Научная статья на тему 'Биологический материал, необходимый для приготовления микропрепаратов, в диагностике инфекционных и паразитарных заболеваний человека'

Биологический материал, необходимый для приготовления микропрепаратов, в диагностике инфекционных и паразитарных заболеваний человека Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
472
57
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ИНФЕКЦИОННЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ / ПАРАЗИТАРНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ / ДИАГНОСТИКА / БИОЛОГИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ / іНФЕКЦіЙНі ЗАХВОРЮВАННЯ / ПАРАЗИТАРНі ЗАХВОРЮВАННЯ / ДіАГНОСТИКА / БіОЛОГіЧНИЙ МАТЕРіАЛ / INFECTIOUS DISEASES / PARASITIC DISEASES / DIAGNOSIS / BIOLOGICAL MATERIAL

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Аракельян Р.С., Стулова М.В., Карпенко С.Ф., Гасанова Э.Д., Окунская Е.И.

Материалом для микроскопического исследования являлись кровь, костный мозг, ликвор, пунктаты лимфатических узлов, фекалии, дуоденальное содержимое и желчь, моча, мокрота, отделяемое мочеполовых путей, биоптаты тканей, мазки со слизистой оболочки ротовой полости, небных миндалин, носа и др. Окончательный диагноз гельминтозов может быть установлен только на основании положительных данных лабораторных исследований. Основным методом лабораторной диагностики этих инвазий является обнаружение яиц или личинок гельминтов. Материалом для исследований служат испражнения, содержимое двенадцатиперстной кишки, кровь, мокрота, биопсированные ткани и другие материалы. Препараты из крови для микроскопии готовят обычно на предметных стеклах, от их качества и чистоты в огромной степени зависит эффективность обнаружения и идентификации кровепаразитов. Препараты от больных лейшманиозом исследуют под иммерсией, лейшмании в них располагаются вне клеток, но нередко они обнаруживаются в цитоплазме мононуклеаров и нейтрофильных лейкоцитов. Число лейшманий в одной клетке может достигать нескольких десятков. Они имеют форму мелких овальных или круглых телец размером от 2,5 до 5 мкм. Цитоплазма окрашивается в сероватоголубой, ядро в красный или краснофиолетовый, кинетопласт в темнофиолетовый цвет. Наличие ядра и кинетопластов главный признак, отличающий лейшманию от тромбоцитов, кокков, дрожжевых клеток. При лабораторном исследовании (окраска по Романовскому Гимзе) микрофилярии окрашиваются в темноголубой цвет и напоминают извитые волокна. Внутри личинок хорошо просматривается ядерная зернистость. Возбудители паразитарных и инфекционных болезней также могут находиться и в других биологических субстанциях организма человека (моча, спинномозговая жидкость, костный мозг, отделяемое мочеполовых органов, дуоденальное содержимое, желчь, мокрота).

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Biological material for microslides to diagnose human infectious and parasitic diseases

The material for microscopic examination were blood, bone marrow, cerebrospinal fluid, lymph node puncture, feces, duodenal contents and bile, urine, sputum, urogenital tract secretions, tissue biopsies, smears from the mucous membranes of the mouth, tonsils, nose, etc. The final diagnosis of helminth infections can be established only on the basis of the positive findings of laboratory research. The basic method of laboratory diagnosis of these invasions is the detection of helminth eggs or larvae. The material for the research is the feces, the contents of the duodenum, blood, sputum, tissue biopsies, and other materials. Slides of blood microscopy are usually prepared on glass slides, their quality and purity greatly impact the effectiveness of detection and identification of blood parasites. The material from leishmaniasis patients is studied under immersion; Leishmania locate mainly outside the cell, but often they are found in the cytoplasm of mononuclear cells and neutrophils. The number of Leishmania in a single cell can reach several tens. They are in the form of small round or oval cells ranging in size from 2.5 to 5 microns. The cytoplasm is grayblue colored, the nucleus are red or redpurple, kinetoplasts are dark purple color. The presence of a nucleus and kinetoplasts is the main feature that distinguishes Leishmania from platelets, cocci, and yeast cells. In a laboratory study (painting by Romanovsky Giemsa), microfilaria are colored in dark blue and resemble crimped fibers. Inside the larvae nuclear grain is easy visible. The causative agents of parasitic and infectious diseases can also be found in other biological substances of the human body: the urine, cerebrospinal fluid, bone marrow, secretion of urinary organs, duodenal contents, bile, and phlegm.

Текст научной работы на тему «Биологический материал, необходимый для приготовления микропрепаратов, в диагностике инфекционных и паразитарных заболеваний человека»

На допомогу практикуючому лкарю

To Help Practitioner

УДК 616.9 DOI: 10.22141/2312-413x.4.13.2016.91450

АРАКЕЛЬЯН Р.С.1, СТУЛОВА М.В.1, КАРПЕНКО С.Ф.1, ГАСАНОВА Э.Д.2, ОКУНСКАЯ Е.И.3, ГЕРАСИНА Н.И.4, АДАЙБАЕВА В.Ж.5, КУЗИНА А.Ю.6

1ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Астрахань, Россия

2 ГБУЗ АО «Областная инфекционная клиническая больница им. А.М. Ничоги», г. Астрахань, Россия

3 ГБУЗ АО «Детская городская поликлиника № 3», г. Астрахань, Россия

4 ГБУЗ АО «Центр медицины катастроф и скорой медицинской помощи», г. Астрахань, Россия

5 ГБУЗ АО «Александро-Мариинская областная клиническая больница», г. Астрахань, Россия

6 ГБУЗ АО «Областная детская клиническая больница им. Н.Н. Силищевой», г. Астрахань, Россия

БИОЛОГИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ, НЕОБХОДИМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ МИКРОПРЕПАРАТОВ,

В ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННЫХ И ПАРАЗИТАРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЧЕЛОВЕКА

Мнфектология

Резюме. Материалом для микроскопического исследования являлись кровь, костный мозг, ликвор, пун-ктаты лимфатических узлов, фекалии, дуоденальное содержимое и желчь, моча, мокрота, отделяемое мочеполовых путей, биоптаты тканей, мазки со слизистой оболочки ротовой полости, небных миндалин, носа и др. Окончательный диагноз гельминтозов может быть установлен только на основании положительных данных лабораторных исследований. Основным методом лабораторной диагностики этих инвазий является обнаружение яиц или личинок гельминтов. Материалом для исследований служат испражнения, содержимое двенадцатиперстной кишки, кровь, мокрота, биопсированные ткани и другие материалы. Препараты из крови для микроскопии готовят обычно на предметных стеклах, от их качества и чистоты в огромной степени зависит эффективность обнаружения и идентификации кровепаразитов. Препараты от больных лейшманиозом исследуют под иммерсией, лейшмании в них располагаются вне клеток, но нередко они обнаруживаются в цитоплазме мононуклеаров и нейтрофиль-ных лейкоцитов. Число лейшманий в одной клетке может достигать нескольких десятков. Они имеют форму мелких овальных или круглых телец размером от 2,5 до 5 мкм. Цитоплазма окрашивается в серовато-голубой, ядро — в красный или красно-фиолетовый, кинетопласт — в темно-фиолетовый цвет. Наличие ядра и кинетопластов — главный признак, отличающий лейшманию от тромбоцитов, кокков, дрожжевых клеток. При лабораторном исследовании (окраска по Романовскому — Гимзе) микрофиля-рии окрашиваются в темно-голубой цвет и напоминают извитые волокна. Внутри личинок хорошо просматривается ядерная зернистость. Возбудители паразитарных и инфекционных болезней также могут находиться и в других биологических субстанциях организма человека (моча, спинномозговая жидкость, костный мозг, отделяемое мочеполовых органов, дуоденальное содержимое, желчь, мокрота). Ключевые слова: инфекционные заболевания; паразитарные заболевания; диагностика; биологический материал

Инфекционные и паразитарные болезни на протяжении многих столетий были и остаются наиболее опасными болезнями человеческого организма из-за их способности вовлечь в процесс большое число здоровых людей в течение короткого периода времени.

Инфекционные и паразитарные заболевания относятся к числу наиболее распространенных недугов человека. Характеризуясь различным по степени тяжести течением, большинство из них при правильном и своевременном лечении способно заканчиваться полным

© «Актуальная инфектология», 2016 © «Actual Infectology», 2016

© Издатель Заславский А.Ю., 2016 © Publisher Zaslavsky O.Yu., 2016

Для корреспонденции: Аракельян Рудольф Сергеевич, кандидат медицинских наук, доцент кафедры инфекционных болезней и эпидемиологии, ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, ул. Бакинская, 121, г. Астрахань, 414024, Россия; e-mail: rudolf_astrakhan@rambler.ru

For correspondence: Rudolf Arakeluan, Candidate of Medical Sciences, Assistant Professor of the Department of infection diseases and epidemiology, Astrakhan State Medical University, T. Bakinskaya st., 121, Astrakhan, 414024, Russia; e-mail: rudolf_astrakhan@rambler.ru

22

Актуальна ¡нфектолопя, р-ISSN 2312-413X, е-ISSN 2312-4148

№ 4(13) • 2016

выздоровлением, так как лекарственные препараты действуют непосредственно на причину болезни — микроорганизм. В этой связи качество и оперативность диагностики инфекций приобретают особое значение [4].

Лабораторные исследования играют важную роль в установлении диагноза инфекционных и паразитарных болезней, при назначении этиотропной терапии, проведении контроля за эффективностью лечения. Процесс специфической лабораторной диагностики основан на выявлении возбудителя и ответной реакции организма человека в ходе инфекционного процесса. Он состоит из трех этапов: сбора материала, транспортировки и его исследования в лаборатории. К проведению каждого этапа предъявляют определенные требования, от соблюдения которых зависит эффективность лабораторной диагностики. Задача врача заключается в правильном выборе метода исследования и грамотной оценке его результатов [4].

Материалом для микроскопического исследования являлись кровь, костный мозг, ликвор, пунктаты лимфатических узлов, фекалии, дуоденальное содержимое и желчь, моча, мокрота, отделяемое мочеполовых путей, биоптаты тканей, мазки со слизистой оболочки ротовой полости, небных миндалин, носа и др.

Для обнаружения кровепаразитов, например простейших (малярийные плазмодии, трипаносомы, лейшмании, бабезии) и гельминтов (микрофилярии), исследуют препараты «тонкий мазок» и/или «толстая капля» крови [4].

Спинномозговую жидкость [4] для микробиологического исследования отбирают в стерильную пробирку во время люмбальной пункции. Для приготовления препарата используется осадок, образующийся спонтанно или в результате центрифугирования.

Мочу [4] для микроскопического исследования собирают в стерильную посуду после тщательного туалета наружных половых органов. Для приготовления препарата используют осадок мочи.

Микроскопическому исследованию подвергаются нативные (нефиксированные, неокрашенные) и окрашенные препараты. В первом случае выявляются живые микроорганизмы в препарате «висячая капля» или «раздавленная капля», оцениваются подвижность и морфологические свойства возбудителя.

Наиболее широко применяется микроскопия микроорганизмов в окрашенном состоянии, в частности для диагностики паразитарных болезней (малярия, амебиаз, лямблиоз, лейшманиоз, гельминтозы). Для окраски препаратов используют ориентировочные, специальные и дифференцирующие методы. Ориентировочная окраска позволяет оценить общую морфологию микроорганизма. С этой целью применяют стандартные красители — фуксин или метиленовый синий [2].

Окончательный диагноз гельминтозов может быть установлен только на основании положительных данных лабораторных исследований. Основным методом лабораторной диагностики этих инвазий является обнаружение яиц или личинок гельминтов [4].

Материалом для исследований служат испражнения, содержимое двенадцатиперстной кишки, кровь, мокрота, биопсированные ткани и другие материалы.

Сбор материала для исследования производят в чистую стеклянную или пластмассовую посуду, на которую наклеивают этикетку с указанием необходимых сведений. При массовом обследовании допускается сбор фекалий в стаканчики из парафинированной бумаги и пр.

Испражнения для анализов должны доставляться в лабораторию не позднее одних суток после их выделения, а при подозрении на стронгилоидоз — немедленно. При невозможности доставить фекалии в указанные сроки их следует смешивать с 2-5-кратным количеством консервирующих жидкостей и хранить до исследования в охлажденном виде.

Кровь — жидкая ткань организма, в компонентах которой могут паразитировать простейшие (малярийные плазмодии, трипаносомы, лейшмании, бабезии) и гельминты (филярии, шистосомы). Для некоторых из них кровь является основным местом обитания, и они составляют группу кровепаразитов. Таковы малярийные плазмодии, бабезии, которые паразитируют в эритроцитах, и трипаносомы, обитающие в плазме крови. Лейшмании и токсоплазмы обитают в тканевых макрофагах и в кровеносном русле появляются редко. Что касается гельминтов, то взрослые шисто-сомы постоянно живут в венозных сосудах, отрождая здесь яйца. Другие гельминты — филярии основным местом локализации выбирают лимфатические сосуды, а личинки (микрофилярии), которые они отро-ждают, проникают в плазму и длительное время в ней сохраняются [1, 3].

Для обнаружения кровепаразитов исследуют цельную кровь, приготавливая из нее тонкий мазок и толстую каплю. Эти препараты исследуют в нативном (трипаносомы, микрофилярии тропических гель-минтозов) или окрашенном (малярийные плазмодии, лейшмании, микрофилярии) виде.

Препараты из крови для микроскопии готовят обычно на предметных стеклах, от их качества и чистоты в огромной степени зависит эффективность обнаружения и идентификации кровепаразитов.

Для лабораторного подтверждения диагноза малярии из крови больного готовят тонкий мазок и толстую каплю, в которой вероятность обнаружения возбудителя большая (одно поле зрения толстой капли соответствует 50 полям тонкого мазка). Для идентификации возбудителя исследуется и мазок.

При изготовлении мазков палец поворачивают проколом вверх. К выступившей капле крови прикасаются нижней поверхностью предметного стекла, отступив на 1,5—2 см от узкого края. Затем стекло переворачивают, берут в левую руку, а в правую — предметное стекло со шлифовальными краями и обломанными уголками и его узким краем под углом в 45° касаются капли крови. Кровь растекается по краю шлифованного стекла. Мазок должен быть тонким (эритроциты не должны налегать друг на друга). Затем мазок высушивают на

воздухе, фиксируют 15 мин в 96° этиловом спирте или 20 мин в смеси Никифорова (в равных соотношениях этиловый спирт и эфир). Фиксированные мазки высушивают на воздухе и окрашивают 30—45 мин по методу Романовского — Гимзе. В мазке крови плазмодии обнаруживаются в эритроцитах, причем цитоплазма паразитов окрашивается в голубой или серовато-синий цвет, а ядро — в различные оттенки красного цвета. В цитоплазме плазмодия на стадии собственного ши-зонта появляется пигмент — мелкие зернышки коричневого или темно-коричневого цвета. Тонкий мазок крови содержит фиксированные эритроциты, располагающиеся в один слой. Находящиеся в эритроцитах плазмодии хорошо визуализируются, что дает возможность правильно установить вид возбудителя и стадию его развития [3].

При изготовлении толстых капель палец поворачивают проколом вниз. К выступающим каплям крови подносят предметное стекло, на которое берут 2—3 капли крови и затем углом другого предметного стекла кровь размазывают, чтобы получить на стекле овал диаметром около 1 см или полосу длиной 2—3 см. Слой крови не должен быть слишком толстым. Затем мазок сушат на воздухе, можно в термостате (30—35 °С). После высушивания окрашивают в течение 40—45 мин по Романовскому — Гимзе без предварительной фиксации. При этом происходит выщелачивание гемоглобина из эритроцитов, и одновременно окрашиваются лейкоциты, кровяные пластинки и плазмодии. Это повышает чувствительность метода, так как позволяет просматривать более толстый слой крови. Малярийные плазмодии в толстой капле выглядят иначе, чем в мазке, потому что в нефиксированном виде плазмодии подвергаются деформации и лежат в поле зрения свободно, паразиты уменьшаются в размерах. Окрашиваются плазмодии в толстой капле так же, как и в мазке.

Толстую каплю готовят следующим образом. На предметное стекло наносят 2—3 капли крови и размазывают ее до диаметра десятикопеечной монеты. Кровь подсушивают на воздухе, затем к ней добавляют дистиллированную воду для удаления из эритроцитов гемоглобина, вновь подсушивают, окрашивают по Романовскому — Гимзе на протяжении 45 мин, после чего краску смывают, препараты подсушивают и подвергают микроскопии [1].

Микроскопируя препараты, распознают вид плазмодия. Эритроциты, в которых находятся возбудители трехдневной малярии, увеличены в размерах (в 1,5 раза), бледнее окрашены по сравнению с эритроцитами, свободными от плазмодиев. В пораженных плазмодиями эритроцитах появляется нежная, равномерно красного цвета зернистость, распределяющаяся по всему эритроциту (шюффнеровская зернистость). Шизонт амебовидной формы, стадия морулы имеет вид тутовой ягоды. Эритроциты, которые содержат возбудителей четырехдневной малярии, в размерах не увеличиваются. В первые 10 ч паразит имеет форму кольца, меньших размеров, чем возбудитель трехдневной малярии, затем шизонт принимает форму ленты,

расположенной поперек эритроцита. В этой стадии паразит занимает 1/0—1/3 объема эритроцита, ядро лежит на краю ленты. Стадия морулы имеет форму розетки и включает 6—8—10 мерозоитов. Пигмент золотисто-желтого цвета [1].

Морфология четырех видов малярийных паразитов человека достаточно специфична, чтобы их можно было идентифицировать в мазках крови. Инфицированные P.vivax эритроциты увеличены в размере, бледно-окрашенные, содержат диффузно расположенные ярко-красные пятнышки (зерна Шюффнера); форма и размеры паразитов при этом могут быть самыми разнообразными; при малярии инфицированные эритроциты имеют овальную форму, в остальном они похожи на эритроциты, пораженные возбудителями трехдневной малярии (P.vivax). Размер эритроцитов, инфицированных возбудителем четырехдневной малярии (P.malariae), не изменен, они не содержат зернистости. Паразиты часто принимают лентовидную форму, причем мерозоиты располагаются в виде розетки вокруг находящегося в центре пигмента; возбудители тропической малярии кольцевидной формы, очень мелкие, содержат одно или, чаще, два комочка хроматина, распластаны, как правило, по краю эритроцита. В мазках периферической крови обнаруживаются только кольцевидные стадии бесполых форм паразита, причем могут встречаться случаи присутствия в одном эритроците нескольких микроорганизмов. Гамонты отличаются более крупными размерами, имеют бана-новидную форму. При уровне паразитов выше 2 % есть все основания предполагать наличие тропической малярии [3].

Форма и размеры эритроцитов при тропической малярии не изменяются. В периферической крови взрослые шизонты и формы их деления не встречаются, так как эти стадии происходят в кровеносных капиллярах внутренних органов, мозга пристеночно. Это самый мелкий паразит из всех возбудителей малярии. В стадии деления он не занимает диаметра эритроцита. В периферической крови можно обнаружить юные шизонты в виде колец, по 2—4 в одном эритроците, и половые клетки. В эритроцитах с паразитами появляется грубая зернистость в виде пятен неправильной формы пурпурно-красного цвета (мауреровская пятнистость). Диагноз ставится на основании обнаружения в периферической крови юных шизонтов (по 2—3 в одном эритроците) или взрослых гаметоцитов, которые имеют вид полулуния либо сигары. Ядро в этих клетках расположено посередине и окружено зернами пигмента черно-коричневого цвета.

Лейшмании. Это группа жгутиковых простейших, вызывающих различные формы лейшманиозов. В крови обычно обнаруживаются только висцеро-подобные лейшмании, возбудители висцеральных лейшманиозов [4].

Препараты от больных лейшманиозом исследуют под иммерсией, лейшмании в них располагаются вне клеток, но нередко они обнаруживаются в цитоплазме мононуклеаров и нейтрофильных лейкоцитов. Число

24

Актуальна Ыфектолопя, р-ISSN 2312-413X, е-ISSN 2312-4148

№ 4(13) • 2016

лейшманий в одной клетке может достигать нескольких десятков. Они имеют форму мелких овальных или круглых телец размером от 2,5 до 5 мкм. Цитоплазма окрашивается в серовато-голубой, ядро — в красный или красно-фиолетовый, кинетопласт — в темно-фиолетовый цвет. Наличие ядра и кинетопластов — главный признак, отличающий лейшманию от тромбоцитов, кокков, дрожжевых клеток.

Микрофилярии. Большая группа тропических гель-минтозов — филярий, вызывающих у человека 8 нозо-форм филяриадозов, взрослые паразиты обитают в органах и тканях и недоступны для идентификации. Их личинки (микрофилярии) концентрируются в крови или коже [4].

При лабораторном исследовании (окраска по Романовскому — Гимзе) микрофилярии окрашиваются в темно-голубой цвет и напоминают извитые волокна. Внутри личинок хорошо просматривается ядерная зернистость.

Исследование кала. Деревянной палочкой или спичкой из разных мест доставленной пробы берут комочек кала величиной со спичечную головку и тщательно растирают его на предметном стекле с несколькими каплями 50% раствора глицерина до получения полупрозрачного и равномерного мазка, который занимает почти всю поверхность предметного стекла. Грубые кусочки непереваренной клетчатки удаляют. Обычно мазки просматриваются при малом увеличении микроскопа (7 х 8) без покровного стекла. В правильно приготовленном нативном мазке яйца глистов обычно хорошо видны под малым увеличением микроскопа.

Фекалии — самый обильный и сложный по составу экскрет человеческого организма. В нем при лабораторном исследовании могут быть обнаружены практически все гельминты и патогенные кишечные простейшие, идентификация которых не вызывает особых трудностей у грамотного специалиста.

Возбудители паразитарных и инфекционных болезней также могут находиться и в других биологических субстанциях организма человека: моча, спинномозговая жидкость, костный мозг, отделяемое мочеполовых органов, дуоденальное содержимое, желчь, мокрота.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии какого-либо конфликта интересов при подготовке данной статьи.

Список литературы

1. Беляев А.Е., Званцов А.Б., Авдюхина Т.И. Практическое руководство по эпидемиологическому надзору для стран Европейского региона, столкнувшихся с возвратом малярии. — Копенгаген, 2006. — С. 22-25.

2. Лысенко А.Я., Горбунова Ю.П., Авдюхина Т.И., Константинова Т.Н. Лабораторная диагностика кишечных прото-зоозов. Учебное пособие. — М., 2004. — 44 с.

3. Лысенко А.Я., Кондрашин А.В., Ежов М.Н. Маляриоло-гия. ВОЗ. — Копенгаген, 2003. — С. 213-225.

4. Лысенко А.Я., Красильников А.А. Лабораторные методы диагностики паразитарных болезней. — М, 1999. — 61 с.

Получено 02.11.2016 ■

Аракельян Р.С.1, СтуловаМ.В.1, Карпенко С.Ф.1, Гасанова £.Д.2, Окунська О.1.3, Герасна Н.1.4, Адайбаева В.Ж.5, Кузна А.Ю.6

1ФДБОУ ВО «Астраханський державний медичний у^верситет» МОЗ РосП, м. Астрахань, Ро&я

2ДБУЗ АТ«Обласна нфекцйна l<лiнiчналкарня iM. А.М. Нiчоги», м. Астрахань, Ро&я

3 ДБУЗ АТ«Дитяча мська полклнка № 3», м. Астрахань, Роая

4 ДБУЗ АТ «Центр медицини катастроф та швидкоi медичноi допомоги», м. Астрахань, Ро&я

5 ДБУЗ АТ«Александро-МарИнська обласна клiнiчна лкарня», м. Астрахань, Росiя

6 ДБУЗ АТ «Обласна дитяча клiнiчна лкарня iм. Н.М. Силщевоi», м. Астрахань, Росiя

БЮЛОПЧНИЙ МАТЕР1АЛ, НЕОБХ1ДНИЙ ДЛЯ ПРИГОТУВАННЯ М1КРОПРЕПАРАТ1В, У Д1АГНОСТИЦ11НФЕКЦ1ЙНИХ I ПАРАЗИТАРНИХ ЗАХВОРЮВАНЬ ЛЮДИНИ

Резюме. Матерiалом для мжроскошчного досладження були кров, юстковий мозок, лшвор, пунктати лiмфатичних вузлiв, фекалй, дуоденальний вмют i жовч, сеча, харкотиння, видь лення сечостатевих шляхiв, бюптати тканин, мазки зi сли-зово! оболонки ротово! порожнини, пщнебшних мигдалин, носа та ш. Остаточний даагноз гельмiнтозiв може бути вста-новлений тшьки на пiдставi позитивних даних лабораторних дослщжень. Основним методом лабораторно! дiагностики цих швазш е виявлення яець або личинок гельмшпв. Матерiалом для дослщжень служать випорожнення, вмют дванадцятипа-ло! кишки, кров, харкотиння, бюпсоваш тканини та шш1 ма-терiали. Препарати з кровi для мшроскопй готують зазвичай на предметному скт, вщ його якосп i чистоти значною мiрою залежить ефектившсть виявлення та щентифжаци кровепара-зийв. Препарати вщ хворих на лейшманюз дослщжують пщ iмерсiею, лейшмани в них розташовуються поза клнинами, але нерщко вони виявляються в цитоплазмi мононуклеарш i

нейтрофшьних лейкоцийв. Число лейшманш в однш клггиш може досягати деклькох десятков. Вони мають форму д^бних овальних або круглих тiлець розмiром вщ 2,5 до 5 мкм. Цитоплазма забарвлюеться в мрувато-блакитний, ядро — у чер-воний або червоно-фюлетовий, кинетопласт — у темно-фюле-товий колiр. Наявнiсть ядра i кинетопласт — головна ознака, що вщрзняе лейшманiю вщ тромбоцитiв, кок1в, дргаджових клiтин. При лабораторному дослiдженнi (забарвлення за Ро-мановським — Пмзою) мiкрофiлярii фарбуються в темно-блакитний колiр i нагадують покрученi волокна. Усередиш личинок добре проглядаеться ядерна зернистють. Збудники паразитарних i шфекцшних хвороб також можуть перебувати й в шших бiологiчних субстанц1ях оргашзму людини (сеча, спинномозкова рiIдина, юстковий мозок, видшення сечостатевих оргатв, дуоденальний вмiст, жовч, мокротиння). Ключовi слова: iнфекдiйнi захворювання; паразитарнi за-хворювання; дiагностика; бiологiчний матерiал

Arakelian R.S.1, Stulova M.V.1, Karpenko S.F.1, Gasanova E.D.2, Okunskaia Ye.I.3, GerasinaN.I.4, Adaidaeva V.Zh.5, Kuzina A.Yu.6

1 FSFEI HE «Astrakhan State Medical University»» of MoH of RF, Astrakhan, Russia 2SFHCI PC «Nichoga Regional Clinical Hospital of Infectious Diseases», Astrakhan, Russia 3 SFHCI PC «Children's City Outpatient Clinic», Astrakhan, Russia

4SFHCI PC «Center of Medicine of Disaster and emergency Medicine», Astrakhan, Russia

5 SFHCI PC «Aleksandro-Mariinskaia Regional Clinical Hospital», Astrakhan, Russia

6 SFHCI PC «Silischeva Children's Clinical Hospital», Astrakhan, Russia

BIOLOGICAL MATERIAL FOR MICROSLIDES TO DIAGNOSE HUMAN INFECTIOUS AND PARASITIC DISEASES

Abstract. The material for microscopic examination were blood, bone marrow, cerebrospinal fluid, lymph node puncture, feces, duodenal contents and bile, urine, sputum, urogenital tract secretions, tissue biopsies, smears from the mucous membranes of the mouth, tonsils, nose, etc. The final diagnosis of helminth infections can be established only on the basis of the positive findings of laboratory research. The basic method of laboratory diagnosis of these invasions is the detection of helminth eggs or larvae. The material for the research is the feces, the contents of the duodenum, blood, sputum, tissue biopsies, and other materials. Slides of blood microscopy are usually prepared on glass slides, their quality and purity greatly impact the effectiveness of detection and identification of blood parasites. The material from leishmaniasis patients is studied under immersion; Leishmania locate mainly outside the cell, but often they are found in the cytoplasm of mononuclear

cells and neutrophils. The number of Leishmania in a single cell can reach several tens. They are in the form of small round or oval cells ranging in size from 2.5 to 5 microns. The cytoplasm is gray-blue colored, the nucleus are red or red-purple, kinetoplasts are dark purple color. The presence of a nucleus and kinetoplasts is the main feature that distinguishes Leishmania from platelets, cocci, and yeast cells. In a laboratory study (painting by Romanovsky — Giemsa), microfilaria are colored in dark blue and resemble crimped fibers. Inside the larvae nuclear grain is easy visible. The causative agents of parasitic and infectious diseases can also be found in other biological substances of the human body: the urine, cerebrospinal fluid, bone marrow, secretion of urinary organs, duodenal contents, bile, and phlegm.

Keywords: infectious diseases; parasitic diseases; diagnosis; biological material

26

AioyaAbHa iH$ei<rc>Aoriq, p-ISSN 2312-413X, e-ISSN 2312-4148

№ 4(13) • 2016

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.