CC BY
24
БИОХИМИЧЕСКИЕ И ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ДИСФЕРЛИН-АССОЦИИРОВАННЫХ МЫШЕЧНЫХ ДИСТРОФИЙ
© А.С. Захаров, Н.В. Короткова, Н.Д. Мжаванадзе, А.А. Никифоров
Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова, Рязань, Российская Федерация
Дисферлин (Fer1L1) является трансмембранным кальций-связывающим белком семейства ферлин-1-подобных белков, в состав которого наряду с самим дисферлином входят миофер-лин Fer1L3, отоферлин Fer1L2, а также другие ферлины Fer1L4, Fer1L5 и Fer1L6. Дисферлин синтезируется во всех клетках организма, но наиболее активно - в симпластах поперечнополосатой мышечной ткани. Весь спектр выполняемых им функций до конца не выяснен, но достоверно известны следующие: участие в репарации сарколеммы и внутриклеточных везикулярных систем после повреждений, генерация и обеспечение правильного функционирования системы Т-трубочек сарколеммы, регуляция эндо- и экзоцитоза и воспаления, участие в фагоцитозе. Мутации в гене дисферлина приводят к развитию нервно-мышечных заболеваний аутосомно-рецессивного типа наследования, называемых дисферлинопатиями: миопатия Миоши, конечностно-поясная мышечная дистрофия типа 2В и мышечная дистрофия с первичным поражением мышц переднего фасциального ложа голени. При заболеваниях указанной группы происходит нарушение экспрессии мРНК и/или функции белка дис-ферлина в скелетной мышечной ткани, что обусловлено мутациями в гене DYSF (dystrophy-associatedfer-1-like). Дисферлинопатии - заболевание редкое, характеризующееся неуклонным прогрессированием и инвалидизацией пациентов, в связи с чем актуальным в настоящее время является изучение биохимических аспектов заболевания с целью разработки терапии. В представленной статье рассматриваются вопросы строения дисферлина, его функций в норме, а также биохимические основы патогенеза дисферлинопатий.
Ключевые слова: дисферлин; семейство ферлинов; репарация сарколеммы; функционирование Т-трубочек.
BIOCHEMICAL AND PATHOPHYSIOLOGICAL ASPECTS OF DYSFERLIN-ASSOCIATED MUSCULAR DYSTROPHY
A.S. Zakharov, N.V. Korotkova, N.D. Mzhavanadze, A.A. Nikiforov
Ryazan State Medical University, Ryazan, Russian Federation
Dysferlin is a transmembrane calcium-binding protein of the ferlin-1-like protein family, which includes myoferlin Fer1L3, otoferlin Fer1L2 and other ferlins Fer1L4, Fer1L5, and Fer1L6 along with dysferlin itself. Dysferlin is synthesized in all cells of the body, but most actively - in the symplasts of striated muscle tissue. The full range of functions performed by this protein is not fully clarified, but the following have been clearly shown: participation in the post-injury repair of sarcolemma and intracellular vesicular systems, generation and maintenance of the correct functioning of the sarcolemmal T-tubule system, regulation of endo- and exocytosis and
6L®
157
D01:10.238 88/HMJ202101157-169
inflammation, participation in phagocytosis. Mutations in the dysferlin gene lead to the development of a number of neuromuscular diseases of the autosomal recessive type of inheritance called dysferlinopathies: Miyoshi myopathy, limb-girdle muscular dystrophy type 2B, and distal anterior compartment myopathy. These diseases are characterized by the impaired expression of mRNA and/or the function of the protein dysferlin in skeletal muscles, which is caused by mutations in the DYSF (dystrophy-associatedfer-1-like) gene. Although rare, dysferlinopathy is characterized by continuous progression causing severe disability, which explains the importance of research and development of appropriate treatments, including gene therapy. The article presents information on the structure of dysferlin, the mechanisms of its normal functions, as well as the biochemical basis of the pathogenesis of dysferlinopathies. Keywords: dysferlin; ferlin family; sarcolemma repair; T-tubule function.
Строение дисферлина
На сегодняшний день известны 15 изоформ дисферлина, которые имеют массу от 222 до 241 кДа и от 1954 до 2119 аминокислотных остатков в своём составе. Структура дисферлина, по данным последних исследований и международных баз данных белков включает 7 кальций-связывающих С2-доменов (называемых с С2A по C2G), 2Fer-домена ^^ и FerB), 2 DysFC, 2 DysFN-домена и 1 трансмембранный С-концевой домен [1,2].
С2-домены являются кальций-связы-вающими и обеспечивают взаимодействие дисферлина с фосфолипидами клеточных мембран. По литературным данным, наиболее активным является С2А-домен [3,4].
Первичная структура С2А-домена включает 101 аминокислоту, часть из которых образует 8 противоположно направленных бета-складчатых участков вторичной структуры, которые вместе с оставшимися аминокислотами 3 петли, формируют вершины С2А-домена. С2А имеет 2 каль-ций-связывающих участка с разным сродством к ионам кальция [3,5]. В участке связывания с высоким сродством расположены аминокислотные остатки Асп-18, Иле-19/Арг-19 (зависит от конкретной изофор-мы белка) и Асп-21 из первой петли, а также Асн-40 из второй петли. В состав участка связывания кальция с низким сродством входят аминокислоты Асп-71, Гис-72 и Глу-73 из 3 петли [2,5]. Функционирование кальций-связы-вающих участков можно объяснить следующим образом: для правильной ориентации и связывания
иона кальция необходимо его связывание с 6-ю донорами электронов. Частью этих доноров являются карбонильные и гидрок-сильные атомы кислорода перечисленных аминокислот, остальными же донорами являются атом кислорода фосфатных групп фосфолипидов мембран [3].
Также в связывании С2А-домена с клеточными мембранами участвуют аминокислотные остатки Мет-75 3-й петли (в качестве «заякоривающего» аминокислотного остатка) и аминокислотные остатки Иле-19 (как формирующие гидрофобные взаимодействия с радикалами жирных кислот для изоформ дисферлина 1-7 и 15) или Арг-19 и Арг-20 (как связывающиеся боковыми радикалами с отрицательно заряженными фосфатными группами фосфо-липидов для изоформ дисферлина 8-14) [2]. Подтверждением этому служат результаты исследований, согласно которым му-тантные по аминокислоте Мет-75 дисфер-лины перестают связывать липиды как в присутствии кальция, так и независимо от него, а нормальные дисферлины лучше связываются с липидами в случае присутствия положительно заряженного фосфа-тидилхолина [5-7]. Остальные кальций-связывающие домены дисферлина имеют сходное строение, но меньшую активность.
Внутренний FerA-домен дисферлина представлен 4-мя альфа-спиральными участками, объединёнными в 2 группы по 2 спирали, между которыми находится связующая последовательность аминокислот. В отличие от FerA доменов других белков семейства ферлинов, данный домен
в дисферлине может кальций-опосредо-ванно связывать отрицательно заряженные фосфолипиды и кальций-независимо связывать нейтральные фосфолипиды (фосфа-тидилхолин) [8,9]. Кроме того, наличие большого количества альфа-спиралей с подвижной линкерной последовательностью делает данный домен схожим структурно с белками SNARE (soluble NSF attachment receptor; белки, осуществляющие слияние с клеточной мембраной или органеллой-мишенью). В совокупности со способностью связывать фосфолипиды мембран этот факт позволяет предполагать участие данного домена в слиянии мембран либо непосредственно, либо в комплексе с соседними SNARE-протеинами.
С-концевой трансмембранный домен, согласно базам данных UniProt и SMART (рис. 1), имеет высоко консервативную последовательность неполярных аминокислот -Иле-Иле-Лей-Фен-Иле-Иле-Лей-Фен-Иле-Лей-Лей-Лей-Фен-Лей-Ала-Иле-Фен-Иле-, которая может обеспечивать гидрофобные взаимодействия с неполярными радикалами жирных кислот фосфолипид-ного бислоя, «заякоривая» С-конец белка в мембране [1,2]. Функции центральных доменов FerB, DysFN, DysFC в настоящее время не изучены, но предполагается, что они поддерживают правильную конфор-мацию белковой молекулы, необходимую для поддержания его способности связывать кальций С2-доменами.
Рис. 1. Доменная структура дисферлина на основе данных баз SMART и UniProt
Участие дисферлина в репарации клеточных мембран после повреждения
Как уже говорилось ранее, дисфер-лин участвует в процессе регенерации мембран, в случае мышечной ткани - сарколеммы. В настоящее время, наиболее популярной теорией репарации сарколеммы является теория «мембранных заплаток», заключающаяся в агрегации друг с другом мембранных пузырьков (секреторных везикул, лизосом, энларгеосом, эндо-сом), их доставке к месту повреждения и слиянием с сарколеммой (рис. 2). Об участии дисферлина и многих других белков в репарации сарколеммы написано много научных работ, но все они в той или иной степени противоречат друг другу. В представленном обзоре авторы излагают своё видение данной проблемы на основе имеющихся данных следующим образом:
1) Повреждение мембраны сопровождается резким поступлением кальция внутрь клетки, что приводит к увеличению содержания его уровня в цитоплазме и активации кальций-зависимых белков.
2) Повышение концентрации кальция в цитоплазме ведёт к активации аннексина А1, формирующего комплекс с одним из своих лигандов - белком S100A11. Отличительной особенностью комплекса является создание в результате его встраивания в мембраны органелл так называемых «сайтов контакта мембран», которые необходимы:
а) для формирования мультивезику-лярных телец - структур поздних эндосом, которые могут выполнять как роль мест расщепления поглощённого материала, так и роль экзосом. В свою очередь, экзосомы в процессе экзоцитоза встраивают свою мембрану с цитоплазматической мембраной, тем самым транспортируя мембраны к месту повреждения цито-/сарколеммы;
б) для агрегации мембранных везикул друг с другом, создавая большую «заплатку» из везикул-«лоскутов» для последующего встраивания в повреждённый участок цитолеммы;
в) аннексин А1 может инициировать транспорт везикул к сарколемме по системе Т-трубочек. Процесс может осуществ-
ляться следующим образом: входящий в результате повреждения сарколеммы кальций активирует кальций-зависимые изо-формы аденилатциклазы (например, изо-формы I, III, VIII) и активирует протеин-киназу А; протеинкиназа создаёт белковый комплекс с белком АКАР-15- и аннекси-ном А1, который прикрепляет мембрану везикулы к белкам семейства кинезина-2 (KIF3A, KIF3B, KIF3C, KIF17), доставляющего везикулы по микротрубочкам от центра клетки к сарколемме.
3) Для слияния мембранных везикул с сарколеммой необходимо разрушение подмембранной сети актиновых микро-филаментов, являющихся механическим барьером для данного процесса. В условиях повреждённой сарколеммы и резко возросших концентраций внутриклеточного кальция роль дезорганизатора акти-новой сети выполняет фермент кальпаин-3. При нормальной концентрации внутриклеточного кальция кальпаин находится в неактивном состоянии в комплексе с ти-тином в №МА-сайтах саркомера, при резком возрастании уровня кальция каль-паин аутоактивируется и активирует сар-коплазматический пул кальпаина-3. Активированный кальпаин-3 способен расщеплять высокомолекулярный белок цитоске-лета талин, необходимый для полимеризации и пространственной организации актиновых микрофиламентов в местах их контакта друг с другом. С расщеплением талина распадается и подмембранная ак-тиновая сеть.
4) После распада актиновых микрофиламентов аннексин А2, локализующийся в сарколемме и в мембранных везикулах, кальций-независимым образом в мономерном или гомодимерном состоянии «прикрепляет» мембраны везикул к сарколемме подобно мосту, облегчая дальнейший процесс слияния мембран.
5) Финальный этап репарации сарколеммы, слияние везикулярных мембран с сарколеммой, происходит благодаря ди-сферлину. В активированном и связанном с кальцием состоянии дисферлин может
обеспечивать слияние мембран двумя разными способами:
а) С2-домены дисферлина кальций-зависимо связывают Н3-домены белков семейства t-SNARE синтаксина-4 и SNAP-23 внутри сарколеммы и стимулирует образование гетеродимеров синтаксин-4/S NAP-23, формирующих комплекс, необходимый для слияния мембран. Данный комплекс впоследствии взаимодействует с белками семейства v-SNARE синаптобревином и VAMP-2 внутри мембран везикул, что и вызывает слияние мембран друг с другом;
б) С2-домены дисферлина в совокупности с его FerA-доменами могут непосредственно кальций-зависимым образом связывать фосфолипиды мембран везикул, сближая их с сарколеммой и запуская слияние.
6) Доставку дисферлина к сарколемме обеспечивают преимущественно кавеоли-новые везикулы. Дисферлин опосредованно через убиквитинлигазу MG53, так же известную как Trim-72, связывается с белком кавеолином-3 и в сарколемме в наибольшем количестве обнаруживается именно в участках, содержащих кавеолин-3.
7) Репарация сарколеммы может происходить за счёт различных мембранных везикул (мультивезикулярных телец, лизосом, энларгеосом и т.п.), как из ново образующегося, так и из уже накопленного пула, т.к. дисферлин способен напрямую кальций-независимо связывать аль-фа-тубулин, неподвижно прикрепляя ранее образованные везикулы к микротрубочкам цитоскелета.
Таким образом, дисферлин выполняет в процессе репарации сарколеммы несколько важных функций:
а) формирует комплекс белков семейства SNARE, опосредуя слияние везикулярной мембраны с сарколеммой;
б) непосредственно связывает мембрану везикулы с сарколеммой при помощи С2А-домена;
в) является «кальциевым сенсором», необходимым для активации и выполнения функций, связанных с ним аннексинов,
косвенно принимая участие в формировании и транспортировке мембранных везикул к месту повреждения сарколеммы;
г) прикрепляет везикулы к микротрубочкам цитоскелета, обеспечивая формирование подмембранного пула везикул.
Рис. 2. Репарация сарколеммы «мембранными заплатками» и участие дисферлина в этом процессе
Точка зрения авторов об организации репаративных механизмов сарколеммы опирается на следующие факты:
1) В исследованиях на мышечных волокнах, лишённых дисферлина, наблюдается скопление большого количества мембранных везикул под сарколеммой, которые, тем не менее, не могут слиться с сарколеммой [10,11]. Вывод о том, что именно дисферлин обеспечивает слияние везикулярной мембраны с сарколеммой, так же подтверждается исследованием Codding S.J., и др. (2016), которое выявило способность дисферлина взаимодействовать с белками семейства SNARE [12].
2) Положение о том, что дисферлин играет важную роль в координации активности аннексинов, подтверждается исследованием Lennon N.J., и др. [13]. Из него мы видим, что при повышении концентрации кальция в саркоплазме и при повреждении сарколеммы дисферлин освобождает ан-нексин А1 из комплекса, обеспечивая его
выход в саркоплазму. Взаимодействие ан-нескина А2 с дисферлином сохраняется независимо от концентрации кальция или повреждения сарколеммы.
3) Участие аннексина А1 в формировании мультивезикулярных телец подтверждается рядом работ [14-17], а взаимодействие комплекса аннексин А1/АКАР-150/ПКА с кинезином-2 уже было описано для окситоцин-содержащих нейронов гипоталамуса [18]. Учитывая, что и кинезин-2, и кальций-зависимые аденилатциклазы синтезируются и в скелетных мышцах, данное взаимодействие может иметь место в поперечнополосатой мускулатуре.
4) Способность аннексина А2 кальций-независимым образом формировать гомодимерные структуры и прикреплять мембраны друг к другу описана в работе Lopez-Rodriguez J.C., и др. [19].
5) Способность кальпаина-3 расщеплять талин подтверждается исследованием Taveau M., и др. [20].
6) Участие дисферлина в прикреплении везикул к микротрубочкам может объясняться его способностью связывать альфа-тубулинкальций-независимым образом [21].
7) Ведущая роль кавеолиновых везикул в доставке дисферлина к сарколемме вытекает из исследований Hernandez-Deviez D.J., и др., которые подтверждают аномальную локализацию дисферлина в комплексе Гольджи при мутациях ка-веолина-3; Capanni C., и др., подтверждающим колокализацию дисферлина с ка-веолином-3 и Chuanxi G., и др., и Flix В., и др., подтверждающим опосредованное взаимодействие дисферлина с кавеоли-ном-3 через белок MG53 [22-25].
8) Наконец, возможную роль мульти-везикулярных телец, лизосом, кавеолосом и других везикул как доноров мембраны подтверждают исследования, говорящие о наличии белков LAMP, ESCRT, холестерина и пр. в месте слияния мембранных «заплаток» с цитолеммой [11,17,26]. Дисферлин необходим для образования
и функционирования системы Т-трубочек в мышечных волокнах
Т-трубочки представляют собой инвагинации сарколеммы внутрь саркоплазмы, которые связывают поверхность сарколеммы с эндоплазматическим ретику-лумом. По своей длине Т-трубочки могут быть разными, доходя даже до центра мышечного волокна, где располагается саркомер. Основная функция системы Т-трубочек - в ответ на возбуждающий постсинаптический потенциал с нервного волокна обеспечить входной кальциевый ток, который затем активирует рианодин-чувствительные кальциевые каналы на терминальных цистернах саркоплазмати-ческого ретикулума. Итогом данной цепочки событий является выход кальция из терминальных цистерн саркоплазматиче-ского ретикулума в саркоплазму и начало мышечного сокращения.
Дисферлин играет важную роль в формировании и регуляции активности Т-трубочек. Различные исследования показывают способность дисферлина образо-
вывать инвагинации цитолеммы, схожие по морфологии с Т-трубочками мышечных волокон, даже в клетках немышечного дифферона. Изучение дисферлино-дефи-цитных мышечных волокон выявляет наличие в них аномальных, дистрофически изменённых Т-трубочек. Данный факт подтверждает, что дисферлин не только может формировать Т-трубочки, но и совершенно необходим для поддержания их нормального строения и функционирования. Локализация дисферлина в уже зрелых мышечных волокнах и в ещё созревающих миоту-булах существенно различается. В первом случае выявляется преимущественно сар-колеммная локализация данного белка, в то время как во втором - в формирующихся Т-трубочках и в цитоплазме [27,28].
В саркоплазме, помимо аннексинов А1, А2 и кавеолина-3, дисферлин находится вместе с РЮ-доменом фосфолипазы С (данный домен выполняет роль фосфати-дилинозитол-4,5-бисфосфатногосенсора). В Т-трубочках дисферлин колокализуется с такими белками, как Bin1, митоген-активируемая протеинкиназа В (Akt) и ди-гидропиридин-чувствительными кальциевыми каналами L-типа (L-type Ca-channels, dihydropyridine receptors, DHPR) [27-29]. Связь дисферлина с кальциевыми каналами L-типа важна для правильной регуляции водно-ионного баланса в мышечных волокнах и защите их от повреждений. Опыты на дисферлин-дефицитных волокнах показывают существенное DHPR-опосредованное увеличение концентрации ионов кальция в саркоплазме, что приводит к усугублению механического или осмотического повреждения клеток [29-31].
На основании представленных данных можно предположить модель функционирования дисферлина в Т-трубочках (рис. 3):
1) в результате внеклеточного стимула активируются рецепторы, сцепленные с Gq-белками, активация которых приводит к активации фосфолипазы С;
2) активация фосфолипазы С приводит к фосфорилированию фосфатидили-нозитол-4,5-бисфосфата в фосфатидили-нозитол- 1,4,5-трифосфат, высвобождению
диацилглицерола и увеличению тока кальция в саркоплазму;
3) активированный кальцием дисфер-лин, своими С2А-доменами связывает фосфолипиды мембран липосом в тех участках, где белок Binl (также необходимый для формирования Т-трубочек) уже сформировал кривизну сарколеммы внутрь, и одним из описанных в предыдущей главе способов обеспечивает слияние липосомальной мембраны с сарколеммой и возникновение её «изгиба» в сторону саркоплазмы;
4) параллельно с этим в участках, не занятых белком Bin1, происходит кавеолин-опосредованный эндоцитоз, который обеспечивает рекрутирование сарколеммного пула дисферлина и протеинкиназы В (Akt) к формирующимся Т-трубочкам, что увеличивает число сливающихся с Т-трубочками липосом и увеличивает рост Т-трубочек;
5) в образующихся Т-трубочках Akt
через свой РН3-домен взаимодействует с образовавшимся фосфатидилинозитол-1,4,5-трифосфатом и активируется, что приводит к повышению в миотубулах синтеза необходимых для построения Т-трубочек белков и липидов и доставке их к формирующимся Т-трубочкам;
6) в сформировавшихся Т-трубоч-ках дисферлин связывается с белками кальциевых каналов L-типа (DHPR), чтобы ограничить вход кальция в клетку в результате активации каналов и предотвратить осмотическое повреждение мышечных волокон;
7) в зрелых мышечных волокнах Т-трубочки закончили своё формирование, в связи с этим необходимость в эндоцитозе дисферлина исчезает, и сарколеммный пул дисферлина возрастает, существенно превосходя количество дисферлина, связанного с Т-трубочками.
Рис 3. Участие дисферлина в формировании Т-трубочек сарколеммы мышечного волокна
Другие функции дисферлина
Еще одной важной функцией дис-ферлина является предохранение мышечной ткани от агрессии со стороны иммунной системы. Так, в дисферлино-дефи-цитных мышечных волокнах значительно
снижена экспрессия белка CD55, который препятствует присоединению к сарколемме «комплекса атаки мембраны», состоящего из компонентов комплемента с С5Ь по С9 [11]. Специфичность белка CD55 по отношению к скелетным поперечнополо-
сатым мышечным волокнам может обусловливать тот факт, что дисферлинопатии (конечностно-поясная мышечная дистрофия типа 2В, миопатия Миоши, проксимо-дистальная миопатия) почти никогда не поражают мышечную ткань сердца.
Дисферлин необходим также и для формирования межэндотелиальных контактов и правильного ангиогенеза. Данные исследований показывают, что в дис-ферлино-дефицитных эндотелиоцитах снижено содержание белков межклеточной адгезии PECAM-1/CD31 и VCAM-1, которые необходимы для адгезии эндоте-лиоцитов друг к другу и поддержанию физиологически нормального уровня проницаемости капилляров, а также взаимодействия с форменными элементами крови и правильного роста сосудов [32].
В нейтрофилах и макрофагах дис-ферлин вовлечён в регуляцию активности интегринов. Так, было показано, что дис-ферлино-дефицитные макрофаги демонстрируют увеличенную экспрессию гена ITGB3 (интегрин-3-ß) [33]. Кроме того, в дисферлино-дефицитных фагоцитах снижена активность эндоцитоза мембранного интегрина-1-ß. Отсутствие негативной регуляции интегрина-1-ß в совокупности с увеличенным синтезом интегрина-3-ß приводят к повышенной фагоцитарной активности нейтрофилов и макрофагов, что может явиться одним из факторов повреждения мышечной ткани при дисферлинопа-тиях. Парадоксальным является сниженная способность дисферлино-дефицитных фагоцитов, обладающих усиленной активностью интегринов, к более низкому, по сравнению с нормальными фагоцитами, уровню адгезии к эндотелию. Возможно, данный факт можно объяснить снижением экспрессии PECAM-1 и VCAM-1 в таких же дисферлино-дефицитных эндотелиоци-тах, как это было описано выше.
Дисферлинопатии
Дисферлинопатии возникают из-за нарушения структуры дисферлина в результате мутаций в гене DYSF. Ген DYSF располагается в 13-м сегменте короткого плеча 2-й хромосомы (2p 13). К настояще-
му моменту описано много мутаций данного гена, которые приводят к дисферли-нопатиям, наиболее распространены среди них нонсенс-, миссенс-мутации и сдвиги рамки считывания. Подавляющее большинство мутаций изменяет структуру С2В, С2Си внутренних DysF-доменов, а также соседних с ними линкерных последовательностей. Примечательно, что гомозиготные мутации приводят преимущественно к миопатии Миоши, в то время как гетерозиготные - к конечностно-поясной мышечной дистрофии типа 2В, хотя среди гетерозиготных мутаций в домене С2В относительно высок и шанс развития миопатии Миоши [34].
Выделяют несколько клинических форм дисферлинопатий в зависимости от первичного поражения определённых мышц [36,37], наиболее частые из них: ко-нечностно-поясная мышечная дистрофия типа 2В (limb-girdle muscular myopathy type 2B, LGMD2B), миопатия Миоши и ди-стальная миопатия с первичным поражением переднего ложа голени (distal anterior compartment myopathy). LGMD2B характеризуется первичным поражением мышц поясов конечностей и проксимальных сегментов конечностей, миопатия Миоши -дистальных сегментов конечностей, ди-стальная миопатия с первичным поражением переднего ложа голени - первичным поражением передней группы мышц голени (m. tibialis anterior, m. extensor digitorum longus, m. extensor hallucis longus). Несмотря на различия в первичном поражении мышц, дисферлинопатии в остальном схожи: одинаковый патогенез, первые проявления заболевания возникают в конце 2-й -начале 3-й декады жизни, крайне редкое поражение миокарда, отсутствие дисфер-лина в сарколемме мышечных волокон при иммуногистохимическом анализе, гипертрофия поражённых мышц, резкое повышение уровня креатинкиназы в крови.
Биохимические основы патогенеза дисферлинопатий
1) отсутствие дисферлина в мембранах Т-трубочек приводит к неадекватному
току кальция в мышечные волокна и усугублению осмотических и механических повреждений, а также затруднению регенерации Т-трубочек и образования новых Т-трубочек при дифференцировке миоса-теллитоцитов. Накопление повреждённых Т-трубочек в мышечных волокнах может обусловливать мышечную слабость при дисферлинопатиях, а также компенсаторную гипертрофию мышечных волокон;
2) отсутствие дисферлина в сарколемме нарушает её репарацию, что приводит к обильной некротической гибели мышечных волокон даже при относительно небольших повреждениях мембран под действием физических, осмотических или окислительных факторов;
3) нехватка сарколеммного белка CD55 при дисферлинопатиях приводит к разрушению мышечных волокон под действием C5b-C9 компонентов комплемента;
4) аномальный по строению дисфер-лин нарушает ангиогенез и повышает проницаемость сосудов, что может приводить к гипоксии мышц (а гипоксия мышц нарушает ионный и осмотический градиенты из-за нехватки АТФ и замедления работы ионных насосов) и их отёку;
5) при нехватке дисферлина в фагоцитах увеличивается их фагоцитарная активность, что приводит к усиленному разрушению и поглощению даже неизменённых мышечных волокон;
6) накопление продуктов некротической гибели мышечных волокон усиливает воспаление и приводит к дальнейшему распространению патологического процесса;
7) недостаток регенерации, а также закисление очага воспаления приводят у избыточной пролиферации фибробластов и постепенному замещению скелетной мышечной ткани волокнистой соединительной и жировой.
Лабораторная диагностика дисфер-линопатий [34-36]:
1) биохимический анализ крови выявляет резкое возрастание (в 10-100 раз) активности мышечной креатинкиназы, такой резкий подъём является специфич-
ным для дисферлинопатий;
2) вестерн-блот и иммуногистохими-ческий анализ выявляют отсутсвтие связывания антидисферлиновых антител с дис-ферлином. Это может быть обусловлено как отсутствием дисферлина в миосимпластах, так и наличием дефектного дисферлина с аномальной конформацией, не позволяющей антителам опсонизировать данный белок;
3) ПЦР позволяет выявить, какая именно мутация поразила тот или иной участок гена DYSF. На сегодняшний день знание мутация в гене DYSF позволяет лишь узнать, структура какого именно домена дисферлина изменена. В будущем дефектный ген дисферлина и дефектные домены станут мишенями для генной и заместительной терапии дисферлинопатий соответственно;
4) гистологическое исследование: дистрофически изменённых мышечных волокон, некроз мышечных волокон, разрастание соединительной ткани, инфильтрация лейкоцитами.
В настоящее время болезнь не имеет эффективного лечения, её прогрессия приводит к полной утрате функций поражённых мышц и инвалидизации пациента. Однако, разработки по генной терапии дис-ферлинопатий уже имеются и эксперименты на животных показывают первые результаты. Так, трансфекция плазмид с встроенным в них нормальным геном дис-ферлина в экспериментах на мышах показывает постепенное накопление в клетках нормального дисферлина и улучшение их морфологии [37]. Также эффективной себя показывает векторная доставка внутри аденовирусов генов «нанодисферлина»; сложности такого метода лечения заключаются в невозможности поместить полный ген дис-ферлина внутрь капсида аденовируса, из-за чего необходимо точно выяснить методом ПЦР, мутацией какого домена дисферлина вызвана патология, а затем изолировать и поместить в вектор участок гена, кодирующий этот домен и все необходимые для его функционирования окружающие домены [38]. Кроме того, неполноценность структу-
ры нанодисферлинов в сравнении с нормальным дисферлином может привести к неполному выполнению ими своих функций и необходимости введения нескольких разных нанодисферлинов для компенсации недостающих доменов.
Заключение В представленной работе описана наиболее полная модель репарации мембран под действием дисферлина, а также участия данного белка в образовании Т-трубочек. Рассмотрены биохимические основы патогенеза дисферлинопатий. Мутации в гене БУББ приводят к исчезновению дисферлина в клеточных мембранах, увеличению степени повреждения мы-
шечных волокон и нарушению их регенерации, что в конечном итоге способствует прогрессированию миодистрофии и инва-лидизации пациентов. В связи с этим очень важным и актуальным является дальнейшее изучение биохимических изменений, возникающих при указанной патологии, с целью обоснования оптимальных точек приложения терапии дисфер-линопатий, а также разработки современных эффективных технологий лечения.
Дополнительная информация
Конфликт интересов. Автор декларирует отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, о которых необходимо сообщить в связи с публикацией данной статьи.
Литература
1. UniProtKB - O75923 (DYSF_HUMAN). Доступно по: https://www.uniprot.org/uniprot/O75923. Ссылка активна на 14 сентября 2020.
2. SMART: Sequence analysis results for O75923-13. Доступно по: https://smart.embl.de/smart/ show_motifs.pl?GENOMIC=1&DO_PFAM=DO_ PFAM&INCLUDE_SIGNALP=INCLUDE_SIGN ALP&ID=9606.ENSP00000386881. Ссылка активна на 14 сентября 2020.
3. Harsini F.M., Bui A.A., Rice A.M., et al. Structural Basis for the Distinct Membrane Binding Activity of the Homologous C2A Domains of My-oferlin and Dysferlin // Journal of Molecular Biology. 2019. Vol. 431, №11. P. 2112-2126. doi:10.1016/j.jmb.2019.04.006
4. Wang Y., Tadavon R., Santamaria L., et al. Calcium binds and rigidifies the dysferlin C2A domain in a tightly coupled manner // Biochemical Journal. 2021. Vol. 478, №1. P. 197-215. doi:10.1042/ BCJ20200773
5. Fuson K., Rice A., Mahling R., et al. Alternate splicing of dysferlin C2A confers Ca2+-dependent and Ca2-independent binding for membrane repair // Structure. 2014. Vol. 22, №1. P. 104-115. doi:10.1016/j.str.2013.10.001
6. Marty N.J., Holman C.L., Abdullah N., et al. The C2 domains of otoferlin, dysferlin, and myoferlin alter the packing of lipid bilayers // Biochemistry. 2013. Vol. 52, №33. P. 5585-5592. doi:10.1021/ bi400432f
7. Middel V., Zhou L., Takamiya M., et al. Dysferlin-mediated phosphatidylserine sorting engages macrophages in sarcolemma repair // Nature Communications. 2016. Vol. 7. P. 12875. doi:10.1038/n comms12875
8. Harsini F.M., Chebrolu S., Fuson K.L., et al. FerA is a Membrane-Associating Four-Helix Bundle
Domain in the Ferlin Family of Membrane-Fusion Proteins // Scientific Reports. 2018. Vol. 8, №1. P. 10949. doi:10.1038/s41598-018-29184-1
9. Peulen O., Rademaker G., Anania S., et al. Ferlin Overview: From Membrane to Cancer Biology // Cells. 2019. Vol. 8, №9. P. 954. doi:10.3390/ cells8090954
10. Bansal D., Miyake K., Vogel S.S., et al. Defective membrane repair in dysferlin-deficient muscular dystrophy // Nature. 2003. Vol. 423, №6936. P. 168-172. doi: 10.1038/nature01573
11. Glover L., Brown R.H. Dysferlin in Membrane Trafficking and Patch Repair // Traffic. 2007. Vol. 8, №7. P. 785-794. doi:10.1111/j.1600-0854. 2007.00573.x
12. Codding S.J., Marty N., Abdullah N., et al. Dysferlin Binds SNAREs (Soluble N-Ethylmalei-mide-sensitive Factor (NSF) Attachment Protein Receptors) and Stimulates Membrane Fusion in a Calcium-sensitive Manner // Journal of Biological Chemistry. 2016. Vol. 291, №28. P. 14575-14584. doi: 10.1074/jbc.M116.727016
13. Lennon N.J., Kho A., Bacskai B.J., et al. Dysferlin Interacts with Annexins A1 and A2 and Mediates Sarcolemmal Wound-healing // Journal of Biological Chemistry. 2003. Vol. 278, №50. P. 5046650473. doi: 10.1074/jbc.M307247200
14. Gerke V., Moss S.E. Annexins and membrane dynamics // Biochimica et Biophysica Acta. 1997. Vol. 1357, №2. P. 129-154. doi:10.1016/s0167-4889(97)00038-4
15. Tebar F., Gelabert-Baldrich M., Hoque M., et al. Annexins and Endosomal Signaling // Methods in Enzymology. 2014. Vol. 535. P. 55-74. doi:10.1016/ B978-0-12-397925-4.00004-3
16. Rogers M.A., Buffolo F., Schlotter F., et al. Annexin A1-dependent tethering promotes extracellular vesicle aggregation revealed with single-
extracellular vesicle analysis // Science Advances. 2020. Vol. б, №38. P. eabb1244. doi:10.1126/ sci-adv.abb1244
17. Rentero C., Blanco-Muñoz P., Meneses-Salas E., et al. Annexins-Coordinators of Cholesterol Homeostasis in Endocytlc Pathways // International Journal of Molecular Science. 2018. Vol. 19, №5. P. 1444. doi:10.3390/ijms19051444
18. Makani V., Sultana R., Sie K.S., et al. Annexin Ai complex mediates oxytocin vesicle transport // Journal of Neuroendocrinology. 2013. Vol. 25, №12. P. 1241-1254. doi:10.1111/jne.12112
19. López-Rodríguez J.C., Martínez-Carmona F.J., Rodríguez-Crespo I., et al. Molecular dissection of the membrane aggregation mechanisms induced by monomerlc annexin A2 // Biochimica et Biophysi-ca Acta. 2018. Vol. 18б5, №б. P. 8б3-873. doi:10.1016/j.bbamcr.2018.03.010
20. Taveau M., Bourg N., Sillon G., et al. Calpaln 3 is activated through autolysis within the active site and lyses sarcomeric and sarcolemmal components // Molecular and Cellular Biology. 2003. Vol. 23, №24. P. 9127-9135. doi:10.1128/mcb.23.24.9127-9135.2003
21. Azakir B.A., Di Fulvio S., Therrien C., et al. Dysferlin interacts with tubulin and microtubules in mouse skeletal muscle // PLoS One. 2010. Vol. 5, №4. P. e10122. doi:10.1371/journal.pone.0010122
22. Hernández-Deviez D.J., Martin S., Laval S.H., et al. Aberrant dysferlin trafficking in cells lacking caveolin or expressing dystrophy mutants of caveolin-3 // Human Molecular Genetics. 2005. Vol. 15, №1. P. 129-142. doi: 10.1093/HMG/DDI434
23. Capanni C., Sabatelli P, Mattioli E., et al. Dysferlin in a hyperCKaemic patient with caveolin 3 mutation and in C2C12 cells after p38 MAP kinase inhibition // Experimental & Molecular Medicine. 2003. Vol. 35, №б. P. 538-544. doi:10.1038/emm.2003.70
24. Cai C., Weisleder N., Ko J.K., et al. Membrane repair defects in muscular dystrophy are linked to altered interaction between MG53, caveolin-3, and dysferlin // Journal of Biological Chemistry. 2009. Vol. 284, №23. P. 15894-15902. doi:10.1074/ jbc.M109.009589
25. Flix B., de la Torre C., Castillo J., et al. Dysferlin interacts with calsequestrin-1, myomesin-2 and dynein in human skeletal muscle // International Journal of Biochemistry & Cellular Biology. 2013. Vol. 45, №8. P. 1927-1938. doi:10.1016/j.biocel. 2013.06.007
26. Bittel D.C., Chandra G., Tirunagri LMS, et al. Annexin A2 Mediates Dysferlin Accumulation and Muscle Cell Membrane Repair // Cells. 2020. Vol. 9, №9. P. 1919. doi:10.3390/cells9091919
27. Hofhuis J., Bersch K., Büssenschütt R., et al. Dysferlin mediates membrane tabulation and links T-tubule biogenesis to muscular dystrophy // Journal of Cellular Science. 2017. Vol. 130, №5. P. 841852. doi: 10.1242/jcs. 19886 i
28. Klinge L., Harris J., Sewry C., et al. Dysferlin asso-
ciates with the developing T-tubule system in rodent and human skeletal muscle // Muscle & Nerve. 2010. Vol. 41, №2. P. 166-173. doi: 10.1002/mus.21166
29. Kerr J.P., Ziman A.P., Mueller A.L, et al. Dysferlin stabilizes stress-induced Ca2+ signaling in the transverse tubule membrane // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2013. Vol. 110, №51. P. 2083120836. doi: 10.1073/pnas.1307960110
30. Lukyanenko V., Muriel J.M., Bloch R.J. Coupling of excitation to Ca2+ release is modulated by dysferlin // Journal of Physiology. 2017. Vol. 595, №15. P. 5191-5207. doi:10.1113/JP274515
31. Kerr J.P., Ward C.W., Bloch R.J. Dysferlin at transverse tubules regulates Ca(2+) homeostasis in skeletal muscle // Frontiers in Physiology. 2014. Vol. 5. P. 89. doi:10.3389/fphys.2014.00089
32. Sharma A., Yu C., Leung C., et al. A new role for the muscle repair protein dysferlin in endothelial cell adhesion and angiogenesis // Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 2010. Vol. 30, №11. P. 2196-2204. doi:10.1161/ATVBAHA. 110.208108
33. De Morree A., Flix B., Bagaric I., et al. Dysferlin regulates cell adhesion in human monocytes // Journal of Biological Chemistry. 2013. Vol. 288, №20. P. 14147-14157. doi: 10.1074/jbc.M112.448589
34. Jin S.Q., Yu M., Zhang W., et al. Dysferlin Gene Mutation Spectrum in a Large Cohort of Chinese Patients with Dysferlinopathy // Chinese Medical Journal. 2016. Vol. 129, №19. P. 2287-2293. doi:10.4103/0366-6999.190671
35. Patel N.J., Van Dyke K.W., Espinoza L.R. Limb-Girdle Muscular Dystrophy 2B and Miyoshi Presentations of Dysferlinopathy // The American Journal of the Medical Sciences. 2017. Vol. 353, №5. P. 484-491. doi:10.1016/j.amjms.2016.05.024
36. Wang M., Guo Y., Fu Y., et al. Atypical Miyoshi distal myopathy: A case report // Experimental and Therapeutic Medicine. 2016. Vol. 12, №5. P. 3068-3072. doi:10.3892/etm.2016.3716
37. Guha T.K., Pichavant C., Calos M.P. Plasmid-Mediated Gene Therapy in Mouse Models of Limb Girdle Muscular Dystrophy // Molecular Therapy, Methods & Clinical Development. 2019. Vol. 15. P. 294-304. doi:10.1016/j.omtm.2019.10.002
38. Llanga T., Nagy N., Conatser L., et al. Structure-Based Designed Nano-Dysferlin Significantly Improves Dysferlinopathy in BLA/J Mice // Molecular Therapy. 2017. Vol. 25, №9. P. 2150-2162. doi:10.1016/j.ymthe.2017.05.013
References
1. UniProtKB - O75923 (DYSF_HUMAN). Available at: https://www.uniprot.org/uniprot/O75923. Accessed: 2021 September 14.
2. SMART: Sequence analysis results for O75923-13. Available at: https://smart.embl.de/smart/show_mo tifs.pl?GENOMIC=1&DO_PFAM=DO_PFAM&IN CLUDE_SIGNALP=INCLUDE_SIGNALP&ID=96 06 .ENSP00000386881. Accessed: 2021 September 14.
3. Harsini FM, Bui AA, Rice AM, et al. Structural Basis for the Distinct Membrane Binding Activity of the Homologous C2A Domains of Myoferlin and Dysferlin. Journal of Molecular Biology. 2019; 431(11):2112-26. doi: 10.1016/j.jmb.2019.04.006
4. Wang Y, Tadavon R, Santamaria L, et al. Calcium binds and rigidifies the dysferlin C2A domain in a tightly coupled manner. Biochemical Journal. 2021;478(1):197-215. doi:10.1042/BCJ20200773
5. Fuson K, Rice A, Mahling R, et al. Alternate splicing of dysferlin C2A confers Ca2+-dependent and Ca2-independent binding for membrane repair. Structure. 2014;22(1):104-15. doi:10.1016/j.str. 2013.10.001
6. Marty NJ, Holman CL, Abdullah N, et al. The C2 domains of otoferlin, dysferlin, and myoferlin alter the packing of lipid bilayers. Biochemistry. 2013;52(33):5585-92. doi:10.1021/bi400432f
7. Middel V, Zhou L, Takamiya M, et al. Dysferlin-mediated phosphatidylserine sorting engages macrophages in sarcolemma repair. Nature Communications. 2016;7:12875. doi:10.1038/ncomms12875
8. Harsini FM, Chebrolu S, Fuson KL, et al. FerA is a Membrane-Associating Four-Helix Bundle Domain in the Ferlin Family of Membrane-Fusion Proteins. Scientific Reports. 2018;8(1):10949. doi:10.1038/s41598-018-29184-1
9. Peulen O, Rademaker G, Anania S, et al. Ferlin Overview: From Membrane to Cancer Biology. Cells. 2019;8(9):954. doi:10.3390/cells8090954
10. Bansal D, Miyake K, Vogel SS, et al. Defective membrane repair in dysferlin-deficient muscular dystrophy. Nature. 2003;423(6936):168-72. doi: 10.1038/nature01573
11. Glover L, Brown RH. Dysferlin in Membrane Trafficking and Patch Repair. Traffic. 2007;8(7): 785-94. doi:10.1111/j.1600-0854.2007.00573 .x
12. Codding SJ, Marty N, Abdullah N, et al. Dysferlin Binds SNAREs (Soluble N-Ethylmaleimide-sensitive Factor (NSF) Attachment Protein Receptors) and Stimulates Membrane Fusion in a Calcium-sensitive Manner. Journal of Biological Chemistry. 2016;291(28):14575-84. doi:10.1074/jbc. M116.727016
13. Lennon NJ, Kho A, Bacskai BJ, et al. Dysferlin Interacts with Annexins A1 and A2 and Mediates Sarcolemmal Wound-healing. Journal of Biological Chemistry. 2003;278(50):50466-73. doi:10.1074/ jbc.M307247200
14. Gerke V, Moss SE. Annexins and membrane dynamics. Biochimica et Biophysica Acta. 1997;1357 (2):129-54. doi:10.1016/s0167-4889(97)00038-4
15. Tebar F, Gelabert-Baldrich M, Hoque M, et al. Annexins and Endosomal Signaling. Methods in Enzymology. 2014;535:55-74. doi:10.1016/B978-0-12-397925-4.00004-3
16. Rogers MA, Buffolo F, Schlotter F, et al. Annexin A1-dependent tethering promotes extracellular vesicle aggregation revealed with single-extra-
cellular vesicle analysis. Science Advances. 2020; 6(3):eabb1244. doi: 10.1126/sciadv.abb1244
17. Rentero C, Blanco-Muñoz P, Meneses-Salas E, et al. Annexins-Coordinators of Cholesterol Homeostasis in Endocytic Pathways. International Journal of Molecular Science. 2018;19(5):1444. doi:10.3390/ijms19051444
18. Makani V, Sultana R, Sie KS, et al. Annexin A1 complex mediates oxytocin vesicle transport. Journal of Neuroendocrinology. 2013;25(12): 1241-54. doi: 10.1111/jne. 12112
19. López-Rodríguez JC, Martínez-Carmona FJ, Rodríguez-Crespo I, et al. Molecular dissection of the membrane aggregation mechanisms induced by monomeric annexin A2. Biochimica et Biophysica Acta. 2018;1865(6):863-73. doi:10.1016/j.bbamcr. 2018.03.010
20. Taveau M, Bourg N, Sillon G, et al. Calpain 3 is activated through autolysis within the active site and lyses sarcomeric and sarcolemmal components. Molecular and Cellular Biology. 2003;23(24): 9127-35. doi:10.1128/mcb.23.24.9127-9135.2003
21. Azakir BA, Di Fulvio S, Therrien C, et al. Dysferlin interacts with tubulin and microtubules in mouse skeletal muscle. PLoS One. 2010;5(4): e10122. doi:10.1371/journal.pone.0010122
22. Hernández-Deviez DJ, Martin S, Laval SH, et al. Aberrant dysferlin trafficking in cells lacking caveolin or expressing dystrophy mutants of cave-olin-3. Human Molecular Genetics. 2005;15 (1):129-42. doi: 10.1093/HMG/DDI434
23. Capanni C, Sabatelli P, Mattioli E, et al. Dysferlin in a hyperCKaemic patient with caveolin 3 mutation and in C2C12 cells after p38 MAP kinase inhibition. Experimental & Molecular Medicine. 2003;35(6):538-44. doi:10.1038/emm.2003.70
24. Cai C, Weisleder N, Ko JK, et al. Membrane repair defects in muscular dystrophy are linked to altered interaction between MG53, caveolin-3, and dysferlin. Journal of Biological Chemistry. 2009; 284(23):15894-902. doi:10.1074/jbc.M109.009589
25. Flix B, de la Torre C, Castillo J, et al. Dysferlin interacts with calsequestrin-1, myomesin-2 and dynein in human skeletal muscle. International Journal of Biochemistry & Cellular Biology. 2013; 45(8):1927-38. doi:10.1016/j.biocel.2013.06.007
26. Bittel DC, Chandra G, Tirunagri LMS, et al. Annexin A2 Mediates Dysferlin Accumulation and Muscle Cell Membrane Repai. Cells. 2020;9(9): 1919. doi:10.3390/cells9091919
27. Hofhuis J, Bersch K, Büssenschütt R, et al. Dysferlin mediates membrane tubulation and links T-tubule biogenesis to muscular dystrophy. Journal of Cellular Science. 2017;130(5):841-52. doi:10.1242/ jcs.198861
28. Klinge L, Harris J, Sewry C, et al. Dysferlin associates with the developing T-tubule system in rodent and human skeletal muscle. Muscle & Nerve. 2010;41:166-73. doi:10.1002/mus.21166
29. Kerr JP, Ziman AP, Mueller AL et al. Dysferlin stabilizes stress-induced Ca2+ signaling in the transverse tubule membrane. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2013;110(51):20831-6. doi:10.1073/ pnas.1307960110
30. Lukyanenko V, Muriel JM, Bloch RJ. Coupling of excitation to Ca2+ release is modulated by dysferlin. Journal of Physiology. 2017;595(15):5191-207. doi: 10.1113/JP274515
31. Kerr JP, Ward CW, Bloch RJ. Dysferlin at transverse tubules regulates Ca(2+) homeostasis in skeletal muscle. Frontiers in Physiology. 2014;5:89. doi:10.3389/fphys.2014.00089
32. Sharma A, Yu C, Leung C, et al. A new role for the muscle repair protein dysferlin in endothelial cell adhesion and angiogenesis. Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 2010;30(11): 2196-204. doi: 10.1161/ATVBAHA. 110.208108
33. De Morree A, Flix B, Bagaric I, et al. Dysferlin regulates cell adhesion in human monocytes. Journal of Biological Chemistry. 2013;288(20):14147-57. doi: 10.1074/jbc.M112.448589
34. Jin SQ, Yu M, Zhang W, et al. Dysferlin Gene Mutation Spectrum in a Large Cohort of Chinese Patients with Dysferlinopathy. Chinese Medical Journal. 2016;129(19):2287-93. doi:10.4103/0366 -6999.190671
35. Patel NJ, Van Dyke KW, Espinoza LR. Limb-Girdle Muscular Dystrophy 2B and Miyoshi Presentations of Dysferlinopathy. The American Journal of the Medical Sciences. 2017;353(5): 484-91. doi:10.1016/j.amjms.2016.05.024
36. Wang M, Guo Y, Fu Y, et al. Atypical Miyoshi distal myopathy: A case report. Experimental and Therapeutic Medicine. 2016;12(5):3068-72. doi:10.3892/etm.2016.3716
37. Guha TK, Pichavant C, Calos MP. Plasmid-Mediated Gene Therapy in Mouse Models of Limb Girdle Muscular Dystrophy. Molecular Therapy. Methods & Clinical Development. 2019;15:294-304. doi:10.1016/j.omtm.2019.10.002
38. Llanga T, Nagy N, Conatser L, et al. Structure-Based Designed Nano-Dysferlin Significantly Improves Dysferlinopathy in BLA/J Mice. Molecular Therapy. 2017;25(9):2150-62. doi:10.1016/j.ym the.2017.05.013
Информация об авторах [Authors Info]
Захаров Александр Сергеевич - студент 3 курса лечебного факультета, Рязанский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Рязань, Российская Федерация. ORCID ID: 0000-0002-4004-7474.
Alexander S. Zakharov - 3-year Student of the Faculty of Medicine, Ryazan State Medical University, Ryazan, Russian Federation. ORCID ID: 0000-0002-4004-7474.
*Короткова Наталья Васильевна - к.м.н., доцент кафедры биологической химии с курсом клинической лабораторной диагностики ФДПО; с.н.с. ЦНИЛ, Рязанский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Рязань, Российская Федерация. e-mail: fnv8@yandex.ru
SPIN: 3651-3813, ORCID ID: 0000-0001-7974-2450, Researcher ID: I-8028-2018.
Natalya V. Korotkova - MD, PhD, Associate Professor of the Department of Biological Chemistry with Course of Clinical Laboratory Diagnostics of the Faculty of Additional Professional Education; Senior Researcher at the Central Research Laboratory, Ryazan State Medical University, Ryazan, Russian Federation. e-mail: fnv8@yandex.ru
SPIN: 3651-3813, ORCID ID: 0000-0001-7974-2450, Researcher ID: I-8028-2018.
Мжаванадзе Нина Джансуговна - к.м.н., доц., доцент кафедры сердечно-сосудистой, рентгенэндоваскулярной, оперативной хирургии и топографической анатомии; с.н.с. ЦНИЛ, Рязанский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Рязань, Российская Федерация.
SPIN: 7757-8854, ORCID ID: 0000-0001-5437-1112, Researcher ID: M-1732-2016.
Nina D. Mzhavanadze - MD, PhD, Associate Professor of the Department of Cardiovascular, Х-Ray Endovascular, Operative Surgery and Topographic Anatomy, Senior Researcher at the Central Research Laboratory, Ryazan State Medical University, Ryazan, Russian Federation. SPIN: 7757-8854, ORCID ID: 0000-0001-5437-1112, Researcher ID: M-1732-2016.
Никифоров Александр Алексеевич - к.м.н. доц., доцент кафедры фармакологии с курсом фармации ФДПО; зав. ЦНИЛ, Рязанский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Рязань, Российская Федерация. ORCID ID 0000-0003-0866-9705.
Aleksandr A. Nikiforov - MD, PhD, Associate Professor, Head of the Central Research Laboratory, Ryazan State Medical University, Ryazan,
Russian Federation.
ORCID ID 0000-0003-0866-9705.
Цитировать: Захаров А.С., Короткова Н.В., Мжаванадзе Н.Д., Никифоров А.А. Биохимические и патофизиологические аспекты дис-ферлин-ассоциированных мышечных дистрофий // Наука молодых (Eruditio Juvenium). 2021. Т. 9, №»1. С. 157-169. doi:10.23888/HMJ 202191157-169
To cite this article: Zakharov AS, Korotkova NV, Mzhavanadze ND, Nikiforov AA. Biochemical and pathophysiological aspects of dysferlin-associated muscular dystrophy. Science of the young (Eruditio Juvenium). 2021;9(1):157-69. doi:10.23888/HMJ202191157-169
Поступила / Received: 14.09.2020 Принята в печать / Accepted: 01.03.2021
