Научная статья на тему 'Биологические свойства кокковой микрофлоры кишечника у ВИЧ-инфицированных детей'

Биологические свойства кокковой микрофлоры кишечника у ВИЧ-инфицированных детей Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
432
79
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Медицина в Кузбассе
ВАК
Область наук
Ключевые слова
микробиоценоз / стафилококки / энтерококки / биологические свойства / ВИЧ-инфекция. / microbiocenosis / staphylococcus / enterococcus / biological / HIV!infection

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Отдушкина Лариса Юрьевна

Предмет исследования. Кишечный микробиоценоз относительно здоровых детей и детей с ВИЧ-инфекцией. Цель исследования – изучение видового состава и факторов патогенности стафилококков и энтерококков, выделенных из кишечного биотопа детей с ВИЧ! инфекцией. Методы исследования. Изучен микробиоценоз фекалий у 68 ВИЧ!инфицированных и 45 ВИЧ!негативных детей в возрасте от 1 мес. до 3 лет. Выделенные микроорганизмы идентифицировались по морфологическим, культуральным, биохимическим и патогенным свойствам. Результаты. У всех ВИЧ!инфицированных и у ВИЧ!негативных детей в 100 % случаев высевался Enterococcus faecalis. Изучение биологических свойств энтероккков позволило установить, что культуры Enterococcus faecalis, изолированные из толстой кишки ВИЧ!инфицированных детей, обладали более выраженными факторами агрессии. Количество штаммов энтерококков, обладающих липазной активностью, в основной группе было в 2,5 раза больше (22 %), чем в группе сравнения (9 %), а ДНКазная активность была присуща только энтерококкам, выделенным от ВИЧ!инфицированных детей (3 %). В 6 раз чаще в кишечном содержимом ВИЧ!позитивных детей определялись гемолизин-продуцирующие штаммы энтерококков. Видовой состав стафилококков у ВИЧ!инфицированных и ВИЧ!негативных детей ха! рактеризовался отсутствием статистически значимых различий (р > 0,05), но количественный уровень стафилококков у ВИЧ!позитивных детей был в 10 раз меньше, чем у ВИЧ!негативных. Также отсутствовали отличия по распространенности таких факторов вирулентности, как продукция гемолизина, липазы и ДНКазы. При этом у детей с ВИЧ-инфекцией преимущественно выделяли штаммы с низкой и средней способностью продуцировать липазу. Штаммы от ВИЧ-негативных детей большей частью обладали низкой липазной активностью. Staphylococcus aureus, выделенный из кишечного микробиоценоза ВИЧ-позитивных детей, чаще проявлял устойчивость к цефалоспоринам, но был более чувствителен к аминогликозидам, в то время как у ВИЧ-негативных детей данные штаммы были более чувствительны к фторхинолонам. Область применения. Медицинская микробиология. Заключение. Установлено, что среди всех выделенных стафилококков доминирующее положение занимали Staphylococcus aureus, S. epidermidis, S. xylosus; а среди энтерококков доминировали Enterococcus faecalis и E. faecium, как у ВИЧ-инфицированных, так и в группе сравнения. Энтерококки и стафилококки, выделенные из кишечника ВИЧ-инфицированных детей, обладают более высокой способностью к адгезии и инвазии, а также устойчивостью к антибиотикам.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Отдушкина Лариса Юрьевна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

BIOLOGICAL PROPERTIES OF COCCOID MICROFLORA IN HIV-INFECTED CHILDREN

Objective. Intestinal microbiocenosis of relatively healthy children and children with HIV infection. Aim – study was to investigate the species composition and pathogenicity factors of staphylococci and enterococci isolated from intestinal biotope of children with HIV infection. Methods: faecal was studied in 68 HIV-infected and 45 HIV!negative children aged from 1 month to 3 years. Isolated micro! organisms were identified by morphological, cultural, biochemical and pathogenic properties. Results. All HIV!infected and HIV!negative children in 100 % of cases were inoculated Enterococcus faecalis. The biological properties of enterococcus has allowed to establish that culture of Enterococcus faecalis isolated from the colon of HIV-infected children had a more pronounced aggression factors. The number of strains of enterococci having lipanoi activity in the main group was 2,5 times more (22 %) than in the comparison group (9 %), and DNА activity was unique to enterococci isolated from HIV!infected children (3 %). 6 times more frequent than in the intestinal content of HIV!positive children were determined hemolysin producing strains of enterococci. Species composition of staphylococci in HIV-infected and HIV!negative children characterized by a lack of statistically significant differences (p > 0,05), but the quantitative levels of Staphylococcus in HIV!positive children was 10 times less than HIV!negative children. There was also no difference in the prevalence of these virulence factors like production of hemolysin, lipase and DNase. From children with HIV infection was mainly identified strains with low and medium ability to produce lipase. Strains from HIV-negative children mostly had low lipanoi activity. Staphylococcus aureus isolated from intestinal microbiota of HIV!positive children more frequently exhibited resistance to cephalosporin, but was more sensitive to aminoglycosides, while in HIV-negative children these strains were more sensitive to fluoroquinolones. Field. Medical Microbiology Conclusion. It is established that among all isolated staphylococci dominant position was occupied by Staphylococcus aure! us, S. epidermidis, S. xylosus; and among the enterococci was dominated by Enterococcus faecalis and E. faecium as in HIV! infected and the comparison group. Enterococci and staphylococci isolated from the intestine of HIV-infected children have a higher capacity for adhesion to and invasion and resistance to antibiotics.

Текст научной работы на тему «Биологические свойства кокковой микрофлоры кишечника у ВИЧ-инфицированных детей»

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА СПЕЦИФИЧНОСТИ И ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО ЭКСПРЕСС-ТЕСТА И ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ ПРИ ВЕРИФИКАЦИИ ТЯЖЕЛЫХ ФОРМ ПНЕВМОКОККОВЫХ ПНЕВМОНИЙ

Соловьев К.И., Гладин С.А., Никитина Н.Н. и др. Частота пневмококковой пневмонии у взрослых больных терапевтических стационаров на трех территориях Российской Федерации. Пульмонология. 2013. № 4. С. 29-36.).

3. Chuchalin AG, Sinkopalnikov AI, Kozlov RS, Tyurin IE, Rachina СА. Community-acquired pneumonia in adults: practical recommendations for diagnosis, treatment and prevention. Clinical microbiology, antimicrob. chimiother. 2010; (3):186-225. Russian (Чучалин А.Г., Синкопальников А.И., Козлов Р.С., Тюрин И.Е., Рачина С.А. Внебольничная пневмония у взрослых: практические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике. Клин. микробиол. антимикроб. химиотер. 2010. № 3. С. 186-225.).

4. Artyomova LV. Diagnostic value of PCR in deciphering the etiology of infections caused by opportunistic pathogens. Cand. Вюі. sci. abstracts diss. M., 2005. 26р. Russian (Артемова Л.В. Диагностическая значимость ПЦР в расшифровке этиологии инфекций, вызванных условно-патогенными возбудителями: автореф. дисс. ... канд. биол. наук. М., 2005. 26 с.).

5. Martynova AV. Epidemiological aspects of pneumococcal infection and molecular and genetic characteristic of Streptococcus pneumonia. Dr. med. sci. abstracts diss. St-Petersburg, 2008. 37 р. Russian (Мартынова А.В. Эпидемиологические аспекты пневмококковых инфекций и молекулярно-генетическая характеристика Streptococcus pneumonia: автореф. дис. ... д-ра мед. наук. СПБ. 2008. 37 с.).

6. Matosova SV, Parkina NV, Shipulina OYu, Chernyshov DV, Chentsov VB, Smirnova TYu et al. The etiological diagnosis of purulent meningitis and meningoencephalitis by polymerase chain reaction in real time: the materials VII of reports of All-Russian conference infection, Moscow, 2015. р. 216. Russian (Матосова СВ., Паркина Н.В., Шипулина О.Ю., Чернышов Д.В., Ченцов В.Б., Смирнова Т.Ю. и др. Этиологическая диагностика гнойных менингитов и менингоэнцефалитов методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени //Матер. VII Ежегодного Всероссийского Конгресса по инфекционным болезням с международным участием. М., 2015. С. 216).

7. Butler JC, Hofmann J, Cetron MS. The continued emergence of drug-resistant Streptococcus pneumonia in the United States: an update from the Centers for Disease Control and Preventions Sentinel Surveillance System. J. Infect. Dis. 1996; 174: 986-993.

8. Nikolenko VV, Feldblyum IV, Vorobyova NN, Golodnov SO, Semerikov VV, Polushkina AV et al. Experience of using immunoassay for the diagnosis of pneumococcal pneumonia. J. of microbiol, epidemiol and immunolog. 2015; (3): 18-24. Russian (Николенко В.В., Фельдблюм И.В., Воробьева Н.Н., Голоднова С.О., Семериков В.В., Полушкина А.В. и др. Опыт использования иммунохроматографического теста для диагностики пневмококковой пневмонии. ЖМЭИ. 2015. № 3. С. 18-24.).

9. Dominguez J, Gali N, Blanco S. Detection of Streptococcus pneumonia antigen by a rapid immunochromatographic assay in urine samples. Chest. 2001; 119: 243-249.

10. Lionel A. Mandell, John G. Bartlett, Scott F. Dowell et al. Update of Practice Guidelines for the Management of Community-Acquired Pneumonia in Immunocompetent Adults. Guidelines for CAP in Adults CID. 2003; 37: 1405-1433.

11. Pokrovsky VI, Briko NI. The general epidemiology with fundamentals of evidential medicine: the management to a practical training. M.: GEOTAR-Media, 2012. 496 р. Russian (Покровский В.И., Брико Н.И. Общая эпидемиология с основами доказательной медицины: руководство к практическим занятиям. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. 496 с).

Й1

Статья поступила в редакцию 23.10.2015 г.

Отдушкина Л.Ю.

Кемеровская государственная медицинская академия,

г. Кемерово

БИОЛОГИЧЕСКИЕ свойств

с кокковой микрофлоры

КИШЕЧНИКА У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ДЕТЕЙ

Предмет исследования. Кишечный микробиоценоз относительно здоровых детей и детей с ВИЧ-инфекцией.

Цель исследования - изучение видового состава и факторов патогенности стафилококков и энтерококков, выделенных из кишечного биотопа детей с ВИЧ- инфекцией.

Методы исследования. Изучен микробиоценоз фекалий у 68 ВИЧ-инфицированных и 45 ВИЧ-негативных детей в возрасте от 1 мес. до 3 лет. Выделенные микроорганизмы идентифицировались по морфологическим, культуральным, биохимическим и патогенным свойствам.

Результаты. У всех ВИЧ-инфицированных и у ВИЧ-негативных детей в 100 % случаев высевался Enterococcus faecalis. Изучение биологических свойств энтероккков позволило установить, что культуры Enterococcus faecalis, изолированные из толстой кишки ВИЧ-инфицированных детей, обладали более выраженными факторами агрессии. Количество штаммов энтерококков, обладающих липазной активностью, в основной группе было в 2,5 раза больше (22 %), чем в группе сравнения (9 %), а ДНКазная активность была присуща только энтерококкам, выделенным от ВИЧ-инфицированных детей (3 %). В 6 раз чаще в кишечном содержимом ВИЧ-позитивных детей определялись гемолизин-проду-цирующие штаммы энтерококков. Видовой состав стафилококков у ВИЧ-инфицированных и ВИЧ-негативных детей характеризовался отсутствием статистически значимых различий (р > 0,05), но количественный уровень стафилококков у ВИЧ-позитивных детей был в 10 раз меньше, чем у ВИЧ-негативных. Также отсутствовали отличия по распространенности таких факторов вирулентности, как продукция гемолизина, липазы и ДНКазы. При этом у детей с ВИЧ-инфекцией преимущественно выделяли штаммы с низкой и средней способностью продуцировать липазу. Штаммы от ВИЧ-негативных детей большей частью обладали низкой липазной активностью. Staphylococcus aureus, выделенный из

14

T. 14 № 4 2015

Medicine

in Kuzbass

ОЛ&Эицина

в Кузбассе

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

кишечного микробиоценоза ВИЧ-позитивных детей, чаще проявлял устойчивость к цефалоспоринам, но был более чувствителен к аминогликозидам, в то время как у ВИЧ-негативных детей данные штаммы были более чувствительны к фторхинолонам.

Область применения. Медицинская микробиология.

Заключение. Установлено, что среди всех выделенных стафилококков доминирующее положение занимали Staphylococcus aureus, S. epidermidis, S. xylosus; а среди энтерококков доминировали Enterococcus faecalis и E. faecium, как у ВИЧ-инфицированных, так и в группе сравнения. Энтерококки и стафилококки, выделенные из кишечника ВИЧ-инфицированных детей, обладают более высокой способностью к адгезии и инвазии, а также устойчивостью к антибиотикам. Ключевые слова: микробиоценоз; стафилококки; энтерококки; биологические свойства; ВИЧ-инфекция. Otdushkina L.Y.

Kemerovo State Medical Academy, Kemerovo

BIOLOGICAL PROPERTIES OF COCCOID MICROFLORA IN HIV-INFECTED CHILDREN Objective. Intestinal microbiocenosis of relatively healthy children and children with HIV infection.

Aim - study was to investigate the species composition and pathogenicity factors of staphylococci and enterococci isolated from intestinal biotope of children with HIV infection.

Methods: faecal was studied in 68 HIV-infected and 45 HIV-negative children aged from 1 month to 3 years. Isolated microorganisms were identified by morphological, cultural, biochemical and pathogenic properties.

Results. All HIV-infected and HIV-negative children in 100 % of cases were inoculated Enterococcus faecalis. The biological properties of enterococcus has allowed to establish that culture of Enterococcus faecalis isolated from the colon of HIV-infected children had a more pronounced aggression factors. The number of strains of enterococci having lipanoi activity in the main group was 2,5 times more (22 %) than in the comparison group (9 %), and DNA activity was unique to enterococci isolated from HIV-infected children (3 %). 6 times more frequent than in the intestinal content of HIV-positive children were determined hemolysin producing strains of enterococci. Species composition of staphylococci in HIV-infected and HIV-negative children characterized by a lack of statistically significant differences (p > 0,05), but the quantitative levels of Staphylococcus in HIV-positive children was 10 times less than HIV-negative children. There was also no difference in the prevalence of these virulence factors like production of hemolysin, lipase and DNase. From children with HIV infection was mainly identified strains with low and medium ability to produce lipase. Strains from HIV-negative children mostly had low lipanoi activity. Staphylococcus aureus isolated from intestinal microbiota of HIV-positive children more frequently exhibited resistance to cephalosporin, but was more sensitive to aminoglycosides, while in HIV-negative children these strains were more sensitive to fluoroquinolones.

Field. Medical Microbiology

Conclusion. It is established that among all isolated staphylococci dominant position was occupied by Staphylococcus aureus, S. epidermidis, S. xylosus; and among the enterococci was dominated by Enterococcus faecalis and E. faecium as in HIV-infected and the comparison group. Enterococci and staphylococci isolated from the intestine of HIV-infected children have a higher capacity for adhesion to and invasion and resistance to antibiotics.

Key words: microbiocenosis; staphylococcus; enterococcus; biological; HIV-infection.

Согласно гипотезе «нарушенной микрофлоры» основным фактором, запускающим оппортунистические инфекции (ОИ) у пациентов с ВИЧ-инфекцией, является нарушение нормальной микрофлоры — естественной защиты против ОИ. Микрофлора у таких пациентов нарушается из-за длительного использования антибиотиков широкого спектра, а также противопаразитарных препаратов и, возможно, препаратов с цитостатическим эффектом (АРТ) [1]. Истощение нормальной микрофлоры делает экологические ниши свободными, и они легко заселяются микроорганизмами, которые обычно присутствуют в умеренных количествах в организме и в окружающей среде [2]. По данным литературы, к доминантным микросимбионтам, обеспечивающим колонизационную резистентность слизистых, помимо бифидобактерий, лактобацилл и типичных кишечных палочек, относят энтерококки. В составе же факультативной микрофлоры довольно часто присутствуют стафилококки.

Корреспонденцию адресовать:

ОТДУШКИНА Лариса Юрьевна,

650029, Кемерово, ул. Ворошилова, д. 22а, ГБОУ ВПО КемГМА Минздрава России.

Тел.: 8 (3842) 73-28-71.

E-mail: micro@kemsma.ru

На сегодняшний день остается открытым вопрос о роли кокковой флоры в развитии ОИ у ВИЧ-инфицированных детей. В большинстве случаев данные микроорганизмы изучаются как микросимбионты у ВИЧ-негативных пациентов. При этом структура энтерококков и стафилококков, распространенность факторов вирулентности, антибиотикорезистентность штаммов у ВИЧ-инфицированных пациентов до настоящего времени изучены недостаточно, что затрудняет разработку эффективных мер по предупреждению развития у таких детей вторичных осложнений энтерококковой и стафилококковой этиологии [3-7].

Цель настоящего исследования — изучение видового состава и факторов патогенности стафилококков и энтерококков, выделенных из кишечного биотопа детей с ВИЧ-инфекцией.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Изучен микробиоценоз кишечника у 68 детей с перинатальной ВИЧ-инфекцией. Диагноз ВИЧ-инфекции был поставлен на основании данных эпидемиологического анамнеза (перинатальный контакт), и подтвержден результатами ИФА, ПЦР, иммуноб-лотинга. Группу сравнения составили 45 ВИЧ-нега-тивных относительно здоровых детей. Группы бы-

Оifauiwa Medicine

в Кузбассе

T. 14 № 4 2015

1

15

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА КОККОВОЙ МИКРОФЛОРЫ КИШЕЧНИКА У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ДЕТЕЙ

ли сопоставимы по возрасту (средний возраст составил 2,3 ± 0,2 года) и полу.

Объектом исследования были 157 штаммов энтерококков (95 культур, выделенных из содержимого толстой кишки ВИЧ-инфицированных детей, и 62 культуры от ВИЧ-негативных детей) и 114 штаммов стафилококков (57 культур, изолированные от ВИЧ-инфицированных, и 57 культур — от ВИЧ-не-гативных детей).

Выделение энтерококков и стафилококков осуществляли общепринятыми методами. Идентификацию проводили на основании морфологических, тинкто-риальных, культуральных и биохимических свойств. Биохимический профиль стафилококков изучали с использованием коммерческих тест-систем ПБДС, энтерококков — ЭН-КОККУСтест (Erba Lachema). Адгезивные свойства микроорганизмов изучали согласно методике В.И. Брилиса (1989). Липолитическую, ДНКазную, гемолитическую активности энтерококков и стафилококков исследовали методом посева на Trybuthirit Base Agar (HiMedia), DNA Base Agar (Hi-Мебіа) и кровяной мясо-пептонный агар.

Количественную характеристику липазной активности изучали спектрофотометрическим методом с использованием набора «LIPASA liquicolor» на приборе СФ-2000. Кинетику выделения данного фермента наблюдали через 30, 60 и 90 мин от начала опыта. Штаммы с низкой липазной активностью считали при значениях 0-30 Е/л, со средней липазной активностью — 31-60 Е/л, с высокой липазной активностью — 61 Е/л и более. Чувствительность к антибактериальным препаратам осуществляли дискодиффузионным методом на среде Мюллер-Хилтона с использованием стандартных коммерческих дисков с амикацином, ципрофлоксацином, гентамицином, цефтриаксоном, цефазолином, левомицетином.

На начальном этапе статистической обработки осуществляли формирование базы данных, включающей информацию о видовом составе и количественном уровне кокковой микрофлоры, их адгезивных характеристик, а также о распространенности и уровне экспрессии факторов вирулентности среди условно-патогенных бактерий. Количественные признаки представлены в виде M ± m, где М — среднее арифметическое, m — ошибка средней величины.

Для статистического анализа использовали пакет прикладных программ Statistica (версия 6.1 лицензионное соглашение ВХХИ 006ВО92218 FAN11). Характер распределения переменных величин в рассматриваемой совокупности определяли с помощью построения гистограмм. В связи с тем, что характер распределения данных не соответствовал нормальному, для статистической обработки применяли непараметрические критерии оценки статистической значимости. Для определения значимости различий между двумя несопряженными совокупностями использовали критерий х2. Для анализа связей между коло-

низационным уровнем бактерий и их адгезивной активностью применяли коэффициент корреляции Спирмена. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимался равным 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты проведенных исследований показали, что видовая структура энтерококков у ВИЧ-инфицированных и ВИЧ-негативных детей характеризовалась отсутствием статистически значимых различий (р > 0,05). У всех ВИЧ-инфицированных и у ВИЧ-негативных детей в 100 % случаев высевался Enterococcus faecalis, кроме того у детей сравниваемых групп в 39,7 % и 37,7 % случаев, соответственно, встречался также Enterococcus faecium. Однако интенсивность колонизации слизистой кишечника данными бактериями у детей основной группы была статистически выше и составила 7,5 ± 0,4 lg КОЕ/г против 6,4 ± 0,2 lg КОЕ/г у детей группы сравнения (р < 0,05).

Изучение факторов вирулентности энтерококков, изолированных из кишечника ВИЧ-позитивных и ВИЧ-негативных детей, позволило выявить значительные отличия в их адгезивной активности. Так у ВИЧ-инфицированных детей 22 % штаммов оказались высоко адгезивными. В группе сравнения высокой способностью к адгезии обладали только 4,4 % штаммов. В большинстве случаев в сравниваемых группах энтерококки были представлены среднеадгезивными штаммами (46 % и 20 %, соответственно) с доминированием культур, выделенных от детей с ВИЧ-инфекцией. Доля штаммов с низкой способностью к адгезии у ВИЧ-позитивных детей не превышала 15 %, в группе сравнения — 10 %. На долю неадгезивных штаммов энтерококков в основной группе приходилось в 5 раз больше культур, чем в группе сравнения (16 % и 3 %, соответственно). При этом установлено, что связь между адгезивной активностью Enterococcus faecalis и интенсивностью колонизации слизистой отсутствовала (r = 0,14; р > 0,05), что позволяет говорить о наличии специфических механизмов поддержания определенного популяционного уровня у данных микроорганизмов.

Изучение биологических свойств энтероккоков позволило установить, что культуры Enterococcus faecalis, изолированные из толстой кишки ВИЧ-инфицированных детей, обладали более выраженными факторами агрессии. Так, количество штаммов энтерококков, обладающих липазной активностью, в основной группе было в 2,5 раза больше (22 %), чем в группе сравнения (9 %), а ДНКазная активность была присуща только энтерококкам, выделенным от ВИЧ-инфицированных детей (3 %). В 6 раз чаще в кишечном содержимом ВИЧ-позитивных детей определялись гемолизин-продуцирующие штам-

Сведения об авторах:

ОТДУШКИНА Лариса Юрьевна, заочный аспирант, ассистент, кафедра микробиологии, иммунологии и вирусологии, ГБОУ ВПО Кем-ГМА Минздрава России, г. Кемерово, Россия. E-mail: micro@kemsma.ru

16

T. 14 № 4 2015 MediciinnLass

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

мы энтерококков (19 % и 3 %, соответственно, p < 0,001). Полученные результаты позволяют сделать вывод, что фекальные энтерококки у детей с ВИЧ-инфекцией могут играть этиологическую роль в возникновении гнойно-воспалительных процессов.

Кроме того, у обследованных детей сравниваемых групп установлена высокая распространенность микроорганизмов рода Staphylococcus, которые обнаруживались у них в 100 % случаев, при этом в 26,7 % случаев у одного ребенка выделяли по два и более видов стафилококков. Видовой состав стафилококков у ВИЧ-инфицированных и ВИЧ-негативных детей характеризовался отсутствием статистически значимых различий (р > 0,05). Наиболее часто встречался Staphylococcus aureus, доля которого составила 33,3 % и 40 %, соответственно. В 25 % случаев у ВИЧ-инфицированных детей обнаруживался Staphylococcus xylo-sus, в группе сравнения — в 27 % случаев. Однако Staphylococcus epidermidis у ВИЧ-позитивных детей высевался в 2 раза реже по сравнению с ВИЧ-негатив-ными детьми (11 % и 27 % случаев, соответственно). Кроме того, у детей сравниваемых групп с небольшой частотой высевались и другие виды стафилококков: Staphylococcus intermedius (8 % и 6,7 %, соответственно), Staphylococcus lentus (9,3 % и 6,7 %, соответственно), Staphylococcus simulans (6,7 % и 2,1 %, соответственно). При этом отмечено, что при ВИЧ-инфекции видовая структура стафилококков была более разнообразна и, кроме вышеуказанных видов, встречались также Staphylococcus haemolyticus (4 %) и Staphylococcus cohnii (2,4 %).

В целом, количественный уровень стафилококков был в 10 раз меньше у ВИЧ-позитивных детей, чем у ВИЧ-негативных, и составил 5,2 ± 0,3 lg КОЕ/г против 6,5 ± 0,4 lg КОЕ/г, соответственно (p < 0,05). Более низкий уровень колонизации слизистой кишечника стафилококками при ВИЧ-инфекции связан, вероятно, с более выраженными межвидовыми конкурентными взаимоотношениями стафилококков, поскольку у ВИЧ-негативных детей видовой состав стафилококков был менее разнообразным.

Несмотря на то, что в сравниваемых группах доля Staphylococcus aureus в общей структуре стафилококков была практически одинаковой, тем не менее, у детей с ВИЧ-инфекцией количественный уровень данных микроорганизмов был статистически выше и составил 7,2 ± 0,4 lg КОЕ/г против 5,9 ± 0,4 lg КОЕ/г у ВИЧ-негативных (p < 0,01). При этом уровень колонизации слизистой Staphylococcus epidermidis у ВИЧ-позитивных был на 2 lg меньше, чем у детей группы сравнения (5,2 ± 0,2 lg КОЕ/г против 7,1 ± 0,4 lg КОЕ/г, соответственно, p < 0,01), а содержание Staphylococcus xylosus в сравниваемых группах было одинаковым и составило 6,2 ± 0,3 lg КОЕ/г.

В связи с тем, что возникновение оппортунистических инфекций связывают с увеличением уровня экспрессии факторов патогенности условно-патоген-

ной микрофлоры при развитии иммунодефицита [8], у стафилококков, изолированных из кишечника ВИЧ-позитивных и ВИЧ-негативных детей, были изучены факторы вирулентности. Установлено отсутствие статистически значимых отличий по структуре адгезивной активности стафилококков (х2 = 0,15; p > 0,05). Так, у ВИЧ-инфицированных детей 34,7 % штаммов были высоко адгезивными, в группе сравнения высокой способностью к адгезии обладали 33,3 % штаммов стафилококков. В большинстве случаев стафилококки в сравниваемых группах были среднеадгезивными (37,3 % и 42,2 %, соответственно). Доля штаммов с низкой способностью к адгезии у ВИЧ-позитивных детей не превышала 18,7 %, в группе сравнения — 17,8 %. Неадгезивными были 9,3 % стафилококков от детей основной группы и 6,7 % штаммов от детей группы сравнения.

Также отсутствовали отличия по распространенности таких факторов вирулентности, как продукция гемолизина, липазы и ДНКазы (х2 = 0,12; p > 0,05). Гемолизин продуцировали 91 % штаммов стафилококков, выделенных от ВИЧ-позитивных детей и 89 % штаммов от здоровых детей. ДНКазной активностью характеризовались 22,7 % стафилококков от детей с ВИЧ-инфекцией и 24,4 % штаммов от ВИЧ-негативных детей. Липазной активностью обладали 76 % стафилококков в основной группе и 56 % штаммов в группе сравнения (p > 0,05). Однако количественная оценка липазной активности показала статистически значимые отличия по данному признаку (p < 0,05). Среднее значение липазной активности у стафилококков, выделенных от детей с ВИЧ-инфекцией, составило 39,49 Е/л, тогда как в группе сравнения данный показатель не превышал 18,69 Е/л. При этом от детей с ВИЧ-инфекцией преимущественно выделяли штаммы с низкой (60 %) и средней (33,3 %) способностью продуцировать липазу. На долю штаммов с высокой липазной активностью приходилось только 6,7 % культур. 84,6 % штаммов от ВИЧ-не-гативных детей обладали низкой липазной активностью, а средней — только 7,7 % стафилококков. По некоторым данным липаза стафилококков выполняет роль не только фермента инвазии, но также используется как адгезин [9].

Результаты определения чувствительности выделенных штаммов стафилококков к антибиотикам у ВИЧ-позитивных и ВИЧ-негативных детей были статистически недостоверны, однако количество штаммов, резистентных к антибиотикам, преобладало у ВИЧ-инфицированных детей. Так, Staphylococcus aureus среди всех выделенных штаммов у ВИЧ-инфицированных в 55 % случаев был устойчив к одному антибиотику, в 20 % — к двум, в 25 % — к трем. При этом встречались штаммы (по 5 %), резистентные к 4 и 5 антимикробным препаратам. Среди штаммов Staphylococcus aureus, изолированных от ВИЧ-негативных детей, устойчивых к 5 антибиотикам не

Information about authors:

OTDUSHKINA Larisa Yurevna, postgraduate student, assistant, department of microbiology, immunology and virusology, Kemerovo State Medical Academy, Kemerovo, Russia. E-mail: micro@kemsma.ru

I

MedicLn<L=ss T. 14 № 4 2015

17

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА КОККОВОЙ МИКРОФЛОРЫ КИШЕЧНИКА У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ДЕТЕЙ

выявлено, а процент штаммов, чувствительных к 2 и 3 препаратам был ниже, и составил 9,5 %. Количество культур, устойчивых к двум антибиотикам, не отличалось от опытной группы (24 %), но штаммов, устойчивых к одному препарату, было меньше в 1,4 раза (38 %). Staphylococcus xylosus был менее резистентным к изучаемым антибиотикам в обеих группах. При этом наибольшая устойчивость данного вида к антимикробным препаратам была отмечена у ВИЧ-положительных детей с доминированием резистентных штаммов к трем антибиотикам. Среди штаммов, выделенных от ВИЧ-негатив-ных детей, 39,5 % обладали чувствительностью ко всем антибиотикам. Staphylococcus epider-midis проявлял максимальную устойчивость к четырем антимикробным препаратам с преобладанием резистентных штаммов у ВИЧ-позитив-ных детей и, преимущественно, к одному антибиотику (33 % против 9 % в группе сравнения). При этом в сравниваемых группах определялись чувствительные штаммы ко всем антимикробным препаратам, составившие у ВИЧ-позитивных детей 16 %, а у ВИЧ-негативных их было в 4 раза больше — 64 % (табл.).

Полученные результаты показали, что Staphylococcus aureus, выделенный из кишечного микробиоценоза ВИЧ-позитивных детей, чаще проявлял устойчивость к цефалоспоринам, но был более чувствителен к аминогликозидам, в то время как у ВИЧ-негатив-ных детей данные штаммы были более чувствительны к фторхинолонам. Staphylococcus xylosus в сравниваемых группах в равной степени был устойчив к цефалоспоринам. Staphylococcus epidermidis, выделенный у ВИЧ-инфицированных детей, обладал большей устойчивостью к фторхинолонам.

Таблица

Удельный вес штаммов стафилококков, резистентных к антибиотикам (в %)

Table

The specific gravity of Staphylococcus strains resistance to antibiotics (in %)

ВЫВОДЫ:

1. Энтерококки и стафилококки, выделенные из кишечника ВИЧ-инфицированных детей, обладают более высокой способностью к адгезиии и инвазии, что повышает вероятность развития гнойно-воспалительных осложнений у данной категории лиц.

2. Липаза является не только фактором инвазии, но, при недостатке структурных адгезинов, может участвовать в адгезии микросимбионтов, что позволяет им достигать более высокого количественного уровня и быть причиной возникновения оппортунистических инфекций у ВИЧ-инфицированных детей.

3. Стафилококки, выделенные из кишечника ВИЧ-инфицированных детей, проявляют большую резистентность к антибактериальным препаратам (преимущественно к группе цефалоспорининов), что необходимо учитывать при выборе препаратов для лечения таких больных.

S. aureus S. xylosus S. epidermidis

Резистентность ВИЧ- ВИЧ- ВИЧ- ВИЧ- ВИЧ- ВИЧ-

позитив негатив позитив негатив позитив негатив

К 1 антибиотику 55 38 29 22 33 9

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

К 2 антибиотикам 20 24 7 11 17 9

К 3 антибиотикам 25 9,5 36,7 11 17 9

К 4 антибиотикам 5 9,5 14,3 0 17 9

К 5 антибиотикам 5 0 7 5,5 0 0

К 6 антибиотикам 0 0 7 11 0 0

ЛИТЕРАТУРА / REFERENS:_____________________________________________________________________________________________

1. Jorge O. Alarcon, Laura Freimanis-Hance et al. Opportunistic and other infections in HIV-infected children in Latin America compared to similar cohort in the United States. AIDS Research and human retroviruses. Mary Ann Liebert, Inc. 2012; 28(3): 1226-1233.

2. Alberto Novaes Ramos Jr, Luiza Harunari Matida et all. AIDS patient care and STDs. Mary Ann Liebert, Inc. 2011; 25(4): 176-223.

3. Gabrielyan NI, Gorskaya EM, Spirina TS et al. Enterococci as causative agents of infectious postoperative complications. J. Microbiology, epidemiology and immunology. 2007; (4): 50-53. Russian (Габриэлян Н.И., Горская Е.М., Спирина Т.С. и др. Энтерококки как возбудители инфекционных послеоперационных осложнений //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2007. № 4. С. 50-53).

4. Jett BD, Huycke MM, Gilmore MS. Virulence of enterococci. Clin. Microbiol. Rev. 1994; 7(4): 462-478.

5. Bukharin OV, Balysheva VI, Kartashova OL, Sycheva MV. Characteristics of the virulence potential of clinical isolates of enterococci. J. Microbiology, epidemiology and immunology. 2013; (3): 12-18. Russian (Бухарин О.В., Валышева И.В., Карташова О.Л., Сычева М.В. Характеристика вирулентного потенциала клинических изолятов энтерококков //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2013. № 3. С. 12-18.).

6. Valyshev AV. Antimicrobial compounds of enterococci. J. Microbiology, epidemiology and immunology. 2014; (5): 119-126. Russian (Валышев А.В. Антимикробные соединения энтерококков //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2014. № 5. С. 119-126.).

7. Priyatkin RG, Kuzmenko OM. Synthesized proteins of Staphylococcus aureus. J. Microbiology, epidemiology and immunology. 2010; (4): 118-124. Russian (Прият-кин Р.Г., Кузьменко О.М. Секретируемые белки Staphylococcus aureus //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2010. № 4. С. 118-124.).

8. Shamsudinov AF, Tyurin YA. Protein toxins of Staphylococcus aureus, J. Microbiology, epidemiology and immunology. 2014; (2): 113-120. Russian (Шамсу-динов А.Ф., Тюрин Ю.А. Белковые токсины Staphylococcus aureus //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2014. № 2. С. 113-120).

9. Joseph B, Ramteke P, Kumar P et al. Studies on the enhanced production of extracellular lipase by Staphylococcus epidermidis. J. General and Applied Microbiology. 2006; 52: 315-320.

18

T. 14 № 4 2015 Mediciinn^bass

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.