CC BY
5
мого ДФГ заставляет также предположить, что и в резине па основе СКД-лр мы имеем дело не с самим ДФГ, а с продуктами его превращения, близкими к нему по строению, но с более выраженными аллергенными свойствами в отличие от ТМТД и продуктов его превращения. Известно, что продуктами превращения ДФГ могут быть амины циклического и линейного строения [3]. Для установления их роли в образовании сенсибилизирующих свойств резин проверяли наличие антител у морских свииок к парафеиилендиами-ну как аналогу циклических аминов и мочевине как аналогу линейных аминов. Получена положительная реакция у 20 % животных на парафе-нилендиамин, что указывает на основную роль циклических аминов.
В формировании биологического эффекта резин на основе НК значительную роль, по-видимому, играют, соединения фенольного типа, на что указывают как результаты химического анализа вытяжек, так и ответная реакция животных на фракции вытяжек. О. Г. Алексеева [Г| указывает, что жесткая структура фенольного кольца и наличие в молекуле амино-, нитро-, меркапто-групп и активных атомов являются наиболее благоприятными условиями для взаимодействия химического вещества с белком и образования антигена. Практически в каждой реальной резиновой смеси существует возможность образования подобных соединений путем взаимодействия антиоксидантов фенольного типа с активными радикалами ускорителя вулканизации.
Особенно отчетливо их роль видна на примере резин на основе НК, содержащего фепольные соединения природного происхождения. В пашей
практике дважды удалось избавиться от сенсибилизирующих свойств резин путем замены НК «смокед-шит» на «светлый креп» или изопрено-вый каучук, не содержащий соединения фенольного типа.
Выводы. 1. Показано, что причиной сенсибилизирующего действия резин является комплекс веществ, состоящий из аллергенов, входящих в состав резиновой смеси, и продуктов превращения исходных ингредиентов: соединений фенольного типа для резин на основе натурального каучука «смокед-шит» и аминосоединеиий для резин, содержащих ДФГ.
2. Полученные результаты дают основания для осуществления гигиенического контроля за резинами по уровню миграции соединений фенольного типа и аминосоединений.
3. Качественное отличие биологической активности резин от активности исходных ингредиентов определяется характером комбинированного действия исходных ингредиентов и продуктов их превращения.
Литература
1. Алексеева О. Г.. Дуева Л. А. // Аллергия к промышленным химическим соединениям. — М., 1978.
2. Бережнива Л. И., Петрова Л. /7. /'/ Вестн. дерматол. — 1982. — № 12.— С. 56—60.
3. ДогаОкин Б. А.. Донцов А. А.. Шершнев В. А. Химия эластомеров: 2-е изд. — М., 1980.
4. Лазарев Н. В.// Вредные вещества в промышленности.— Л., 1976.— С. 49; 62: 83; 371.
5. Чикишёв Ю. Г.. Шужкая Н. И., Сироткина И. С. и др. // Гиг. и сан. — 1980, —№ о.— С. 34—36.
Поступила J7.0e.8G
УДК 613.636:663.1 |-07:С12.112.017.1+612.112.015.3
В. В. Соколовский, Г. А. Баскович, А. И. Чечуро. А. И. Джагинян,
Ю. И. Верткин
БИОХИМИЧЕСКИЕ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ БЕЛЫХ КЛЕТОК КРОВИ ПРИ ИНГАЛЯЦИОННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ПРОДУКТОВ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО
СИНТЕЗА
Ленинградский санитарно-гигиенический медицинский институт
При изучении патогенеза, совершенствовании методов диагностики и лечения аллергических заболеваний удобным объектом исследований представляются лейкоциты крови — клетки, наиболее быстро реагирующие на антиген, участвующие в аллергических реакциях и определяющие ! индивидуальную реактивность организма [2, 4]. Особенности функциональной активности лейкоцитов как иммунекомпетентных клеток определяются интенсивностью метаболических процессов в них.
В настоящей работе изучали корреляцию между показателями иммунологической реактивно-
сти и активностью ряда ферментов энергетического обмена в лейкоцитах периферической крови экспериментальных животных при ингаляционном воздействии продуктов микробиологического синтеза (МБС) и в крови больных с броп-холегочной патологией, имеющих в процессе производства контакт с этим же аллергеном.
Морских свинок помещали в ингаляционные камеры и подвергали в течение 28 дней круглосуточному воздействию продуктов МБС в концентрациях 0,1 мг/мз (I серия) и 0,01 мг/м3 (II серия). Контрольных животных помещали на гот же период в камеры с чистым воздухом. Обсле-
дование животных проводили до помещения их в ингаляционные камеры и через 1, 14 и 28 сут после начала затравки.
В клинике обследованы 32 человека с бронхо-легочной патологией: 20 больных астматическим бронхитом (АБ) и 12 больных бронхиальной астмой (БА).
В лейкоцитах крови животных и людей определяли активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ, КФ 1.1.1.27), глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ, КФ 1.1.1.49) и гексокиназы (КФ 2.7.1.1) спектрофотометрическими методами [3]. Состояние иммунного статуса организма оценивали по таким показателям клеточного и гуморального иммунитета, как реакция специфического лейколизиса (РСЛЛ) в модификации Л. А. Дуевой, реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) в капиллярах, реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) крови [5], содержание специфических антител (ССА), определяемое по средней интенсивности свечения иммунофлюоресцентным методом, относительное содержание В-лимфоцитов — методом розетко-образования с частицами зимозаиа, активированного комплементом, содержание иммуноглобулинов (Ig) крови классов А, М и G — методом радиальной иммунодиффузии по Манчини.
Статистическую обработку материалов проводили с помощью непараметрических методов. Исследование корреляционной связи между активностью ферментов и показателями иммунологической реактивности проводили методом ранговой корреляции Спирмена [7].
Результаты экспериментальных исследований свидетельствуют о возрастании ферментативной активности лейкоцитов периферической крови морских свинок при ингаляционном воздействии продуктов МБС. Так, при концентрации продукта в ингаляционной камере 0,1 мг/м3 статистически достоверное увеличение активности ЛДГ и Г-6-ФДГ наблюдается уже к 14-м суткам эксперимента и сохраняется к 28-м суткам. При концентрации продукта 0,01 мг/м3 отмеченные изменения менее выражены, достоверно увеличивается только активность Г-6-ФДГ на 14-е сутки (табл. 1).
Исследование показателей иммунного статуса показало, что изучаемое вещество оказывает сенсибилизирующее действие. Изменения показателей клеточного и гуморального иммунитета носят волнообразный характер в связи с усилением иммуногенеза на ранних стадиях сенсибилизации и угнетением его в более поздний период. Так, ингаляционные затравки морских свинок продуктом МБС в концентрации 0,1 мг/м3 вызывают достоверное увеличение показателей РСЛЛ на 14-е сутки с последующей нормализацией к 28-м суткам эксперимента и возрастание индекса РТМЛ через 1 и 14 сут с уменьшением до контрольных величин к 28-м суткам. Достоверное увеличение ССА у животных данной группы на-
блюдается на 14-е и 28-е сутки. При концентрации продукта 0,01 мг/м3 сенсибилизирующее действие проявляется менее значительно. В этой группе животных отмечались возрастание РСЛЛ и ССА к 14-м суткам и тенденция к снижению к 28-м суткам. При этом в первые 14 сут повышение ферментативной активности лейкоцитов не коррелирует с усилением реакции клеточного и гуморального иммунитета (/-<10,78; Р>0,05). На 28-е сутки обнаруживается достоверная отри- • цательная корреляция между активностью ЛДГ и величинами ССА и РСЛЛ (/• = 0,87; Р<0,05 и г=—0,93; Р<0,05). Вероятно, в этот период усиление процесса анаэробного гликолиза в лейкоцитах становится лимитирующим фактором, влияющим на ССА и активность РСЛЛ.
Результаты обследования больных с бронхо-легочной патологией представлены в табл. 2.
У больных выявлены аналогичные закономерности в изменении энзиматической активности и иммуногенеза. Так, статистически достоверное увеличение активности ЛДГ и гексокиназы в лейкоцитах крови свидетельствует о возрастании интенсивности реакций анаэробного гликолиза в связи с прогрессирующей дыхательной недостаточностью у больных. При этом активность f Г-6-ФДГ у группы больных в целом имела тенденцию к снижению.
Сдвиги активности ферментов в лейкоцитах происходили на фоне нарушений иммунологической реактивности организма. Достоверно снижались уровень и функциональная активность В-лимфоцитов, вероятно, за счет популяции, ответственной за выработку Ig первичного ответа (IgM), количество которых также достоверно снижалось. Имелась тенденция к уменьшению содержания Ig вторичного ответа (IgG). Отмечалось угнетение клеточного иммунитета: достоверно снижалась функциональная активность Т-лимфоцитов, тестируемая по показателю РБТЛ.
Обращает па себя внимание зависимость ис- \ следованных параметров от выраженности клинического процесса. Наибольшие отклонения в активности ферментов и показателях гуморального иммунитета от параметров контрольной группы обнаруживались у больных БА. У этих больных в большей степени (/><0,05) нарастала активность ферментов анаэробного гликолиза и уменьшалась активность дегидрогеназы путем прямого окисления глюкозы, достоверно снижалось содержание Ig всех исследованных классов. Следует отметить, что в отличие от больных БА у лиц с АБ, характеризующимся отсутствием развитых приступов удушья, сохраняется высо- * кий уровень IgM и IgG, а концентрация IgA превышает таковую в контрольной группе.
Корреляционный анализ взаимосвязи энзиматической активности и показателей иммунного статуса у больных свидетельствует о наличии тесной обратной связи между активностью ЛДГ
Таблица 1
Активность ферментов в лейкоцитах и иммунологическая реактивность у морских свинок при ингаляционном воздействии продуктов МБО (М±т)
Концентрация продуктов МБС, мг/м' Контроль
Показатель 0,1 0,01
срок исследования, сутки
1-е 14-е 8-е 1-е 14-е 28-е 1-е 14-е 28-е
ЛДГ, мкмоль/мг-мин 0,079±0,008 0,167±0,004* 0,212±(!,003* 0,110+0,020 0,103±0,009* 0,169±0,01 0,Ю2±0,009 0,082±0,007 0,130±0,01
Г-6-ФДГ, мкмоль/мг-мин 0,014±0,001 0,021 ±0,003* 0,047±0,00'1* 0,012±0,002 0,024 ±0.002* 0,006±0,Э)1 0,012±0,003 0,01±0,001 0,009±0,001
РСЛЛ, % 2,46±0,9 18,4±4,9* 8,5±5,1 4,1 ±0,9 15,6±3,1* 11,6±2,2 2,84±1,23 3,5±0,3 7,6±3,6
РТМЛ, отн. ед. 1,69±0,19 2,1±0,2 1,2±0,18 1,4±0,12 1,1±0,2 !,7±0,18 1,16±0,11 1,4±0,2 1,0±0,08
ССА, отн. ед. 0,2±0,05 1.1±0,1* 1,3±0,08* 0,1 ±0,04 1,0±0,07* 1,0±0,2 0,1±0,01 0,5±0,03 0,6±0,07
Примечание. Здесь и в табл. 2 звездочка — изменения достоверны при Р<0,05.
Таблица 2
Активность ферментов в лейкоцитах кгови и иммунологическая реактивность у больных с бронхолегочной патологией (М±т)
Обследованные ЛДГ Гексокиназа Г-6-ФДГ В-лнмфоцнты, % г/л РБТЛ, %
мкмоль/мг мин А м а
Здоровые 0,243± 0,032 0,049±0,005 0,134±0,011 8,8±0,7 3,0±0,26 1,86±0,14 18,7±1,71 53,3±2,6
Больные 0,403±0,029* 0,081 ±0,007* 0,101 ±0,009 4,9±0,5* 2,83±0,39 1,32±0,17* 15,98±1,96 29,8+4,5*
В том числе:
АБ 0,368±0,040* 0,060±0,005 0,129±0,010 5,0±0,5* 3,5±0,31* 1,56±0,17 20,4±2,31 36,0±5,6*
БА 0,501±0,041* 0,098±0,007* 0,080± 0,006* 4,7±0,4* 1,77±0,15* 1,07±0,12* 11,4± 1,03* 27,4±4,2*
и концентрацией lgГíЛ и Обнаруживается
также усиление их взаимосвязи с активацией патологического процесса: чем больше возрастает активность дегидрогеназы анаэробного гликолиза, тем в большей степени (Р<0,05) снижается синтез
Во взаимосвязи ферментов энергетического обмена и показателей иммунологической реактивности четко прослеживаются две стадии. На ранних этапах при непродолжительном воздействии продукта возрастание показателей клеточного и гуморального иммунитета происходит на фоне повышения активности исследованных ферментов. В этом случае активацию метаболизма в белых клетках крови можно рассматривать как компенсаторную реакцию, направленную на восполнение клеточного дефицита, на фоне которого развиваются интенсивные иммунные реакции. С увеличением сроков воздействия по мере напряжения адаптационных механизмов происходит угнетение показателей иммунного статуса. В этот период возрастание активности ЛДГ уже становится лимитирующим фактором в реакциях гуморального иммунитета.
По мере развития иммунопатологического процесса, как следует из материалов клинических исследований, активность основной дегидрогеназы, участвующей в поддержании гомеостаза в защитной антиоксидантной системе, падает. Истощение адаптационных механизмов сопровождается нарастанием активности ферментов анаэробного гликолиза, направленным па восполнение энергетических потребностей организма в условиях прогрессирующей кислородной недостаточности, и угнетением всех исследованных показателей гуморального иммунитета.
Стадийность изменений показателей энзимагн-
ческой активности и иммунного статуса в процессе развития иммунопатологического процесса отмечалась как другими авторами [6, 8], так и нами в ранее проведенных исследованиях [1].
Все эти факты позволяют говорить о возможности функциональных нарушений и предрасположенности к развитию профессиональных заболеваний в период напряжения адаптационных механизмов. Ферменты энергетического обмена в значительной мере отражают напряжение гуморального иммунитета как фактора специфической резистентности организма. Оценка их активности может быть использована при разработке информативных тестов диагностики и прогнозирования иммунопатологических сдвигов.
Литература
1. Джангулова И. Э., Баскович Г А.. Барышникова Г. В. и др. // Антиокснданты и адаптация. — Л., 1984. — С. 26—34.
2. Комиссарова И. А., Джорджадзе Н. С.. Брацде Н. А. // Клин. мед. — 1984. — № 7. — С. 79—82.
3. Луганова И. С., Сейц И. Ф. // Вопр. онкол. — 1964. — № 10. —С. 3.
4. Маврина Е. А. и др.//Гиг. труда.— 1983. — № 3. — С 23_25
5. Симойлина Н. А. // Лаб. дело. — 1970. — № 8. — С. 455.
6. Сидоренко Г. И., Меркурьева Р. В. // Гиг. и сан. — 1981. — №8. — С. 8—12.
7. Терентиев Г. В., Ростова И. С. Практикум по биометрии.—Л., 1977.— С. 76.
8. Goulelgtter У.. Blamoutier J.// J. Med. Chir. prat. — 1980. —Vol. 151, N 23. — P. 535—540.
Поступила 07.07.86
Summar y. Correlation between energy metabolism enzyme activity in peripheral blood leukocytes and indicators of cell and humoral immunity is established in guinea-pigs under inhalation effect of microbiological synthesis-related products and in patients with bronchopulmonary disease which are occupationally exposed to this allergen.
