CC BY
21
УДК 618.1+616.6]-002-0227-078. 33
БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВАГИНАЛЬНЫХ ЛАКТОБАЦИЛЛ И ФАКТОРЫ МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА ПРИ ИНФЕКЦИОННО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ПОЛОВОЙ СФЕРЫ
Е. В. Наумкина
Урогенитальные инфекции, вызванные условно-патогенными возбудителями, относясь к заболеваниям, передаваемым половым путем, по сути своей являются прежде всего дисбиотическими процессами, и актуальность их изучения определяется широким распространением, возникновением зачастую в молодом возрасте и выраженным влиянием на репродуктивное здоровье [1, 2].
Ранее нами было показано, что вероятность возникновения дисбиотических нарушений, вариант изменения вагинального микробиоценоза и тяжесть процесса находятся в определенной зависимости от принадлежности к группам риска, связанным с возрастом, половым поведением, а также гормональным и иммунным статусом пациентки [3].
Степень компенсированности дисбиоти-ческих нарушений и клиническая манифестация патологического процесса находятся в определенной зависимости от сохранности облигатной микрофлоры, которая в свою очередь может зависеть от биологических характеристик вагинальных лактобактерий, определяющих их способность выживать в условиях патологических микробиоценозов.
Кроме того, противоинфекционная резистентность влагалищного биотопа связана со степенью иммунной дисфункции, в основном определяемой факторами местного иммунитета [4, 5, 6].
Целью настоящего исследования явилось изучение состояния факторов местного иммунитета влагалища в сопоставлении с некоторыми персистентными характеристиками облигатной микрофлоры при инфекцион-но-воспалительных заболеваниях половой сферы.
Комплексное микробиологическое исследование включало микроскопию вагинальных мазков, а также количественный посев на расширенный набор питательных сред, обеспечивающих выделение широкого круга условно-патогенных микроорганизмов (УПМ), Gardnerella vaginalis, дрожжеподобных грибов, урогенитальных мико- и уреаплазм, лактобактерий с инкубацией в аэробных и микроаэрофильных условиях.
Изучение факторов местного иммунитета влагалища было проведено у 79 больных. В качестве контроля обследовали 10 здоровых женщин репродуктивного возраста, не предъявляющих жалоб, у которых при микроскопии вагинальных мазков и при микробиологическом исследовании был определен нормоценоз.
Для этого использовали вагинальные смывы, полученные путем введения в задний свод влагалища 5 мл стерильного физраствора. Полученную смывную жидкость центрифугировали, в осадке подсчитывали число лейкоцитов в камере Горяева, а также для оценки клеточного звена иммунитета ставили реак-
зателей местного иммунитета влагалища от состояния вагинального микробиоценоза из обследованных больных были выделены следующие группы: I — нормоценоз (доминирование лактобацилл, отсутствие УПМ в высоких титрах); II — неспецифический вагинит (УПМ факультативно-анаэробной группы в ассоциациях в высоких титрах); III — бактериальный вагиноз (отсутствие или дефицит лактобацилл при значительном увеличении титров гарднерелл и облигатных анаэробов); IV — сочетанные нарушения микробиоценоза (различные варианты сочетаний бактериального вагиноза с неспецифическим вагинитом, урогенитальным кандидозом и т. п.). Результаты изучения факторов местного иммунитета в выделенных группах в сравнении с контрольной представлены в таблице 1. Статистическую значимость различий оценивали с помощью непараметрических методов (критерий Манна—Уитни).
Самые высокие уровни лизоцима и количественного содержания лейкоцитов в вагинальном смыве отмечены в группе больных с неспецифическим вагинитом.
Содержание лактоферрина оказалось значительно выше у больных с сочетанны-ми вариантами нарушений микробиоценоза
Таблица 1
Состояние факторов местного иммунитета влагалища в зависимости от варианта нарушения вагинального микробиоценоза
Показатель Неспецифический вагинит Бактериальный вагиноз Микст-инфекции Контроль
Лизоцим, мкг/мл 37,00±4,59 21,95±5,12 29,18±3,32 18,68±4,69
Лейкоциты, х109/л 25,2±6,97 13,73±6,1 13,14±5,31 9,63±2,1
Лактоферрин, нг/мл 143,9±30,4 178,33±14,97 ** 188,15±15,01 ** 107,9±20,73
Секреторный нг/мл 16,26±5,11 ** 37,18±6,55 ** 10,19±3,34 ** 0,93±0,29
Активность фагоцитоза 47,7±9,2 46,14±7,51** 49,51±6,93 ** 70,04±4,79
Фагоцитарное число 30' 2,1±0,61 2,05±0,8 ** 1,99±0,59 ** 3,48±0,87
Индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ) 1,13±0,32 1,04±0,19 1,0±0,21 1,24±0,42
Примечание. ** — /»<0,01.
цию фагоцитоза с культурой стафилококка с вычислением показателей фагоцитарной активности (ФА), фагоцитарного числа через 30 и 120 минут (ФЧ30 и ФЧ120) и индекса завершенности фагоцитоза (ИЗФ).
В надосадочной жидкости определяли иммуноферментным методом содержание лактоферрина с использованием набора реагентов «Лактоферрин-стрип» («Вектор-Бест», Новосибирск), секреторного иммуноглобулина А с использованием тест-систем «sIgA — ИФА-Бест», лизоцима по действию на тест-культуру Micrococcus luteus ATCC 15307.
Были изучены биологические свойства 90 штаммов лактобактерий, выделенных из вагинального отделяемого.
Антилизоцимную активность (АЛА) определяли по методике О. В. Бухарина (1989), в основу которой положен принцип «отсроченного антагонизма». Антилактоферрино-вую активность (АЛФА) определяли по методике И. В. Валышевой с соавт. (2003).
Адгезивные свойства изучали по методике В. И. Брилис с соавт. (1986). Нами был использован развернутый метод, рекомендованный авторами для изучения влияния различных факторов на процесс адгезии.
Для выявления зависимости уровня пока-
влагалища и бактериальным вагинозом. При бактериальном вагинозе отмечается также самое высокое содержание секреторного при неспецифическом вагините этот показатель несколько ниже и в четвертой группе самый низкий, хотя и существенно выше, чем в контроле. Во всех группах значительно снижена активность и интенсивность фаго-цитозы.
Также был проведен анализ степени влияния различных показателей состояния вагинального микробиоценоза (количественное содержание представителей нормальной и условно-патогенной микрофлоры, число участников микробных ассоциаций, высев клинически значимых возбудителей инфекций, передаваемых половым путем, и т. д.) на уровень показателей местного иммунитета. Была выявлена прямая корреляционная зависимость между числом условно-патогенных участников микробных ассоциаций и уровнем лактоферрина (г = 0,72; р<0,01), а также обратная зависимость между этим показателем и показателями активности и интенсивности фагоцитоза (г = —0,54 и г = —0,62 соответственно, р<0,05).
Далее нами было проведено изучение ряда биологических характеристик (адгезивной, антилизоцимной (АЛА), антилакто-ферриновой активности (АЛФА) 90 штаммов лактобактерий, выделенных от больных с различными вариантами нарушений вагинального микробиоценоза.
От больных с бактериальным вагинозом было выделено 14 штаммов лактобактерий; с урогенитальным кандидозом — 22 штамма; с неспецифическим вагинитом — 20 штаммов; и 34 штамма изученных лактобактерий были выделены от пациенток с нормоцено-зом вагинальной микрофлоры и составили контрольную группу.
При изучении адгезивных свойств было выявлено, что большинство штаммов, выделенных от пациенток контрольной груп-
пы, обладали средней степенью адгезивно-сти — индекс адгезивности составил 3,58+1,21. К среднеадгезивным относились также штаммы, выделенные при неспецифическом вагините,— 3,87+1,52. При бактериальном вагинозе и особенно при уроге-нитальном кандидозе индекс адгезивности оказался выше (4,4±1,81 и 5,0+1,43 соответственно), что позволило отнести изученные культуры к высокоадгезивным.
Большинство изученных культур обладали высоким уровнем антилизоцимной активности. При этом антилизоцимная активность лактобактерий, выделенных от больных с бактериальным вагинозом и урогениталь-ным кандидозом, оказалась ниже, чем в контрольной группе (6,0+1,74 и 7,33±1,01 в сравнении с 8,0+1,36 мкг), тогда как при неспецифическом вагините отмечалось увеличение значения этого признака у лактобакте-рий (9,0+0,34 мкг).
Довольно существенные различия выявлены при изучении антилактоферриновой активности лактобактерий, выделенных при вагинальных дисбиозах. Так, при бактериальном вагинозе антилактоферриновая активность лактобактерий оказалась значительно выше (108,99+16,3 нг), чем в контрольной группе (82,5+11,8 нг) (р<0,05), тогда как при урогенитальном кандидозе (70,67+12,01 нг) и неспецифическом вагините (64,9+14,9 нг) этот показатель существенно ниже (р<0,05).
Логично было бы предположить, что селекция штаммов лактобактерий с определенными персистентными характеристиками при вагинальных дисбиозах определяется концентрацией в вагинальном отделяемом инактивируемого фактора. Сопоставление полученных данных показывает, что более высокая концентрация лизоцима при неспецифических вагинитах определяет селекцию лактобактерий с выраженной антили-зоцимной активностью. При бактериальном вагинозе, когда регистрируется значитель-
ное увеличение содержания лактоферрина в вагинальном отделяемом, более высокие шансы на выживание получают лактобакте-рии с высоким уровнем антилактоферрино-вой активности.
Таким образом, проведенное исследование показало, что степень выраженности и характер местной иммунной реакции определяются видом нарушений вагинального микробиоценоза. Сохранность облигатной микрофлоры, влияющая на компенсирован-ность патологического процесса, зависит в свою очередь от биологических характеристик вагинальных лактобактерий, определяющих их способность выживать в условиях патологических микробиоценозов.
Библиографический список
1. Баскаков В. П., Кочеровец В. И, Цвелев Ю. В, Кира Е. Ф. Неклостридиальные анаэробные гнойно-септические заболевания женских половых органов//Неклостридиальная анаэробная инфекция.— Л., 1982.— С. 37— 41.
2. Краснопольский В. И, Кулаков В. И. Хирургическое лечение воспалительных заболеваний придатков матки.— М.: Медицина, 1984.— 159 с.
3. Наумкина Е. В. Эпидемиологические особенности урогенитальных инфекций, вызванных условно-патогенными возбудителями, при комплексном микробиологическом подходе к диагностике/ Е. В. Наумкина, Н. В. Рудаков//Омский науч. вестн.— 2006.— Т. 35.— № 1.— С. 70—73.
4. Микроэкология влагалища и факторы местного иммунитета при воспалительных заболеваниях половой сферы у подростков/Е. В. Наумкина [и др.]//Ом-
ский науч. вестн.— 2005.— Т. 33.— № 4.— С. 83—86.
5. Состояние вагинальной микрофлоры и факторы местного иммунитета влагалища при воспалительных заболеваниях половой сферы/£. В. Наумкина [и др.]//Бюл-летень ВСНЦ СО РАМН.— 2005.— Т. 45.— № 7.— С. 89—93.
6. Долгушина В. Ф. Диагностика, лечение воспалительных заболеваний нижнего отдела половых органов, прогнозирование и профилактика их осложнений у беременных. Автореф. дис. ... д-ра мед. наук.— Челябинск, 1991.
E. V. Naumkina
BIOLOGICAL PROPERTIES OF VAGINAL LACTOBACILLI AND LOCAL IMMUNITY FACTORS IN INFECTIOUS INFLAMMATORY DISEASES OF SEXUAL SPHERE
Status of reproductive microflora and local immunity factors of vagina compared to some biological characteristics of normal microflora in infectious inflammatory diseases of sexual sphere were studied. It was revealed that the degree of expression and character of local immune reaction are determined by the type of vaginal microflora disorders. Safety of obligate microflora effecting compensation of pathological process depends on biological characteristics of vaginal lactobacilli determining their ability to survive in conditions of pathological microbiocenosis.
Keywords: local immunity factors, vaginal microflora disorders, infectious inflammatory diseases of sexual sphere.
Омская государственная медицинская академия
Материал поступил в редакцию 30.06.2008
