CC BY
401СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 Асхадулина Г.К. Влияние дегенерации синокаротидных хеморецепторных зон на регуляции дыхания у крыс // Физ. журнал СССР. - 1985. - Т. LXXI. - № 11.
2 Баширова Д.Б., Оджагвердизаде Э.А. Сравнительная характеристика строения и сосудистого русла при инволюции некоторых эндокринных желез // Морфология. - 2016. - Т. 149. - № 3. - С. 30-31.
3 Баширова Д.Б. Особенности строения и интрамурального кровеносного русла каротидного клубочка у плодов и новорожденных // Проблемы современной морфологии человека. - М., 2018. - С. 43-44.
4 Гуков А.О., Жданов А.М. Синдром каротидного синуса и вазовагальные синкопе // Терапевтический архив. - 2000. - № 12. - С. 72-74.
5 Сергийко С.В., Лукьянов С.А. Особенности предоперационной подготовки больных с различными формами клинического течения феохромоцитом // Вестник хирургии. - 2015. - Т. 174. - № 4. - С. 34-37.
6 Труш Н.В. Сравнительная и возрастная морфо-функциональная характеристика щитовидной, околощитовидной желез и каротидного клубочка животных: автореф. ... д-ра биол. наук. - Благовещенск, 2004.
7 Параметры гемомикроциркуляторного русла толстой кишки в онтогенезе человека с позиций морфологического и математического анализов / П.А. Гелашвили, Б.Б. Галахов, С.Н. Юхимец, А.А. Супильников, К.В. Панидов // Морфологические ведомости. - 2011. - № 2. - С. 85-89.
Рукопись получена: 24 января 2019 г. Принята к публикации: 28 января 2019 г.
УДК 57.576.38
БУККАЛЬНЫЙ ЭПИТЕЛИЙ КАК ОТРАЖЕНИЕ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ И ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ
© 2019 А.Г. Прошин1, Н.А. Дурнова2, В.Н. Сальников2, М.Н. Курчатова2, Н.В. Сальников2
Частное учреждение образовательная организация высшего образования «Саратовский медицинский университет «Реавиз», Саратов
2ФГБОУ ВО «Саратовский государственный медицинский университет имени В.И. Разумовского» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Саратов
В статье представлена обобщающая информация о буккальном эпителии как объекте изучения в медицинских и биологических исследованиях. Применение буккального эпителия позволяет определить влияние разнообразных физических, химических факторов, в том числе лекарственных препаратов.
Ключевые слова: буккальный эпителий, микроядра, имуногистохимический метод, пролиферация, токсичность.
Актуальной задачей современной молекулярной медицины остается поиск клеточных и тканевых объектов исследования, получить которые возможно неинвазивным путем. В качестве материала для неинвазивной диагностики внимание исследователей сосредоточено на буккальном эпителии [10]. Буккальный эпителий, как часть мукозальной системы, представляет собой многослойный неороговевающий эпителий [5]. Данный объект исследования обладает большой информативностью, нетравматичностью воспроизведения забора относи-
тельно слизистой оболочки, доступностью в организме и может быть применим для прижизненной диагностики социально значимых заболеваний [1, 9].
Одним из способов исследования мукозальных эпителиоцитов ротовой полости (эпителия слизистых оболочек) является цитологический метод, основанный на подсчете микроядер (рисунок). Микроядра могут быть фрагментами хромосом, образовавшимися при повреждении ДНК из-за нарушения образования веретена деления в процессе митоза. Также микроядра могут представлять собой одну или несколько целых хромосом, не вошедших в состав ядра в анафазе митоза [5].
Рис. 1. Мазки буккального эпителия с микроядрами в клетках: А - клетка с одним микроядром, Б - клетка с множеством микроядер [6]
Цель: обобщить сведения об изменениях ядерного аппарата буккального эпителия под воздействием экзогенных факторов и их значении для практического применения в диагностике различных заболеваний.
1. Буккальный эпителий в изучении клеточной пролиферации. При выявления экспрессии маркера пролиферативной активности (К/-67) с вычислением митотического и апопто-тического индексов заключено, что высокий пролиферативный потенциал и апоптическая активность клеток являются предпосылками наличия скрытых механизмов нарушения регенерации компенсаторного характера. Т.к. нарушение баланса между клеточной пролиферацией и апоптозом влияет на эффективность регенераторных процессов при повреждении и приспособлении к патологическим условиям существования организма [9].
2. Буккальный эпителий как объект для определения влияния факторов среды на организм человека. Частота встречаемости микроядер в клетках буккального эпителия может служить адекватным показателем при определении уровня ксеногенной интоксикации.
Исследование корреляции между цитогенетическими нарушениями в клетках буккального эпителия (частота встречаемости микроядер) и степенью загрязнения окружающей среды установило, что увеличение числа клеток буккального эпителия, содержащих микроядра, возрастает у людей, проживающих в районах с высоким содержанием токсикантов в воздухе и почве [4].
Одним из цитотоксичных факторов является курение. Установлено, что цитоморфологи-ческий признак, наблюдаемый у пациентов при курении, характеризовался отклонением в сторону уменьшения доли нормальных клеток и увеличения доли клеток с различными ци-томорфологическими отклонениями [5].
3. Буккальный эпителий как объект для подтверждения безопасности лекарственных веществ. Так как в работах по экологическому мониторингу были получены результаты, свидетельствующие в пользу чувствительности микроядерного теста, вероятно, он может применяться и для изучения действия лекарственных веществ. Так, в исследовании, проводимом для исключения негативного воздействия хлоргексидина на генетический аппарат клеток слизистой ротовой полости, сравнение количества микроядер до и после применения выявило, что хлоргексидин не приводит к увеличению микроядер при его многократном использовании, следовательно, не оказывает цитотоксичного воздействия на клетки ротовой полости [6].
4. Буккальный эпителий в стоматологических исследованиях. При исследовании клеток буккального эпителия пациентов с заболеванием «пародонтит» отмечено, что на частоту встречаемости клеток с микроядрами в эпителии больных пародонтитом людей не влияет группа крови и резус фактор, пол, но оказывает влияние стадия заболевания, отмечается совместное влияние пола и стадии заболевания. У людей с первой стадией заболевания паро-донтитом уровень клеток с микроядрами достоверно ниже, в то время как с увеличением тяжести симптомов болезни, количество клеток с микроядрами возрастает. Таким образом, частота встречаемости мукозальных эпителиоцитов с микроядрами отражает физиологические процессы в организме [7].
Буккальный эпителий секретирует ряд сигнальных молекул - цитокинов, хемокинов, ростовых и гемопоэтических факторов, принимая участие в иммунном ответе. Секретируемые буккальным эпителием сигнальные молекулы регулируют активность иммунных клеток, что, в свою очередь, определяет развитие острых и хронических воспалительных реакций слизистых оболочек. При воспалительных заболеваниях ротовой полости наблюдается изменение степени дифференцировки буккального эпителия и снижение количества сиаловой кислоты в мембранах клеток. Соотношение экспрессии сигнальных молекул Е-кадерина и катепсина-Д в буккальном эпителии является диагностическим признаком онкологических и диспласти-ческих процессов в слизистой оболочке полости рта. При гиперплазии буккального эпителия экспрессия Е-кадерина снижается. В образцах карциномы буккального эпителия Е-кадерин слабо экспрессируется в базальной части клеток. В диспластическом буккальном эпителии и при карциноме экспрессия катепсина-Д возрастает, причем максимальна она в цитоплазме клетки. Проапоптотический белок р53 является молекулярным маркером дисплазии и карциномы эпителия полости рта. При дисплазии буккального эпителия и процессах, предшествующих малигнизации, белокр53 экспрессируется в 80-90 % случаев, тогда как при карциноме буккального эпителия он был верифицирован лишь в 63 % образцов. Иммуногистохимиче-ское исследование экспрессии в буккальном эпителии ряда сигнальных молекул способно
адекватно отражать нарушение системного гомеостаза у онкологических больных и может использоваться для ранней диагностики первичных опухолей, при выявлении рецидива или для оценки прогрессирования онкологических заболеваний. Так или иначе, повышение частоты буккальных эпителиоцитов с микроядрами считается наиболее ранним признаком он-ко-процесса [4].
Результаты стоматологического обследования, основанного на регистрации и учете частоты встречаемости микроядер в интерфазных клетках буккальных мазков, взятых у пациентов до постановки протезов и после показали, что протезы из металлокерамики обладают меньшим генотоксическим эффектом по сравнению с пластмассовыми протезами, т.е. являются более биосовместимыми, и обладают минимально раздражающим действием на слизистую [8].
5. Буккальный эпителий в исследованиях физиологических процессов организма человека. При использовании буккального эпителия для оценки биологического возраста человека установлено, что электроотрицательность ядер буккального эпителия изменяется в течение жизни примерно до 30 лет в параболической зависимости: сначала возрастает, а затем начинает снижаться. Предполагается, что по коэффициенту наклона 1-й части кривой (степень возрастания электроотрицательности буккального эпителия) можно спрогнозировать симметричный процесс снижения этого показателя после 30 лет и таким образом рассчитать приблизительную продолжительности жизни. В исследовании буккального эпителия было выявлено различие уровня хемокинову пациентов с болезнью Крона и язвенным колитом. Было установлено, что у людей с болезнью Крона в буккальном эпителии повышен уровень экспрессии транкрипционных факторов СХСЬ8, СХСЬ9 и СХСЬ10, что позволяет использовать буккальный эпителий в дифференциальной диагностике воспалительных процессов кишечника [4].
Заключение. Применение буккального эпителия в качестве клеточного и тканевого материала для исследования влияния разнообразных факторов является актуальной задачей. Это объясняется следующими сведениями. Во-первых, функциональные патологические изменения буккального эпителия коррелируют с показателями нарушения гомеостаза организма, что позволяет быстро оценить состояние организма. Во-вторых, изменения в буккальном эпителии могут выступать в качестве маркеров предопухолевого состояния, что, несомненно, важно в условиях современного экологического состояния окружающей среды. В-третьих, исследование буккального эпителия обладает преимуществами перед другими цитологическими методами своей достаточно невысокой стоимостью [1, 4, 5, 9, 10].
Таким образом, применения в качестве материала именно клеток буккального эпителия имеет ряд преимуществ, благодаря ряду факторов: неинвазивный способ получения, большая информативность, нетравматичность воспроизведения забора. Метод доступен для прижизненного гистологического исследования, может служить источником важной диагностической и прогностической информации о состоянии здоровья, стрессовых воздействиях, влиянии факторов внешней среды, стоматологических конструкций, используемых фармакологических средств.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 Беляева Н.Н., Сычева Л.П., Журков В.С. Оценка цитологического и цитогенетического статуса слизистых оболочек полости носа и рта у человека: метод.рекомендации. - М., 2005. - 37 с.
2 Хахулина Н.Н., Курчатова М.Н., Микроядерный тест в оценке антимутагенной активности лекарственных средств // Бюллетень медицинских Интернет-конференций. - 2014. - Том 4. - Выпуск 5 (Май). - С. 786.
3 Курчатова М.Н., Ващенко А.А., Бабошкина Л.С. Цитогенетическая активность экстрактов и соков очитка большого и очитка пурпурного // Бюллетень медицинских Интернет-конференций. - 2016. - Том 6. - № 5.
4 Пальцев М.А., Полякова В.О., Коновалов С.С. и др. Сигнальные молекулы в буккальном эпителии: оптимизация диагностики социально значимых заболеваний // Молекулярная медицина. - 2012. - № 4. - С. 18-23.
5 Молоканова Ю.П. Особенности цитоморфологии буккального эпителия курящих лиц юношеского возраста // Вестник Московского государственного областного университета. Серия: Естественные науки. - 2017. -№ 1. - С. 21-30.
6 Сальников В.Н., Дурнова Н.А., Курчатова М.Н. и др. Изучение цитогенетической активности Хлоргексидина на буккальный эпителий с помощью микроядерного теста на стоматологическом приеме // Бюллетень медицинских Интернет-конференций. - 2017. - Том 7. - № 1. - С. 371-373.
7 Калаев В.Н., Игнатова И.В., Карпова С.С., Артемова О. В. Частота буккальных эпителиоцитов с микроядрами у лиц, страдающих парадонтитом // Вестник ВГУ, серия: Химия. Биология. Фармация. - 2010. - № 1. -С. 82-85.
8 Полухина Н.В., Дурнова Н.А., Коннов В.В. и др. Цитогенетические эффекты ортопедических конструкций // Саратовский научно-медицинский журнал. - 2012. - № 2. - C. 300-304.
9 Яковцова И.И., Данилюк С.В., Никонов А.Ю. и др. Морфологические особенности регенерации слизистой оболочки полости рта у лиц с металлическими конструкциями // Вюник проблем бюлоги i медицини. - 2014. -№ 4. - С. 256-261.
10 Биофизические принципы конструирования съемных протезов при полном отсутствии зубов / А.Г. Прошин, Е.Б. Киларджиева // Сборнике трудов СГМУ. - 2015. - С. 135-137.
Рукопись получена: 14 января 2019 г. Принята к публикации: 16 января 2019 г.
