CC BY
290
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ОБЗОРЫ
Биомаркеры повреждения головного мозга у новорожденных
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва
ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России
В перинатальной медицине, несмотря на большое количество методов оценки состояния центральной нервной системы (ЦНС) у новорожденных, весьма актуален поиск ранних предикторов повреждения головного мозга. Определение маркеров повреждения ЦНС позволяет оценивать эффективность различных методов лечения перинатальной асфиксии, гипоксически-ишемической энцефалопатии и внутрижелудоч-ковых кровоизлияний, а также оценить риск развития неврологического дефицита. Для прогнозирования последствий гипоксической травмы изучается широкая панель биомаркеров: нейропротеины, кальций-связывающий белок, вазоактивные вещества, маркеры оксидативного стресса, медиаторы воспаления. Известно, что при повреждении головного мозга происходит увеличение концентрации ряда биомаркеров в различных биологических жидкостях, степень которого коррелирует с выраженностью повреждения вне зависимости от сроков родов. Таким образом, целью данного обзора является оценка роли биомаркеров у новорожденных для выявления и определения повреждения головного мозга.
Ключевые слова:
биомаркеры, гипоксия плода, травма головного мозга
Неонатология: новости, мнения, обучение. 2018. Т. 7. № 1. С. 70-76.
Статья поступила в редакцию: 20.01.2018. Принята в печать: 20.02.2018.
Biomarkers of brain damage in newborns
Prikhod'ko A.M.1, Kirtbaya A.R.'-2, 1 V.I. Kulakov Obstetrics, Gynecology and Perinatology National RomanovA.Yu.1, Baev O.R.1 Medical Research Center of Ministry of Healthсаre of the Russian
Federation, Moscow 2 I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
In perinatal medicine, despite large number evaluation methods of central nervous system (CNS) condition in newborns, it is urgent to search for early predictors of brain damage. Identification of CNS damage markers allows to evaluate effectiveness of perinatal asphyxia, hypoxic-ischemic encephalopathy and intraventricular hemorrhages various methods of treatment, and to assess risk of neurological impairment. To predict hypoxic trauma consequences, a wide biomarker panel is studied: neuroproteins, calcium-binding protein, vasoactive substances, oxidative stress markers, inflammatory mediators. It is known that in case of brain damage, an increase of biomarkers concentration in various biological fluids is observed, degree of which correlates to lesion severity, regardless of delivery date. Thus, the aim of this review is to evaluate biomarkers role in infant brain damage identification and estimation.
Keywords:
biomarkers, fetal hypoxia, brain damage
Neonatology: News, Opinions, Training. 2018; 7 (1): 70-6.
Received: 20.01.2018. Accepted: 20.02.2018.
Приходько А.М.1, Киртбая А. Р.1, 2, Романов А.Ю.1, Баев О. Р.1
i
2
Для прогнозирования последствий повреждения головного мозга в результате черепно-мозговой травмы, инсульта или дистресса плода в родах изучается широкая панель биомаркеров [1-3]. Для этого оценивается корреляционная связь между их концентрацией в крови и клинической картиной при данных патологиях [4-7]. В неонатологии этот вопрос имеет первостепенное значение, так как диагноз повреждения головного мозга ставится на основании данных акушерского анамнеза, соответствующей клинической симптоматики, данных инструментальных и лабораторных исследований [8]. В настоящее время существует широкий спектр методов диагностики гипоксиче-ских травм головного мозга, наиболее распространенными из них являются электроэнцефалография, ультразвуковое (УЗ) сканирование и магнитно-резонансная томография (МРТ) его структур. Анализ нарушений центральной нервной системы (ЦНС) на раннем этапе позволяет оценить отдаленные результаты гипоксии [9]. Таким образом, поиск новых маркеров, непосредственно указывающих на повреждение ЦНС на этапе, когда не все клинические и инструментальные методы исследования могут обнаружить данные нарушения, весьма актуален для выбора правильной тактики и проведения рациональной терапии. Также не теряет актуальности вопрос ложноположительного диагноза гипоксии в родах по данным кардиотокографии, который не подтверждается впоследствии оценкой по шкале Апгар и показателями кислотно-основного состояния крови новорожденного.
В течение последних 20 лет биомаркеры повреждения головного мозга изучали для прогнозирования исходов после черепно-мозговой травмы [10, 11]. Учитывая патофизиологические изменения, происходящие в результате вну-тримозгового кровоизлияния или при повреждении ткани головного мозга, были подробно изучены такие биомаркеры, как нейропротеины, кальций-связывающий белок, вазоак-тивные вещества, маркеры оксидативного стресса, медиаторы воспаления у новорожденных с диагнозом «асфиксия» и у недоношенных новорожденных [12-16]. Несмотря на очевидную целесообразность применения в качестве ранних маркеров оценки тяжести последствий травмы головного мозга, реальное их использование в клинической практике ограничено отсутствием рекомендаций по выбору биомаркеров в той или иной клинической ситуации, а также отсутствием четких референсных значений.
Биомаркеры повреждения различных тканей организма давно нашли применение в разных направлениях клинической практики. Для оценки повреждения головного мозга у взрослых людей с диагнозом «болезнь Альцгеймера» используется определение уровней р-амилоида и т-протеина и/или проведение позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ) для визуализации очагов скопления амилоида [17, 18]. Тропонины Т и I исследуются как маркеры повреждения миокарда при остром коронарном синдроме [19]. В данном обзоре освещаются основные критерии, которым должны соответствовать биомаркеры повреждения головного мозга, а также основные биомаркеры, использующиеся в клинической и перинатальной медицине.
Во время родов оценка состояния плода проводится с помощью кардиотокографии и тестов инвазивной диагно-
стики. Учитывая большое количество ложноположительных диагнозов, связанных с ухудшением состояния плода, по которым проводится оперативное родоразрешение, необходимо дополнить представление о состоянии ЦНС плода и ее повреждении с помощью специфических биомаркеров. В настоящее время имеются референсные значения для отдельных маркеров при тяжелых поражениях ЦНС новорожденных, однако нет данных о взаимосвязи дистресса плода в родах по данным инструментального мониториро-вания и отсутствием асфиксии при оценке новорожденного по шкале Апгар. Наиболее интересным в интранатальной оценке состояния плода для прогнозирования отдаленных результатов является исследование маркеров повреждения ЦНС в пуповинной крови при различных типах патологического паттерна во время кардиотокографии и отсутствии ацидоза при рождении.
Исследования биомаркеров перинатального повреждения головного мозга показали, что они в состоянии предсказать степень и локализацию нарушений в нервных тканях после их повреждения. Определение указанных биомаркеров с привязкой их к интранатальному наблюдению за состоянием плода в сочетании с традиционными методами исследования могут позволить проводить точное прогнозирование гипоксической травмы головного мозга, контролировать прогрессирование заболевания путем их динамического мониторинга благодаря короткому периоду полураспада.
Биомаркеры, применяемые у новорожденных с перинатальным повреждением головного мозга
Диагноз перинатального повреждения головного мозга в настоящее время ставится на основании данных клинических, инструментальных и лабораторных исследований [20, 21]. Для предотвращения неблагоприятных последствий травмы большое значение имеют ранняя диагностика и время начала лечения. В связи с этим стоит отметить, что биомаркеры могут обнаружить повреждение на той стадии, когда его клиническая картина еще не сформирована.
Среди потенциальных маркеров повреждения головного мозга в результате перинатальной асфиксии (ПА), гипо-ксически ишемической энцефалопатии (ГИЭ) у доношенных новорожденных и внутрижелудочковых кровоизлияний (ВЖК) у недоношенных [14] выделяют ряд белковых молекул, которые будут обозначены ниже.
S100B
S100B принадлежит к семейству кальций-связываю-щих белков и синтезируется преимущественно в астро-цитах глии, а также за пределами ЦНС. Он принимает участие в росте нейронов и регуляции уровня кальция, а в клинической практике используется преимущественно как онкомаркер меланомы. S100B определяется во многих биологических жидкостях (спинномозговая жидкость, кровь, моча, амниотическая жидкость, слюна и молоко) [15, 22], но в наибольшей концентрации содержится в ЦНС
(глиальные клетки, нейроны), при незначительном внеклеточном расположении [23, 24]. S100B участвует в поддержании нейронального гомеостаза - при концентрации 10-9 моль/л он стимулирует рост нейритов и увеличивает выживаемость нейронов, при концентрации 10-6 моль/л -стимулирует экспрессию воспалительных цитокинов и индуцирует апоптоз.
Определение концентрации S100B в биологических жидкостях дает необходимую информацию о перинатальном повреждении головного мозга после ПА, ГИЭ и ВЖК [25, 26], физиологическом развитии ЦНС у здоровых новорожденных [27-29] и эффективности, а также о побочном влиянии медикаментозной терапии у беременных и новорожденных, в том числе в группах высокого риска [30, 31].
D. GazzoLo и соавт. (2009) отмечают, что концентрация S100B коррелирует со степенью повреждения головного мозга и выраженностью неврологических нарушений у детей первого года жизни, а также с уровнем смертности детей в течение этого периода [31, 32]. Однако необходимо проведение дальнейших исследований для оценки связи между концентрацией белка S100B, данными МРТ и отдаленными исходами у детей.
Активин А
Данный биомаркер относится к семейству трансформирующих факторов роста р и регулирует дифференцировку и пролиферацию нейронов [33]. В последние несколько лет стало возможным измерение концентрации активина А в различных биологических жидкостях: спинномозговой, крови, моче и грудном молоке [34-36]. Измерение концентрации активина А дает необходимую информацию о повреждении головного мозга при различных клинических ситуациях (ПА, ГИЭ, ВЖК) [37, 38]; эффективности и побочном влиянии медикаментозной терапии у беременных. Например, изучается возможность его использования при оценке влияния антидепрессантов во время беременности на развитие и функционирование ЦНС плода [39, 40]. В экспериментальных исследованиях на животных было также доказано, что активин А принимает участие в нейро-протекции и регенеративных процессах непосредственно после травмы вследствие гипоксии [41].
На сегодняшний день мало данных о связи концентрации активина А со степенью поражения головного мозга по данным МРТ-исследования, а также с кратко- и долгосрочными исходами лечения. Различия уровней выработки активина А у новорожденных и детей старшего возраста указывают на его возможное участие в развитии ЦНС в качестве трофического фактора [42, 43].
Концентрация активина А была выше в спинномозговой жидкости доношенных новорожденных, перинатальная асфиксия которых привела к развитию ГИЭ, чем у новорожденных без ГИЭ [44]. В другом исследовании была продемонстрирована положительная корреляция концентрации активина А в крови доношенных новорожденных с уровнем нарушения фетальной циркуляции и гипоксии [45]. Недавно была также изучена концентрация активина А в моче новорожденных в зависимости от степени развившейся ГИЭ [46]. По результатам этого исследования уровень активина А
в моче >0,08 нг/л позволяет предсказать развитие умеренной или тяжелой ГИЭ с чувствительностью 83,3% и специфичностью 100%.
Адреномедуллин
Адреномедуллин (АМ) принадлежит к семейству пептидов, связанных с геном кальцитонина, впервые был выделен у пациентов с феохромоцитомой. Он участвует в ответе на гипоксию и воспаление, вырабатывается под действием интерлейкина-ip и стимулирует выработку ряда ростовых факторов при неоваскуляризации [13]. В ЦНС он синтезируется в нейронах и эндотелии сосудов, где оказывает сосудорасширяющее действие за счет стимуляции высвобождения N0 эндотелиальными клетками; есть данные о его участии в поддержании нейронального гомеостаза и ингибирова-нии апоптоза [14]. Также изучается роль АМ в реперфузи-онном повреждении сердечно-сосудистой системы у плодов и новорожденных при ишемии. Его измерение в крови, спинномозговой и амниотической жидкостях дает информацию об острых и хронических поражениях у плодов и новорожденных, таких как синдром задержки роста плода (СЗРП), ПА, ГИЭ, ВЖК [47-49]. Измерение концентрации AM проводится при хронической гипоксии плода и СЗРП, в том числе для оценки эффективности лечения [50]. P. FLorio и соавт. (2008) было проведено исследование по измерению концентрации AM у новорожденных с врожденными пороками сердца, которым проводили кардиохирурги-ческое вмешательство, для оценки возможного повреждения ЦНС при использовании аппарата искусственного кровообращения [48]. Следует отметить, что взаимосвязь концентрации AM со степенью повреждения головного мозга по МРТ изучена не до конца. Также отсутствуют референс-ные значения уровня АМ у новорожденных и детей старшего возраста, нет данных о связи концентрации AM с гестацион-ным возрастом или полом.
Нейроспецифическая енолаза (NSE)
Нейрональнальная форма внутрицитоплазматического гликолитического фермента енолазы синтезируется в цитоплазме нейронов и нейроэндокринных клеток [49, 50]. Она обнаруживается в спинномозговой жидкости и крови после травмы нервной ткани или при нарушении проницаемости гематоэнцефалического барьера (ГЭБ), при инсульте, черепно-мозговой травме, ПА и ГИЭ [51, 52]. Хотя нейроспецифическая енолаза (NSE) была предложена в качестве перспективного биомаркера при травме ЦНС у новорожденных, родившихся в состоянии асфиксии, ограничением к ее использованию является гемолиз, так как она экспрессиру-ется на мембране эритроцитов [49]. В настоящее время не изучена корреляция между концентрацией NSE и степенью поражения головного мозга по данным МРТ.
Было продемонстрировано повышение уровня NSE в крови доношенных новорожденных с ГИЭ по сравнению с новорожденными контрольной группы. Кроме того, высокий уровень NSE также был ассоциирован с неблагоприятными исходами у новорожденных этой группы [53]. В другом исследовании связи между уровнем NSE и степенью ГИЭ не выявлено [54]. В свою очередь Roca и соавт. продемон-
стрировали однозначную связь между уровнем МБЕ после рождения и результатами неврологического обследования ребенка в возрасте 2 лет жизни [55].
Маркеры оксидативного стресса
Окислительный стресс (ОБ) является одним из основных звеньев в патогенезе заболеваний плода и новорожденного [56, 57]. У недоношенных детей антиоксидантная система до конца не сформирована и не может противодействовать воздействию свободных радикалов, способствующих повреждению клеток, тканей и органов. Эритроциты крайне чувствительны к повреждению свободными радикалами из-за высокой концентрации внутриклеточного кислорода и гемового железа, что является одной из причин развития анемии недоношенных при ответе на гипоксию.
Б. Реггопе и соавт. (2012) показали взаимосвязь степени ОБ в перинатальном периоде с осложнениями течения беременности и раннего неонатального периода [58]. Таким образом, актуален поиск концентрации маркеров ОБ в различных биологических жидкостях и корреляции между ОБ и степенью повреждения головного мозга по данным МРТ.
Глиальный фибриллярный кислый белок
Мономерный глиальный фибриллярный кислый белок ^^АР) быстро высвобождается при повреждении нервной ткани и астроглиозе. Его концентрация в сыворотке крови увеличивается после инсульта, соответствуя степени ишемического повреждения головного мозга [59]. Кроме того, отмечается более высокая концентрация G-FAP у младенцев с ПА по сравнению со здоровыми детьми и у недоношенных детей с плохим прогнозом по сравнению с детьми, у которых он более благоприятный. G-FAP можно использовать в качестве биомаркера для выявления ГИЭ у новорожденных, а также мониторинга состояния ЦНС при использовании неонатальной гипотермии [60]. Эффективность определения G-FAP при диагностике неврологических нарушений у новорожденных вследствие ГИЭ намного превосходит все клинические показатели. Необходимы дальнейшие исследования для уточнения связи G-FAP с неврологическим дефицитом, степенью повреждения головного мозга по данным МРТ и оценке долгосрочных исходов.
Гемооксигеназа-1
Гемооксигеназа-1 (НО-1) - это фермент, ограничивающий скорость деградации гема, приводящий к производству эквимолярного железа, монооксида углерода (СО) и били-вердина, который затем сразу преобразуется в билирубин под действием биливердинредуктазы [61].
НО-1 является индуцируемой изоформой фермента, ее синтез может быть вызван различными патологическими состояниями, в том числе в перинатальном периоде [62-66]. Повышение синтеза НО-1 связано с его защитными функциями при ГИЭ [67], так как она оказывает антиоксидантное, противовоспалительное и противоапоптотическое действие [68]. Изучение распределения концентрации НО-1 в различных биологических жидкостях дало основание предполагать, что НО-системы играют важную роль в развитии сосудистой сети при плацентации, в патогенезе осложнений
беременности и преждевременных родов [69]. Таким образом, необходимы дальнейшие исследования, посвященные изучению изменений уровня НО-1 при ПА, ГИЭ и ВЖК, а также оценке связи между концентрацией НО-1 и степенью поражения мозга по данным МРТ.
МикроРНК
МикроРНК представляют собой небольшие некодирую-щие молекулы РНК длиной около 22 нуклеотидов [70]. Эти фрагменты РНК регулируют экспрессию гена путем ингиби-рования трансляции матричной РНК (мРНК) и последующего синтеза белка. Таким образом, микроРНК участвуют в пролиферации, дифференцировке, метаболизме и гибели биологических клеток [71].
По данным А. Looney и соавт. (2015), у новорожденных, родившихся с ПА или ГИЭ, отмечалось снижение концентрации микро-РНК374а (miR-374a) по сравнению со здоровыми детьми. Однако причины, приводящие к ее снижению, изучены не до конца, а референсные значения микроРНК при определении ее методом полимеразной цепной реакции, не определены [72]. При исследовании уровня мРНК в крови матери отмечалось повышение концентрации при гипоксии плода. По данным С. Whitehead и соавт. (2013), отмечается высокая корреляция между степенью гипоксии плода (ацидоза) и уровнем мРНК материнской крови, что открывает возможность использования этого теста в качестве неинва-зивной пренатальной диагностики состояния плода [73].
Заключение
В настоящее время становится все более очевидно, что биомаркеры станут важным объектом дальнейших исследований в качестве показателей, учитывающих развитие, функционирование и повреждение ЦНС. Однако необходимо учитывать, что биомаркеры могут быть определены с помощью различных анализаторных систем и методик (ELISA, хемилю-минесценция, газовая хроматография и т.д.), каждая из них может демонстрировать различные результаты для одного и того же пациента. Кроме того, в настоящее время не определены референсные значения для каждого маркера в различных биологических средах, а также в зависимости от гестационного возраста, пола, паритета родов [74, 75]. Также нет данных о состоянии ЦНС при дистрессе плода в родах при отсутствии асфиксии при рождении. Прогнозирование отдаленных нарушений ЦНС в зависимости от типа кардиотокографии в родах позволит своевременно решать вопрос об оперативном родоразрешении.
Другим важным направлением исследований является оценка уровней биомаркеров в качестве предикторов повреждения головного мозга, которое на данный момент определяется с помощью более трудоемких и дорогих методов исследования (МРТ), являющихся «золотым стандартом» диагностики. S100B и активин А представляют наиболее надежные и перспективные биомаркеры для обнаружения повреждения головного мозга и прогнозирования его исходов [76-81]. Основные преимущества их применения заключаются в простоте измерения, высокой эффективности при низкой стоимости методик их определения; возможности
неинвазивного измерения в таких биологических жидкостях, как моча и слюна; возможности длительного мониторинга и доступности результатов в краткие сроки.
Одним из перспективных направлений является изучение биомаркеров с целью оценки проводимой терапии у новорожденных с ПА [82, 83]. Так как все вышеперечисленные биологически активные вещества участвуют в различных патофизиологических процессах, они имеют потенциальное значение для оценки эффективности различных методов лечения. По данным А. Roca и соавт. (2012), мониторинг новорожденных с ПА и ГИЭ во время проведения гипотермии показал, что концентрация биомаркеров коррелирует
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
с неблагоприятными неврологическими исходами и ранней неонатальной смертностью [84]. Дальнейшие исследования биомаркеров позволят не только мониторировать состояние новорожденных во время проведения гипотермии, но и заранее отбирать пациентов с высокой вероятностью успеха данного вида терапии.
Создание панели для комплексной оценки состояния ЦНС: маркеров, характеризующих непосредственную гибель нейронов, нарушение межнейрональной передачи нервного импульса и когнитивных функций головного мозга, даст долгосрочный прогноз по развитию новорожденных, родившихся без асфиксии и при различных степенях ее тяжести.
Приходько Андрей Михайлович - кандидат медицинских наук, врач акушер-гинеколог 1-го родильного отделения ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России», Москва Е-шаН: a_prikhodko@oparina4.ru
Киртбая Анна Ревазиевна - кандидат медицинских наук, заведующая по клинической работе отделения анестезиологии и реанимации новорожденных ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России», доцент кафедры неонатологии педиатрического факультета ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России Е-шаН: a_kirtbaya@oparina4.ru Романов Андрей Юрьевич - клинический ординатор E-шaiL: romanov1553@yandex.ru
Баев Олег Радомирович - доктор медицинских наук, профессор, руководитель 1-го родильного отделения ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России», Москва E-maiL: o_baev@oparina4.ru
ЛИТЕРАТУРА/РЕРЕРЕ1ЧСЕБ
1. Pleines U.E., Morganti-Kossmann M.C., Rancan M., et al. S-100 beta reflects the extent of injury and outcome, whereas neuronal specific eno-lase is a better indicator of neuroinflammation in patients with severe traumatic brain injury. J Neurotrauma. 2001; 18: 491-8.
2. Woertgen C., Rothoerl R.D., Metz C., Brawanski A. Comparison of clinical, radiologic, and serum marker as prognostic factors after severe head injury. J Trauma. 1999; 47: 1126-30.
3. Hayakata T., Shiozaki T., Tasaki O., et al. Changes in CSF S100B and cytokine concentrations in early-phase severe traumatic brain injury. Shock. 2004; 22: 102-7.
4. Foerch C., Singer O.C., Neumann-Haefelin T., et al. Evaluation of serum S100B as a surrogate marker for long-term outcome and infarct volume in acute middle cerebral artery infarction. Arch Neurol. 2005; 62: 1130-4.
5. Sanchez-Pena P., Pereira A.R., Sourour N.A., et al. S100B as an additional prognostic marker in subarachnoid aneurysmal hemorrhage. Crit Care Med 2008; 36: 2267-73.
6. Kovesdi E., Luckl J., Bukovics P., et al. Up-date on protein biomarkers in traumatic brain injury with emphasis on clinical use in adults and pediatrics. Acta Neurochir (Wien). 2010; 152: 1-17.
7. Moritz S., Schmidt C., Bucher M., et al. Neuromonitoring in carotid surgery: are the results obtained in awake patients transferable to patients under sevoflurane/fentanyl anesthesia? J Neurosurg Anesthesiol. 2010; 22: 21-31.
8. Risso F.M., Sannia A., Gazzolo D. Preterm and term newborn: primary investigations. J Matern Fetal Neonatal Med. 2012; 25: 70-2.
9. Hellstrom-Westas L., Rosen I. Continuous brain-function monitoring: state of the art in clinical practice. Semin Fetal Neonatal Med. 2006; 11: 503-11.
10. Kochanek P.M., Berger R.P., Bayir H., et al. Biomarkers of primary and evolving damage in traumatic and ischemic brain injury: diagnosis, prognosis, probing mechanisms, and therapeutic decision making. Curr Opin Crit Care. 2008; 14: 135-41.
11. Gazzolo D., Abella R., Frigiola A., et al. Neuromarkers and unconventional biological fluids. J Matern Fetal Neonatal Med. 2010; 23: 66-9.
12. Gazzolo D., Abella R., Marinoni E., et al. New markers of neonatal neurology. J Matern Fetal Neonatal Med. 2009; 22: 57-61.
13. Florio P., Abella R., Marinoni E., et al. Biochemical markers of perinatal brain damage. Front Biosci (Schol Ed). 2010; 2: 47-72.
14. Gazzolo D., Di Iorio R., Marinoni E., et al. S100B protein is increased in asphyxiated term infants developing intraventricular hemorrhage. Crit Care Med. 2002; 30: 1356-60.
15. Risso F.M., Serpero L.D., Zimmermann L.J., et al. Perinatal asphyxia: kidney failure does not affect S100B urine concentrations. Clin Chim Acta. 2012; 18: 150-3.
16. Gazzolo D., Marinoni E., Di Iorio R., et al. Measurement of urinary S100B protein concentrations for the early identification of brain damage in asphyxiated full-term infants. Arch Pediatr Adolesc Med. 2003; 157: 1163-8.
17. Cullen V.C., Fredenburg R.A., Evans C., et al. Development and advanced validation of an optimized method for the quantitation ofAb42 in human cerebrospinal fluid. AAPS J. 2012; 14: 510-8.
18. Koo J., Byun Y. Current status of PET-imaging probes of beta-amyloid plaques. Arch Pharm Res 2013; 36 (10): 1178-84.
19. Apple F.S., Jesse R.L., Newby L.K., et al. National Academy of Clinical Biochemistry; IFCC Committee for Standardization of Markers of Cardiac Damage. National Academy of Clinical Biochemistry and IFCC Committee for Standardization of Markers of Cardiac Damage Laboratory Medicine Practice Guidelines: Analytical issues for biochemical markers of acute coronary syndromes. Circulation. 2007; 115: e352-5.
20. Mulligan J.C., Painter M.J., O'Donoghue P.A., et al. Neonatal asphyxia II. Neonatal mortality and long-term sequelae. J Pediatr. 1980; 96: 903-7.
21. Low J.A., Lindsay B.G., Derrick E.J. Threshold of metabolic aci-dosis-associated with newborn complications. Am J Obstet Gynecol. 1997; 177: 1391-4.
22. Gazzolo D., Michetti F. Perinatal S100B protein assessment inhuman unconventional biological fluids: a minireview and new perspectives. Cardiovasc Psychiatry Neurol. 2010; 2010: 703563.
23. Ferri G.L., Probert L., Cocchia D., et al. Evidence for the presence of S-100 protein in the glial component of the human enteric nervous system. Nature. 1986; 297: 409-10.
24. Pham N., Fazio V., Cucullo L., et al. Extracranial sources of S100B do not affect serum levels. PLoS One. 2010; 5 (9).
25. Blennow M., Savman K., Ilves P., et al. Brain-specific proteins in the cerebrospinal fluid of severely asphyxiated newborn infants. Acta Paediatr. 2001; 90: 1171-5.
26. Gazzolo D., Bruschettini M., Corvino V., et al. S100b protein concentrations in amniotic fluid correlate with gestational age and with cerebral ultrasound scanning results in healthy fetuses. Clin Chem. 2001; 47: 954-6.
27. Gazzolo D., Bruschettini M., Lituania M., et al. S100b protein concentrations in urine are correlated with gestational age in healthy preterm and term newborns. Clin Chem. 2001; 47: 1132-3.
28. Gazzolo D., Vinesi P., Marinoni E., et al. S100B protein concentrations in cord blood: correlations with gestational age in term and preterm deliveries. Clin Chem. 2000; 46: 998-1000.
29. Gazzolo D., Kornacka M., Bruschettini M., et al. Maternal glucocorticoid supplementation and S100B protein concentrations in cord blood and urine of preterm infants. Clin Chem. 2003; 4: 1215-8.
30. Sannia A., Risso F.M., Serpero L.D., et al. Antenatal glucocorticoid treatment affects preterm infants' S100B urine concentration in adose-dependent manner. Clin Chim Acta. 2010; 411: 1539-41.
31. Gazzolo D., Florio P., Ciotti S., et al. S100B protein in urine of preterm newborns with ominous outcome. Pediatr Res. 2005; 58: 1170-4.
32. Gazzolo D., Frigiola A., Bashir M., et al. Diagnostic accuracy of S100B urinary testing at birth in full-term asphyxiated newborns to predict neonatal death. PLoS One. 2009; 4: e4298.
33. Florio P., Gazzolo D., Luisi S., et al. Activin A in brain injury. Adv Clin Chem. 2007; 43: 117-33.
34. Florio P., Luisi S., Bruschettini M., et al. Cerebrospinal fluid activin a measurement in asphyxiated full-term newborns predicts hypoxic ischemic encephalopathy. Clin Chem. 2004; 50: 2386-9.
35. Florio P., Frigiola A., Battista R., et al. Activin A in asphyxiated full term newborns with hypoxic ischemic encephalopathy. Front Biosci (Elite Ed). 2010; 2: 36-42.
36. Florio P., Luisi S., Moataza B., et al. High urinary concentrations of activin A in asphyxiated full-term newborns with moderate or severe hypoxic ischemic encephalopathy. Clin Chem. 2007; 53: 520-2.
37. Sannia A., Zimmermann L.J., Gavilanes A.W., et al. Elevated activin A urine levels are predictors of intraventricular hemorrhage in preterm newborns. Acta Paediatr. 2013; 102 (10). doi: 10.1111/apa.12332.
38. Florio P., Perrone S., Luisi S., et al. Increased plasma concentrations of activin A predict intraventricular hemorrhage in preterm newborns. Clin Chem. 2006; 52: 1516-21.
39. Bellissima V., Ververs T.F., Visser G.H., Gazzolo D. Selective serotonin reuptake inhibitors in pregnancy. Curr Med Chem. 2012; 19: 4554-61.
40. Bellissima V., Visser G.H., Ververs T.F., et al. Antenatal maternal antidepressants drugs affect activin A concentrations in maternal blood, in amniotic fluid and in fetal cord blood. J Matern Fetal Neonatal Med. 2011; 24: 31-4.
41. Di Iorio R., Marinoni E., Lituania M., et al. Adrenomedullinin creases in term asphyxiated newborns developing intraventricular hemorrhage. Clin Biochem. 2004; 37: 1112-6.
42. Di Iorio R., Marinoni E., Letizia C., et al. Adrenomedullin is increased in the fetoplacental circulation in intrauterine growth restriction with abnormal umbilical artery waveforms. Am J Obstet Gynecol. 2000; 182: 650-4.
43. Gazzolo D., Marinoni E., Giovannini L., et al. Circulating adrenomedullin is increased in preterm newborns developing intraventricular hemorrhage. Pediatr Res. 2001; 50: 544-7.
44. Florio P., Luisi S., Bruschettini S., et al. Cerebrospinal fluid activin A measurement in asphyxiated full-term newborns predicts hypoxic ischemic encephalopathy. Clin Chem. 2004; 50: 2386-9.
45. Florio P., Reis F., Severi F., et al. Umbilical cord serum activin A levels are increased in pre-eclampsia with impaired blood flow in the uteroplacental and fetal circulation. Placenta. 2006; 27: 432-7.
46. Florio P., Frigiola A., Battista R., et al. Activin A in asphyxiated full-term newborns with hypoxic ischemic encephalopathy. Front. Biosci. 2010; 2: 36-42.
47. Di Iorio R., Marinoni E., Gazzolo D., et al. Maternal nitric oxide supplementation increases adrenomedullin concentrations ingrowth retarded fetuses. Gynecol Endocrinol. 2002; 16: 187-92.
48. Florio P., Abella R., Marinoni E., et al. Adrenomedullin blood concentrations in infants subjected to cardiopulmonary bypass: correlation with monitoring parameters and prediction of poor neurological outcome. Clin Chem. 2008; 54: 202-6.
49. Pahlman S., Esscher T., Bergvall P., Odelstad L. Purification and characterization of human neuron-specific enolase: radioimmunoassay development. Tumour Biol. 1984; 5: 127-39.
50. Basile A.M., Fusi C., Conti A.A., et al. S-100 protein and neuron specific enolase as markers of subclinical cerebral damage after cardiac surgery: preliminary observation of a 6-month follow-up study. Eur Neurol. 2001; 45: 151-9.
51. Fogel W., Krieger D., Veith M., et al. Serum neuron-specific enolase as early predictor of outcome after cardiac arrest. Crit Care Med. 1997; 25: 1133-8.
52. Garcia-Alix A., Cabanas F., Pellicer A., et al. Neuron-specific enolase and myelin basic protein: relationship of cerebrospinal fluid concentrations to the neurologic condition of asphyxiated full-term infants. Pediatrics. 1994; 93: 234-40.
53. Celtik C., Acunas B., Oner E., et al. Neuron-specific enolase as a marker of the severity and outcome of hypoxic encephalopathy. Brain Dev. 2004; 26: 398-402.
54. Nagdyman N., Komen W., Ko H., et al. Early biochemical indicators of hypoxic ischemic encephalopathy after birth asphyxia. Pediatr Res. 2001; 49: 502-6.
55. Roka A., Kelen D., Halasz J., et al. Serum S100B and neuron-specific enolase levels in normothermic and hypothermic infants after perinatal asphyxia. Acta Paediatr. 2012; 101: 1184-8.
56. Bracci R., Perrone S., Buonocore G. The timing of neonatal brain damage. Biol Neonate. 2006; 90: 145-55.
57. Perrone S., Tataranno M.L., Stazzoni G., Buonocore G. Biomarkers of oxidative stress in fetal and neonatal diseases. J Matern Fetal Neonatal Med. 2012; 25: 2575-8.
58. Perrone S., Tataranno M.L., Stazzoni G., et al. Oxidative injury in neonatal erythrocytes. J Matern Fetal Neonatal Med. 2012; 25: 104-8.
59. Blennow M., Rosengren L., Jonsson S., et al. Glial fibrillary acidic protein is increased in the cerebrospinal fluid of preterm infants with abnormal neurological findings. Acta Paediatr. 1996; 85: 485-9.
60. Ennen C.S., Huisman T.A., Savage W.J., et al. Glial fibrillary acidic protein as a biomarker for neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy-treated with whole-body cooling. Am J Obstet Gynecol. 2011; 205: 251-7.
61. Tenhunen R., Marver H.S., Schmid R. The enzymatic conversion of heme to bilirubin by microsomal heme oxygenase. Proc Natl Acad Sci USA. 1968; 61: 748-55.
62. Denschlag D., Marculescu R., Unfried G., et al. The size of a microsatellite polymorphism of the haem oxygenase 1 gene is associated with idiopathic recurrent miscarriage. Mol Hum Reprod. 2004; 10: 211-4.
63. Bainbridge S.A., Smith G.N. HO in pregnancy. Free Radic Biol Med. 2005; 38: 979-88.
64. Shrestha Dangol D., Chen H.P. Role of hemeoxygenase-2 in pregnancy-induced hypertension. Int J Gynaecol Obstet. 2004; 85: 44-6.
65. Barber A., Robson S.C., Myatt L., et al. Heme oxygenase expression in human placenta and placental bed: reduced expression of placenta endothelial HO-2 in preeclampsia and fetal growth restriction. FASEB J. 2001; 15: 1158-68.
66. Eide I.P., Isaksen C.V., Salvesen K.A., et al. Decidual expression and maternal serum levels of heme oxygenase 1 are increased in preeclampsia. Acta Obstet Gynecol Scand. 2008; 87: 272-9.
67. Tanaka Y., Maher J.M., Chen C., Klaassen C.D. Hepatic ischemia reperfusion induces renal heme oxygenase-1 via NF-E2-relatedfactor 2 in rats and mice. Mol Pharmacol. 2007; 71: 817-25.
68. Fujita T., Toda K., Karimova A., et al. Paradoxical rescue from ischemic lung injury by inhaled carbon monoxide driven by derepression of fibrinolysis. Nat Med. 2001; 7: 598-604.
69. Li Volti G., Galvano F., Frigiola A., et al. Potential immunoregulatory role of heme oxygenase-1 in human milk: a combined biochemical and molecular modeling approach. J Nutr Biochem. 2010; 21: 865-71.
70. Ambros V. microRNAs: tiny regulators with great potential. Cell. 2001; 107: 823-6.
71. Bartel D.P. MicroRNAs: genomics, biogenesis, mechanism, and function. Cell. 2004; 116: 281-97.
72. Looney A.-M., et al. Down-regulation of umbilical cord blood levels of miR-374a in neonatal hypoxic ischemic encephalopathy. J. Pediatr. 2015; 167: 269-73.
73. Whitehead C., et al. Quantifying circulating hypoxia-induced RNA transcripts in maternal blood to determine in utero fetal hypoxic status. BMC Med. 2013, 11: 256.
74. Sannia A., Risso F.M., Zimmermann L.J., et al. S100B urine concentrations in late preterm infants are gestational age and gender dependent. Clin Chim Acta. 2013; 417: 31-4.
75. Serpero L.D., et al. J Matern Fetal Neonatal Med. 2013; 26 (S2): 44-9. Downloaded by [Federal State Institution] at 04:02 11 July 2016.
76. Risso F.M., Serpero L.D., Zimmermann L.J., et al. Urine S100 BB and A1B dimers are valuable predictors of adverse outcome in full-term asphyxiated infants. Acta Paediatr. 2013; 102 (10): e467.
77. Florio P., Marinoni E., Di Iorio R., et al. Urinary S100B protein concentrations are increased in intrauterine growth-retarded newborns. Pediatrics. 2006; 118: e747-54.
78. Florio P., Michetti F., Bruschettini M., et al. Amniotic fluid S100B protein in mid-gestation and intrauterine fetal death. Lancet. 2004; 364: 270-2.
79. Gazzolo D., Serpero L.D., Frigiola A., et al. Antenatal glucocorticoids supplementation and central nervous system development. Curr Drug Metab. 2013; 14: 160-6.
80. Risso F.M., Sannia A., Gavilanes D.A., et al. Biomarkers of brain damage in preterm infants. J Matern Fetal Neonatal Med. 2012; 25: 101-4.
81. Michetti F., Corvino V., Geloso M.C., et al. The S100B protein in biological fluids: more than a lifelong biomarker of brain distress. J Neuro-chem. 2012; 120: 644-59.
82. Atzori L., Antonucci R., Barberini L., et al. 1H NMR-based me-tabolomic analysis of urine from preterm and term neonates. Front Biosci (Elite Ed). 2011; 3: 1005-12.
83. Dessi A., Atzori L., Noto A., et al. Metabolomics in newborns with intrauterine growth retardation (IUGR): urine reveals markers of metabolic syndrome. J Matern Fetal Neonatal Med. 2011; 24: 35-9.
84. Roka A., Kelen D., Halasz J., et al. Serum S100B and neuron-specific enolase levels in normothermic and hypothermic infants after perinatal asphyxia. Acta Paediatr. 2012; 101: 319-23.
