CC BY
3010. Патент ЯП2266324 С12N1/20. Продуцент экзополисахарида. Опубл. 20.12.2005. Бюл. 35.
11. Показатели токсиметрии, подлежащие определению на разных стадиях производства и применения химических веществ. МУ № 4230-86. — М, 1987.
12. Положения об организации работы по технике безопасности в микробиологической промышленности. — М, 1980.
13. Предельно допустимые концентрации загрязняющих веществ в воздухе рабочей зоны. ГН 2.2.5.1313-03. Гигиенические нормативы. — М.: Минздрав России, 2003.
14. Предельно допустимые концентрации микроорганизмов-продуцентов, бактериальных препаратов и их компонентов в воздухе рабочей зоны. ГН 2.2.6.709. — М.: МЗ России, 1999.
15. Проблемы нормы в токсикологии. Под ред. И.М.Трахтенберга. — М., 1991.
16. Ткачева С.Г., Дубинина О.Н., Хуснаризанова Р.Ф. и др. // Сб. работ 69-й итоговой научной сессии КГМУ и отделения медико-биологических наук Центрально-Черноземного района НЦ РАМН. Ч. 1. — Курск, 2004. — С. 139-140.
17. Трахтенберг И.М., Тимофиевская Л.А., Квятковская И.Я. Методы изучения хронического действия химических и биологических загрязнителей. — Рига, 1987.
18. Требования к постановке экспериментальных исследований по обоснованию предельно допустимых концентраций промышленных химических аллергенов в воздухе рабочей зоны и атмосферы. МУ1.1.0578-96.
Материал поступил в редакцию 08.02.08.
УДК 613.579.66
Н.В.Кобызева1*, О.Н.Дубинина2, О.Н.Логинов3, С.П.Четвериков1, Т.Ф.Бойко1, Н.Ю.Черняева2, Р.Ф.Хуснаризанова2, Н.Н.Силищев1
1Институт биологии Уфимского научного центра РАН 2ФГУН «Уфимский НИИ медицины труда и экологии человека Роспотребнадзора» 3ГУП «Опытный завод Академии наук Республики Башкортостан», Уфа
БИОПРЕПАРАТ-НЕФТЕДЕСТРУКТОР «ЛЕНОЙЛ»
Новый биопрепарат-нефтедеструктор «Ле-нойл», основу которого составляет природный консорциум нефтеокисляющих микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species [1], предназначен для ремедиации природных и техногенных объектов от нефтяного загрязнения [2-4].
* Фрагмент диссертационной работы
Токсиколого-гигиеническая оценка препарата «Ленойл» выполнена согласно требований действующих методических указаний [5, 6].
Токсичность и опасность при введении в желудок оценивали на беспородных белых крысах и мышах. Вводился энтерально нативный препарат. При введении дозы 5 г/кг гибели животных не зарегистрировано в течение 2-х недель наблюдения. Общее состояние и поведение подопытных животных не имели отклонений, регистрируемых визуально.
При однократном 4-часовом вдыхании животными жидкого аэрозоля общее состояние и поведение животных подопытной и контрольной групп не различалось. Случаев гибели животных на протяжении 2-недельного периода наблюдения не зарегистрировано.
Местное раздражающее влияние биопрепарата изучали на белых мышах, морских свинках и кроликах. Однократный контакт с кожей животных нативного продукта, а также разбавленных растворов не оказывает заметного раздражающего эффекта. При повторных 7-кратных аппликациях появляется небольшая сухость кожных покровов. Исследование местного действия на конъюнктиву глаза кроликов не выявило способности нативного продукта вызывать развитие воспалительного процесса.
Кожно-резорбтивное действие биопрепарата испытывали в 2-недельном опыте на белых мышах пробирочным методом. Масса тела подопытных животных, поведенческие реакции, коэффициенты относительной массы внутренних органов не отличались от параметров соответствующих показателей контрольной группы. Гибели животных в ходе опыта не зарегистрировано.
Для оценки возможности аллергизации организма при контакте с препаратом использован тест гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) на мышах, а также метод накожных аппликаций на морских свинках с постановкой иммунологических тестов in vitro. Мыши получали сенсибилизирующую дозу препарата в количестве 100 мкг. Разрешающая доза выявила увеличения индекса ГЗТ у мышей (6,2±1,3, в контрольной группе 3,18±0,87), что свидетельствует об аллергической перестройке в организме подопытных животных по сравнению с контролем. При обследовании морских свинок по окончании 1-месячных аппликаций нативного продукта установлено следующее: положительные кожные тесты выявлены у 80% животных опытной группы при отсутствии таковых в контроле. Вместе с тем, количество лейкоцитов и лейкоцитарная формула, белок и белковые фракции сыворотки крови не имели отличий между опытной и контрольной группами.
Определение соотношения разных классов лимфоцитов по тесту розеткообразующих клеток выявило тенденцию (р < 0,1) к снижению содержания Т-лимфоцитов и увеличению В-лимфоцитов. Оценка неспецифической иммунологической реактивности морских свинок по показателям фагоцитарной реакции показала увеличение фагоцитарного числа в подопытной группе.
Результаты этого исследования свидетельствуют о том, что контакт организма с препаратом вызывает формирование определенных сдвигов в функциональном состоянии иммунной системы, выражающихся стимуляцией факторов клеточного иммунитета и неспецифической реактивности, что может служить этиологическим фактором возникновения аллергических заболеваний, главным образом дерматитов, при производственном контакте с биопрепаратом.
Кумулятивные свойства биопрепарата оценивали на беспородных белых крысах в условиях ежедневного энтерального введения дозы 1 г/кг массы тела на протяжении 1 месяца. При этом суммарная доза составила 26 г/кг. В ходе эксперимента и по окончании его общее состояние и поведение подопытных животных не имели существенных отличий от контроля, случаев гибели животных не зарегистрировано, динамика массы тела и коэффициенты относительной массы внутренних органов не имели достоверных различий между группами. Гематологические и биохимические исследования показали, что общий анализ крови (гемоглобин, эритроциты, лейкоциты, лейкоцитарная формула), ферментативная активность в сыворотке крови аспарагиновой трансаминазы, аланиновой трансаминазы, лактат дегидрогеназы, общий белок, белковые фракции также не выявили существенных отклонений в группе подопытных животных.
Зарегистрировано некоторое увеличение диуреза, а также суточной экскреции белка (р < 0,05). В сыворотке крови отмечено повышение содержания мочевой кислоты (р < 0,02). Отмеченные изменения, скорее всего, обусловлены поступлением в организм подопытных животных значительного количества белка микробного происхождения.
Биопрепарат «Ленойл» не содержит в своем составе патогенных и условно патогенных микроорганизмов.
Оценена способность штаммов микроорганизмов биопрепарата к диссеминации в организме. Исследование выполнено по окончании 1-месячного эксперимента с энтеральным введением беспородным белым крысам препарата в суммар-
ной дозе 26 г/кг. Использован метод посева крови и отпечатков внутренних органов на питательные среды с последующим исследованием результатов посева. Диссеминации микроорганизмов во внутренние органы не обнаружено.
Изучено дисбиотическое действие биопрепарата «Ленойл» посредством исследования микробиоценоза толстой кишки: определение содержания облигатных анаэробных бактерий (би-фидобактерий, лактобацилл), кишечной палочки (нормальной и гемолизирующей), условно-патогенных энтеробактерий, в том числе протея, а также стафилококков, энтерококков, дрож-жеподобных и плесневых грибов. Установлено, что явлений дисбактериоза в опытной группе по сравнению с контролем не отмечается.
Результаты токсиколого-гигиенических исследований дают основание заключить, что данный продукт может быть использован по назначению: для ускорения деградации нефти при рекультивации загрязненных нефтью территорий. Обязательным условием при этом является выполнение требований санитарного законодательства.
Работа частично поддержана грантом РФФИ № 08-04-99002.
Список литературы
1. Логинов О.Н., Силищев Н.Н., Чураев Р.Н. и др. Патент RU 2232806 С12 N 1/20. Консорциум микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов. Заявл. 12.08.2002; опубл. 20.07.2004. Бюл. 20.
2. Логинов О.Н., Пилюгин В.В., Костючен-ко В.П. и др. Патент RU 2237711 С 12 N 1/20. Способ рекультивации отбеливающей земли, загрязненной нефтепродуктами. Заявл. 30.12.2002; опубл. 10.10.2004. Бюл. 28.
3. Логинов О.Н., Силищев Н.Н., Нуртдинова Л.А. и др. Патент RU 2241032 C 12 N 1/20. Способ очистки водных поверхностей от нефтяного загрязнения. Заявл. 03.12.2002; опубл. 27.11.2004. Бюл. 33.
4. Бакаева М.Д., Биккинина А.Г., Нуртдинова Л.А. и др. // Башкирский химический журнал, 2005. - Т. 12. - № 3. - С. 123-127.
5. Методические указания по экспериментальному обоснованию ПДК микроорганизмов-продуцентов и содержащих их готовых форм препаратов в объектах производственной и окружающей среды, № 5789/1-91 от 11.06.91.
6. Методические указания по гигиенической оценке микробных средств защиты растений от насекомых и болезней на основе неспорообразую-щих микроорганизмов, № 2620-82 от 22.09.82.
Материал поступил в редакцию 08.02.08.
