CC BY
99
Journal of Stress Physiology & Biochemistry, Vol. 12 No. 1 2016, pp. 31-41 ISSN 1997-0838 Original Text Copyright © 2015 by Ozolina, Nesterkina, Dudareva, Nurminsky and Gurina
ORIGINAL ARTICLE
Changes in Composition of Vacuolar Membrane Lipid Fatty Acids Under Osmotic Stress
N.V. Ozolina, I.S. Nesterkina, L.V. Dudareva, V.N. Nurminsky,
V.V. Gurina
Siberian Institute of Plant Physiology and Biochemistry, SB RAS, Irkutsk, Russia *E-Mail: [email protected]
Received December 1,2015
The investigation of influence of different types of osmotic stress (hypo- and hyperosmotic) on the composition of vacuolar membrane lipid fatty acids of red beet root (Beta vulgaris L., variety Bordeaux) was conducted. Noteworthy, the plenty intensive stress impact didn't cause the conventional nonspecific reaction bound up with the increase of the unsaturated fatty acid content regulating membrane microviscosity. This feature apparently can be explained with the location and biochemical characteristics of the scrutinized membrane. Some reliable increases of the content of the short-chain saturated fatty acids (C14:0+C15:0) under hyper osmotic stress and the content of the long-chain saturated fatty acids (C22:0+C23:0) under both types of osmotic stress were found. It was proposed that the revealed changes in the content of saturated fatty acids of red beet root vacuolar membrane lipids were specific, and corresponding fatty acids were the most sensitive to osmotic stress impact.
Key words: fatty acids, osmotic stress, tonoplast
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
32
Changes in Composition of Vacuolar Membrane Lipid...
Известно, что липидный состав клеточных соединениям относятся некоторые насыщенные
мембран зависит от условий окружающей среды. ЖК. Увеличение насыщенных ЖК в липидах
Действие различных стрессирующих факторов мембран влечёт за собой уменьшение текучести
вызывает значительные изменения в их составе, мембран, что может негативно сказаться при
что связано с регуляцией экспрессии отдельных защите от стрессирующего воздействия (Popov et
генов, ответственных за синтез липидного al., 2012). Но, с другой стороны, эти ЖК могут
метаболизма (Novickaya et a/., 2008). Жирные принимать активное участие в сигнальной
кислоты (ЖК) и их производные, входящие в состав трансдукции. Целью исследования было изучение
мембранных липидов, играют существенную роль в динамики содержания жирных кислот в липидах
клетке. Они являются резервным запасом, который вакуолярной мембраны у корнеплодов столовой
может быть использован для получения энергии, в свёклы при разных видах осмотического стресса.
качестве строительных блоков в мембранах и MATERIALS AND METHODS
действуют как сигнальные молекулы, запускающие Объектом исследования служили корнеплоды
в ответ на различные виды стрессовых факторов столовой свеклы (Beta vulgaris L.), сорт Бордо. В
каскады сигнальных реакций (Baker et a/., 2006). экспериментах были использованы корнеплоды в
Последние исследования показали, что жирные период покоя, которые находились в
кислоты, являясь одними из наиболее важных овощехранилище в течение нескольких месяцев
липидных сигнальных молекул, активируют при температуре 4-5оС. Эти корнеплоды
защитные реакции на транскрипционном уровне и подвергали гипер- и гипоосмотическому стрессу.
способны менять конформацию и активность Для создания гиперосмотического стресса
внутриклеточных белков и метаболитов (Hou et a/., корнеплоды в течение 3-х суток выдерживали
2015). (подсушивали) на открытом воздухе при комнатной
Липиды могут уменьшать действие стрессора, температуре, что приводило к частичной потере
например, увеличивая количество ненасыщенных массы корнеплодов и увеличению осмотической
ЖК в составе мембранных липидов, что приводит к концентрации клеточного сока. Для создания
снижению микровязкости липидного бислоя (Los et гипоосмотического стресса очищенные
a/., 2013). Но, кроме этого хорошо изученного корнеплоды выдерживали в течение суток в
феномена, в мембране увеличивается синтез дистиллированной воде, в результате чего
определенных липидов, которые содержатся в осмоляльность клеточного сока (общая
нормальных условиях в следовых количествах. Их концентрация растворенных частиц в 1 кг воды)
содержание значительно возрастает в условиях уменьшалась. Осмоляльность оценивали на
стресса (Okazaki, Saito, 2014). К таким осмометре ОМКА 1Ц-01 (Россия). Характеристики
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
Ozolina et al.
33
стрессов приведены на рис. 1. Влияние (Carreau, Dubacq, 1978) Далее метиловые эфиры
осмотического стресса на барьерные свойства жирных кислот липидов тонопласта и
мембран (стабильность мембран) изучали с микродоменов анализировали на хромато-масс-
использованием экспериментальной установки спектрометре 5973 N/6890N MSD (Agilent
собственного изготовления, позволяющей получать Technology, США). Для разделения использовали
серии компьютерных изображений (цейтраферная капиллярную колонку HP-INNOWAX (30 м х 250
видеосъемка, частота кадров 0.1 мин-1 (1 кадр за мкм х 0.50 мкм). Неподвижная фаза -
10 мин)), отражающих динамику процесса полиэтиленгликоль. Подвижная фаза - гелий;
разрушения вакуолей (Nurminskiy et al., 2004). С скорость потока газа - 1 мл/мин. Температура
помощью компьютерной обработки данных строили испарителя 250°С, источника ионов - 230°С,
график зависимости количества сохранившихся детектора - 150°С, температура линии,
вакуолей (%) от времени и рассчитывали значения соединяющей хроматограф с масс-спектрометром
периода полураспада изолированных вакуолей, в - 280°С. Хроматографирование проводили в
течение которого разрушаются 50% вакуолей (Т1/2). изократическом режиме при 200°С. Для
Вакуолярные мембраны получали по методу идентификации пиков метиловых эфиров жирных
(Salyaev et al., 1981). Критерии оценки чистоты кислот использовали значение времени
использованных в экспериментах изолированных удерживания стандартов и индекс эквивалентной
мембран по ферментам-маркёрам приведены в длины алифатической цепи (ECL) (Christie, 1988).
статье (Ozolina et al., 2013). В таблице и на графиках представлены
Из вакуолярных мембран, выделенных из средние арифметические значения величин и их
нормальных и подвергнутых разным видам стандартные отклонения, которые были получены в
осмотического стресса корнеплодов, пяти независимых экспериментах, подсчитанные с
экстрагировали липиды по методу Блая и Дайера помощью программы Microsoft Excel.
(Bligh, Dyer, 1959). Экстрагированные липиды Статистическую значимость различий
использовали в экспериментах по изучению сравниваемых средних значений оценивали с
жирнокислотного состава липидов тонопласта. Для помощью U-критерия Манни-Уитни.
получения метиловых эфиров жирных кислот после RESULTS AND DISCUSSION
упаривания к экстракту липидов добавляли 1% Как видно их данных, приведённых на рис. 1,
метанольный раствор H2SO4. Полученную смесь при осмотическом стрессе происходили
нагревали на водяной бане при температуре 55°С в существенные изменения массы корнеплода
течение 30 мин. После охлаждения метиловые столовой свёклы и осмотической концентрации
эфиры жирных кислот трижды экстрагировали клеточного сока. Так, при осмотическом стрессе
гексаном. Экстракт концентрировали в токе аргона изменение массы корнеплода происходило
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
34
Changes in Composition of Vacuolar Membrane Lipid...
приблизительно на 20% (в сторону увеличения или исследователями (Gigon et a/., 2004).
уменьшения в зависимости от вида стресса) и Как видно из приведенных данных (табл. 1), в
осмотическая концентрация клеточного сока составе липидов вакуолярных мембран
снижалась на 12%. При гипоосмотическом стрессе корнеплодов столовой свеклы преобладали
в 2 раза снижался период полураспада ненасыщенные ЖК, содержание которых в норме и
изолированных вакуолей, что говорит о при гипоосмотическом стрессе составляло 65.75%
значительных нарушениях стабильности и 66.87% и немного уменьшалось при
вакуолярной мембраны (рис. 2). Эти показатели гиперосмотическом стрессе - до 65.31%,
позволяют говорить о том, что стрессовая нагрузка соответственно. Содержание насыщенных жирных
была достаточно интенсивной. Тогда как кислот также изменялось в зависимости от стресса
результаты изучение состава ЖК липидов очень незначительно - сумма насыщенных ЖК в
тонопласта существенных изменений не норме составила 34.25%, а при гипоосмотическом
показывают (табл. 1). Особенно удивляет стрессе 33.13% и 34.69% при гиперосмотическом.
отсутствие различий при осмотическом стрессе в Отсутствие различий в содержании ненасыщенных
содержании ненасыщенных ЖК (табл. 1), которые жирных кислот при осмотическом стрессе (табл. 1)
по общепринятому мнению в первую очередь может быть связано с объектом исследований -
должны реагировать на стрессовое воздействие тонопластом корнеплодов столовой свёклы,
(Los et a/., 2013). Очень мало менялся индекс который имеет определенное расположение
ненасыщенности (ИН, табл. 1) ЖК. Увеличение внутри клетки (первое стрессирующее воздействие
ненасыщенных ЖК было отмечено при разных принимает плазмалемма). Кроме того, вакуоли
видах абиотического стресса. Так, увеличение клеток корнеплода столовой свеклы обладают
концентрации ненасыщенных ЖК является одним мощными защитными антиоксидантными
из важнейших факторов низкотемпературной системами, к которым в первую очередь относятся
адаптации, что было неоднократно бетацианины (Pedreno, Escribano, 2001).
продемонстрировано на многих растительных Более тщательный анализ состава ЖК липидов
объектах (Badea, Basu, 2009). Влияние водного тонопласта при разных видах осмотического
дефицита (засухи) на липидный метаболизм стресса показал, что достоверные различия были
листьев Arabidopsis thaliana также вызывало обнаружены при сравнении суммы
активацию десатуразной активности и было короткоцепочечных насыщенных жирных кислот
показано, что уровень ненасыщенности полярных (С14:0+С15:0) (рис. 3). И если при
липидов увеличивался в растениях не гипоосмотическом стрессе их суммарное
чувствительных к водному дефициту. Подобные содержание практически не отличалось от
результаты были получены и многими другими контроля, то при гиперосмотическом стрессе
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
Ozolina et al.
35
содержание суммы короткоцепочечных обнаружена зависимость адаптационных
насыщенных ЖК увеличивалось в 1.4 раза. По механизмов растительной клетки от содержания
литературным данным повышенное содержание длинноцепочечных жирных кислот. Так, было
короткоцепочечных ЖК характерно для морских отмечено 30%-е повышение относительного
водорослей (Fleurence et al., 1994). Кроме того, содержания этих ЖК в тканях проростков
сообщалось об увеличении содержания ЖК С14 в пшеницы, растущих в условиях низких (4°С)
ответ на солевой стресс у видов Isochysis (Repand, температур (Makarenko et al., 2010). В 2 раза
Parry, 1994). Значительное увеличение ЖК С12 и увеличивалось содержание насыщенных
С14 было отмечено в плазматической мембране длинноцепочечных ЖК на первом этапе при
Zygosaccharomyces rouxii, когда клетки действии лазерного излучения низкой
выращивали при повышенном содержании NaCl интенсивности на каллусную ткань пшеницы (
(Hosono, 1992). Такая же закономерность была Dudareva et al., 2014). Эффективная стратегия
отмечена при солевом стрессе в плазмалемме из защиты у Noccaea caerulescens от стресса
каллуса Spartina paters (Wu et al., 2005). В вызванного высокими концентрациями кадмия
настоящее время доказана важная роль также была связана с синтезом длинноцепочечных
короткоцепочечных ЖК как сигнальных молекул, ЖК (Zemanova et al., 2015). Повышенное
принимающих участие в регуляции экспрессии содержание ЖК с очень длинной цепью было
целого ряда генов, регулирующих клеточные отмечено в липидах вегетативных органов
функции и поддерживающие гомеостаз (Tan et al., галофитов. Рост насыщенности ЖК и длины их
2014). Можно предположить, что изменения в цепей вызывал уменьшение текучести мембран и
содержании короткоцепочечных ЖК является индуцировал эффект снижения проницаемости
специфическим ответом на солевой и мембран для ионов натрия. Был сделан вывод, что
осмотический стресс, так как их повышенное увеличение содержания в липидах
содержание отмечено в основном при этих длинноцепочечных ЖК является адаптивной
стрессирующих воздействиях. реакцией, направленной на поддержание роста
Достоверные различия были выявлены также растений в условиях солевого стресса (Ivanova et
во фракции насыщенных длинноцепочечных ЖК al., 2009).
(С22:0+С23:0) (рис. 4). Длинноцепочечные жирные В наших экспериментах только для арахиновой
кислоты обеспечивают плотность упаковки ЖК (С20:0) было отмечено противоположное
липидного бислоя (Taranov, 1988). При обоих изменение её содержания при разных видах
видах осмотического стресса их суммарное осмотического стресса. При гипоосмотическом
содержание превышало контроль в 1.5 раза. стрессе содержание этой ЖК снижалось в 1.3
В последнее время в ряде исследований раза, а при гиперосмотическом увеличивалось в 1.5
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
36
Changes in Composition of Vacuolar Membrane Lipid...
раза. И хотя большая ошибка в контрольном варианте не позволяет утверждать, а только высказать предположение о тенденции в изменении её содержания при стрессе, характер этих изменений говорит о специфичности изменений в её содержании при разных видах осмотического стресса. Изменения в содержании арахиновой кислоты, судя по литературным данным, наблюдаются при всех видах стресса, но исследователи при анализе в первую очередь обращают внимание на изменения в содержании ЖК, количество которых в процентном отношении
выше и чьи изменения более заметны. Так, при изучении жирнокислотного состава липидов мембран митохондрий проростков гороха при недостаточном увлажнении (гиперосмотический стресс) содержание арахиновой кислоты увеличивалось в 2 раза. Такие же результаты были получены на мембранах проростков гороха -содержание арахиновой кислоты в условиях недостаточного увлажнения возрастало в 2 раза по сравнению с контролем (Zhigacheva et a/., 2010). При других видах абиотического стресса было отмечено снижение содержания арахиновой ЖК.
Table 1. Динамика изменения содержания жирных кислот липидов вакуолярных мембран корнеплодов столовой свеклы в норме и при разных видах осмотического стресса
Обозначение Содержание жирных кислот липидов тонопласта, % от общего содержания
Норма Гипоосмотический стресс Гиперосмотический стресс
С14:0 0.50 ±0.04 0.53 ± 0.07 0.74 ± 0.16
С15:0 0.83 ± 0.08 0.96 ± 0.10 1.09 ± 0.24
С16:0 28.28 ± 1.01 27.83 ± 0.79 28.15 ± 0.29
С16:1(п-9) 1.66 ± 0.82 1.04 ± 0.13 1.48 ± 0.25
С17:0 0.29 ± 0.09 0.30 ± 0.07 0.21 ± 0.04
С18:0 2.55 ± 0.53 1.85 ± 0.90 1.88 ± 0.19
С18-1 (n-9) 22.24 ± 1.38 20.01 ± 2.64 20.36 ± 0.38
С18-2 (n-6) 37.53 ± 1.04 40.47 ± 2.97 38.89 ± 1.42
С18-3(п-3) 4.03 ± 0.33 4.62 ± 0.43 4.40 ± 0.17
С20:0 0.76 ± 0.4 0.64 ± 0.16 1.10 ± 0.03
С 20:1 (n-11) 0.45 ± 0.05 0.50 ± 0.04 0.45 ± 0.11
С22:0 0.31 ± 0.07 0.43 ± 0.05 0.51 ± 0.07
С22:1 (n-11) 0.21 ± 0.04 0.23 ± 0.03 0.24 ± 0.04
С23:0 0.37 ± 0.06 0.56 ± 0.11 0.48 ± 0.14
I насыщенных 34.25 ± 0.20 33.13 ± 1.45 34.69 ± 1.96
I ненасыщенных 65.75 ± 0.19 66.87 ± 1.45 65.31 ± 1.96
ИДС 1.11 ± 0.01 1.17 ± 0.05 1.12 ± 0.04
I ненасыщ./насыщенных жирных кислот 1.93 ± 0.01 2.06 ± 0.14 1.91 ± 0.16
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
Ozolina et al.
37
Figure 1. Характеристики гипо- и гиперосмотического стрессов. Изменение осмотической концентрации (С) клеточного сока и массы (m) корнеплодов.
Контроль Гипоосмотический Гиперосмотический
стресс стресс
Figure 2. Влияние разных видов осмотического стресса на период полураспада изолированных вакуолей Т1/2. Результаты получены методом цейтраферной видеосъемки.
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
38
Changes in Composition of Vacuolar Membrane Lipid...
Контроль Г ипоосмотический Г иперосмотический
стресс стресс
Figure 3. Сумма короткоцепочечных ЖК (С14:0+С15:0) в тонопласте в норме и при разных видах осмотического стресса. * - различия достоверны (р<0.05, критерий Манна-Уитни).
Figure 4. Сумма длинноцепочечных ЖК (С22:0+С23:0) в тонопласте в норме и при разных видах осмотического стресса. * - различия достоверны (р<0.05, критерий Манна-Уитни).
При температурном стрессе (4°С) у липидов колеоптилей и корней этиолированных проростков пшеницы содержание арахиновой кислоты снижалось в 1.8 раза у колеоптилей и в 1.5 раза у корней (Makarenko et al., 2010). Менее заметное снижение было отмечено этими авторами на других объектах (проростки кукурузы и проростки пырейника сибирского). Ещё более заметное
снижение содержание арахиновой кислоты было отмечено при изучении жирнокислотного состава тканей каллусов пшеницы: после 5 мин низкоинтенсивного лазерного излучения, которое классифицировалось как стрессовое воздействие, содержание этой кислоты возрастало в 3.4 раза. (Dudareva et al., 2014). Таким образом, изменение содержания арахиновой ЖК в мембранах,
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
Ozolina et al.
39
вероятно, является специфичным для определённых видов абиотического стресса.
CONCLUSIONS
В результате проведённых экспериментов можно предположить, что при осмотическом стрессе у корнеплодов столовой свёклы одним из звеньев в цепи биохимических реакции, участвующих в формировании ответа на стрессовое воздействие является повышение содержания определённых насыщенных ЖК. Повышение содержания ненасыщенных ЖК в мембранах при абиотическом стрессе в данном случае не наблюдалось, что не подтвердило общепринятое представление. Это может быть связано с особенностями объекта исследования. Вакуолярная мембрана чувствительна к осмотическому стрессу, и выявленные изменения в содержании ЖК ее липидов могут являться специфичным ответом при этом стрессирующем воздействии.
ACKNOWLEDGMENT
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научных проектов № 14-04-31103 мол_а. В работе использовалось оборудование Байкальского аналитического центра (ЦКП) ИНЦ СО РАН.
REFERENCES
Badea C., Basu S.K. (2009) Effect of low temperature on metabolism of membrane lipids in plants and associated gene expression. Plant Omics., 2, 78-84.
Baker A., Graham I.A., Holdsworth M., Smith S.M.,
Theodoulou F.L. (2006) Chewing the fat: в-oxidation in signaling and development. Trends Plant Sci., 11, 124-132.
Bligh E.G., Dyer W.J. (1959) A rapid method of total lipid extraction and purification. Can. J. Biochem. Physiol., 37, 911-917.
Carreau J.P., Dubacq J.P. (1978) Adaptation of macro-scale method to the micro-scale for fatty acid methyl transesterification of biological lipid extracts. J. Chromatogr., 151, 384-390.
Christie W.W. (1988) Equivalent chain lengths of methyl ester derivatives of fatty acids on gas chromatography: a reappraisal. J. Chromatogr., 447, 305-314.
Dudareva L.V., Rudikovskya E.G., Shmakov V.N. (2014) The influence of low-intensity He-Ne laser radiation on the fatty acid composition of callus tissues of wheat (Triticum aestivum L.). Biologicheskie Membrany, 31, 364-370.
Fleurence J., Gutbier G., Mabeau S., Leray C., (1994) Fatty acids from 11 marine macroalgae of the French Britany coast. J. Appl. Phycol., 6, 527532.
Gigon A., Matos A.-R., Laferay D., Zuily-Fodil Y., Pham-Thi A.-T. (2004) Effect of drought stress on lipid metabolism in the leaves of Arabidopsis thaliana (Ecotype Columbia). Ann. Bot., 94, 345351.
Hosono K., (1992) Effect of salt stress on lipid composition and membrane fluidity of the salt tolerant yeast Zygosaccaharomyces rouxil. J. Gen. Microbiol., 138, 91-96.
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
40
Changes in Composition of Vacuolar Membrane Lipid...
Hou Q., Ufer G., Bartels D. (2015) Lipid signaling in plant responses to abiotic stress. Plant Cell Environ. Doi:10.1111/pce. 12666.
Ivanova T.V., Myasoedov N.A., Pchelkin V.P., Cydendambaev V.D., Vereschagin A.G. (2009) Enhanceable maintenance of fat acids with a very long chain in lipids of vegetative organs of halophytes. Fiziologiya Rastenii, 56, 871-878.
Los D.A., Mironov K.S., Allakhverdiev S.I. (2013) Regulatory role of membrane fluidity in gene expression and physiological functions. Photosynth. Res., 343, 489-509.
Makarenko S.P., Dudareva L.V., Katyshev A.I., Konenkina T.A., Nazarova A.V., Rudikovskaya E.G., Sokolova N.A., Chernikova V.V., Konstantinov Yu.M. (2010) Impact of low temperature on fatty acid composition of crop species with different cold resistance.
Biologicheskie Membrany, 27, 486-488.
Novickaya G.V., Feofilaktova T.V., KocheshkovA T.K., Yusupova I.U., Novickiy Yu.I. (2008) Change of composition and maintenance of lipids in the leaves of magnitoorientations types of radish under influence of the weak permanent magnetic field. Fiziologiya Rastenii, 55, 541-551.
Nurminskiy V.N., Korzun A.M., Rozinov S.V., Salyaev R.K. (2004) Computer-based stop motion videocapturing of faction of isolated vacuoles. Biomeditsinskaya khimiya, 50, 180-187.
Okazaki Y., Saito K. (2014) Roles of lipids as signaling molecules and mitigators during stress response in plants. Plant J., 79, 584-596.
Ozolina N.V., Nesterkina I.S., Kolesnikova E.V., Salyaev R.K., Nurminsky V.N., Rakevich A.L., Martynovich E.F., Chernyshov M.Yu. (2013) Tonoplast of Beta vulgaris L. contains detergent-resistant membrane microdomains. Planta, 237, 859-871.
Pedreno MA., Escribano J. (2001) Correlation between antiradical activity and stability of betaine from Beta vulgaris L. roots under different pH, temperature and light conditions. J. Sci. Food Agric., 81, 627-631.
Popov V.N., Antipina O.V., Pchelkin V.P., Cydendambaev V.D. (2012) Change of maintenance and fatty acids composition of lipids of leaves and roots of tobacco at low temperature hardening. Fiziologiya Rastenii, 59, 203-208.
Salyaev R.K., Kuzevanov V.Ia., Khaptagaev S.B., Kopytchuk V.N. (1981) Segregation and cleaning of vacuoles and vacuolar membranes from the cell of plants. Fiziologiya Rastenii, 28, 1295-1305.
Tan J., McKenzie C., Potamitis M., Thorburn AN., Mackay CR., Macia L. (2014) The role of short-chain fatty acids in health and disease. Adv. Immunol, 121, 91-119.
Taranov N.P. (1988) Lipids of CNS under damaging influences. Science, Leningrad, Russia.
Wu J., Seliskar D., Gallagher J. (2005) The response of plasma membrane lipid composition in callus of the halophyte Spartina patens (Poaceae) to salinity stress. Am. J. Bot., 92, 852-858.
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
Ozolina et al.
41
Zemanova V., Pavlik M., Kyjakova P., Pavlikova D. (2015). Fatty acid profiles of ecotypes of hyperaccumulator Noccaea caerulescens growing under cadmium stress. J. Plant Physiol., 180, 27-34.
Zhigacheva I.V., Mesharina T.A., Terenina M.B.,
Krikunova N.N., Burlakova E.B., Generozova I.P., Shugaev A.G., Fattakhov S.G. (2010) Fattty acid composition of pea germ mitochondrial membranes exposed to insufficient watering and treated with organophosphorus plant growth regulator. Biologicheskie Membrany, 27, 256261.
JOURNAL OF STRESS PHYSIOLOGY & BIOCHEMISTRY Vol. 12 No. 1 2016
