CC BY
6
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
141
конкретной молекулярной мишени. Известно, что scFv части отдельных химерных рецепторов CAR часто стремятся к агрегации, в частности посредством «обмена доменами» (domain-swapping). Агрегация химерных рецепторов CAR приводит к тонической активации CAR Т-клеток, снижая специфичность цитотоксической активности CAR Т-клеток, а также приводя к более быстрому истощению пролиферативного потенциала (снижению персистенции) CAR T-клеток. Тенденция к агрегации является характеристикой каждой конкретной последовательности scFv. Подбор оптимальной последовательности внеклеточной части рецептора CAR является трудоемкой и времязатратной процедурой.
В данной работе в качестве внеклеточной части химерного рецептора использовалась полноразмерная последовательность Flt3-лиганда — естественного агониста тирозикиназного рецептора Flt3. Flt3-лиганд с высокой аффинностью взаимодействует с рецептором Flt3. Рецептор Flt3 представлен в повышенном количестве на поверхности бластных клеток в большинстве случаев острого миелоидного лейкоза. В примерно трети случаев рецептор Flt3 несет активирующую мутацию, что связывают с плохим прогнозом. Таким образом, безантительные Flt3-CAR Т-клетки могут более специфично элиминировать бластные клетки при остром миелоидном лейкозе.
В ходе работы была получена генетическая конструкция, кодирующая безантительный химерный рецептор Flt3-CAR, содержащая полноразмерную последовательность неизмененного Flt3-лиганда. С помощью лентиви-русной трансдукции донорских CD3-позитивных клеток были получены Flt3-CAR T-клетки. Было показано, что Flt3-CAR T-клетки специфически элиминируют Flt3-позитивные клетки THP-1 и не мешают пролиферации Flt3-негативным клеткам U937. Используя клетки Flt3-CAR Jurkat как модель Flt3-CAR T-клеток, неспособную к Т-клеточной активации, было показано, что химерный белок Flt3-CAR не цитотоксичен по отношению к Flt3-позитивным клеткам THP-1. Киллинг Flt3-позитивных клеток THP-1 дозозависимо ингибировался растворенным рекомбинантным Flt3-лигандом.
Таким образом, полученные Flt3-CAR T-клетки специфически убивают Flt3-позитивные клетки in vitro. Для элиминирования клеток-мишеней безантительным Flt3-CAR T-клеткам необходим функциональный механизм Т-клеточной активации. Безантительные Flt3-CAR T-клетки взаимодействуют с клетками-мишенями через сайт связывания Flt3-ligand:Flt3 рецептора Flt3 на поверхности THP-1.
БИОСОВМЕСТИМОЕ УСТРОЙСТВО ДЛЯ
УКРЫТИЯ ДЕФЕКТА ФИБРОЗНОГО КОЛЬЦА
В ПОЯСНИЧНОМ ОТДЕЛЕ ПОЗВОНОЧНИКА
ПОСЛЕ СЕКВЕСТРЭКТОМИИ
С.А. Макаров1, А.Г. Аганесов1, М.М. Алексанян1,
В.А. Демина2, О.А. Спирин1
1 ФГБНУ Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В. Петровского, Москва, Россия
2 НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: грыжа межпозвонкового диска, дискэкто-
мия, секвестрэктомия, дефект фиброзного кольца.
Дегенеративно-дистрофические изменения поясничного отдела позвоночника занимают 5 место среди
причин госпитализации и 3 место среди причин хирургического лечения. В настоящее время золотым стандартом хирургического лечения при грыжах межпозвонкового диска в поясничном отделе позвоночника является микрохирургическая или эндоскопическая секвестр- или дискэктомия. При этом риск развития рецидива заболевания при эндоскопическом методе достигает 30%, а при микрохирургическом — 10%. Рецидивы грыж межпозвонковых дисков часты, так как при классическом исполнении операции остаётся дефект в фиброзном кольце и задней продольной связке. Для снижения риска развития рецидива на мировом рынке в настоящее время существует единственный импортный (США) биосовместимый имплант, который не получил распространения в связи с высокой стоимостью, а также остаточным высоким риском рецидива. На отечественном рынке аналогов не существует. При использовании меж-теловых кейджей после дискэктомии с последующей фиксацией позвонков с целью создания спондилодеза после операции возникают следующие осложнения: синдром смежного уровня, миграция фиксаторов, что требует проведения повторных оперативных вмешательств. Кроме того, при проведении таких операций многократно возрастает её продолжительность, объём кровопотери, увеличивается срок пребывания на постельном режиме. При использовании нашего устройства в позвоночно-двигательном сегменте сохранится полная амплитуда движений, что, в свою очередь, является профилактикой и синдрома смежного уровня.
Нами планируется создание биосовместимого устройства для укрытия дефекта фиброзного кольца для предотвращения рецидивов после поясничной се-вестрэктомии. Разработка биосовместимого устройства для укрытия дефекта фиброзного кольца при малоинва-зивных операциях на поясничном отделе позвоночника позволит улучшить результаты хирургического лечения дегенеративных заболеваний поясничного отдела позвоночника и улучшить качество жизни данной группы пациентов, которые в основном являются людьми трудоспособного возраста.
В настоящее время разработан эскиз устройства; совместно с НИЦ «Курчатовский институт» проводятся комплексные испытания для изучения свойств материалов для выбора наиболее подходящего.
ВКЛАД РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЫ
В ТЕРАПИЮ АУТОИММУННЫХ
ЗАБОЛЕВАНИЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ
С.В. Макаров1, Н.Х. Муселимян2
1 Институт интегративной медицины, Москва, Россия
2 The George Washington University, Washington, DC, USA
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: стволовые клетки, рассеянный склероз,
миастения.
Памяти нашего учителя, одного из основоположников регенеративной медицины в Поволжье, профессора СамГМУ М.В. Угловой посвящается
В последнее десятилетие отмечается рост заболеваемости аутоиммунной патологией во всем мире. Это касается также хронических прогрессирующих аутоиммунных заболеваний нервной системы: рассеянного
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
