: 10.1034/j. 1600-0609.2003.00043.x.
10. Lippert E., Boissinot M., Kralovics R. et al. The JAK2-V617F mutation is frequently present at diagnosis in patients with essential thrombocythemia and polycythemia vera. Blood. 2006; 108(6): 1865-7 DOI: 10.1182/blood-2006-01-013540.
11. Tabassum N., Saboor M., Ghani R. et al. Frequency of JAK2 V617F mutation in patients with Philadelphia positive chronic myeloid leukemia in Pakistan. Pak J Med Sci. 2014; 30(1): 185-8. DOI: 10.12669/pjms.301.3906.
12. Grisouard J., Ojeda-Uribe M., Looser M. et al. Complex subclone structure that responds differentially to therapy in a patient with essential thrombocythemia and chronic myeloid leukemia. Blood. 2013; 122(22): 3694-6. DOI: 10.1182/ blood-2013-07-516385.
13. Hassankrishnamurthy S., Mody M.D., Kota V.K. A Case of Chronic Myelogenous Leukemia Occurring in a Patient Treated for Essential Thrombocythemia. Am J Case Rep. 2019; 20: 10-4. DOI: 10.12659/AJCR.911854.
14. Hussein K., Bock O., Seegers A. et al. Myelofibrosis evolving during imatinib treatment of a chronic myeloproliferative disease with coexisting BCR-ABL translocation and JAK2V617F mutation. Blood. 2007; 109(9): 4106-7. DOI: 10.1182/ blood-2006-12-061135.
15. Bader G., Dreiling B. Concurrent JAK2-Positive Myeloproliferative Disorder and Chronic Myelogenous Leukemia: A Novel Entity? A Case Report with Review of the Literature. J Investig Med High Impact Case Rep. 2019; 7: 1 -5. DOI: 10.1177/2324709619832322.
16. Lee Y.J., Moon J.H., Shin H.C. et al. Two CML patients who subsequently developed features of essential thrombocythemia with JAK2-V617F mutation while in complete cytogenetic remission after treatment with imatinib mesylate. Int J Hematol. 2013; 97(6): 804-7. DOI:10.1007/s12185-013-1326-8.
17. Jelinek J., Oki Y., Gharibyan V. et al. JAK2 Mutation 1 849G>T is Rare in Acute Leukemias but Can be Found in CMML, Philadelphia Chromosome negative CML, and Megakaryocytic Leukemia. Blood. 2005; 106(10): 3370-3. DOI: 10.1182/blood-2005-05-1800.
18. Soderquist C.R., Ewalt M.D., Czuchlewski D.R. et al. Myeloproliferative neoplasms with concurrent BCR-ABL1 translocation and JAK2 V617F mutation: a multi-institutional study from the bone marrow pathology group. Mod Pathol. 2018; 31(5): 690-704. DOI: 10.1038/modpathol.2017.182.
19. Martin-Cabrera P., Haferlach C., Kern W. et al. BCR-ABLl-positive and JAK2 V617F-positive clones in 23 patients with both aberrations reveal biologic and clinical importance. Br J Hematol. 2017; 176(1): 135-9. DOI: 10.1111/bjh.13932.
20. Lewandowski K., Wojtaszewska M., Kanduia Z. et al. Coexistence of JAK2 or CALR mutation is a rare but clinically important event in chronic myeloid leukemia patients treated with tyrosine kinase inhibitors. Int J Lab Hematol. 2018; 40(3): 366-71. DOI: 10.1111 /ijlh.12798.
21. Trejo R.M.A., Gonzalez V.A., Saldivar I. et al. High Frequency of Concurrent JAK2 V617F Mutation and BCR/ABL Fussion Gene in a Cohort (1 8/142) of Mexican Patients with MPD. Blood. 2012; 120: 1766.
22. Pahore Z.A., Shamsi T.S., Taj M. et al. JAK2V617F mutation in chronic myeloid leukemia predicts early disease progression. J Coll Physicians Surg Pak. 2011; 21 (8): 472-5. DOI: 08.2011/JCPSP.472475.
23. Nangalia J., Massie C.E., Baxter E.J. et al. Somatic CALR mutations in myeloproliferative neoplasms with nonmutated JAK2. N Engl J Med. 2013; 369: 2391-405. DOI: 10.1056/NEJMoa1312542.
24. Klamfl T., Gisslinger H., Harutyunyan A.S. et al. Somatic mutations of calre-ticulin in myeloproliferative neoplasms. N Engl J Med. 2013; 369: 2379-90. DOI: 10.1056/NEJMoa1311347.
25. Qiao C., Sun C., Ouyang Y. et al. Clinical importance of different calreticu-lin gene mutation types in wild-type JAK2 essential thrombocythemia and myelofibrosis patients. Haematologica. 2014; 99: e183. DOI: 10.3324/haema-tol .2014.109199.
26. Pagoni M., Garofalaki M., Tziotziou I. et al. Concurrent or Sequential BCR-ABL1 translocation and Calr gene or JAK2V617F mutation. 58th ASH Annual meeting. San Francisco. 6-9.12.2014. https://ash.confex.com/ash/2014/web-program/Paper68049.html.
27. Cabagnols X., Cayuela J.M., Vainchenker W. A CALR Mutation Preceding BCR-ABL1 in an Atypical Myeloproliferative Neoplasm. N Engl J Med. 2015; 372(7): 688-90. DOI: 10.1056/NEJMc1413718.
28. Bonzheim I., Mankel B., Klapthor P. et al. CALR-mutated essential thrombo-cythemia evolving to chronic myeloid leukemia with coexistent CALR mutation and BCR-ABL translocation. Blood. 2015; 125(14): 2309-11. DOI: 10.1182/ blood-2014-12-616847
29. Loghavi S., Pemmaraju N., Kanagal-Shamanna R. et al. Insights from response to tyrosine kinase inhibitor therapy in a rare myeloproliferative neoplasm with CALR mutation and BCR-ABL1. Blood. 2015; 125(21): 3360-3. DOI: 10.1182/ blood-2015-03-632893.
30. Seghatoleslami M., Ketabchi N., Ordo A. et al. Coexistence of p190 BCR/ ABL Transcript and CALR 52-bp Deletion in Chronic Myeloid Leukemia Blast Crisis: A Case Report. Mediterr J Hematol Infect Dis. 2016; 8(1): e2016002. DOI: 10.4084/MJHID.2016.002.
31. Diamond J.M., de Almeida A.M., Belo H.J. et al. CALR-mutated primary myelofibrosis evolving to chronic myeloid leukemia with both CALR mutation and BCR-ABL1 fusion gene. Ann Hematol. 2016; 95(12): 2101-4. DOI: 10.1007/ s00277-016-2827-3.
32. Patel S., Kim S.H., Shammo J.M. et al. Patient with myeloproliferative neoplasms (MPN) who later develop ph+ chronic myelogenous leukemia (CML): a case series. J Clin Oncol. 2017; 35(suppl): e18563. DOI: 10.1200/JCO.201735.15_ suppl.e18563.
33. Dogliotti I., Carmen F., Serra A. et al. CALR-positive myeloproliferative disorder in a patient with Ph-positive chronic myeloid leukemia in durable treatment-free remission: a case report. Stem Cell Investig. 2017; 4: 57. DOI: 10.21037/ sci.2017.06.02.
19. Martin-Cabrera P., Haferlach C., Kern W. et al. BCR-ABL1-positive and JAK2 V617F-positive clones in 23 patients with both aberrations reveal biologic and clinical importance. Br J Hematol. 2017; 176(1): 135-9. DOI: 10.1111/bjh.13932.
20. Lewandowski K., Wojtaszewska M., Kanduia Z. et al. Coexistence of JAK2 or CALR mutation is a rare but clinically important event in chronic myeloid leukemia patients treated with tyrosine kinase inhibitors. Int J Lab Hematol. 2018; 40(3): 366-71. DOI: 10.1111/ijlh.12798.
21. Trejo R.M.A., Gonzalez V.A., Saldivar I. et al. High Frequency of Concurrent JAK2 V617F Mutation and BCR/ABL Fussion Gene in a Cohort (18/142) of Mexican Patients with MPD. Blood. 2012; 120: 1766.
22. Pahore Z.A., Shamsi T.S., Taj M. et al. JAK2V617F mutation in chronic myeloid leukemia predicts early disease progression. J Coll Physicians Surg Pak. 2011; 21 (8): 472-5. DOI: 08.2011/JCPSP.472475.
23. Nangalia J., Massie C.E., Baxter E.J. et al. Somatic CALR mutations in myeloproliferative neoplasms with nonmutated JAK2. N Engl J Med. 2013; 369: 2391-405. DOI: 10.1056/NEJMoa1312542.
24. Klamfl T., Gisslinger H., Harutyunyan A.S. et al. Somatic mutations of calre-ticulin in myeloproliferative neoplasms. N Engl J Med. 2013; 369: 2379-90. DOI: 10.1056/NEJMoa1311347
25. Qiao C., Sun C., Ouyang Y. et al. Clinical importance of different calreticu-lin gene mutation types in wild-type JAK2 essential thrombocythemia and myelofibrosis patients. Haematologica. 2014; 99: e183. DOI: 10.3324/haema-tol.2014.109199.
26. Pagoni M., Garofalaki M., Tziotziou I. et al. Concurrent or Sequential BCR-ABL1 translocation and Calr gene or JAK2V617F mutation. 58th ASH Annual meeting. San Francisco. 6-9.12.2014. https://ash.confex.com/ash/2014/web-program/Paper68049.html.
27 Cabagnols X., Cayuela J.M., Vainchenker W. A CALR Mutation Preceding BCR-ABL1 in an Atypical Myeloproliferative Neoplasm. N Engl J Med. 2015; 372(7): 688-90. DOI: 10.1056/NEJMc1413718.
28. Bonzheim I., Mankel B., Klapthor P. et al. CALR-mutated essential thrombocythemia evolving to chronic myeloid leukemia with coexistent CALR mutation and BCR-ABL translocation. Blood. 2015; 125(14): 2309-11. DOI: 10.1182/ blood-2014-12-616847.
29. Loghavi S., Pemmaraju N., Kanagal-Shamanna R. et al. Insights from response to tyrosine kinase inhibitor therapy in a rare myeloproliferative neoplasm with CALR mutation and BCR-ABL1. Blood. 2015; 125(21): 3360-3. DOI: 10.1182/ blood-2015-03-632893.
30. Seghatoleslami M., Ketabchi N., Ordo A. et al. Coexistence of p190 BCR/ ABL Transcript and CALR 52-bp Deletion in Chronic Myeloid Leukemia Blast Crisis: A Case Report. Mediterr J Hematol Infect Dis. 2016; 8(1): e2016002. DOI: 10.4084/MJHID.2016.002.
31. Diamond J.M., de Almeida A.M., Belo H.J. et al. CALR-mutated primary myelofibrosis evolving to chronic myeloid leukemia with both CALR mutation and BCR-ABL1 fusion gene. Ann Hematol. 2016; 95(12): 2101-4. DOI: 10.1007/ s00277-016-2827-3.
32. Patel S., Kim S.H., Shammo J.M. et al. Patient with myeloproliferative neoplasms (MPN) who later develop ph+ chronic myelogenous leukemia (CML): a case series. J Clin Oncol. 2017; 35(suppl): e18563. DOI: 10.1200/JCO.2017.35.15_ suppl.e1 8563.
33. Dogliotti I., Carmen F., Serra A. et al. CALR-positive myeloproliferative disorder in a patient with Ph-positive chronic myeloid leukemia in durable treatment-free remission: a case report. Stem Cell Investig. 2017; 4: 57 DOI: 10.21037/ sci.201706.02.
34. Kandarpa M., Wu Y.M., Robinson D. et al. Clinical characteristics and whole exome/transcriptome sequencing of coexisting chronic myeloid leukemia and myelofibrosis. Am J Hematol. 2017; 92(6): 555-61. DOI: 10.1002/ajh.24728.
35. De Roeck L., Michaux L., Debackere K. et al. Coexisting driver mutations in MPN: clinical and molecular characteristics of a series of 11 patients. Hematology. 2018; 11: 1-8. DOI: 10.1080/10245332.2018.1498182.
36. Boddu P., Chihara D., Masarova L. et al. The co-occurrence of driver mutations in chronic myeloproliferative neoplasms. Ann Hematol. 2018; 97(11): 2071-80. DOI: 10.1007/s00277-018-3402-x.
37 Mughal T.I., Gotlib J., Mesa R. et al. Recent advances in the genomics and therapy of BCR/ABL1-positive and -negative chronic myeloproliferative neoplasms. Leuk Res. 2018; 67: 67-74. DOI: 10.1016/j.leukres.2018.02.008.
38. Pingali S.R., Mathiason M.A., Lovrich S.D., Go R.S. Emergence of chronic myelogenous leukemia from a background of myeloproliferative disorder: JAK2V617F as a potential risk factor for BCR-ABL translocation. Clin Lymphoma, Myeloma. 2009; 9(5): E25-9. DOI: 10.3816/CLM.2009.n.080.
39. Magor G.W., Tallack M.R., Klose N.M. et al. Rapid Molecular Profiling of Myeloproliferative Neoplasms Using Targeted Exon Resequencing of 86 Genes Involved in JAK-STAT Signaling and Epigenetic Regulation. J Mol Diagn. 2016; 18: 707-18. DOI: 10.1016/j.jmoldx.2016.05.006.
40. Stein B.L., Williams D.M., O'Keefe C. et al. Disruption of the ASXL1 gene is frequent in primary, post-essential thrombocytosis and post-polycythemia vera myelofibrosis, but not essential thrombocytosis or polycythemia vera: analysis of molecular genetics and clinical phenotypes. Haematologica. 2011; 96: 1462-9. DOI: 10.3324/haematol.2011.045591.
Информация об авторах
Абдуллаев Адхамжон Одилович*, кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории молекулярной гематологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, e-mail: [email protected] ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-2530-808X
Степанова Елена Александровна, научный сотрудник лаборатории молекулярной гематологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации,
e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0002-8187-5639
Макарик Татьяна Викторовна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории молекулярной гематологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, е-mail: [email protected] ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-1454-3471
Никулина Елена Евгеньевна, научный сотрудник лаборатории молекулярной гематологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, e-mail: [email protected] ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-3914-8611
34. Kandarpa M., Wu Y.M., Robinson D. et al. Clinical characteristics and whole exome/transcriptome sequencing of coexisting chronic myeloid leukemia and myelofibrosis. Am J Hematol. 2017; 92(6): 555-61. DOI: 10.1002/ajh.24728.
35. De Roeck L., Michaux L., Debackere K. et al. Coexisting driver mutations in MPN: clinical and molecular characteristics of a series of 11 patients. Hematology. 2018; 11: 1-8. DOI: 10.1080/10245332.2018.1498182.
36. Boddu P., Chihara D., Masarova L. et al. The co-occurrence of driver mutations in chronic myeloproliferative neoplasms. Ann Hematol. 2018; 97(11): 2071-80. DOI: 10.1007/s00277-018-3402-x.
37 Mughal T.I., Gotlib J., Mesa R. et al. Recent advances in the genomics and therapy of BCR/ABL1-positive and -negative chronic myeloproliferative neoplasms. Leuk Res. 2018; 67: 67-74. DOI: 10.1016/j.leukres.2018.02.008.
38. Pingali S.R., Mathiason M.A., Lovrich S.D., Go R.S. Emergence of chronic myelogenous leukemia from a background of myeloproliferative disorder: JAK2V617F as a potential risk factor for BCR-ABL translocation. Clin Lymphoma, Myeloma. 2009; 9(5): E25-9. DOI: 10.3816/CLM.2009.n.080.
39. Magor G.W., Tallack M.R., Klose N.M. et al. Rapid Molecular Profiling of Myeloproliferative Neoplasms Using Targeted Exon Resequencing of 86 Genes Involved in JAK-STAT Signaling and Epigenetic Regulation. J Mol Diagn. 2016; 1 8: 707-18. DOI: 10.1016/j.jmoldx.2016.05.006.
40. Stein B.L., Williams D.M., O'Keefe C. et al. Disruption of the ASXL1 gene is frequent in primary, post-essential thrombocytosis and post-polycythemia vera myelofibrosis, but not essential thrombocytosis or polycythemia vera: analysis of molecular genetics and clinical phenotypes. Haematologica. 2011; 96: 1462-9. DOI: 10.3324/haematol.2011.045591.
Information about the authors
Adhamjon O. Abdullaev*, Cand. Sci. (Med.), Senior Researcher, Laboratory of
Molecular Hematology, National Research Center for Hematology,
e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-2530-808X
Elena A. Stepanova, Researcher, Laboratory of Molecular Hematology, National Research Center for Hematology, e-mail: [email protected] ORCID: https: //orcid.org/0000-0002-8187-5639
Tatyana V. Makarik, Cand. Sci. (Biol.), Senior Researcher, Laboratory of Molecular Hematology, National Research Center for Hematology, e-mail: [email protected] ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-1454-3471
Elena Y. Nikulina, Researcher, Laboratory of Molecular Hematology, National
Research Center for Hematology,
e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-3914-8611
Треглазова Светлана Анатольевна, научный сотрудник лаборатории молекулярной гематологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации,
e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-2698-7168
Горячева Светлана Рудольфовна, кандидат медицинских наук, врач-гематолог консультативного гематологического отделения с дневным стационаром по проведению интенсивной высокодозной химиотерапии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, e-mail: [email protected] ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-3906-9171
Шухов Олег Александрович, кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник научно-консультативного отделения химиотерапии ми-елопролиферативных заболеваний ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0001-5393-0816
Быкова Анастасия Витальевна, врач-гематолог научно-консультативного отделения химиотерапии миелопролиферативных заболеваний ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0002-3123-8316
Трацевская Жанна Викторовна, врач-патологоанатом патолого-анатоми-ческого отделения ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации,
e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-2197-7358
Меликян Анаит Левоновна, доктор медицинских наук, заведующая отделением стандартизации методов лечения ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0002-2119-3775
Ковригина Алла Михайловна, доктор биологических наук, заведующая
патолого-анатомическим отделением ФГБУ «Национальный медицинский
исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения
Российской Федерации,
e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0002-1082-8659
Svetlana A. Treglazova, Researcher, Laboratory of Molecular Hematology, National Research Center for Hematology, e-mail: [email protected] ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-2698-7168
Svetlana R. Goryacheva, Cand. Sci. (Med.), Hematologist, Advisory Hematology Outpatient Department for Intensive High-Dose Chemotherapy, National Research Center for Hematology, e-mail: [email protected] ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-3906-9171
Oleg A. Shukhov, Cand. Sci. (Med.), Senior Researcher, Scientific Advisory Department of Chemotherapy of Myeloproliferative Diseases, National Research Center for Hematology, e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0001-5393-0816
Anastasiya V. Bykova, Hematologist, Scientific Advisory Department of Chemotherapy of Myeloproliferative Diseases, National Research Center for Hemato-logy,
e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0002-3123-8316
Zhanna V. Tratsevskaya, Pathologist, Pathology Department, National Research
Center for Hematology,
e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0003-2197-7358
Anait L. Melikyan, Dr. Sci. (Med.), Head of the Department of Standardization of Methods of Therapy, National Research Center for Hematology, e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0002-2119-3775
Alla M. Kovrigina, Dr. Sci. (Biol.), Head of the Pathology Department, National
Research Center for Hematology,
e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0002-1082-8659
Туркина Анна Григорьевна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая научно-консультативным отделением химиотерапии миелопроли-феративных заболеваний ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации,
e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0001-9947-2371
Судариков Андрей Борисович, доктор биологических наук, заведующий лабораторией молекулярной гематологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0001-9463-9187
* Автор, ответственный за переписку
Поступила: 22.11.2019 Принята к печати: 25.12.2019
Anna G. Turkina, Dr. Sci. (Med.), Prof., Head of the Scientific Advisory Department of Chemotherapy of Myeloproliferative Diseases, National Research Center for Hematology, e-mail: [email protected] ORCID: https: //orcid.org/0000-0001-9947-2371
Andrey B. Sudarikov, Dr. Sci. (Biol.), Head of the Laboratory of Molecular Hematology, National Research Center for Hematology, e-mail: [email protected]
ORCID: https: //orcid.org/0000-0001-9463-9187
* Corresponding author
Received 22 Nov 2019 Accepted 25 Dec 2019
